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P物质在佐剂性关节炎发病中的作用
佐剂性关节炎(AA)是类风湿关节炎的动物模型。P物质(SP)是发现早的一种神经肽,广泛分布于外周及中枢神经系统中。有人报道P物质在外周及体外细胞培养条件下可增强免疫功能。本实验对佐剂性关节炎发病过程中P物质的可能调节作用进行了初步探讨。1 材料与方法 选用体重约200克左右的Wistar雄性大鼠,将0.1mL完全弗式佐剂(CFA,内含死结核杆菌1.0mg/mL)皮内注射于右后肢足垫内,观察AA发病情况。将雷公藤多甙片用1%的甲基纤维素配制成3g/L的混悬液,将发病动物于免疫后17d开始连续口服雷公藤多甙10mg/kg,每日1次,共10d,观察雷公藤多甙对AA的治疗效果;通过淋巴细胞转化实验反映细胞免疫功能。对中枢P物质进行放射免疫测定。实验数据以均值±标准差(x—±s)表达,用t检验作统计学处理。2 结果 以CFA皮内注射到大鼠右后肢足垫内,至免疫后第15d,按炎症情况分级,对侧即左后肢发生炎症者占总数的37.5%,严重者占22.5%。严重者(Ⅲ,Ⅳ级)左后踝周径为3.49±0.18cm,显著高于左后肢未发生炎症者2.40±0.02cm(P<0.001)。左后肢炎症自CFA免疫后第28d开始消褪,自45d左右痊愈。Ⅰ-Ⅱ级炎症关节可完全恢复正常,Ⅲ-Ⅳ级炎症关节大多仍僵直。结果说明佐剂性关节炎是一种自限性疾病,可以由注射CFA诱导出来。注射侧即右后肢炎症持续三个月仍存在。CFA注射组的体重增加20.2±2.3g,明显低于对照组不完全弗氏佐剂(IFA)注射组55.1±5.7 g (P<0.01)。 在此期间给雷公藤多甙组体重增加23.1±3.8 g,明显高于对照组6.6±2.2g(P<0.01)。 免疫对淋巴细胞转化的影响:于免疫后当天,第6、25、51d进行淋巴细胞转化实验,测定counts/min值。结果表明,CFA免疫可以增加机体免疫功能,且对免疫功能影影响较持久(见表1)
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牙周内源性再生的策略与展望
牙周病等多种原因造成的牙周支持结构( periodontal supporting apparatus)破坏或丧失是成年人失牙的首要原因,牙周病的治疗和牙周缺损的修复是学者们共同关注的课题,目前还没有哪一种临床治疗方法可以实现真正意义上的牙周组织生理性和功能性再生[1-3].自2004年Seo等[4]从人牙周膜组织中成功分离出牙周膜干细胞( periodontal ligament stem cells,PDLSC)以来,利用干细胞移植技术修复牙周组织缺损已成为牙周组织再生研究的主要策略[3].值得注意的是,无论是动物体内的临床前期研究,还是牙周病患者的临床病例报告,干细胞移植均取得了令人振奋的结果[5-10].然而,干细胞移植需要高标准的体外细胞培养条件、严格的调控措施和复杂的操作规程,其临床转化面临着巨大的人力、物力与财力的挑战,特别在一些非致死性疾病(如牙周组织缺损)的治疗上,"取,,与"舍"仍然存在争议[11].随着干细胞生物学研究的不断深入,利用干细胞在体内的运动和迁移机制,诱导患者自身干细胞募集和"归巢"( cell homing)促进牙周组织自我修复再生有望解决体外干细胞培养与移植面临的"转化困难",具有广阔的研究前景和临床应用空间[12-14].
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血吸虫与绦虫细胞培养的研究进展
随着细胞生物学技术的迅速发展,人体蠕虫的体外培养工作已由虫体培养转入细胞培养阶段,近年来已成功建立了猪囊尾蚴细胞系,制备的细胞疫苗免疫妊娠母猪后可使仔猪获得先天性免疫力[1-2].关于血吸虫细胞的体外培养,虽然目前尚未获得持续增殖细胞系,但已筛选出了合适的细胞培养条件[3].开展血吸虫与绦虫细胞的体外培养工作,对于其生物学和免疫学研究及抗寄生虫药物的筛选等均具有重要意义.现将几种主要血吸虫与绦虫细胞培养的研究进展综述如下.
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LPS刺激后细胞内静态游离钙浓度[Ca2+]i升高
目的:前文已报道,Mφ细胞RAW264.7在LPS预处理后诱导了致敏和耐受,提示LPS预处理引起细胞内参与反应的信号转导分子或效应分子发生了某种变化.已知[Ca2+]i在白细胞活化中的重要性以及静态[Ca2+]i与Mφ反应性有密切关系,因此我们推测LPS预处理可能引起了静态[Ca2+]i的变化.方法:RAW264.7细胞培养条件见;细胞在置有载玻片的6孔板中完全贴壁后,LPS10ng/mL作用18 h,取玻片,Fura-2负载,测细胞内钙.结果及讨论:8批实验结果中,有7批LPS预处理后,[Ca2+]i均明显升高如下表所示:
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淋巴细胞培养条件及常见失败原因探讨
淋巴细胞培养是实验研究常用的一项技术,对于培养器皿,可以选用培养板,培养瓶,培养皿,三角烧瓶,试管,青、链霉素小瓶等[1,2].目前,关于淋巴细胞分离方法的文献资料较多,论述较详细,而对淋巴细胞培养则论述较少,较简单.细胞培养工作十分繁琐,环节较多,探讨细胞培养的条件,对于成功培养细胞具有十分重要的意义.本文选用1.5ml离心管培养淋巴细胞,观察了淋巴细胞培养前后的变化,探讨了淋巴细胞培养的条件及失败的常见原因.现报道如下.