Orexin与胃肠活动的调节

Orexin除了主要分布于中枢神经系统的下丘脑外,还广泛分布于包括外周的胃肠组织,如胃肠神经丛和内分泌细胞等部位.Orexin在促进食欲的同时,还能通过中枢和外周途径调节胃肠运动和消化液的分泌.

偏头痛预防药物致体重增加与下丘脑神经肽的关系

目的:探讨偏头痛预防药物致体重增加与下丘脑神经肽的关系.方法:选择104例体重指数＜25 kg/m2且无内分泌和代谢性疾病的偏头痛患者,随机分成两组,分别用阿米替林或氟桂利嗪预防治疗6个月.采用放射免疫测定法测定各组患者在治疗前及治疗后第2、4、6个月时Orexin A、Orexin B和神经肽Y的血浆浓度.结果:两组患者经药物预防治疗后血浆中Orexin A和Orexin B浓度明显减少,而神经肽Y浓度却明显增加.OrexinA、OrexinB浓度减少与体重增加呈负相关,而神经肽Y浓度增加与体重增加呈正相关.结论:偏头痛患者用阿米替林或氟桂利嗪预防治疗后体重增加可能与下丘脑神经肽相关.

Orexin与睡眠-觉醒调节

Orexin是下丘脑外侧Orexin神经元合成和分泌的神经肽,包括Orexin A和Orexin B.Orexin神经元发出兴奋性投射至除小脑之外的整个中枢神经系统,尤其以高密度投射到下丘脑和脑干的单胺能神经元以及胆碱能神经元,激活两种G蛋白偶联细胞表面受体Orexin 1受体和Orexin 2受体,参与睡眠-觉醒调节.Orexin系统受损可以引起人和动物出现发作性睡病.本文综述了近几年Orexin调节睡眠-觉醒的研究进展,以及Orexin受体靶点药物在治疗睡眠障碍方面的应用.

中枢组胺能神经系统调节睡眠-觉醒机制研究进展

哺乳动物组胺能神经元集中分布于下丘脑后部的结节乳头核(tuberomammillary nucleus,TMN),其神经纤维投射至全脑.研究发现,中枢组胺的释放与觉醒时相呈正相关,觉醒期的释放量是睡眠期的4倍;内源性物质前列腺素E2和神经肽阿立新(orcxin)激活TMN组胺能神经元,增加组胺释放,促进觉醒;前列腺素D2和腺苷抑制组胺能神经元活性,诱导睡眠.本文综述组胺能神经系统调节睡眠一觉醒研究进展,讨论拟(抗)组胺类药物用于促觉醒或(和)镇静催眠的可能性.

发作性睡病转基因动物模型研究进展

发作性睡病(narcolepsy)是一种慢性非进行性睡眠障碍,也是研究睡眠觉醒调节机制的重要病理模型,以白日嗜睡和猝倒发作为主要特征,常在青少年期起病并伴随终生,人群中的患病率约为0.03%～0.10%[1].目前研究认为发作性睡病是基因和环境因素相互作用的结果,并且与人HLA-DR2和DQB1*0602密切相关[2],虽然该病病因至今未明[1,3],但是单胺类神经递质和抗抑郁药可有效改善其症状[4].

Orexin(Hypocretin)研究新进展

Orexin又称hvpocretin,是1998年发现的具有重要作用的神经肽,中文有增食欲素、胖素、阿立新素等不同译名.

Orexin与睡眠障碍

Orexin是下丘脑外侧区合成和分泌的小分子神经多肽,能影响机体摄食行为,参与血糖代谢、疼痛感知、心血管及自主神经系统的调节等.近年来发现Orexin还参与睡眠-觉醒周期的调节.为此,对Orexin参与睡眠-觉醒调控和与之相关的睡眠障碍疾病作一综述.

督脉电针对慢性脑缺血大鼠OX2R及其配体表达的影响

目的:研究督脉电针在慢性脑缺血时大鼠脑食欲素受体-2(OX2R)及其配体在不同时间点缺血后的变化.方法:实验中运用分次结扎双侧颈总动脉法建立慢性脑缺血模型,将Wistar大鼠分4组,造模成功后给予督脉电针干预,免疫组织化学法观察OX2R的表达,同时运用ELISA技术检测各组大鼠额叶皮质区Orexin-A和Orexin-B的总含量变化.结果:1个月、2个月时,模型组OX2R及其配体表达高于正常组,同时呈递增趋势;在相同时间进行组间比较,1个月时,模型组和针刺治疗组OX2R及其配体的表达无显著差别,立即针刺组OX2R及其配体的表达较模型组有升高;2个月时针刺治疗组OX2R及其配体表达较模型组有明显升高,而立即针刺组与针刺治疗组相比OX2R及其配体表达有升高.结论:实验观察到OX2R及其配体的表达在1个月和2个月时随着时间延长而升高,经过督脉电针干预后促进了OX2R及其配体表达,同时观察到早期干预对OX2R及其配体表达的影响优于针刺治疗组.

顺铂化疗对下丘脑、血浆ghrelin和orexin表达的影响

目的:观察顺铂化疗对下丘脑、血浆ghrelin、orexin表达和摄食量的影响.方法:Real-time PCR、ELISA法观察顺铂对大鼠下丘脑、血浆ghrelin、orexin表达及摄食量的影响;19名接受顺铂经导管动脉灌注化疗(TAI)的肝细胞患者(HCC),ELISA法检测化疗前和化疗后血浆ghrelin、orexin的变化,用直观类比标度(VAS)(0-10)评估食欲和摄食量.结果:每日腹腔注射顺铂6 mg/kg,1-5 d大鼠摄食量均显著减少(P＜0.05),且l-4d血浆酰化ghrelin显著降低(P＜0.05),5d时浓度仍低于对照组,但无统计学意义.血浆非酰化ghrelin和总的血浆ghrelin没有明显变化(P＞0.05),而1-5天血浆omxm水平均明显降低(P＜0.05);顺铂注射ld后,大鼠下丘脑ghreilin和orexin的mRNA表达量均显著减少(P＜0.05),ghrelin mRNA变化持续3d,orexin mRNA在化疗后5d仍低于对照组(P＜0.05);肝细胞癌患者化疗后1至8d的摄食量明显降低,ld和2d时的血浆酰化ghrelin显著低于化疗前水平(P＜0.05).3d时逐渐恢复,化疗后3d、4d和7d时血浆酰化ghrelin浓度与化疗前无统计学差异(P＞0.05).血浆非酰化ghrelin和总的血浆ghrelin没有明显变化(P＞0.05);化疗后1～4 d时血浆orexin浓度均显著降低(P＜0.05),化疗后7d时orexin基本恢复到化疗前水平(P＞0.05).结论:顺铂可降低大鼠下丘脑和血浆ghrelin、omxin的mRNA表达,HCC的TAI会降低血浆酰化ghrelin、orexin、和摄食量.

中枢注射抗Orexin抗体对禁食大鼠摄食的抑制作用

目的:探讨中枢注射抗Orexin抗体对禁食大鼠摄食的抑制作用.方法:采用免疫组织化学法和蛋白质免疫印迹分析法,对Orexin抗体的特异性进行了检测,分析Orexin阳性神经元和阳性神经纤维在大脑中的分布.给予24 h禁食大鼠中枢注射抗Orexin抗体,计算其对大鼠食物摄入量的影响.结果:蛋白质免疫印迹分析显示,Orexin抗体能够检测到合成的Orexin-A.免疫组织化学分析显示,Orexin阳性神经元存在于外侧下丘脑区域和穹窿周核,Orexin阳性神经纤维大量投射至弓状核、下丘脑室周核和下丘脑室旁核、菱形丘脑核、丘脑室旁核、缰内侧核和纹质丘脑、中脑的中央灰质区、蓝斑核和中缝核、脑桥和髓质的网状结构、对疑核和迷走神经复合体.与注射羊血清相比,给予45 μg/10 μL抗Orexin抗体侧脑室注射则抑制了大鼠的食物摄入量(P＜0.05).高剂量抗Orexin抗体能显著地抑制大鼠摄食,并且呈剂量依赖关系(P＜0.05).结论:中枢注射抗Orexin抗体对禁食大鼠摄食具有抑制作用,并呈剂量依赖关系.

Orexin受体1对摄食条件反射的调控研究

目的:观察Orexin受体1对摄食条件反射的调控研究.方法:将40只大鼠随机分为四组,分别为NS/NS组,SB/SB组,NS/SB组,SB/NS组,每组10只大鼠,给予大鼠八组“条件刺激-无条件刺激(CS-US)”训练,给予无条件刺激后立即进行条件刺激,每组进行训练前30min给予SB或生理盐水(NS).获得性训练后,给予2组反射消失性训练,即给予8次条件刺激.条件刺激是给予大鼠10s,2kHZ声音刺激,无条件刺激是直接给予大鼠食物.结果:给予条件刺激后,四组大鼠摄食行为均明显增加,摄食间隔均明显缩短,当条件刺激强度增加时,摄食行为也增加,而预先给予SB,与NS/NS组相比,其余组大鼠摄食行为相对减少(P＜0.05),摄食间隔增加.消失性训练中,与NS/NS,NS/SB组相比,SB/NS组和SB/SB组大鼠摄食行为明显减少(P＜0.05).与其他三组大鼠相比,SB/NS组大鼠摄食间隔缩短.预先给予SB使后两次刺激后摄食间隔明显增加(P＜0.05).结论:OX1R信号通路调控摄食反射的产生和消失.

蓝斑区去甲肾上腺素能神经元在Orexin促麻醉觉醒中的作用研究

目的:探讨蓝斑区(LC)去甲肾上腺素能神经元在orexin促麻醉觉醒中作用.方法:应用异氟烷对成年SD大鼠进行麻醉,15分钟后,将SD大鼠随机分为6组,分别注射orexin-A/B (100pmol/0.3 μL)及其溶剂saline (0.3 μL); orexin Ⅰ型受体拮抗剂SB334867/Ⅱ型受体拮抗剂TCS-OX2-29(20 μg/0.3 μL及其溶剂DMSO(0.3 μL),通过观察大鼠翻正反射的消失和恢复时间,研究蓝斑区微注射orexin及其拮抗剂对异氟烷麻醉的诱导和觉醒的影响.结果:蓝斑区(LC)微注射四种试剂或其溶剂均对SD大鼠异氟烷麻醉的诱导时间无明显影响;蓝斑区(LC)微注射orexin-A能缩短SD大鼠异氟烷麻醉觉醒时间(P＜0.001),而微注射orexinⅠ型拮抗剂SB334867能延长觉醒时间(P＜0.001);orexm-B、orexinⅡ型受体拮抗剂TCS-OX2-29对大鼠异氟烷麻醉的觉醒无明显影响.结论:蓝斑区(LC)的去甲肾上腺素能神经元介导了orexin的促麻醉觉醒作用.

侧脑室注射orexin对顺铂诱导大鼠异食癖的影响

目的:研究化疗后止呕药联合侧脑室注射orexin能否改善顺铂诱导的异食癣与食欲减退,进一步探索吡嘧司特联合orexin抗呕吐的机制.方法:①腹腔注射止呕药并侧脑室置管给予orcxin,观察大鼠高岭土摄取及摄食改变.②EIA法测量脑脊液中P物质含量.结果:①顺铂中高剂量组高岭土摄入增加、摄食和体重减少,呈量效依赖关系(P＜0.05～0.01).②恩丹西酮早期抑制高岭土摄入(P＜0.05).联合用药后延长该效应且晚期增加摄食(P＜0.05).③阿瑞吡坦晚期抑制高岭土摄入,呈量效依赖关系(P＜0.05～0.01),联合用药后第4天,高岭土摄取减少、摄食增加(P＜0.05).④吡嘧司特晚期抑制高岭土摄入,呈量效依赖关系(P＜0.05～.0.01).高剂量吡嘧司特晚期增加摄食(P＜0.05).联合用药后第4、5天,高岭土摄入减少,第1、4、5天摄食增加(P＜0.05).⑤注射顺铂脑脊液中P物质浓度升高(P＜0.05).联合用药能够降低P物质浓度(P＜0.05).结论:联合应用orexin能够延长止呕药作用期并改善顺铂引起的食欲减退.吡嘧司特通过减少P物质的含量,抑制高岭土摄入.

Orexin-A在肥胖大鼠摄食和自由活动中的调控

目的:探讨Orexin-A对肥胖大鼠摄食和自由活动的影响.方法:雄性SD大鼠下丘脑外侧区(LH)置管,预先测量体重(BW),脂体重(FM)和瘦体重(LM),据此对大鼠分组并分别提供高脂(HF)和低脂(LF)饮食饲喂,通过置管向大鼠LH注射人工合成脑脊液(aCSF)或orexin-A(OXA).在饲喂前后监测OXA对大鼠自发动态运动(SPA)以及摄食量,体重(BW),脂体重(FM)和瘦体重(LM)的影响,以及每日LH注射OXA是否能够抵抗高脂饮食引起的摄食诱导肥胖(DIO).结果:高脂饮食饲喂之后,高摄食诱导肥胖(DIO)大鼠和低DIO大鼠间体重增加量(△BW)、摄食量和高脂饮食饲喂后的体重无差异(P＞0.05),但与低脂饮食组大鼠相比,上述各指标均显著增加(P＜0.05).低DIO大鼠的24 h SPA和活跃期SPA显著高于高DIO大鼠(P＜0.05).LH注射OXA可使严重DIO降低而轻微DIO增加,DIO程度对LH注射OXA后的SPA的影响呈非线性的.每日双侧LH注射OXA可抑制早期DIO但并不改变大鼠摄食量.LH注射OXA使大鼠SPA增加,影响能量消耗,有助于DIO抵抗.结论:Orexin-A可通过增加大鼠活动量,调控肥胖大鼠的摄食和DIO抵抗作用.

下丘脑腹内侧核Orexin-1及其受体对大鼠胃酸分泌的影响及其机制

目的:探讨下丘脑腹内侧核Orexin-1及其受体对大鼠胃酸分泌的影响及其机制.方法:大鼠麻醉后侧脑室及VMH置管,大鼠分组后分别VMH注射orexin-A、[Pro34]-酪酪肽、[cpp1-7、Npy19-23、Ala31、Aib32、Gln34]胰多肽;腹腔注射SB-334867;皮下注射阿托品;侧脑室微量注射GR-231118、CGP-71683.给药结束后使用幽门结扎模型检测大鼠的胃酸分泌.结果:OXA能够促进胃酸分泌,且呈量效依赖关系.腹腔注射SB-334867能够抑制胃酸分泌,且呈量效依赖关系;SB-334867能够抑制orexin-A对胃酸分泌的促进作用;阿托品不但能够抑制胃酸分泌并且还能够完全阻断OXA的促胃酸分泌作用.侧脑室微量注射GR-231118或CGP-71683胃酸及胃液量减少,呈量效依赖关系,并且能够完全阻断OXA的促胃酸分泌作用.VMH内微量注射[cpp1-7,Npy19-23,Ala31,Aib32,Gin34]胰多肽胃酸分泌增多,且呈量效依赖关系.结论:Orexin-A能够作用于下丘脑VMH促进胃酸分泌,orexin受体、Y1和Y5受体以及迷走神经系统均参与该过程.

Orexin-A对高脂饮食诱导肥胖大鼠摄食和体重的影响

目的:探讨Orexin-A对高脂饮食诱导的肥胖大鼠摄食和体重的影响.方法:通过检测SD大鼠24 h动态SPA的分布情况来定义HA大鼠和LA大鼠,创建饮食诱导肥胖(DIO)大鼠模型,向HA和LA大鼠延髓外侧下丘脑(rLH)和黑质多巴胺致密部(SN))微量注射orexin-A,观察orexin-A对能量消耗、自发动态运动(SPA)的作用,以及动态SPA对饮食诱导肥胖(DIO)的抵抗作用.结果:雄性SD大鼠在标准饮食情况下,24 h动态SPA呈正偏态分布,非固定SPA(ambulatory SPA)与瘦体重(lean mass,LM)(P＜ 0.05)以及总体重(P＜0.05)显著相关.HA和LA大鼠(high and low activity rats)间的固有SPA(intrinsic SPA)差异有显著统计学意义(P＜0.05).与LA大鼠相比,HA大鼠延髓外侧下丘脑(rLH)和黑质多巴胺致密部(SN)的orexin-A反应性更高.在rLH和SN注射orexin-A能显著增加动态SPA (rLH:P＜0.05;SN:P＜0.05).在HA和LA大鼠的rLH注射orexin-A,每种剂量与注射相同剂量的aCSF的大鼠相比效果有显著差异.而对于SN注射OXA,只有注射高剂量OXA的HA大鼠,与对照组相比,才出现著差异.在rLH注射OXA后,对HA/LA大鼠动态SPA均有显著影响(P＜0.05).HA大鼠比LA大鼠能量消耗更高.不同的饮食对于HA和LA大鼠转化为SPA有不同的影响,HA大鼠对DIO敏感性低于LA大鼠.与LA大鼠相比,在LF(Low Fat)饮食条件下,转化为脂肪量的热量更少.结论:Orexin-A可通过增加大鼠活动量,使高脂饮食诱导的肥胖大鼠体重减轻.

Orexin和P物质对顺铂诱发大鼠异食癖的影响

目的:观察食欲素(Orexin)和P物质(SP)对顺铂诱发大鼠异食癖的影响.方法:雄性Wistar大鼠被随机分为对照组和顺铂处理组,顺铂处理组给予大鼠顺铂(3或6 mg/kg,腹腔注射),对照组给予等量生理盐水.记录顺铂大鼠摄食高岭土量、摄食量的改变;Real-time PCR法观察顺铂对大鼠下丘脑Orexin和延髓中SP前体-前速激肽原A(PPT-A)mRNA表达的影响;分别和联合应用SP受体(NK1受体)拮抗剂阿瑞匹坦和Orexin-A对顺铂大鼠异食癖和摄食量的作用.结果:皮下注射3 mg/kg(低剂量组)的顺帕后大鼠高岭土摄入量和摄食量与对照组相比无明显差异(P＞0.05),而注射6 mg/kg(高剂量组)顺铂后,大鼠高岭土摄入量与对照组和低剂量组相比显著增加(P＜0.05);高剂量的顺铂作用12h时,大鼠延髓内PPT-A的mRNA表达有轻微增加,但无统计学差异(P＞0.05),24 h后,延髓内PPT-A的mRNA表达量显著增加(P＜0.05).在此后持续观察的5天中,顺铂可持续引起延髓中PPT-A的mRNA表达增高,在第5天时PPT-A的mRNA仍维持166.23±16.92％的高表达.高剂量顺铂抑制大鼠下丘脑中Orexin的mRNA表达,24 h时Orexin降低幅度明显,为对照组的34.81±7.22％(P＜0.05).此后检测的5天,Orexin浓度均低于对照组;将阿瑞匹坦和orexin联合应用,大鼠高岭土摄入量较单独应用阿瑞匹坦或orexin明显减少,摄食量显著增加(P＜0.05).结论:P物质和orexin通路对顺铂化疗大鼠的异食癖和摄食量调控具有协同作用.

下丘脑弓状核微量注射Orexin-A对大鼠胃传入信息和胃运动的影响

目的:探讨ARC orexin-A对胃传入信息以及胃运动的调控及机制.方法:采用细胞外放电记录方法,鉴定ARC orexin胃牵张敏感神经元(Gastric distention sensitive neurons,GD),并探讨ARC内orexm-A对GD神经元放电活动的影响及机制;采用ARC微量注射orexin-A和及其受体阻断剂SB334867,观察大鼠胃收缩幅度和频率的改变.结果:大鼠ARC共记录到149个GD神经元,其中GD-E神经元91个,GD-I神经元58个.ARC微量注射orexin-A,62个(62/91,68.1％)GD-E神经元兴奋性显著增加,其放电频率由4.27±0.58 Hz增加到8.46± 0.95 Hz (P＜0.01);39个(39/58,67.2％)GD-I神经元兴奋性也显著增强,其放电频率由4.02± 0.53 Hz增加到5.43± 0.57 Hz(P＜0.05).然而,ARC给予大鼠orexin-A受体拮抗剂SB334867,再给予orexin-A,orexin-A兴奋效应完全被阻断(P＞0.05).胃运动实验结果显示:在ARC注射不同浓度orexin-A,大约5 min后,大鼠胃收缩幅度和频率呈剂量依赖性增加(P＜0.05～0.01).ARC注射SB334867,可完全消除orexin-A对大鼠胃运动的兴奋效应(P＜0.05).结论:ARC orex-in-A对大鼠GD神经元和胃运动有调控作用,该作用可能通过调控Orexin A受体活动实现的.

Orexin神经元调节应激反应的研究进展

orexin是下丘脑的一种重要神经肽,在摄食、睡眠和药物成瘾等生理心理过程中起着重要作用.近年来发现下丘脑Orexin能神经纤维密集地投向参与应激调控的脑区；orexin基因敲除的老鼠表现为防御反应迟钝；另外,侧脑室微量注射orexin可导致血浆中ACTH水平的上升并诱导出应激样呼吸-心血管反应和行为反应；因此,下丘脑及中枢orexin系统对应激的调控可能起关键作用.其可能机制为强烈刺激能活化下丘脑orexin神经元,诱导中枢神经系统orexin的释放,从而激活CRF通路及蓝斑-交感-肾上腺髓质系统,提高血浆皮质酮与去甲肾上腺素的水平,诱导应激反应,维持机体的稳定.

OBJECTIVE: Inlfammation and lung function decline are the main pathophysiological features of chronic obstructive pulmonary disease (COPD). Acupuncture can improve lung function in patients with COPD, but the underlying mechanisms are not well understood. Orexins (OXs), which are found in peripheral plasma, are neuropeptides that regulate respiration and their levels are related to COPD. Therefore, we hypothesized that acupuncture might alter OXs, reduce lung inlfammation and improve lung function in COPD.
METHODS:COPD was induced in rats by exposure to cigarette smoke for 8 weeks and injecting with lipopolysaccharide twice. Electroacupuncture (EA) was performed at Feishu (BL13) and Zusanli (ST36) for 30 min/d for 2 weeks. Rat lung function and morphology were assessed after EA. The levels of tumor necrosis factor-α(TNF-α) and interleukin-1β(IL-1β) in bronchoalveolar lavage lfuid (BALF) and orexin A and B levels in the lung tissue were detected by enzyme-linked immunosorbent assay. OX receptor mRNA levels and immunopositive cells were assessed with real-time polymerase chain reaction and immunohistochemical methods, respectively. The relationships among lung function, cell factors, and OX levels were analyzed by Pearson correlation analyses. RESULTS: Compared with the control group, lung function was signiifcantly decreased in the rats with COPD (P<0.05). There were obvious increases in TNF-α and IL-1β levels in BALF (P<0.05 and P<0.01, respectively), orexin A level in lung tissue (P<0.01; but not orexin B) and mRNA expressions of OX 1 type receptor (OXR1) and OX 2 type receptor (OXR2) in lung tissue (P<0.05 and P<0.01, respectively); the integrative optical densities (IODs) of both receptors were greater in the COPD group (P<0.05). For rats with COPD subjected to EA, lung function was improved (P<0.05). There were notable decreases in TNF-αand IL-1βlevels (P<0.05 and<0.01, respectively) in BALF. Orexin A, but not orexin B, levels in lung tissue also decreased (P<0.01), as did mRNA expression of OX1R and OX2R in lung tissue (P<0.05 and P<0.01, respectively). Receptor IODs were also reduced after EA treatment (P<0.05). Furthermore, orexin A levels and ratio of forced expiratory volume in 0.3 s to forced vital capacity were strongly negatively correlated (P<0.01), and orexin A was positively correlated with TNF-α and IL-1β(P<0.001 and P<0.05, respectively).
CONCLUSION:EA at Zusanli and Feishu improved lung function of rats with COPD and had an anti-inlfammatory effect, which may be related to down-regulation of OXA and its receptors.