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IFN-γ在小鼠造血调节中的作用
本研究旨在探讨IFN-γ在小鼠骨髓造血调节中的作用及其作用机制.通过RT-PCR方法扩增小鼠IFN-γ(mIFN-γ)片段,构建mIFN-γ慢病毒表达载体pCDH1-mIFN-γ-EF1-copGFP(pCDH-mIFN-γ-GFP).将pCDH-mIFN-γ-GFP和pCDH1-EF1-copGFP (pCDH-GFP)分别与辅助质粒pPACK-A、pPACK-B、pPACK-C组合,通过磷酸钙沉淀法转染293T细胞,制备慢病毒.通过慢病毒将mIFN-γ和GFP转导至C57BL/6J雄性小鼠的骨髓单个核细胞,接种于M3434甲基纤维素完全培养基进行集落形成试验,同时将其通过尾静脉注射给致死剂量照射的受体C57BL/6J小鼠体内,定期进行血常规检查.结果显示,成功构建pCDH-mIFN-γ-GFP慢病毒载体;转导mIFN-γ的293T细胞分泌mIFN-γ蛋白;转导mIFN-γ的小鼠骨髓单个核细胞集落生成数量较对照组显著减少,集落形成能力下降;mIFN-γ组的骨髓移植小鼠血象恢复较GFP对照组延迟,移植后8周流式细胞术检测外周血仍可见GFP阳性细胞.结论:mIFN-γ降低了造血干/祖细胞的增殖能力,延缓骨髓移植小鼠的造血恢复时间.
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JAK/STAT信号通路与白血病
JAK/STAT通路是造血生长因子广泛应用的信号转导通路,介导细胞多种生理过程,JAK/STAT通路在生物个体发生发育、造血调节和免疫反应中发挥着重要的作用.JAK/STAT信号通路的持续激活与人类多种肿瘤尤其是造血系统恶性肿瘤的发生有关.JAK/STAT通路的持续激活已成为白血病的普遍特征.本文对近年来白血病形成中JAK/STAT的异常激活的研究综述如下.
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小鼠骨髓细胞肾上腺素β2受体的表达及其意义
目的:探讨骨髓细胞肾上腺素β2受体(β2-AR)的表达及其意义,为神经因素调节骨髓造血理论提供依据.方法:用Ficoll淋巴细胞分离液从正常小鼠骨髓分离的单个核细胞直接涂片、粒一单集落造血祖细胞培养后涂片、骨髓基质细胞培养爬片,同时行骨髓石蜡切片及全骨髓细胞涂片,用免疫组织化学SP法检测上述标本中骨髓细胞β2-AR的表达.另取小鼠采用淋巴细胞注射法制备免疫介导的再生障碍性贫血(简称再障)模型,β2-AR拮抗剂组静脉注射ICI 118551,对照组静脉注射生理盐水,至第8天采用Western blotting检测3组小鼠骨髓单个核细胞β2-AR的表达.结果:正常小鼠骨髓细胞β2-AR免疫组织化学反应可见胞质及胞膜呈深浅不等的棕黄色,其中单个核细胞48%强阳性,造血祖细胞55%中等阳性、45%弱阳性,骨髓基质细胞68%强阳性,其他辅助细胞呈不同程度的阳性反应.再障模型组、β2-AR拮抗剂组及对照组小鼠骨髓单个核细胞β2-AR相对表达量分别为1.030.31、1.72±0.29及1.41±0.35.与对照组比较,再障模型组β2-AR表达量明显降低(P<0.05),β2-AR拮抗剂组β2-AR表达明显增加(P<0.05).结论:正常小鼠骨髓细胞有β2-AR表达,其表达量与骨髓造血状态有关,提示β2-AR可能通过神经一内分泌一免疫网络途径参与造血调节.
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ITP相关细胞因子水平的检测及临床意义
特发性血小板减少性紫癜(ITP)是病因比较复杂、临床上以皮肤粘膜出血为主要表现的一类疾病,一般认为免疫功能异常导致抗自身血小板抗体的产生在ITP发病过程中起重要作用.业已证实[1],多种细胞因子如血小板生成素(TPO)等在造血调节及促进血小板及巨核细胞增生过程中发挥其重要作用.因而进一步探讨TPO及其它细胞因子在ITP发病过程中作用及其机理,为ITP的综合治疗提供有效依据.本研究观察了ITP患者治疗前、后外周血和骨髓中TPO、白细胞介素-3(IL-3)、IL-6及IL-8的含量变化,并探讨了细胞因子变化与疾病临床转归的相关性,结果如下.
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骨髓内皮细胞无血清条件培养液对WEHI-3细胞生长的影响
该实验收集小鼠骨髓内皮细胞条件培养液(mBMEC-CM)预留部分原液外,其作用阻遏分子量为10000daltons(10KD)和3000daltons(3KD)的超滤膜眼滤,获得分子量＞10DK、3～10KD、＜3KD的超滤液,分别检测不同组分超滤液及原液对小鼠白血病细胞系(WEHI-3)细胞集落生长的影响,发现小鼠骨髓内皮细胞无血清条件培养液中分子量＞10KD和＜3KD组分对小鼠粒单系白血病细胞系(WEHI-3)集落生长有明显的抑制作用,而mBMEC-CM原液和3～10KD两组的集落数与对照组差别无统计学意义.以上结果表示:小鼠骨髓内皮细胞无血清条件培养液中可能存在多种分子量大小不同的造血生长因子,对粒单系白血病细胞系(WEHI-3)细胞的生长起调控作用.
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儿茶酚胺类物质与造血调节的关系
机体的儿茶酚胺类物质来源于交感神经和肾上腺髓质,参与着机体功能活动的神经调节和体液调节,这类物质与造血调节之间的关系研究较少,已有的研究结果还存在一些重大分歧.本文就已有文献对骨髓中的儿茶酚胺类物质及相关受体、儿茶酚胺类物质与红系、粒-单系、巨核系造血的关系作一综述.
