首页 > 文献资料
-
白花蛇舌草乙醇提取物对TGF-β1诱导的人肺腺癌细胞H358上皮间质化的干预作用
目的 探讨白花蛇舌草乙醇提取物(EEHD)对转化生长因子-β1(TGF-β1)体外诱导的人肺腺癌细胞H358间质化过程的干预作用.方法 以5 ng· mL-1的转化生长因子-β1作用于H358细胞24 h,成功构建上皮间质转化模型,此后分别加入低、中、高浓度的白花蛇舌草乙醇提取物作用48 h后,通过蛋白质印迹法与定量聚合酶链反应检测各组细胞上皮标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)及间质细胞标志物波蛋白(vimentin)的蛋白和mRNA的表达.结果 5 ng·mL-1的转化生长因子-β1可成功构建H358细胞上皮间质转化模型,在不同浓度白花蛇舌草乙醇提取物干预后,随浓度升高E-钙黏蛋白表达呈上升趋势,波蛋白表达下降.结论 白花蛇舌草乙醇提取物能部分干预甚至逆转转化生长因子-β1诱导的H358细胞上皮间质转化过程.
关键词： 白花蛇舌草乙醇提取物 上皮间质转化 H358细胞 -
槲寄生碱影响Ras蛋白表达抑制肺癌H358细胞增殖
目的 研究槲寄生碱对非小细胞肺癌H358细胞的抑制作用及其相关作用机制.方法 采用MTT法检测槲寄生碱对H358细胞增殖的抑制作用;采用流式细胞仪检测槲寄生碱对H358细胞凋亡的影响;采用Western blot方法检测槲寄生碱对K-Ras、Bcl-2和Bax等蛋白表达的影响;测定caspase 3、caspase 8和caspase 9的活性;检测槲寄生碱在体内的抑瘤活性.结果 槲寄生碱以质量浓度依赖的方式抑制H358细胞增殖,并能有效地诱导H358细胞凋亡;caspase 3、caspase 8和caspase 9受到了不同程度的激活;同时,槲寄生碱抑制K-Ras和Bcl-2的表达,而对Bax没有明显抑制作用;槲寄生碱在体内也表现出明显的抑瘤活性.结论 槲寄生碱在体外能够抑制H358细胞增殖并诱导H358细胞凋亡,为K-Ras突变型非小细胞肺癌等肿瘤疾病的治疗奠定了实验基础.
-
白花蛇舌草乙醇提取物联合吉非替尼对TGF-β1诱导的肺腺癌细胞H358上皮间质化的干预作用
目的 研究白花蛇舌草乙醇提取物(ethanol extract of Hedyotis diffusa,EEHD)联合吉非替尼对TGF-β1诱导的肺腺癌细胞H358上皮间质化的干预作用.方法 以上皮表型人肺腺癌细胞H358为研究对象,TGF-β1诱导构建细胞上皮间质化模型,按EEHD、吉非替尼及两药3种不同顺序联合作用分为6组:A组,EEHD作用48 h;B组,吉非替尼作用48h;A24B24组,先EEHD作用24 h,后吉非替尼作用24 h;B24A24组,先吉非替尼作用24 h,后EEHD作用24 h;AB48组,同时加入吉非替尼和EEHD作用48 h;对照组.CCK-8法测定各组细胞坏死率,Western-blot检测各组细胞中E-cadherin、Vimentin、EGFR蛋白表达情况,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,比较组间差异.结果 各组药物作用均能不同程度抑制上皮间质化肺腺癌细胞H358增殖,E-cadherin表达呈上升趋势,Vimentin表达下降.其中EEHD联合吉非替尼组的细胞生长抑制率和细胞凋亡率显著高于吉非替尼单用组,E-cadherin蛋白表达率则显著高于吉非替尼单用组,而EGFR、Vimentin蛋白表达率显著低于吉非替尼单用组(P＜0.05),EEHD与吉非替尼先后顺序作用组间差异无统计学意义.结论 vEEHD与吉非替尼对上皮间质化的H358细胞具有联合抑制作用,白花蛇舌草可部分逆转H358细胞上皮间质化状态.
-
吉非替尼对肺癌细胞株H358放疗敏感性的影响及其机制
目的 表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是决定放疗效应的重要因素,它的过表达或激活常与包括非小细胞肺癌在内的肿瘤放疗抵抗相关,因而阻断EGFR的信号通路是增强放疗敏感性很有潜力的治疗策略.本研究旨在观察小分子EGFR酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼与放疗联合是否有提高非小细胞肺癌细胞株H358放疗敏感性的作用以及探索其分子机制.方法 将非小细胞肺癌细胞株H358分为X线组和X线+吉非替尼组,前者采用单纯X线照射,后者经1 μmol/L吉非替尼作用24h后再行X线照射.克隆形成实验比较两组细胞放射敏感性,免疫荧光激光共聚焦显微镜观察X线照射后各时间点细胞核中磷酸化γ-H2AX及EGFR焦点在细胞中的定位情况,Western blot法检测放疗后核蛋白中EGFR的表达.结果 克隆形成实验中X线+吉非替尼组各个剂量点的细胞存活率均少于X线组,可见X线+吉非替尼组对放疗更敏感.免疫荧光激光共聚焦显示,X线+吉非替尼组比X线组各时段细胞核内γ-H2AX焦点数增加,持续的时间也更长.EGFR免疫荧光及Western blot结果显示,X线组EGFR在放疗后1h内入核,而X线+吉非替尼组EGFR不在核内表达,仍位于细胞浆内.对Western blot结果用SPSS 13.0进行统计学分析,其差异有统计学意义( P=0.042).结论 吉非替尼可能是通过抑制EGFR放疗后入核进行损伤后DNA双链断裂修复,而起到对NSCLC细胞株H358放疗增敏的作用.
