基于MAPK通路研究五味甘露药浴散加减方治疗类风湿关节炎的药效机制

研究发现五味甘露药浴散加减方药浴有良好的抗炎活性,可以明显改善关节炎症程度,对类风湿性关节炎具有一定的治疗作用,推测其可能与调控滑膜细胞MAPK通路有关.该实验通过建立佐剂关节炎大鼠(AA)模型,进一步探讨其调控滑膜细胞MAPK通路的机制.采用酶联免疫法测定给药2周AA大鼠血清中TNF-α的水平,免疫组化法测定给药4周踝关节滑膜组织蛋白激酶ERK1/2,p38的含量,采用荧光定量PCR (RT-PCR)法检测膝关节滑膜组织中JNK1,ERK1,p38的mRNA表达.结果显示,与模型组比较,给药2周,可明显降低AA大鼠血清中TNF-α的水平(P＜0.05);给药4周,降低踝关节滑膜组织中p38,ERK1/2的蛋白表达(P＜0.05或P＜0.01),降低膝关节滑膜组织JNK1,p38,ERK1的基因表达(P＜0.05或P＜0.01).综上可见,五味甘露药浴散加减方有效治疗类风湿关节炎的作用机制可能与其降低血清中TNF-α的水平和滑膜组织中p38,ERK1/2的表达以及JNK1,p38,ERK1的基因表达,调控MAPK通路有关.

Objective To explore the effects of resveratrol-induced apoptosis and autophagy in T-cell acute lymphoblastic leukemia (T-ALL) cells and potential molecular mechanisms.
Methods The anti-proliferation effect of resveratrol-induced, apoptosis and autophagy on T-ALL cells were detected by using MTT test, immunofluorescence, electronic microscope, and flow cytometry, respectively. Western blotting was performed for detecting changes of apoptosis-associated proteins, cell cycle regulatory proteins and state of activation of Akt, mTOR, p70S6K, 4E-BP1, and p38-MAPK.
Results Resveratrol inhibited the proliferation and induced apoptosis and autophagy in T-ALL cells in a dose and time-dependent manner. It also induced cell cycle arrest at G0/G1 phase via up regulating cyclin-dependent kinase (CDK) inhibitors p21 and p27 and down regulating cyclin A and cyclin D1. Western blotting revealed that resveratrol significantly decreased the expression of antiapoptotic proteins (Mcl-1 and Bcl-2) and increased the expression of proapoptotic proteins (Bax, Bim, and Bad), and induced cleaved-caspase-3 in a time-dependent manner. Significant increase in ratio of LC3-II/LC3-I and Beclin 1 was also detected. Furthermore, resveratrol induced significant dephosphorylation of Akt, mTOR, p70S6K, and 4E-BP1, but enhanced specific phosphorylation of p38-MAPK which could be blocked by SB203580. When autophagy was suppressed by 3-MA, apoptosis in T-ALL cells induced by resveratrol was enhanced.
Conclusion Our findings have suggested that resveratrol induces cell cycle arrest, apoptosis, and autophagy in T-ALL cells through inhibiting Akt/mTOR/p70S6K/4E-BP1 and activating p38-MAPK signaling pathways. Autophagy might play a role as a self-defense mechanism in T-ALL cells treated by resveratrol. Therefore, the reasonable inhibition of autophagy in T-ALL cells may serve as a promising strategy for resveratrol induced apoptosis and can be used as adjuvant chemotherapy for T-ALL.

火炮打击兔应激防护模型卵巢病理及P38表达的形态学研究

目的 探讨实弹演习火炮打击后,不同位置掩体保护下兔卵巢损伤病理变化及丝裂原活化蛋白激酶p38(p38-MAPK)的表达.方法 闽南山地团进攻演习,设置远离演习场的空白对照实验兔组,火炮打击区域设置炮火覆盖山体反角近距隐蔽组和迎面角近距隐蔽组.火炮打击应激损伤后6 h,各组存活雌兔取卵巢,HE染色观察其病理损伤形态学,观察改进型SP法免疫组化染色检测卵巢p38-MAPK表达.结果 与空白对照组比较,反角隐蔽组和迎面角隐蔽组p38-MAPK表达强阳性,迎面角组卵巢结构完整性破坏,基质及卵泡出血,p38-MARK免疫反应强度亦高于反角隐蔽组.结论 火炮打击后实验兔应激损伤反应强烈,反角掩体保护减轻卵巢损伤,p38-MAPK参与卵巢损伤病理过程.

白藜芦醇通过P38 MAPK通路参与对小肠缺血再灌注继发肺损伤的保护作用

目的:探讨白藜芦醇是否通过p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路参与对肠缺血再灌注继发肺损伤的保护.方法:健康成年,SD大鼠,36只,随机分为正常对照组(C组,n=12)、缺血再灌注组(IR组,n=12),缺血再灌注+白藜芦醇预处理组(IRR组,n=12).通过肠系膜动脉夹闭缺血45min后再开放再灌注4h复制大鼠小肠缺血再灌注继发肺损伤模型.计算肺湿干重比值(W/D),HE染色观察肺组织病理学变化,ELASIA法检测肺组织白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达,检测肺组织中磷酸化p38 MAPK (p-p38 MAPK)表达量.结果:病理切片可见IR组肺湿干比增加,组织染色可见肺泡上皮细胞肿胀,肺泡壁增宽,肺间质和肺泡腔水肿明显,肺泡内炎症细胞、红细胞和蛋白渗出明显增多.炎性因子(TNF-α,IL-6)表达增加,p38MAPK表达增加.用白藜芦醇预处理后,W/D比IR组减少,肺损伤程度较IR组减轻,p38表达较IR组减少.结论:白藜芦醇可能通过p38MAPK通路参与保护肠缺血再灌注造成的肺损伤.

血管内皮抑素联合照射对肺癌H-520细胞周期及信号传导通路的影响

目的 探讨血管内皮抑素对肺鳞癌细胞系H-520细胞放射增敏作用的机制.方法 重组人血管内皮抑素联合60 Co γ线作用于H-520细胞后,集落形成实验检测重组人血管内皮抑素对H-520细胞的放射增敏作用;流式细胞术检测细胞周期变化及磷酸化p38-MAPK蛋白的表达水平;RT-PCR检测周期相关基因cyclin D1、cdk2、cdk4及凋亡相关基因survivin的表达情况;Western-blotting检测磷酸化Akt蛋白表达情况.结果 血管内皮抑素可以增加细胞对60 coγ射线的放射敏感性,联合组D0、Dq、N、D10、SF2较照射组低,放射增敏比为1.45;200μg/ml血管内皮抑素处理后H-520细胞发生G0/G1期阻滞,周期相关基因cyclin D1、cdk2、cdk4及凋亡相关基因survivin表达下降;血管内皮抑素联合照射后磷酸化p38-MAPK蛋白及磷酸化Akt蛋白表达下降.结论 血管内皮抑素可能通过抑制H-520细胞增殖,诱导细胞发生G0/G1期阻滞,促进细胞凋亡及阻断p38-MAPK 和P13K/Akt信号通路传导,发挥放射增敏作用.

黄芪甲苷抑制高糖诱导的足细胞凋亡作用及机制

目的:探讨黄芪甲苷(AS-IV)对高糖诱导的足细胞凋亡的作用及其机制.方法:条件性永生的小鼠足细胞分为正常糖组(NG)、高糖组(HG)、甘露醇高渗对照组(MA)及HG+不同剂量(10、50、100 μg/mL)黄芪甲苷干预组(AS-Ⅳ).流式细胞仪及Hoechst染色检测细胞凋亡;荧光探针CM-H2-DCF-DA标记细胞检测活性氧(ROS)水平;Western印迹检测足细胞p38-MAPK活性.结果:高糖促进足细胞ROS的产生并引起足细胞凋亡,AS-Ⅳ明显抑制高糖诱导的ROS的产生及足细胞凋亡,且呈剂量依赖关系.此外,高糖激活p38-MAPK信号通路,AS-Ⅳ呈剂量依赖性抑制p38-MAPK活性.结论:AS-Ⅳ能减少高糖所致的足细胞凋亡,其机制可能与AS-Ⅳ抗氧化及抑制p38-MAPK活化密切相关.

丝裂原活化蛋白激酶信号通路的研究进展

丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)是细胞内一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,参与细胞的多种生物学和生理学行为过程,包括基因的转录、细胞的分化和增殖、细胞周期调控、细胞凋亡及炎性反应等.三个主要的MAPK信号通路已知,细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)信号通路、c-Jun氨基末端蛋白激酶/应激活化蛋白激酶(JNK/SAPK)信号通路和p38-MAPK信号通路.本文的重点是简要概述MAPK信号转导通路分布在某些病理或生理过程中的生物学作用特性.

野黄芩苷对血管紧张素Ⅱ诱导小鼠心肌纤维化的影响

目的:探究野黄芩苷对血管紧张素Ⅱ诱导小鼠心肌纤维化的影响.方法:40只6周雄性C57BL/6小鼠随机分为4组:正常对照组,血管紧张素Ⅱ模型组[2.5 mg/(kg·d)],血管紧张素Ⅱ[2.5 mg/(kg·d)]+野黄芩苷(40 mg/kg)组和野黄芩苷组(40 mg/kg).血管紧张素Ⅱ皮下植入胶囊渗透压泵持续滴注给药,野黄芩苷每天灌胃给药,4周之后处死小鼠.心肌切片做Masson's trichrome染色,显微镜下观察胶原沉积变化;羟脯氨酸含量测定试剂盒检测心肌组织中羟脯氨酸的含量;RT-qRCR检测心肌组织中纤维化相关基因mRNA表达;Westem blot检测心肌组织中p-ERK1//2和p-p38 MAPK蛋白表达.结果:Masson's trichrome染色结果显示,野黄芩苷可显著减少心脏组织中胶原的沉积;与血管紧张素Ⅱ模型组相比,血管紧张素Ⅱ+野黄芩苷组小鼠心肌组织中羟脯氨酸含量显著下降(P＜0.01),同时RT-qRCR结果显示纤维化相关基因Collagen Ⅰ、CollagenⅢ和α-SMA mRNA表达较模型组显著下调(P＜0.05);血管紧张素Ⅱ组小鼠心肌组织中ERK1/2和p38-MAPK蛋白磷酸化水平明显上升,给予野黄芩苷干预后下降,单独给予野黄芩苷小鼠ERK1/2和p38-MAPK蛋白磷酸化水平较正常组无明显差别.结论:野黄芩苷可能是通过抑制ERK1/2和p38-MAPK蛋白的磷酸化来抑制血管紧张素Ⅱ诱导小鼠心肌纤维化的发展.

大肠癌中P38-MAPK和CDX2表达变化的研究

目的 探讨大肠癌中P38-MAPK对CDX2表达的影响和CDX2的表达变化与患者预后之间的关系.方法 收集大肠癌患者病理组织共74例,采用qRT-PCR、Western印迹、免疫组化等技术检测P38-MAPK、CDX2在肿瘤组织、癌旁正常组织中的表达.收集患者的临床资料并进行术后随访,研究患者组织样本中P38-MAPK、CDX2表达的关系及CDX2的表达变化与患者术后生存之间的关系.结果 大肠癌患者肿瘤组织中P38-MAPK、CDX2均为低表达,两者表达变化呈正相关(r=0.4656,P＜0.05).CDX2的表达变化与患者预后显著相关且(r=0.5148,P＜0.05) CDX2高表达组患者具有更长的术后生存期.结论 大肠癌中P38-MAPK低表达导致了CDX2的表达降低.CDX2的表达变化可以用来评估患者的术后生存并可能成为大肠癌治疗的新靶点.

大肠癌组织中P38-MAPK通路对CDX2表达影响的研究

目的:探讨大肠癌发生中尾型同源盒转录因子-2(CDX2)的表达特点及其P38-MAPK通路对CDX2表达的影响.方法:收集我院201 1年1月-2013年1月大肠癌患者病理组织共138例,采用荧光定量PCR、Western blot、免疫组织化学等技术检测CDX2在正常大肠组织、癌旁组织、大肠癌组织中的表达;应用Western blot检测CDX2的上游分子P38-MAPK表达.结果:CDX2在大肠癌组织、癌旁组织、正常组织中RNA的相对表达量分别为100.0±6.6、60.8±5.7、40.4±5.4,各组织中CDX2相对表达量依次为1 00.0±9.8、75.3±6.8、35.8±5.4.p38-MAPK蛋白在大肠癌组织、癌旁组织、正常组织的相对表达量分别为100.0±11.2、58.9±8.7、38.1±6.7.结论:大肠上皮组织中p38-MAPK表达减少,导致CDX2表达减少,是大肠癌发生的重要因素之一.

游离胆固醇经P38-MAPK信号途径激活未折叠蛋白反应诱导巨噬细胞凋亡

目的:探讨p38-MAPK信号通路对未折叠蛋白反应的影响及在游离胆固醇(FC)诱导巨噬细胞凋亡中的作用. 方法:收集小鼠腹腔巨噬细胞进行体外培养,使用100 μg/mL乙酰低密度脂蛋白及 10 μg/mL胆固醇乙酰转移酶抑制剂-58035促进FC聚集,以p38特异性抑制剂SB203580进行干预,Annexin-V和PI 双染后流式细胞仪检测细胞凋亡,Western-bolt检测磷酸化p38和CHOP表达. 结果:普通培养基孵育的巨噬细胞无磷酸化p38和CHOP表达,只有少量细胞凋亡;而在促进FC聚集条件下孵育的巨噬细胞磷酸化p38和CHOP表达明显,8 h后凋亡细胞为(21.8±0.6)%;使用SB203580干预后无磷酸化p38表达,CHOP表达减少,凋亡细胞为(6.9±0.3)%. 结论:FC聚集是诱导巨噬细胞凋亡的重要原因,p38通过激活未折叠反应参与这一过程,而SB203580通过抑制p38活性对FC诱导的巨噬细胞凋亡具有保护作用.

肾衰康灌肠液在急性肾缺血再灌注损伤中的作用及对p38-MAPK信号通路的影响

目的:研究肾衰康灌肠液在肾缺血再灌注损伤中的作用及其对p38-MAPK信号通路的影响.方法:采用新西兰大白兔灌肠制备肾衰康灌肠液含药血清,体外培养人肾小管上皮细胞株(HK-2细胞),并将其随机分为缺血再灌注组、PBS组、低剂量干预组、中剂量干预组、高剂量干预组,共5组.PBS组常规培养,对缺血再灌注组和低、中、高剂量干预组行急性缺血再灌注损伤造模.缺血再灌注开始后立即给予低剂量干预组(25％高剂量血清+75％空白血清)、中剂量干预组(50％高剂量血清+50％空白血清)、高剂量干预组(100％高剂量血清)含药血清处理.与此同时,缺血再灌注组和PBS组分别给予等量PBS灌肠后所得的兔血清,PBS组不予以细胞造模处理.操作0、4、8、12、24和48h后,分别采用RT-PCR法检测细胞中P38MAPK基因表达情况,采用Annexin V-FITC/PI联合流式细胞术分析细胞凋亡情况.结果:4h时,低剂量组细胞凋亡率为(13.5±0.2)％,中剂量组为(7.8±2.1)％,高剂量组为(13.3±0.1)％;12h时,低剂量组细胞凋亡率为(14.8±0.3％),中剂量组为(10.3±0.6)％,高剂量组为(12.9±0.9％),均显著低于对照组[4h,(47.8±3.5)％;12h,(45.6±2.2)％]和PBS组[4h,(45.7±1.2)％;12h,(41.6±0.7)％].含药血清处理模型细胞4h后,与PBS组比较,低、中、高剂量组中MAPK基因表达均显著降低(P＜0.05),且从8～12h,MAPK基因表达升高,逐渐恢复至正常水平.结论:肾衰康灌肠液可抑制肾缺血再灌注模型中HK-2细胞凋亡,可能是通过抑制p38-MAPK基因表达实现的.

脂联素依赖p38-MAPK途径抑制衣霉素诱导的内质网应激致心肌细胞凋亡

目的 通过原代培养SD大鼠的乳鼠心肌细胞建立衣霉素心肌细胞内质网应激损伤模型,观察脂联素对心肌细胞内质网应激致细胞凋亡的作用及其机制.方法 采用酶消化法原代培养乳鼠心肌细胞,倒置相差显微镜下观察细胞生长,通过α-肌动蛋白免疫荧光法对培养的心肌细胞进行鉴定.选用原代培养3～4天的心肌细胞,随机分为五组:对照组、1 mg/L衣霉素组、1 mg/L衣霉素+100 mg/L脂联素组、1 mg/L衣霉素+3μmol/LSB203580组及1 mg/L衣霉素+3 μmol/L SB203580+ 100 mg/L脂联素组.实验终止后,在倒置相差显微镜下观察心肌细胞形态变化,通过流式细胞术检测心肌细胞凋亡,用qRT-PCR及免疫荧光法检测内质网应激指标GRP78和CHOP的mRNA及蛋白表达.结果 与对照组相比,给予衣霉素后,细胞凋亡率显著增加,GRP78和CHOP的mRNA及蛋白表达增加.脂联素预处理后给予衣霉素,可较大程度地逆转上述指标变化,细胞凋亡率显著下降,GRP78和CHOP的mRNA及蛋白表达减少；而加用p38-MAPK抑制剂SB203580后脂联素的保护作用明显减弱,凋亡率显著增加,GRP78和CHOP的mRNA及蛋白表达增高,但较单纯衣霉素处理组凋亡率低,GRP78和CHOP的mRNA及蛋白表达也减少.结论 衣霉素可使GRP78和CHOP表达增强,启动内质网应激,导致心肌细胞凋亡,脂联素可以通过减轻内质网应激逆转衣霉素所致的心肌细胞凋亡作用,对心肌细胞有保护作用,且这种保护作用部分是通过p38-MAPK途径实现的.

Exendin-4降低高糖联合TNF-α诱导的血管内皮细胞损伤的机制

目的 观察exendin-4对于高糖联合肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人脐静脉内皮细胞HUVEC-12损伤的影响并探讨其可能机制.方法 体外培养HUVEC-12细胞至对数生长期,根据干预措施分为正常对照组、高糖+TNF-α组(HT组)、高糖+TNF-a+exendin-4(1 nmol/L)组(HT+E1组)和高糖+TNF-a+exendin-4( 10 nmol/L)组(HT+E10组),采用硝酸还原酶法检测NO含量,实时荧光定量PCR法检测细胞ICAM-1 mRNA表达,细胞免疫荧光法检测NF-kB p65核转位,Western blotting检测p38 MAPK蛋白表达.结果 处理组细胞培养液中NO含量无明显差异；与对照组相比较,HT组核NF-kB p65荧光强度及p38 MAPK水平显著增加(P＜0.01)；加入Eexendin-4预处理组的ICAM-1mRNA表达显著降低；HT+E10组核NF-rB p65荧光强度及p38 MAPK蛋白表达下降,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 Exendin-4减少高糖联合TNF-α诱导的HUVEC-12细胞ICAM-1 mRNA表达,其机制可能与抑制NF-kBp65核转位及p38 MAPK蛋白有关.

miR-25表达对糖尿病肾病形成调控的分子机制研究

目的 探讨microRNA-25(miR-25)表达调控糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)形成的分子机制.方法 分别采用链脲佐菌素和高糖诱导法构建糖尿病肾病模型(Dia组)小鼠和模型HK-2细胞,采用荧光定量PCR检测正常小鼠(Con组)和Dia组小鼠肾脏质量指数(LVWI)和肾脏miR-25、DAB2IP、P38-MAPK、P-AKT mRNA表达水平,并检测HK-2细胞miR-25、DAB2IP、P38-MAPK、P-AKT mRNA表达水平.采用miR-25 mimics在HK-2细胞中过表达miR-25,采用Western blot技术检测DAB2IP、P38-MAPK、P-AKT蛋白表达水平.结果 Dia组小鼠建模全部成功.Dia组小鼠肾脏质量指数、P38-MAPK、P-AKT、DAB2IP mRNA相对表达水平显著高于Con组,肾脏miR-25相对表达水平显著低于Con组(P＜0.05).模型组HK-2细胞miR-25相对表达水平显著低于正常HK-2细胞(P＜0.05),模型组HK-2细胞P38-MAPK、P-AKT、DAB2IP mRNA相对表达水平均显著高于正常HK-2细胞(P＜0.05).用miR-25 mimics转染HK-2细胞和模型HK-2细胞,Western blot结果显示模型HK-2细胞中P-AKT和P38-MAPK表达显著下调(P＜0.05).结论 miR-25高表达可抑制P-AKT和P38-MAPK表达,可能通过JNK信号通路促进DN的发生.

白介素33激活P38-MAPK通路保护心肌缺血再灌注损伤

目的：探讨白介素33（IL-33）是否通过调控P38MAPK通路影响心肌缺血再灌（I／R）损伤。方法：应用大鼠心肌 I／R 模型，将32只成年雄性 SD 大鼠随机分为4组，对照组、模型组、IL-33组、IL-33＋SB230580（P38通路抑制剂）组。检测血清中 LDH、CK 水平及心肌组织中 TNF-α、IL-6、总 caspase-3、活化caspase-3、Bcl-2、Bax、磷酸化P38（p-P38）表达。结果：再灌注4 h 后，IL-33可明显降低 LDH 和 CK、TNF-α、IL-6、Bax 的表达和caspase-3活化，增加Bcl-2、p-P38表达（均P ＜0．05）；SB230580可以一定程度上减弱IL-33的作用。结论：IL-33可以通过P38-MAPK 通路抑制炎症反应和心肌细胞凋亡保护I／R心肌。

自噬在眼镜蛇神经毒素诱导A549细胞死亡中的作用

背景与目的 已有的研究表明眼镜蛇神经毒素具有抗肿瘤作用,而其在肺癌中的作用罕有研究.本研究观察cobrotoxin对人肺A549腺癌细胞株的抗肿瘤作用,探讨自噬和P38-MAPK通路在这过程中的作用.方法 应用MTT法观察cobrotoxin对A549细胞和HFL1人肺成纤维细胞的生长抑制作用以及用3-MA抑制自噬、SB203580抑制P38-MAPK通路后cobrotoxin对A549细胞的生长抑制作用；应用细胞集落平板克隆实验检测cobrotoxin对A549细胞的集落形成的影响；蛋白免疫印迹法(Western blot)测定单独cobrotoxin作用、cobrotoxin分别联合3-MA抑制自噬和SB203580抑制P38-MAPK通路活性后A549细胞内beclin-1、LC3、P62、P38及pP38等蛋白表达水平.结果 不同浓度cobrotoxin对A549细胞的生长有明显抑制作用,对HFL1人肺成纤维细胞无明显抑制作用,3-MA、SB203580作用后cobrotoxin对A549细胞的抑制作用降低；不同浓度cobrotoxin可明显抑制A549细胞的集落形成；cobrotoxin作用后beclin-1、pP38蛋白表达水平明显提高,P62表达明显降低,Ⅱ型/Ⅰ型LC3比值增大,并有浓度依赖性,3-MA抑制自噬后beclin-1蛋白表达水平降低,P62表达增高、Ⅱ型/Ⅰ型LC3比值减小,SB203580抑制P38-MAPK通路后beclin-1、pP38蛋白表达水平降低,Ⅱ型/Ⅰ型LC3比值减小.结论 cobrotoxin对人肺A549腺癌细胞体外生长有抑制作用,可能通过活化P38-MAPK通路激活自噬参与抗肿瘤过程.

p38-MAPK,u-PA和u-PAR蛋白在大肠癌的表达意义及其相关性

为探讨p38-MAPK,u-PA和u-PAR蛋白在大肠癌的表达意义,采用免疫组织化学法观察大肠癌组织、癌旁组织和正常组织中p38-MAPK,u-PA和u-PAR蛋白表达情况.结果,p38-MAPK、u-PA和u-PAR蛋白在大肠癌组织的阳性表达率分别达82%(41/50),68%(34/50),72%(36/50).在50例相应的癌旁黏膜组织中的阳性率分别为38%(19/50),30%(15/50),28%(14/50).在正常黏膜中的阳性表达率分别为16%(8/50),6%(3/50),8%(4/50).在大肠癌组织的表达高于癌旁黏膜,癌旁黏膜高于正常黏膜.在伴有淋巴结转移的大肠癌中阳性率明显高于不伴有淋巴结转移中的表达率.三者在大肠癌中的表达之间没有差异.结果显示,p38-MAPK可能是u-PA和u-PAR的激活物之一,三者在大肠癌的侵袭和转移中起重要作用.