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长链非编码RNA HOTAIR促进胶质瘤细胞侵袭
目的 探讨长链非编码RNAHOT AIR对人脑胶质瘤细胞侵袭的促进作用.方法 采用HOTAIR-siRNA寡聚核苷酸转染胶质瘤U87和U251细胞系,通过实时荧光定量PCR技术检测HOTAIR在胶质瘤细胞中的表达水平.利用Westem blot验证上皮间质化相关通路蛋白(Snail、Stat3和-catenin)、标记蛋白(E-cadherin、CDH13和Vimentin)和侵袭迁移相关基质金属蛋白酶(MMP2、MMP9)的表达变化.采用Transwell实验,观察敲低HOTAIR后其对胶质瘤细胞侵袭的影响.结果 下调HOTAIR表达后,U87和U251细胞的上皮间质化相关信号通路蛋白降低,E-cadherin和CDH13升高,Vimentin降低,MMP2和MMP9表达下降,细胞侵袭能力减弱(P＜0.01).结论 HOTAIR通过诱导上皮间质化促进了胶质细胞侵袭能力.
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大蒜素对TGF-β1诱导人胆管癌细胞上皮间质化的影响及机制
目的 胆管癌的转移机制可能与上皮间质化(EMT)有关.文章旨在探讨大蒜素对TGF-β1诱导的人胆管癌细胞上皮间质化的影响及其作用机制,为大蒜素应用于胆管癌的治疗提供理论依据.方法 采用MTT法检测不同浓度大蒜素对人胆管癌RBE细胞的增殖抑制作用,以24 h的IC50确定为大蒜素给药浓度,将其分为空白对照组、大蒜素组(130.7μmol/L)、TGF-β1组(10 ng/mL)及大蒜素+TGF-β1组(130.7μmol/L+10 ng/mL);采用划痕实验和Transwell小室试验分别检测24h后RBE细胞的迁移及侵袭能力;Western blot分别检测各组EMT相关蛋白E-钙黏蛋白(E-Cadherin)、N-钙黏蛋白(N-Cadherin)、Vimentin、Snail及核因子-κB(NF-κB)信号通路表达情况.结果 与空白对照组及TGF-β1组迁移率(28.19％±0.66％、49.22％±0.27％)比较,大蒜素组及大蒜素+TGF-β1组(9.25％±0.36％、13.91％±0.75％)均下降(P＜0.05);与空白对照组及TGF-β1组侵袭率(33.48％±0.04％、40.21％±0.12％)比较,大蒜素组及大蒜素+TGF-β1组(6.59％±0.06％、9.40％±0.05％)亦均明显下降(P＜0.05);与空白对照组相比,大蒜组的E-Cadherin蛋白表达上调(P＜0.05),而N-Cadherin、Vimentin、Snail、NF-κB及p-NF-κB蛋白表达下调(P＜0.05);与TGF-β1组相比,大蒜素+TGF-β1组的E-Cadherin蛋白表达上调(P＜0.05),N-Cadherin、Vimentin、Snail、NF-κB及p-NF-κB蛋白表达下调(P＜0.05).结论 大蒜素可抑制TGF-β1诱导的人胆管癌细胞发生上皮间质化,其机制可能与阻断NF-κB信号通路有关.
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白花蛇舌草乙醇提取物联合吉非替尼对TGF-β1诱导的肺腺癌细胞H358上皮间质化的干预作用
目的 研究白花蛇舌草乙醇提取物(ethanol extract of Hedyotis diffusa,EEHD)联合吉非替尼对TGF-β1诱导的肺腺癌细胞H358上皮间质化的干预作用.方法 以上皮表型人肺腺癌细胞H358为研究对象,TGF-β1诱导构建细胞上皮间质化模型,按EEHD、吉非替尼及两药3种不同顺序联合作用分为6组:A组,EEHD作用48 h;B组,吉非替尼作用48h;A24B24组,先EEHD作用24 h,后吉非替尼作用24 h;B24A24组,先吉非替尼作用24 h,后EEHD作用24 h;AB48组,同时加入吉非替尼和EEHD作用48 h;对照组.CCK-8法测定各组细胞坏死率,Western-blot检测各组细胞中E-cadherin、Vimentin、EGFR蛋白表达情况,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,比较组间差异.结果 各组药物作用均能不同程度抑制上皮间质化肺腺癌细胞H358增殖,E-cadherin表达呈上升趋势,Vimentin表达下降.其中EEHD联合吉非替尼组的细胞生长抑制率和细胞凋亡率显著高于吉非替尼单用组,E-cadherin蛋白表达率则显著高于吉非替尼单用组,而EGFR、Vimentin蛋白表达率显著低于吉非替尼单用组(P＜0.05),EEHD与吉非替尼先后顺序作用组间差异无统计学意义.结论 vEEHD与吉非替尼对上皮间质化的H358细胞具有联合抑制作用,白花蛇舌草可部分逆转H358细胞上皮间质化状态.
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逆转肿瘤上皮间质化药理研究进展
上皮间质化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是上皮细胞来源的恶性肿瘤细胞获得迁移和侵袭能力的重要生物学过程,是肿瘤侵袭和转移过程的重要启动步骤,与恶性肿瘤的进展和预后密切相关,EMT已经成为抗肿瘤药理研究的重要靶点.该文从药理筛选模型、靶向药物、细胞毒类药物、天然药物几个方面综述近几年来有关逆转肿瘤EMT药理方面的研究,对于研发能够逆转恶性肿瘤EMT的抗肿瘤药物具有重要指导意义.
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姜黄素通过调控上皮间质转化抑制乳腺癌侵袭转移的体外研究
目的:探讨上皮间质转化(EMT)是否参与姜黄素抑制乳腺癌细胞侵袭转移过程.方法:利用不同浓度姜黄素干预脂多糖(LPS)诱导的乳腺癌细胞MCF-7,MTT法检测细胞增殖能力,普通光学显微镜及透射电子显微镜观察细胞形态变化,RT-PCR和Westem blot方法分别检测vimentin,E-cadherin表达变化.结果:姜黄素可抑制LPS诱导的乳腺癌细胞MCF-7 EMT的发生,降低LPS诱导的EMT标志物vimentin蛋白的表达,增强E-cadherin的表达,终导致乳腺癌细胞运动及侵袭能力的降低.结论:姜黄素可以抑制肿瘤细胞侵袭能力,提示EMT程序参与其中,具体分子机制仍需进一步研究.
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Wnt/β-catenin通路在卵巢癌中的调控机制研究进展
卵巢癌死亡率居妇科恶性肿瘤首位,导致其高死亡率的主要原因是早期诊断困难和化疗耐药.研究证实,Wnt/β-catenin信号通路在卵巢癌组织和细胞中被异常激活.其相关蛋白质明显高表达,与卵巢癌的发生发展、侵袭、转移和耐药密切相关.本文简要回顾目前Wnt/β-catenin信号通路在卵巢癌中的研究进展,以期加强对Wnt通路的认知,并进一步研究Wnt通路调控机制,为卵巢癌的防治提供新的靶向治疗方法.
关键词： 卵巢癌 Wnt/β-catenin信号通路 上皮间质化 靶向治疗 -
结直肠癌中上皮间质化相关转录调控和信号通路研究进展
上皮间质化(EMT)在结直肠癌的转移、侵袭中起重要作用.EMT可通过核心转录因子、Brachyury蛋白、叉头转录因子等转录因子调节E-钙蛋白和波形蛋白的表达来调控结直肠癌的转移和侵袭;也可通过转化生长因子β信号通路、Wnt信号回路、RAS/ERK1/2信号环路、PI3K/AKT信号环路等信号通路调控结直肠癌的转移和侵袭.
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Sox5促进胰腺癌细胞迁移侵袭和上皮间质化
目的:探讨Sox5对胰腺癌细胞迁移侵袭和上皮间质化的影响.方法:人正常胰腺细胞HPDE6-C7(HPDE6-C7组)、胰腺癌细胞PANC-1 (PANC-1组)和AsPC-1(AsPC-1组)正常培养至对数生长期,采用qRT-PCR法和Western blot法分别检测各组细胞中Sox5 mRNA和蛋白水平.将shSox5、shControl、pcDNA 3.1-Sox5和载体pcDNA 3.1以脂质体法转染胰腺癌细胞PANC-1,分别标记为shSox5组、shControl组、pcDNA 3.1-Sox5组和Scrambled组,采用qRT-PCR法检测各组细胞中Sox5、E-cadherin、N-eadherin、Vimetin、Snail和Twist1的mRNA 表达;Western blot检测各组细胞中Sox5、E-cadherin、N-cadherin、Vimetin、Snail和Twist1的蛋白表达;Transwell 法检测各组细胞的迁移和侵袭.结果:与HPDE6-C7组相比,PANC-1组和AsPC-1组中Sox5 mRNA和蛋白水平均升高(P＜0.01);与shControl组比较,shSox5组Sox5、N-cadherin、Vimetin、Snail和Twist1的mRNA和蛋白以及细胞迁移和侵袭水平均显著降低(P＜0.01),E-cadherin mRNA和蛋白水平均显著升高(P＜0.01);与Scrambled组比较,pcDNA-3.1-Sox5组Sox5、N-cadherin、Vimetin、Snail和Twist1的mRNA和蛋白以及细胞迁移和侵袭水平均显著升高(P＜0.01),E-cadherin mRNA和蛋白水平均显著降低(P＜0.01).结论:Sox5可促进胰腺癌细胞迁移、侵袭和EMT,将为胰腺癌的靶点治疗提供新靶标.
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中电导性钙离子依赖性钾通道在肝细胞再生蛋白-3促进结肠癌上皮间质化中的作用机制
目的 探讨中电导性钙离子依赖性钾通道(KCNN4)通道在肝细胞再生蛋白-3(PRL-3)诱导结肠癌细胞Lovo上皮间质化(EMT)中的作用机制.方法 用KCNN4通道蛋白特异性阻滞剂TRAM-34和KCNN4-小干扰RNA(siRNA)分别处理已经稳定表达PRL-3的结肠癌Lovo-P细胞和对照组Lovo-C细胞,Western blot检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、Snail以及波动蛋白(Vimentin)的水平变化,Transwell小室检测Lovo细胞侵袭能力变化.结果 Lovo-P分别经过TRAM-34和KCNN4-siRNA处理后,侵袭能力明显降低(45.78±3.89比32.69 ±2.15,45.78 ±3.89比28.76±4.25).Western blot结果提示与对照组比较,TRAM-34处理组E-cadherin蛋白表达上升了69％,Snail蛋白表达下降了36％,而KCNN4-siRNA处理组都E-cadherin蛋白表达上升了57％,Snail蛋白表达下降了30％(P＜0.05).结论 KCNN4通道蛋白参与了PRL-3诱导结肠癌EMT的过程.
关键词： 结肠癌 肝细胞再生蛋白-3 中电导性钙离子依赖性钾通道 上皮间质化 -
MSX2基因与上皮间质化在肿瘤浸润转移的研究进展
同源(异型)框基因Msx(Msx)属于同源(异型)框基因Hox(homeobox)家族成员,Hox基因是一类高度保守的DNA序列,其共同特点是具有180个核苷酸长度的同源区,编码由印个氨基酸折叠成的3个α-螺旋结构~([1]),该结构被称为同源异型域(HD).
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肾上腺激素水平对小鼠乳腺癌转移的影响
目的 探讨肾上腺功能水平和肾上腺激素对小鼠乳腺癌转移的影响及机制.方法 将小鼠随机分为三组分别为:假手术组、肾上腺移植组和肾上腺切除组,并接种稳定表达萤光素酶基因的4T1细胞,观察肿瘤的生长情况并利用印度墨汁染色和小动物活体成像观察肿瘤转移情况;利用伤口愈合实验和Transwell小室实验检测肾上腺素(E)和糖皮质激素地塞米松(DEX)对4T1细胞迁移能力的影响.后通过RT-PCR,实时荧光定量PCR和Western blot检测上皮间质化相关分子如E-cadherin、vimentin和ZEB1基因和蛋白水平的表达.结果 肾上腺移植组肿瘤生长明显增快,瘤体大,肺转移结节明显增多,且腹部转移灶大;而肾上腺切除对肿瘤的生长和转移作用正好相反.DEX明显促进4T1细胞的迁移能力而E作用不明显,且DEX上调vimentin和ZEB1的表达而下调E-cadherin的表达.结论 糖皮质激素促进小鼠乳腺癌的生长和转移,这一作用可能是通过促进上皮间质化介导的.
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胃癌组织Twist与MMP-2的表达及临床病理意义
目的:通过探讨Twist和基质金属蛋白酶2(MMP-2)在胃癌组织中的表达水平,以研究两者与胃癌临床病理因素的相互关系,从而为临床上胃癌的转移复发预警及预后评估提供更准确的研究靶点.方法:首先收集37例胃癌患者石蜡组织切片及其对应的临床病例资料,然后通过免疫组化的方法检测Twist和MMP-2在37例胃癌病理组织切片中的表达情况;通过统计分析进一步了解Twist和MMP-2与临床胃癌相关病理因素之间的关系,同时对两者之间表达水平的关联性进行分析.结果:Twist蛋白在肿瘤细胞的胞质中呈现高表达,同时也存在于细胞核中,其阳性表达率为56.8％;胃癌的淋巴结转移、浆膜浸润等主要与Twist基因的表达有关(P＜0.05);MMP-2蛋白在肿瘤细胞的胞质中呈现高表达,同时也存在于细胞核中,其阳性表达率为54.1％;胃癌的复发及远处转移与MMP-2的表达有关(P＜0.05);Twist和MMP-2在胃癌组织中的表达呈正相关(r=0.257,P＜0.05).结论:胃癌组织中Twist和MMP-2表达均存在异常,且两者的表达水平的变化与临床上胃癌的转移、复发等过程密切相关;同时在一定程度上胃癌组织中的Twist的表达水平可能会调控MMP-2的表达.
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Snail基因慢病毒载体的构建及其促进结肠癌细胞上皮间质化的研究
[目的]构建Snail基因慢病毒载体,研究Snail基因的表达与结肠癌细胞上皮间质化的关系.[方法J利用Gateway Technology法构建Snail基因表达质粒和空白对照质粒,行慢病毒包装.成功构建Snail基因慢病毒载体后,在结肠癌细胞系caco2中转染Snail基因质粒及空白载体对照,构建稳转细胞株caco2- Snail和caco2-vc,并在LoVo细胞中瞬时转染上述质粒,对Snail及E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达进行检测,并用划痕、Tanswell实验对细胞的迁移侵袭能力进行研究.[结果]成功构建Snail基因慢病毒载体并经测序证实.在转染Snail的细胞株中有明显的Snail基因及蛋白表达,其上皮标记E-cadherin的表达比转染空载体的对照组细胞明显下调,且其迁移侵袭能力要强于对照组细胞.[结论]Snail基因慢病毒载体在宿主细胞中表达稳定可靠,可以作为研究上皮间质化很好的工具,Snail基因有明显促进结肠癌细胞上皮间质化的作用.
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利多卡因对表皮生长因子诱导的乳腺癌MDA-MB-231细胞上皮间质转化和迁移能力的影响
目的 探讨利多卡因对表皮生长因子(EGF)诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞(MDA-MB-231)上皮间质转化(EMT)和迁移能力的影响.方法 以未经处理的MDA-MB-231细胞为空白对照组(A组),以10 ng/mL EGF处理的为EGF组(B组),在10 ng/mL EGF中分别加入50、500、5000μmol/L的利多卡因(C、D、E组)干预MDA-MB-231细胞;采用噻唑蓝(MTT)比色法检测利多卡因对MDA-MB-231细胞活性的影响,划痕实验检测MDA-MB-231细胞迁移能力的变化,Western blot检测MDA-MB-231细胞EMT标记蛋白紧密连接蛋白-1(ZO-1)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达.结果 与A组相比,EGF处理后(B、C、D、E组)MDA-MB-231细胞活性和迁移能力增强(P<0.05),Western blot显示上皮标志分子ZO-1蛋白表达减少(P<0.001),间质标志分子MMP-9(P<0.001)蛋白表达增强;而利多卡因500μmol/L(D组)、5000μmol/L(E组)与EGF联合干预MDA-MB-231细胞后,其迁移能力与细胞活性较B组降低,ZO-1蛋白表达上调,MMP-9蛋白表达下调.结论 利多卡因可抑制EGF诱导的MDA-MB-231细胞EMT和迁移.
关键词： MDA-MB-231 利多卡因 表皮生长因子 上皮间质化 -
卵巢上皮性癌中ZEB1的表达及其临床意义
目的 探讨ZEB1在人卵巢原发性上皮性癌中的表达及其临床意义.方法 选取广州军区武汉总医院2006～2010年间手术切除并经病理证实的人正常卵巢组织12例,卵巢原发性上皮性癌60例,其中FIGO Ⅰ期20例,Ⅱ期18例,Ⅲ期17例,ⅣV期5例,应用免疫组织化学法检测卵巢上皮性癌组织中ZEB1蛋白的表达,分析其与卵巢癌患者临床病理特征的关系.结果 ZEB1蛋白在正常卵巢中不表达,在49例(81.67％)卵巢癌中为阳性表达.ZEB1蛋白在各期卵巢上皮性癌中的阳性率分别为:Ⅰ-Ⅱ期73.68％ (28/38),Ⅲ-ⅣV期95.45％ (21/22),差异有统计学意义(P＜0.05); ZEB1在有淋巴结转移及无淋巴结转移组的阳性率分别为100％(14/14)、76.09％(35/46),差异有统计学意义(P＜0.05); ZEB1在各级卵巢上皮性癌中的阳性率分别为:低分化100％ (6/6),中分化96.43％ (27/28),高分化61.54％(16/26),差异有统计学意义(P=0.002).结论 ZEB1在卵巢上皮性癌的发生发展中起重要的作用,可能是卵巢癌治疗的潜在靶点.
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OAZ1基因稳定表达SCC15细胞株的构建及其对舌鳞状细胞癌上皮间质化的影响
目的 探索鸟氨酸脱羧酶抗酶(OAZ1)对舌鳞癌细胞株SCC15上皮间质化的影响及相关机制.方法 构建框移位点突变的OAZ1过表达慢病毒表达载体pLVX-Neo-OAZ1-IRES-ZsGreen,包装病毒并感染SCC15细胞,采用有限稀释法挑取荧光强度较高的单克隆细胞株;利用RT-PCR和Western blot检测OAZ1以及上皮间质化相关基因(E-cadherin、Vimentin、N-cadherin、Zeb1、Snail、Twist1、TGF-β1、Smad1)的mRNA水平和蛋白水平.结果 成功构建了OAZ1基因稳定表达的SCC15细胞株,且OAZ1的过表达可以抑制Vimentin、N-cadherin、TGF-β1的mRNA和蛋白水平表达;此外,OAZ1可以促进Smad1的蛋白水平降低.结论 OAZ1可以抑制舌鳞癌细胞的上皮间质化,其机制可能涉及TGF-β1信号通路和Smad1信号通路的抑制.
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上皮间质化与肿瘤相关性的研究进展
预防肿瘤远处转移是提高恶性肿瘤治疗效果的关键，但因其机制尚不明确，当前尚无确切有效的治疗手段。近期许多研究发现，上皮间质化（E M T ）与肿瘤的进展及转移密不可分［1］。多种生物因子参与 EM T 过程，包括上皮特异性分子、间质特异性分子、转化因子等［2］。本文对EM T在恶性肿瘤发展及转移过程中的作用的相关文献进行综述，以进一步指导研究恶性肿瘤的进展和转移机制。
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过表达OTUD1对结肠癌细胞HCT116增殖和侵袭的影响及机制研究
目的:探讨卵巢癌结构域蛋白酶-1 (ovarian tumor domain-containing protease-1, OTUD1) 基因对人结肠癌细胞HCT116增殖和侵袭的作用及机制.方法:选取低表达OTUD1的人结肠癌细胞株, 利用慢病毒包装技术过表达OTUD1基因, 空载质粒作对照, 嘌呤霉素筛选后构建稳定转染的结肠癌细胞株.RT-PCR (reverse transcription PCR) 和Western blot技术检测转染效率.细胞迁移和侵袭实验检测2组细胞迁移和侵袭能力的改变.细胞增殖实验和流式细胞术检测2组细胞增殖能力的变化.克隆形成实验检测2组细胞的克隆形成能力.Western blot技术分析相关蛋白分子水平的变化, 探讨其可能的机制.结果:6株结肠癌细胞株中HCT116细胞的OTUD1蛋白表达水平低, 并成功构建过表达OTUD1基因的结肠癌细胞株HCT116-OTUD1.与对照组HCT116-Control细胞相比, HCT116-OTUD1细胞株迁移 (P=0.000) 和侵袭能力减弱 (P=0.000) , CCK-8增殖实验显示实验组细胞增殖水平下降 (P=0.004) , EDU流式检测结果显示细胞增殖水平下降 (P=0.000) , 克隆形成能力下降 (P=0.017) .上皮间质转化 (epithelial mesenchymal transition, EMT) 相关分子E-cadherin表达水平上调, Vimentin表达水平下调, 增殖相关信号通路分子p-AKT、p-ERK1/2表达水平下调.结论:过表达OTUD1可以通过减弱细胞的EMT作用来影响其迁移和侵袭能力, 并抑制细胞的增殖能力, 这种变化可能与MAPK/Erk和PI3K/Akt信号通路的激活受到抑制有关.
关键词： 卵巢癌构域蛋白酶-1 结肠癌 上皮间质化 迁移与侵袭 增殖 -
环巴胺阻断Hedgehog信号通路对食管癌EC109细胞上皮间质化逆转的影响及机制
目的:探讨环巴胺阻断Hedgehog通路对食管癌EC109细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的作用及其可能机制.方法:实验分为实验组和对照组,实验组应用Hedgehog通路特异性阻断剂环巴胺作用食管癌EC109细胞48 h.通过real-time PCR检测Gli1的表达变化,观察细胞形态变化,通过血管拟态实验检测血管形成能力变化,Transwell小室侵袭和迁移实验、黏附实验分别检测细胞侵袭、迁移和黏附能力变化,real-time PCR及Western印迹方法检测EMT相关标志物E钙粘蛋白(E-cadherin)、β连环蛋白(β-catenin)、波形蛋白(Vimentin)及EMT调控因子Snail、Twist1等的表达变化.结果:环巴胺阻断EC109细胞Hedgehog信号通路Gli1的mRMA表达明显减少为(41.819±20.150)％,形态发生明显变化,血管拟态个数较对照组[(2.780±0.424) vs.(5.080±0.634)]明显减少(t=-16.919,P =0.000),侵袭实验较对照组[(24.800±2.588) vs.(55.400±4.879)]和迁移实验较对照组[(23.200±1.924) vs.(65.400±4.775)]均明显减少(t=-12.390,P=0.000;t=-18.331,P=0.000),同种细胞间黏附增强(F=9.327,P=0.009),上皮表型标志物E-cadherin表达较对照组[(0.388±0.565) vs.(0.228±0.582)]明显上调(t=3.421,P=0.027),而间质表型Vimentin、β-catenin的表达水平较对照组[(0.588±0.109) vs.(0.507±0.051);(0.998±0.128) vs.(0.756±0.038)]明显下调(t=4.221,P=0.013;t=6.781,P=0.002);与对照组相比,实验组细胞中转录因子Snail的表达较对照组[(0.401±0.021)vs.(0.756±0.038)]下调(t=6.774,P=0.002),Twist1的mRNA表达量相对于对照组也明显下调为(74.987±9.031)％.结论:环巴胺阻断Hh信号通路能明显逆转EC109细胞EMT过程,其机制可能与下调转录因子Snail及Twist1表达有关.
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姜黄素抑制耐紫杉醇食管癌细胞的上皮间质转化作用及机制探讨
目的 建立耐紫杉醇食管癌(EC)细胞系EC9706/PTX,观察姜黄素对EC9706/PTX细胞上皮间质转化(EMT)的抑制作用并探讨其机制,为耐药EC的治疗提供理论依据.方法 用中等浓度间歇作用法建立耐紫杉醇EC细胞EC9706/PTX,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞耐药指数及交叉耐药性,检测不同浓度姜黄素对EC9706/PTX细胞增殖的抑制.使用细胞骨架染色、划痕实验、Transwell侵袭实验检测姜黄素对EC9706/PTX细胞形态变化、迁移和侵袭能力的影响.荧光定量PCR及蛋白免疫印迹(Western blot)检测姜黄素对EC9706/PTX细胞中EMT相关分子标志物E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、波形蛋白、纤维连接蛋白在mRNA和蛋白水平的表达影响.Western blot检测姜黄素对EC9706/PTX细胞中转录因子NF-κB p65及Snail在蛋白水平的表达影响.结果 EC9706/PTX对紫杉醇的耐药指数为28.4,对顺铂、阿霉素产生交叉耐药性,姜黄素能够抑制EC9706/PTX细胞的增殖.在20 μmol/L浓度的姜黄素作用下,EC9706/PTX细胞的迁移和侵袭能力明显降低.荧光定量PCR及West-ern blot检测显示,细胞耐药后E-钙黏蛋白的表达明显下调,而N-钙黏蛋白表达则明显上调,姜黄素逆转了这一现象.Westernblot检测提示,EC细胞发生耐药及EMT后,NF-κB p65及Snail蛋白的表达增强,姜黄素阻断了这一作用.结论 姜黄素能够抑制紫杉醇耐药EC细胞的增殖并且能够逆转紫杉醇耐药EC细胞的EMT现象,其机制可能是通过抑制NF-κB-Snail信号通路实现的.
