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CK-19、Tg及HBME-1在甲状腺结节患者中的表达水平及联合检测的临床应用价值
目的 探讨甲状腺结节患者术前及术后血清 Tg 值的变化及CK-19、HBME-1在甲状腺结节组织中的表达和在甲状腺结节鉴别诊断及预后评估方面的价值.方法 选择153名入院手术的甲状腺结节患者,监测其术前 3天内和手术后1月的 Tg值,并且采用免疫组化法检测结节标本中CK-19及HBME-1的表达.结果 Tg、HBME-1、CK-19及HBME-1和CK-19联合表达以恶性结节伴转移强,恶性无转移较低,甲状腺良性结节低,在良恶性结节中的差异具有统计学意义.各指标中CK-19的敏感性高,HBME-1的特异性高,HBME-1与CK-19联合检测,能提高诊断的准确度.术后Tg值高于或等于术前的患者和术后Tg值低于术前的患者之间复发率差异存在统计学意义.结论 对于甲状腺结节患者,HBME-1、CK-19的表达是具有高度敏感性和特异性的检测指标,联合检测HBME-1和CK-19有利于提高诊断的准确性,对于术前甲状腺结节的良恶性鉴别有重要的参考价值.术前用 Tg 水平来鉴别结节的良恶性意义不大,患者术前术后Tg值的变化是评估近期预后的良好指标,术后Tg值不下降常提示结节预后不良.
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P53,ki-67,galectin-3,HBME-1,34βE12和CK19在甲状腺乳头状癌中的表达及临床病理意义
目的 探讨P53,ki-67,galectin-3,HBME-1,34βE12和CK-19在甲状腺乳头状癌中的表达及临床病理意义.方法 采用免疫组化检测43例甲状腺乳头状癌,37例结节性甲状腺肿,33例甲状腺腺瘤和17例桥本甲状腺炎中P53,ki-67,galectin-3,HBME-1,34βE12和CK-19的表达.结果 P53,ki-67,galectin-3,HBME-1,34βE12和CK-19在甲状腺乳头状癌中的阳性表达率分别为88.37％、79.07％、88.37％、93.02％、86.05％及95.35％,显著高于结节性甲状腺肿的18.92％、29.73％、27.03％、16.22％、24.32％和5.41％(P＜0.05);也高于甲状腺腺瘤和桥本甲状腺炎中的阳性表达率(P＜0.01).结论 联合检测P53,ki-67,galectin-3,HBME-1,34pE12和CK-19在诊断和鉴别诊断甲状腺乳头状癌与良性病变中具有重要的价值.
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肺癌患者血清中细胞角蛋白-2G2检测的临床意义
肿瘤早期发现和早期诊断是肿瘤防治的关键,肿瘤标志的研究与应用对肿瘤诊断及指导临床治疗有重要价值[1].细胞角蛋白(CK)-2G2是一种新型肿瘤标志,其为CK-19的全长片段.我们检测分析肺癌和肺结核患者及健康人血清中CK-2G2含量,以评价CK-2G2在肺癌早期诊断和辅助诊断中的临床应用价值.
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Galectin-3、Cytokeratin-19与桥本甲状腺炎
目的:探讨Galectin-3、Cytokeratin-19在桥本甲状腺炎中的表达情况.方法:通过对Gahctin-3、Cytokeratin-19和桥本甲状腺炎国内外相关文献的检索,总结出Galectin-3、Cytokeratin-19在桥本甲状腺炎中表达情况.结果:Galectin-3、Cytokeratin-19在桥本甲状腺炎中的表达显著高于良性甲状腺肿瘤.其中,呈强阳性者在细胞核及其组织形态上均与甲状腺癌有类似之处,可作为诊断早期桥本甲状腺炎癌变的依据.结论:联合Galectin-3、Cytokeratin-19的检测,可帮助鉴别桥本甲状腺炎是否癌变,其可用FNAB和手术后标本的检测,但其在临床应用中由于免疫组化所需时间长,故应用较局限.
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胃癌患者外周血中CK-19的表达及其临床意义
目的 检测胃癌患者外周血中CK-19和MUC-1的表达,确定其作为早期胃癌微转移分子标志物的可能性;讨论CK-19 mRNA对早期胃癌微转移的临床诊断意义.方法 研究对象共分为三组,其中2009年3月～2012年3月期间于陕西省安康市中心医院住院的96例初治胃癌患者作为实验组,30例胃良性疾病患者和30例健康人的外周血分别作为对照组.采用RT-PCR法检测实验组及对照组的外周血中CK-19 mRNA及MUC-1 mRNA的表达情况并评估目的 基因的表达与临床特征的相关性,对结果进行统计学分析,选取出合适的标本进行PT-QPCR实验.RT-QPCR法检测44例早期胃癌患者外周血中CK-19 mRNA的表达量,通过绘制ROC曲线,探索诊断效果好的临界值并计算AUC.结果 ①实验组和对照组中CK-19 mRNA阳性表达率分别为53.13%(51/96)、1.67%(1/60),差异有高度统计学意义(P ＜ 0.01),且胃癌组中CK-19 mRNA的阳性表达与肿瘤分期和和分化程度有关;胃癌组和对照组中MUC-1 mRNA阳性表达率分别为61.46%(59/96)、51.67%(31/60),差异无统计学意义(P ＞ 0.05).②本实验结果统计的临界值为0.2358,灵敏度为95.45%,准确度为77.37%;AUC为0.897.结论 RT-QPCR法检测外周血中的CK-19 mRNA,适合作为诊断早期胃癌微转移的重要参考指标.
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p53、p16、GPC-3、CK-19应用于肝癌及病情发展诊断的临床价值分析
目的：探讨p53、p16、磷脂酰肌醇蛋白多糖-3（GPC-3）和细胞角蛋白-19（CK-19）在肝组织中的表达和临床诊断意义。方法利用免疫组化染色技术检测126份肝癌组织及84份癌周组织标本，比较p53、p16、GPC-3和CK-19在肝癌组和癌旁组病例中表达及分布，并分析其对肝癌及病情发展的临床意义。结果 p53、p16、GPC-3和CK-19在肝癌组织中的表达水平均高于癌旁正常组织，差异均有统计学意义（ P<0.05）。p53的表达水平在高分化肿瘤中多（26.98%），p16的表达水平在中低分化程度的肿瘤中所占比例多（18.25%），GPC-3在低分化肿瘤中所占的比例多（31.75%），而CK-19在高分化肿瘤中比例多（22.22%）。结论联合应用p53、p16、GPC-3和CK-19在肝癌诊断和肿瘤的分化程度的鉴别具有一定的临床诊断意义。
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巢式RT-PCR检测大肠癌患者门静脉血中癌细胞
目的:建立一种能有效测查大肠癌血中癌细胞的分子生物学方法,并初步探讨其对大肠癌发生微转移可能性的评估意义.方法:应用巢式反转录聚合酶链式反应(Nested RT-PCR)对55 例大肠癌患者门静脉血中细胞角化蛋白-19(CK-19)mRNA基因进行检测.结果:30 例(54.4 %)检得门静脉血CK-19阳性,临床Duke's A+B、C、D其中CK-19阳性检出率分别为48.3 %、58.8 %、66.7 %.结论:巢式RT-PCR可作为一项快速、灵敏度高的分子生物学技术,在大肠癌微转移研究中加以应用.门静脉血中CK-19阳性在早期大肠癌既有发生,且阳性检出率随病情分期的进展而呈上升趋势.CK-19mRNA基因可望成为一项对大肠癌预后进行评估,制定术后康复治疗计划时参考的重要分子指标.
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流式细胞分选术和Rho123在分离MHCC97肿瘤干细胞中的应用
目的:肝癌组织中可能存在具有表型和功能特殊的肝癌细胞,分离和鉴定这群细胞是否具有干细胞特征对阐明肝癌发病机制、揭示肝癌复发和转移具有重要的意义.寻求分离MHCC97肿瘤干细胞的有效方法,探讨角蛋白(CK-19)在不同肝癌细胞亚群中的表达差异.方法:实验于2006-11/2007-05在解放军第四军医大学免疫实验室和肝胆外科实验室完成.细胞来源:MHCC97肝癌细胞(人高转移肝癌细胞系)由上海复旦大学中山医院肝癌研究所提供.实验方法:MHCC97细胞常规消化,HBSS洗涤,制备成单细胞悬液,细胞密度为1×109 L-1.每份取1×106个细胞,参考Rho123对线粒体膜电位测定的0.1 mg/L质量浓度,分别做0.1 mg/L和0.05 mg/L两个质量浓度细胞梯度染色,对照组加入维拉帕米(终浓度50 mmol/L),以未加Rho123作为阴性对照.实验评估:采用免疫细胞化学方法观察细胞角蛋白19在0.05 mg/L Rho123细胞及0.1 mg/L Rho123两组中的表达和含量.结果:单纯加入Rho123组有一低荧光拖尾,而维拉帕米拮抗组无此区域,即0.05 mg/L Rho123细胞占总数的2.1%,其余为0.1 mg/L Rho123组细胞.两组细胞内均有细胞角蛋白19阳性表达,阳性反应为显示位于细胞质的棕黄色颗粒,两组比较有统计学差异(P＜0.05)结论:细胞角蛋白19在肝癌细胞亚群中表达有差异,强阳性多数分布在0.05 mg/L Rho123组中,Rho123结合流式细胞分选术可以有效地分选出癌细胞中的肿瘤干细胞.
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异种肝前体细胞移植治疗急性肝损伤大鼠
背景:成体肝前体细胞可在受体肝脏内定植并分化为肝细胞.不过,异种肝前体细胞移植能否促进急性肝损伤的恢复,脾脏微环境能否促进移植物的存活和向肝细胞分化,尚没有研究.目的:评价异种肝前体细胞移植治疗急性肝损伤的作用;监测移植肝前体细胞在大鼠脾脏实质内的定植及向肝细胞的分化.方法:体外培养雄性小鼠来源的肝前体细胞系肝上皮样前体细胞.通过CCl4腹腔注射联合2/3肝切除构建急性肝损伤大鼠模型,进行肝上皮样前体细胞脾脏移植.在肝切除后1,5,14和21d,苏木精-伊红染色观察肝脏病理改变,全自动生化分析仪监测血清转氨酶变化,PCR反应检测脾脏组织Y染色体特异性序列Sry,脾脏CK-19和Alb免疫组织化学追踪移植肝上皮样前体细胞的植入和肝细胞分化.结果与结论:肝上皮样前体细胞可在体外长期培养,保持增殖能力和双向分化潜能.肝上皮样前体细胞脾脏移植后,肝损伤大鼠肝细胞肿胀明显减轻,丙氨酸转氨酶和天门冬氨酸转氨酶下降更明显.移植后1,5,14和21 d,脾脏DNA中均能检测到Sry序列.在整个实验期间CK-19阳性细胞在大鼠脾脏实质内始终存在.Alb阳性细胞在移植后5d在脾脏实质中出现,随后阳性细胞数逐渐增多.实验表明,移植肝前体细胞能在大鼠脾脏实质中植入,并分化为肝细胞,能有效促进CCl4腹腔注射联合2/3肝切除诱导的大鼠急性肝损伤的修复过程.
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取材及检测方法不同对乳腺癌乳头乳晕复合体浸润检出率的影响
目的：观察两种不同的取材及检测方法，对乳腺癌乳头乳晕复合体浸润检出率的影响。方法460例确诊为 I、II 期乳腺癌的病理标本，随机分为两组，每组230例，实验组按乳头乳晕复合体全面取材；对照组从乳头正中矢状面取材。标本连续切片，分别行 HE 染色及 CK－19免疫组化染色，了解乳头乳晕复合体乳腺癌浸润情况。结果实验组 HES 阳性14例（6．09％），对照组 HES 阳性4例（1．74％，χ2＝5．782， P＜0．05）；实验组 IHC 阳性27例（11．74％），对照组 IHC阳性11例（4．78％，χ2＝7．343， P＜0．01）。 IHC 与 HES 相比，在实验组中差别有显著性意义（χ2＝4．526， P＜0．05），但在对照组差别无显著性意义（χ2＝3．377， P＞0．05）。结论乳头乳晕复合体全面取材有更高的 NAC 乳腺癌浸润的检出率；CK－19免疫组化染色比传统 HE 染色更能发现 NAC 的微浸润灶。
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联合检测CEA和CK-19 mRNA鉴别诊断恶性腹水的意义
联合CEA和CK-19水平测定在腹水性质诊断中的特异性和敏感性,评价应用RT-PCR检测CEA mRNA和CK-19 mRNA在良恶性腹水鉴别方面的性能和应用价值.
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巢式RT-PCR对肺癌外周血中微转移灶的检测和半定量测定
目的对肺癌外周血中微转移灶的检测和半定量测定.方法以CK-19为标记,采用巢式RT-PCR和半定量方法对肺癌患者外周血中微转移灶的检测,比较治疗前后外周血中癌细胞数的相对变化.结果 60例肺癌中有29例CK-19阳性, 18例健康人中,仅1例检测出CK-19阳性, 7例肺良性疾病患者有2例为CK-19阳性.实验组CK-19阳性率48%(29/60)与对照组12%(3/25)相比有极显著差异(P<0.01).2例肺癌患者化疗前相对癌细胞数分别为25和16个,经1周期化疗后,相对癌细胞数分别为5和1个.结论以CK-19为标记,采用巢式RT-PCR方法检测肺癌患者外周血中的癌细胞有较高敏感性和特异性,半定量RT-PCR法,能早期反映外周血中癌细胞数的相对变化情况,有助于对临床疗效及早做出评价.
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Ki-67与CK-19在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义
目的 探讨Ki-67与CK-19在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义.方法 随机选取45例甲状腺乳头状癌病例,其癌灶局限于一侧甲状腺,术式为甲状腺癌改良根治术,癌旁组织分别为基本正常甲状腺、结节性甲状腺肿、滤泡状腺瘤,各15例,每例取癌及癌旁组织各一份,分别行连续切片.采用SP法进行免疫组化测定单克隆抗体Ki-67与CK-19在相应癌组织和癌旁组织中的表达阳性率,并测定Ki-67的增值指数.结果 Ki-67、CK-19在甲状腺乳头状癌组织中表达阳性率分别为84.44%(38/45),80.00%(36/45),皆与其在癌旁组织(良性病变)中的28.89%(13/45),20%(9/45)有显著性差异(P＜0.01).二者在甲状腺乳头状癌组织中多数为强阳性表达.而在癌旁组织中则多为阴性或弱阳性表达,无1例强阳性表达.联合测定这两个指标,则可将其阳性率从80%左右提高到93.33%(42/45).甲状腺乳头状癌组织中Ki-67的增值指数明显高于良性病变(P＜0.01),且伴有淋巴结转移者Ki-67的增值指数升高更明显(P=0.013).结论 Ki-67与CK-19的阳性表达对甲状腺乳头状癌的诊断有辅助作用,联合检测这两个指标可提高诊断阳性率,测定Ki-67的增值指数有利于判断肿瘤的转移和预后.
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外周血CK-19评价乳腺癌术后化疗及监控血液微转移
目的 以外周血CK-19为指标评价术后化疗作用及其监控血液微转移意义.方法 以120例乳腺癌术后患者为研究对象,巢式RT-PCR检测外周血CK-19 mRNA,比较化疗前后表达差异及CK-19表达与乳腺癌远处转移关系.结果 化疗前血液微转移阳性率为23.33％,化疗后为3.33％,差异有统计学意义(P＜0.01)；CK-19阳性组肿瘤转移率为76.9％,阴性组肿瘤转移率为8.6％,两组差异有统计学意义(P＜0.01).结论 术后辅助化疗能降低乳腺癌血液微转移；外周血CK-19能监控乳腺癌血液微转移.
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Galectin-3及CK-19在桥本病伴结节样变中的表达及临床意义
目的 探讨Galeetin-3及CK-19在桥本病伴结节样变的表达及临床意义.方法 采用免疫组化法检测60例桥本病伴结节样变(A组)、30例桥本病伴癌变(B组)及30例癌旁正常甲状腺(C组)组织标本中Galecti-3、CK-19的表达.结果 A、B两组Galectin-3、CK-19的阳性表达比较差异无统计学意义(P＞0.05),但其染色形态及强度比较差异有统计学意义(P＜0.05)；在A组中多数表现为灶性染色,而在B组中多表现为强而弥漫性染色.A组和B组分别与C组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 联合检测Galecti n-3、CK-19的表达有助于桥本病伴结节样变癌变倾向的判断和甲状腺癌的早期诊断.
关键词： 桥本病 甲状腺癌 免疫组织化学 Galectin-3 CK-19 -
CK-19、CK-20、CEA mRNA检测在乳腺癌患者外周血微转移的意义
目的:探讨外周血细胞角蛋白(cytokeratin CK)-19、CK-20以及CEA mRNA检测在乳腺癌诊治中的意义.方法:应用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测40例乳腺癌患者外周血CK-19、CK-20、CEA mRNA在术前、术后3 d、术后14 d(化疗前)、术后35 d(化疗后)的表达,以健康志愿者及乳腺良性肿瘤各10例作为对照,统计分析手术及化疗后乳腺癌患者血循环肿瘤标志物的表达状况.同时根据CK-19的表达水平,分析影响乳腺癌外周血微转移的相关临床病理因素.结果:术前.乳腺癌组CK-19、CK-20、CEA mRNA阳性者分别为26例(65%)、20例(50%)、16例(40%),与对照组相比,3组P值均＜0.01;手术后,3组阳性者分别为14例(35%)、10例(25%)、8例(20%),3组阳性率均较术前明显下降(P=0.013,P=0.037,P=0.023);化疗前3组阳性者分别为19例(47.5%)、15例(37.5%)、10例(25%);化疗后则为6例(15%)、2例(5%)、2例(5%),3组化疗后的阳性率亦有显著降低(P=0.003,P=0.001,P=0.025).根据CK-19 mRNA表达水平,Logistic相关性分析,乳腺癌外周血微转移与淋巴结转移(P=0.0087)、TNM分期(P=0.0125)和病理类型(P=0.0451)有相关性.结论:CK-19、CK-20、CEA在乳腺癌患者外周血中有高表达,其表达状况高低与肿瘤负荷相关.乳腺癌外周血微转移相关性因素为淋巴结转移、TNM分期和肿瘤类型.
