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  • 过表达Lin28a/Lin28b对let-7家族活性的影响

    作者:刘雪荣;田文洪;董小岩;吴效哲;吕建新;吴小兵

    研究在HeLaS3细胞中过表达Lin28a/Lin28b对let 7家族miRNA表达水平和活性的影响.首先,构建Lin28a和Lin28b的表达载体pAAV2neo-Lin28a和pAAV2neo-Lin28b,分别转染HeLaS3细胞并筛选获得Lin28a和Lin28b的稳定表达细胞株HeLaS3/pAAV2neo-Lin28a和HeLaS3/pAAV2neo-Lin28b.然后,以pAAV2neo-Gluc-(Fluc)为基本骨架,构建并获得检测let 7家族miRNA活性的8种质粒型载体,并包装为相应的重组腺相关病毒(Recombinant adeno-associated virus,rAAV),作为检测miRNA靶序列介导的转录后抑制活性的传感器,命名为Asensor.在此基础上,以HeLaS3细胞为对照,用Western blot检测HeLaS3/pAAV2neo-Lin28a和HeLaS3/pAAV2neo-Lin28b细胞中Lin28a和Lin28b表达水平,用QRT PCR测定let-7家族各成员表达水平,用Asensor检测let-7家族各成员活性.Western blot结果显示,HeLaS3/pAAV2neo-Lin28a和HeLaS3/pAAV2neo-Lin28b均能有效地表达Lin28a和Lin28b蛋白;QRT-PCR检测结果显示,相比于HeLaS3细胞,HeLaS3/pAAV2neo-Lin28a细胞中let-7家族各成员表达水平都下降(除let-7e外),但不同成员下降幅度存在差异;Asensor检测结果显示,let-7家族所有成员活性水平都下降,但不同成员下降幅度也存在差异,且同一成员活性水平与表达水平及其下降趋势也不一致.相比于HeLaS3细胞,HeLaS3/pAAV2neo-Lin28b细胞中let-7家族成员的表达和活性水平均明显下降,但表达水平的下降幅度比HeLaS3/pAAV2neo Lin28a细胞大,而活性的下降幅度却与之相近.本研究建立了一种检测和比较miRNA靶序列介导的转录后抑制活性的方法,首次研究了过表达Lin28a和Lin28b对细胞中的let 7家族miRNA活性影响,并发现Lin28a和Lin28b对let-7家族miRNA表达水平的影响和对其相应活性的影响不一致性,说明在检测miRNA表达水平的同时检测miRNA活性能更全面揭示miRNA的调节功能,为进一步研究let-7家族的调控机制奠定了基础.

  • LIN28B调控miRNAs维持MCF-7肿瘤干细胞的干性特征

    作者:白丽鹏;陈翀;刘妍;谢俊岭;王威;罗云萍

    目的 研究LIN28B对人乳腺癌细胞(MCF-7)肿瘤干细胞的干性状态维持的作用机制.方法 在MCF-7细胞中瞬时过表达LIN28B,用qPCR和Western blot检测干性相关基因SOX2、NAONG、c-Myc和OCT4的表达;用流式细胞仪检测CD44high/CD24low细胞亚群的比例;利用体外成球培养检测肿瘤干细胞自我更新的能力,通过RNA第二代测序技术检测在LIN28B过表达后MCF-7细胞中miRNAs的表达差异,通过转染差异表达的miRNA,检测其对MCF-7细胞肿瘤干细胞比例和体外成球能力的影响.结果 转染p-CMV6-LIN28B后能明显提高LIN28B的mRNA和蛋白水平(P<0.001);过表达LIN28B后MCF-7细胞中SOX2、NANOG和OCT4在RNA和蛋白水平表达都明显增高(P <0.05);CD44high/CD24low细胞比例由1.71%上升至11.60% (P <0.05);体外成球培养发现成球细胞数量明显增多(P<0.01);通过RNA测序发现有16个miRNAs在LIN28B过表达后差异表达倍数在2倍以上且P<0.05,LIN28B过表达后miR-92b-5p表达显著上调(P<0.01);转染miR-92b-5p mimic后MCF-7细胞的CD44high/CD24low细胞比例由1.14%上升至3.59% (P <0.05),体外成球能力明显增强(P<0.01).结论 LIN28B能维持MCF-7肿瘤干细胞的干性状态,其作用机制可能是通过miRNAs的表达来实现的.

  • miR-128-3p靶向Lin28B增加肝癌细胞对奥沙利铂的敏感性

    作者:夏如冰;王红英;戴丹;董陶明;汪和平;邹思璐;张健

    目的 研究miR-128-3p与肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞对奥沙利铂敏感性的影响,并探讨其作用机制.方法 采用qRT-PCR法检测人正常肝细胞HL-7702、HCC细胞BEL-7402和Hep-3B中miR-128-3p、Lin28B的表达;将对数生长期的HCC细胞BEL-7402、Hep-3B随机分成miR-128-3p mimics组(转染miR-128-3P mimics)、miR-NC组(未转染细胞)、Lin28B-3'UTR WT组(载体psiCHECK2-Lin28B-3'UTR WT和miR-128-3p共转染)、Lin28B-3'UTR MUT组(载体psiCHECK2-Lin28B-3'UTR MUT和miR-NC共转染)和miR-128-3p+Lin28B组(miR-128-3p和Lin28B共转染)、si-Lin28B组(转染si-Lin28B)和si-NC组(转染沉默对照),均以脂质体转染.采用MTT法检测各组细胞的存活率和活力;Western Blot检测各组细胞的蛋白表达.结果 与人正常肝细胞相比,HCC细胞BEL-7402和Hep-3B中miR-128-3p的表达较显著降低(P<0.01),Lin28B的表达较显著升高(P<0.01),且过表达miR-128-3p、沉默Lin28B均可抑制HCC细胞增殖,促进凋亡,增加HCC细胞对奥沙利铂的敏感性.Lin28B为miR-128-3p的靶标,且回补Lin28B可逆转miR-128-3p增加HCC细胞对奥沙利铂敏感性的作用.结论 miR-128-3p可增加HCC细胞对奥沙利铂的敏感性,其作用机制可能与靶向Lin28B有关,提示miR-128-3p可作为抗奥沙利铂耐药性的潜在靶点.

  • HACE1和LIN28B基因单核苷酸多态性与中国汉族儿童神经母细胞瘤易感性的关联研究

    作者:石金;金雅琼;鲁洁;陈峰;初平;韩书婧;郭永丽;王焕民;倪鑫

    目的 探讨HACE1和LIN28B基因多态与中国汉族儿童神经母细胞瘤的相关性.方法 采用病例对照研究,收集246例中国汉族神经母细胞瘤患儿和328例中国汉族健康儿童标本,提取外周血DNA,通过PCR扩增目的基因片段,随后应用Sequenommassarray对目的片段进行测序分型.并采用卡方检验、校验后Logistic回归分析等统计学方法,比较各SNP位点与NB肿瘤发生发展相关性.结果 HACE1基因rs45521835位点携带AA基因型的患儿以及rs6927608位点携带CC基因型的患儿其NB肿瘤始发于肾上腺较多,OR值分别为5.20(95% CI:1.06 ~ 25.56,P =0.047)和5.00(95%CI:1.02 ~24.55,P=0.052).LIN28B基因SNP位点rs7759938(CC基因型)、rs314280(TT基因型)、rs314276(AA基因型)和rs314263(CC基因型)主要与GNB密切相关,OR值分别2.94(95%CI:1.06 ~ 8.20,P=0.047)、2.94 (95% CI:1.06 ~8.20,P=0.047)、2.95(95% CI:1.06 ~8.24,P=0.047)和3.02(95%CI:1.08 ~8.41,P=0.042).结论 在中国汉族儿童中,HACE1基因(rs45521835,rs6927608)和LIN28B基因(rs7759938,rs314280,rs314276,rs314263) SNPs与原发于肾上腺的神经母细胞瘤或者节细胞性神经母细胞瘤(GNB)密切相关.

  • LIN28B 在结肠癌中的表达及其临床意义

    作者:庞明辉;王康;伍刚;张伟;董丹丹;帅平;梁耀泽;胡阳;李平;李国新

    目的 探讨结肠癌组织中LIN28B的表达及其临床意义.方法 选择美国Biomax的结肠癌及正常组织组合微阵列芯片及2003年1月至2004年12月南方医科大学南方医院的149例手术切除结肠癌石蜡标本作为研究对象.用免疫组化法检测组织芯片和石蜡切片中LIN28B蛋白表达并评分.采用χ2检验比较不同LIN28B表达水平和结肠癌病理性特点包括组织分级、恶性肿瘤(tumor,node,metastasis,TNM)分期及淋巴/远处转移之间的关系.结果 LIN28B在结肠癌组织中相比于正常结肠组织高表达,其高表达与肿瘤的低分化、TNM Ⅲ-Ⅳ期、结肠癌局部淋巴结转移及远处转移有关.多因素Logistic回归分析显示TNM分期是LIN28B高表达的独立危险因素.结论 LIN28B表达与结肠癌病理特征密切相关,有望作为判断结肠癌患者预后的指标.

  • Lin28B在三阴乳腺癌的表达和作用机制初探

    作者:施华球;谢瑞莲

    目的 探讨Lin28B在三阴乳腺癌的表达和作用机制.方法 选择2008年1月1日~2013年12月31日本院收治的三阴乳腺癌(TNBC)患者30例,按照免疫组织化学法检测癌组织及癌旁组织Lin28B蛋白的表达情况.分析Lin28B表达与TNBC病理特征的相关性.结果 TNBC患者癌组织与癌旁组织中Lin28B、E-cadherin、N-cadherin、β-cadherin蛋白表达的阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05).Lin28B蛋白与TNBC患者的肿瘤分化程度、淋巴结转移、远处转移、Ki67表达有相关性,差异有统计学意义(P<0.05),与患者的年龄、月经状态、肿瘤分期无相关(P>0.05).结论 Lin28B蛋白表达情况可能与TNBC的发生、恶化有关,可能会成为TNBC患者治疗时的新靶点.

  • 三阴性乳腺癌中Lin28B的表达和临床意义

    作者:施华球;谢瑞莲

    目的 探讨三阴性乳腺癌中Lin28B的表达情况及其临床意义.方法 选取2008年1月~2013年12月我院收治的三阴性乳腺癌96例患者为观察对象,采用免疫组织化学方法检测癌组织和癌旁组织中Lin28B蛋白的表达,分析Lin28B蛋白表达与三阴性乳腺癌患者病理特征的相关性.结果 癌组织Lin28B的阳性率为70.8%,在癌旁组织Lin28B的阳性率为29.2%,两者的阳性率差异有统计学意义(P<0.05);Lin28B蛋白表达与三阴性乳腺癌患者的年龄、肿瘤分期和月经状态无关(P>0.05),但与患者的肿瘤分化程度、远处转移、淋巴结转移、Ki67表达成正相关(P<0.05).结论 Lin28B的表达与三阴性乳腺癌的发生、发展有关,可能影响病情的发展和患者的预后.

  • 青春发育提前的相关基因研究进展

    作者:蔡春艳

    人类青春期的启动是由再度出现的下丘脑-垂体-性腺轴促性腺激素释放激素的释放幅度和频率明显增加所触发.一系列研究发现许多基因调控青春期启动,包括KISS1和GPR54基因、雌激素受体基因、能量平衡相关基因、LIN28B基因以及MKRN3基因等,这些基因的突变和单核苷酸多态性与青春发育提前相关.该文就这些基因的遗传改变与青春发育提前的关系作一综述.

  • 性早熟雌性Sprague-Dawle大鼠下丘脑Lin28a和Lin28b表达异常

    作者:杨芳琳;于宝生;单晔;王安茹;高兰英;彭娅

    目的:研究正常雌性Sprague-Dawle(SD)大鼠不同性发育阶段及雌激素诱导性早熟后下丘脑Lin28a和Lin28b的表达及意义.方法:1)于雌性SD大鼠出生后15日(postnatal day 15,PND15)、PND23、PND35荧光实时定量PCR分析下丘脑Lin28a和Lin28b mRNA的表达,同时以ELISA法检测血清黄体生成素(LH)和雌二醇(E2)水平变化;2)苯甲酸雌二醇(estradiol benzoate,EB)诱导的性早熟大鼠随机分为EB-1组和EB-2组,分别于阴道开口(vaginal opening,VO)时及PND56两个时间点处死,相应的发育阶段的大鼠用无菌芝麻油(sesame oil,OIL)作为对照分为OIL-1和OIL-2组;荧光实时定量PCR分析下丘脑Lin28a和Lin28b mRNA的表达,ELISA法检测LH和E2水平变化,并观察性早熟对大鼠阴道开口、体重、预臀径、胫骨长等生长发育指标的影响.结果:1)PND15、PND23和PND35组下丘脑Lin28a和Lin28b mRNA表达、血清LH和E2水平无统计学差异(P>0.05);2)EB-1组下丘脑Lin28a和Lin28b mRNA表达高于OIL-1组(P<0.05),血清LH和E2水平与OIL-1组相比无统计学差异(P>0.05);EB-2组下丘脑Lin28a和Lin28b mRNA表达高于OIL-2组(P<0.05),血清LH和E2水平低于OIL-2组(P<0.05);3)与OIL-2组比较,EB-2组VO时间明显提前(P<0.01),体重、顶臀长、胫骨长差异无统计学差异(P>0.05).结论:外源性雌激素引起的性早熟可能导致下丘脑Lin28a和Lin28b表达异常.

  • 靶向Lin28B基因沉默对胰腺癌细胞增殖的影响

    作者:张尤历;陈晖;翁星月;蔡菁;殷文皓;周冰洁;卞石惠;龚爱华;徐岷

    目的 探讨靶向Lin28B基因沉默对细胞增殖的影响.方法 设计Lin28B及GFP短发夹核糖核酸(shRNA)序列,装入Tet-on-pLKO-puro质粒,进行慢病毒包装,感染胰腺癌细胞Panc1,嘌呤霉素筛选并培养稳定干扰细胞株.实验组为Panc1-Tet-on-pLKO-sh-Lin28B;对照组为Panc1-Tet-on-pLKO-sh-GFP.筛选强力霉素佳诱导浓度并诱导干扰序列表达,Western blot检测干扰效率,细胞增殖与活性实验CCK8检测沉默Lin28B对Panc1细胞增殖的影响.结果 构建的Tet-on-pLKO-sh-Lin28B慢病毒可显著抑制Panc1细胞内Lin28B的表达.与对照组Panc1-Tet-on-pLKO-sh-GFP相比,实验组Panc1-Tet-on-pLKO-sh-Lin28B的增殖速度减缓(P<0.05).结论 成功筛选出沉默Lin28B的稳定干扰细胞株,沉默Lin28B对胰腺癌细胞的增殖有抑制作用,为进一步研究Lin28B基因的功能或基因治疗提供有用技术.

  • Lin28B/let-7d 环路调控成纤维细胞功能参与肺纤维化发生

    作者:梁海海;李天宇;解岩;单宏丽

    目的:研究 Lin28B/let-7d 环路诱导肺成纤维细胞增殖、分化的作用及分子机制,为临床肺纤维化的治疗提供新的策略。方法气管注射博来霉素(bleomycin,BLM)造成小鼠肺纤维化模型;血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)及转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1诱导人胚肺成纤维细胞(MRC-5)纤维性变;qRT-PCR 检测组织及细胞中 Lin28B、collagen 1α1、collagen 3α1变化;Western blot 检测 Lin28B 蛋白表达;MTT、Edu 染色和免疫荧光实验分别检测细胞活力、增殖及成纤维细胞向肌成纤维细胞的转变。结果Lin28B在肺纤维化小鼠和细胞中表达明显升高。Lin28B 可诱导MRC-5细胞胶原合成增加,而过表达 let-7d 则减轻 Lin28B的这一作用。进一步研究发现,Lin28B 可诱导成纤维细胞增殖,并促进成纤维细胞向肌成纤维细胞转变,这一作用是通过抑制 let-7d 来实现的。结论Lin-28B 通过抑制 let-7d进而促进成纤维细胞增殖、分化,终增加成纤维细胞胶原合成,诱发肺纤维化的发生,Lin28B 可能作为肺纤维化的治疗新靶点。

  • LIN28B与女性生殖系统恶性肿瘤相关性的研究进展

    作者:王洁

    LIN28B是一种潜在的致癌基因,其本质为一种高度保守的RNA结合蛋白.LIN28B与女性生殖系统恶性肿瘤,如宫颈癌、卵巢癌、子宫内膜癌的发生、发展密切相关.因而LIN28B有望成为女性生殖系统恶性肿瘤一个新的诊断和治疗靶标.本文现将LIN28B与女性生殖系统恶性肿瘤的相关性做一综述.

  • 宫颈上皮病变组织中LIN28B表达与高危型HPV感染的关系及临床意义

    作者:曹学全;王四玲;卢洪胜;孙刚;章辉;杨朝晖;赵武干

    目的 探讨LIN28B在宫颈上皮病变组织中表达与高危型人乳头状瘤病毒(HR-HPV)感染的关系及临床意义.方法 应用免疫组化方法检测102例宫颈癌、83例宫颈上皮内瘤变(CIN)及33例宫颈炎组织中LIN28B表达情况,同时于术前采用第二代基因杂交捕获法(HC-Ⅱ)检测患者HR-HPV感染情况.对随访3年以上宫颈癌患者进行生存分析.结果 LIN28B在宫颈癌中高表达率均高于CIN和宫颈炎(P<0.05).LIN28B表达与组织学分级、FIGO分期、浸润深度及淋巴结是否转移有关(P<0.05).HR-HPV在宫颈炎、CIN和宫颈癌中感染率依次升高(P<0.05),但与临床病理参数均无关(P>0.05).LIN28B表达与HR-HPV感染呈正相关(P<0.05).LIN28B表达与预后有关(P<0.05),而HR-HPV感染与预后无关(P>0.05).结论 LIN28B表达和HR-HPV感染可反映宫颈上皮病变的程度,联合检测二者有助于宫颈癌筛查及临床病理因素的判断,LIN28B表达与宫颈癌患者的预后密切相关.

  • 胃癌组织中LIN28B和c-myc的表达及其临床意义

    作者:李良庆;宋俊;潘敦

    目的 检测胃癌组织中LIN28B和c-myc的表达,分析其临床意义,并初步探讨其可能的作用机制.方法 应用免疫组化SP法检测90例胃癌和30例癌旁正常胃黏膜石蜡组织中LIN28B和c-myc蛋白的表达水平;应用实时荧光定量PCR方法和Western blotting法检测23例新鲜胃癌组织及相应癌旁正常组织中LIN28B和c-myc mRNA及蛋白的表达量.结果 胃癌组织中LIN28B mRNA(△Ct:6.33±2.54)及蛋白(0.601±0.22)的表达水平显著高于癌旁正常组织(△Ct:1.05±0.64,0.124±0.088,P<0.05);LIN28B在胃癌组织中表达阳性率(76.7%,69/90)较癌旁正常胃黏膜石蜡组织中阳性率(66.7%,20/30)高,差异有统计学意义(H=4.195,P<0.05);c-myc在胃癌组织中表达阳性率(81.1%,73/90)较正常胃黏膜石蜡组织中阳性率(60.0%,18/30)高,差异有统计学意义(H=3.887,P<0.05);LIN28B蛋白表达与胃癌分化程度、淋巴结转移、浸润深度、临床分期有相关性(P<0.05),与年龄、性别、肿瘤大小、部位无相关性(P>0.05);LIN28B与c-myc在胃癌组织中的表达有显著相关性(r=0.252,P<0.05).结论 LIN28B和c-myc基因的表达及相互作用与胃癌的发生、发展及生物学行为密切相关,对判断预后有参考作用,其机制可能与胃癌干细胞及LIN28 B/let-7/c-myc信号环路有关.

  • Lin28B的高表达与膀胱癌的恶性程度及预后相关

    作者:冯宇鹏;朱俊峰;黄薇;沈艳;叶向东;杨毅

    目的 探讨膀胱癌组织中Lin28B的异常表达与膀胱癌病理学分级、临床分期及预后的关系.方法 应用免疫组织化学方法检测Lin28B在75例膀胱癌组织及10例癌旁组织中的表达;采用卡方检验或精确概率法分析Lin28B在膀胱癌及癌旁组织中的差异,以及膀胱癌不同病理学分级、不同临床分期中Lin28B的阳性率的差异.并采用log-rank检验及Cox回归分析Lin28B的表达与膀胱癌患者预后的关系.结果 Lin28B在64% (48/75)膀胱癌组织中表达阳性,在癌旁组织中表达为阴性(0),组间差异具有统计学意义(P <0.001).病理学分级恶性程度高的标本,Lin28B的阳性率高,组间差异具有统计学意义(P =0.007).临床分期进展程度高的标本中,Lin28B的阳性率高,组间差异具有统计学意义(P =0.030).Log-rank检验及Cox回归分析示Lin28B表达阳性是预后不良的独立影响因素.结论 Lin28B在膀胱癌中高表达,且与膀胱癌的病理学分级、临床分期及预后密切相关.

  • LIN28B的研究进展

    作者:屈婷婷

    近些年,LIN28B的相关研究工作已引起研究人员的广泛关注,并开始对LIN28B展开多方面、多层次的深入研究.文章从LIN28B的基本性质、对let-7调控机制、与癌症发生的相关机制、对发育的调控及其他相关功能等研究进行较为全面的综述.

  • 沉默Lin28b基因表达促进人结肠癌细胞奥沙利铂化疗敏感性

    作者:庞明辉;王康;伍刚;梁耀泽;胡阳;何飞;侯能易;李平;李国新

    目的 探讨人结肠癌细胞中Lin28b基因表达及其与奥沙利铂化疗敏感性之间的关系.方法 构建干扰Lin28b的shRNA质粒(sh-Lin28b),并转染至结肠癌细胞(Cac02、SW480和HCT116细胞);逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法分别检测结肠癌细胞中Lin28b在mRNA和蛋白水平的表达;用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测sh-Lin28b和奥沙利铂化疗协同作用,Transwell实验检测处理后的结肠癌细胞迁移能力.结果 RT-PCR和Western blot结果证实Cac02、HCT116及SW480结肠癌细胞中均有Lin28b基因表达,其中在SW480细胞中的蛋白表达量比在HCT116中高1.83倍.SW480和HCT116细胞中Lin28b的mRNA表达在50 nmol/L的sh-Lin28b作用下分别被下调36.4%和90.2%,在100 nmol/L的sh-Lin28b的条件下分别被下调61.8%和89.5%.CCK-8结果显示奥沙利铂处理48 h后,HCT116细胞的IC50值为(6.09±1.42) mg/L,SW480细胞升高34.3%,至(8.18 ±3.64) mg/L.sh-Lin28b联合奥沙利铂处理组比较于对照转染组(NC)抑制SW480和HCTll6细胞生存率分别为(55.10±0.78)%和(50.30±0.69)%.Transwell 实验结果显示SW480细胞的迁移能力在sh-Lin28b的作用下降低至(48.60±0.92)%.结论 沉默表达于结肠癌细胞的Lin28b,可显著抑制结肠癌细胞的迁移能力,并促进奥沙利铂的化疗敏感性.

  • MiRNA Let-7和Lin28在散发性听神经瘤中的表达及意义

    作者:黄孝文;许胜;褚汉启;王少立;崔永华;张平

    目的 研究微小RNA Let-7与Lin28在散发性听神经瘤中的表达及二者之间的关系,探讨其对肿瘤进展可能的影响.方法 收集18例经过术后病理证实的散发性听神经瘤组织作为实验组,7例正常胃迷走神经为对照组.采用RT-PCR、免疫组织化学染色方法,检测Let-7d和Lin28A/B mRNA的表达,以及Lin28蛋白的表达.结果 RT-PCR检测显示,Let-7d mRNA表达量在听神经瘤组织显著高于对照神经组织(P<0.001),Lin28A/B mRNA表达量在听神经瘤组织显著低于对照组织(PLin28A=0.004,PLin28B=0.001).在听神经瘤组织中,Let-7d与Lin28A/B mRNA的表达存在负相关关系(r=-0.671,P=0.002;r=-0.662,P=0.003).免疫组织化学检测显示在听神经瘤与正常神经组织中均未发现Lin28蛋白阳性染色.结论 在听神经瘤的生长及恶性转化抑制机制中,以微小RNA为主导的Let-7d/Lin28双向负反馈调节可能起重要作用.

  • 微小RNA Let-7/Lin28调节环与鼻咽癌血管新生的关系研究

    作者:李鹏

    目的 探讨微小RNA Let-7/Lin28调节环与鼻咽癌促血管生成因子的关系,并研究这一关系的作用机制.方法 选取2012年4月-2014年在湖北省襄阳市中心医院耳鼻喉科就诊的鼻咽癌患者54例.另选取同期40例慢性鼻炎患者和32例健康者作为对照组.采用实时荧光定量PCR (RT-PCR)检测组织中Lin28A、Lin28B及Let-7a miRNA相对表达量,ELISA检测血清中血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维生长因子(bFGF)及内皮抑素(ES)水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测H-Ras/PTEN/PI3K/Akt通路蛋白表达情况,分析miRNA Let-7a/Lin28调节环与血管新生因子的关系.结果 RT-PCR检测发现鼻咽癌患者Lin28AmiRNA和Lin28B miRNA相对表达量均高于慢性鼻炎组和健康对照组(P<0 05),而Let-7a miRNA的相对表达量低于上述两组(P<0.05);ELISA检测结果发现鼻咽癌患者组VEGF、bGFG、ES表达量均高于慢性鼻炎组和健康对照组(P<0.05);Western blot检测发现鼻咽癌患者组病理组织中H Ras、p-PI3K及p-Akt表达量高于慢性鼻炎患者组和健康对照组(P<0 05),而p-PTEN表达量低于上述两组(P<0.05);相关性分析发现,Lin28A、Lin28B miRNA与VEGF、bFGF、H-Ras、p-PI3K及p-Akt呈正相关(P<0.05),Let-7a miRNA与VEGF、bFGF、H-Ras、p-PI3K及p-Akt呈负相关(P<0.05).结论 miRNA Lin28/Let-7调节环与血管新生有定的关联性,而这一关联性可能与激活Ras/PI3K/PTEN/Akt通路有关.

  • 高危型HPV感染与食管鳞癌组织中Lin28b表达的相关性研究

    作者:许建功;王武军

    目的:研究人乳头瘤状病毒(HPV)在新乡地区食管鳞癌组织中的感染情况和Lin28b表达的关系.方法:采用基因芯片技术检测114例食管鳞癌组织及癌旁食管正常组织中HPV亚型感染情况,免疫组化SP法检测Lin28b的表达.结果:114例食管鳞癌组织及癌旁食管正常组织中HPV感染阳性率分别为63.2%、6.0%,Lin28b的检出率分别为66.7%、2.0%,差异均有统计学意义(P<0.05);食管鳞癌存在HPV16、18和52三种亚型感染.HPV感染和Lin28b蛋白表达与食管鳞癌分化程度正相关;Lin28b蛋白表达与食管鳞癌浸润深度、淋巴结转移有关.结论:HPV感染食管鳞癌组织与Lin28b蛋白表达存在一定的相关性,可能与食管鳞癌发生、发展有关.

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