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丹酚酸A逆转肺癌多药耐药基因MDR1相关microRNA的筛选与鉴定
通过将人肺癌A549细胞分为正常对照组和给药组,采用实时定量PCR对MDR1的表达水平进行测定.运用microR-NA芯片对给药组和对照组进行microRNA表达谱分析;采用Targetscan预测上调microRNA中与多药耐药基因MDR1相关的miRNA以及实时定量PCR的方法对筛选出的miRNA进行验证,研究丹酚酸A逆转肺癌多药耐药基因MDR1相关microRNA.实验结果表明,与对照组相比,给药组MDR1的表达水平明显下调;microRNA芯片对人肺癌A549细胞的给药组和对照组进行了miRNA表达谱分析,共筛出426个差异表达的miRNA;然后对差异表达上调的miRNA进行靶基因预测,发现有4个明显上调的miRNA与多药耐药基因MDR1相关.对4个miRNA进行实时定量PCR验证,结果与芯片一致.因此认为丹酚酸A下调肺癌多药耐药基因MDR1可能是通过影响miRNA表达进而调控靶基因,对进一步阐明中药逆转多药耐药作用机制提供了实验依据.
关键词： 丹酚酸A 多药耐药 MDR1 microRNA芯片 肺癌A549细胞 -
利用微阵列芯片技术探究基因FOXQ1与大肠癌的关系
目的:应用全基因组表达谱芯片和microRNA芯片检测人结肠癌细胞DLD1在敲低FOXQ1基因前后mRNA和microRNA的表达改变.方法:抽提两组细胞的RNA,分别与WholeHuman Genome Oligo Microarray(4×44 K,Agilent Technologies)全基因组表达谱芯片和mi RCURYTM LNA Array(v.18.0,AgilentTechnologies)microRNA芯片进行杂交,应用genespring、genepix软件对芯片结果进行统计,对全基因组表达谱芯片进行GO、pathway分析,并应用qRT-PCR对部分结果进行验证.应用Microsoft Excel和SPSS17.0软件进行统计学分析.结果:全基因组表达谱的检测结果表明,敲低FOXQ1基因后,在芯片所涵盖的41093个基因中,共有255个基因上调,176个基因下调.qRT-PCR的验证结果与全基因组表达谱芯片的结果基本相符.MicroRNA芯片的检测结果表明,敲低FOXQ1基因后,共有31个microRNA上调,12个microRNA下调.结论:本研究了解了FOXQ1基因敲低前后mRNA和microRNA的表达改变,为后续FOXQ1在结肠癌的发生发展中的作用机制研究提供了重要的线索和实验依据.
关键词： FOXQ1 癌基因 全基因组表达谱芯片 microRNA芯片 -
细胞外基底刚度调控宫颈癌细胞迁移的microRNA 的筛选
目的 通过microRNA 芯片筛选不同基底刚度影响宫颈癌细胞迁移过程中的关键microRNA 的候选者. 方法用丙烯酰胺及双丙烯酰胺的不同比例配置基底刚度为1、20 kPa 的人工基底膜,在其上种植宫颈癌细胞系Siha,36 h后收取细胞提取总RNA,用microRNA芯片及qRT-PCR方法筛选2种基底刚度条件下的差异表达microRNA. 结果 在2种不同刚度条件下生长的宫颈癌细胞系Siha 共有173 个表达差异的microRNA,其中包括70 个表达上调的microRNA和103 个表达下调的microRNA.在宫颈癌细胞系Siha、Hela、Caski 中,检测与宫颈癌细胞迁移相关的miR-21、miR-125a、miR-75b、miR-150、miR-595、miR-218、miR-200b、miR-107、miR-183 等表达与microRNA芯片结果一致. 结论 不同基底刚度可引起宫颈癌细胞系Siha 的microRNA 表达谱不同,microRNA 在基底刚度调控宫颈癌细胞迁移的过程中可能具有重要作用.
关键词： 宫颈癌 microRNA芯片 迁移 -
肝细胞癌组织microRNA-187-3p表达预后意义
目的 微小RNA (microRNA,miRNA)差异表达与多种肿瘤的发生发展密切相关,但微小RNA-187-3p(miR-187-3p)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及预后意义研究较少.本研究检测HCC组织中microRNA的表达谱,分析miR-187-3p在HCC组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系,探讨miR-187-3p表达在其发生、发展及预后中的作用.方法 利用microRNA芯片杂交技术筛选5例HCC组织及相应癌旁组织中差异表达的microRNA,然后通过实时荧光定量PCR(real-time fuorescence quantitative-PCR,RFQ-PCR)法验证86例HCC组织及相应癌旁组织中miR-187-3p表达水平,并统计临床病理资料,随访生存期.结果 148个microRNAs在HCC组织中差异表达,其中102个microRNAs在HCC组织较相应癌旁组织表达下调,46个microRNAs在HCC组织较相应癌旁组织表达上调.RFQ-PCR结果显示,miR-187-3p在HCC组织中表达水平明显低于相应癌旁组织,差异有统计学意义,Z=-2.244,P=0.025.HCC中miR-187-3p表达状态与肿瘤大小(x2=5.031,P=0.025)相关,而与性别(x2=3.648,P=0.056)、年龄(x2=0.003,P=0.956)、是否转移(x2=0.005,P=0.943)、TNM分期(x2=0.129,P=0.719)、肿瘤数目(x2 =0.126,P=0.722)、乙肝表面抗原(x2=0.019,P=0.890)、AFP水平(x2=0.187,P=0.665)和Child分级(x2=1.665,P=0.197)无关.miR-187-3p低表达的HCC患者总生存期较高表达者明显缩短,x2=7.684,P=0.006.且多因素分析发现,miR-187-3p表达水平和TNM分期是影响HCC患者生存预后的独立危险因素.结论 miR-187-3p在一定程度上参与了HCC的发生发展,其有望成为HCC新的潜在的治疗靶点以及诊断、判断病情和预测预后的分子标志物.
关键词： 肝细胞癌 miR-187-3p 基因表达 microRNA芯片 -
microRNA在食管癌放射抵抗细胞表达谱研究
目的 比较食管癌放射抵抗细胞株与其亲本细胞microRNA表达谱的差异.方法 应用Agilent human miRNA芯片检测人食管癌耐放射细胞株KYSE-150R与其亲本细胞KYSE-150的表达谱.GeneSpring GX 10.0.2数据分析挑选差异表达基因.应用软件对筛选出的显著差异表达miRNA的潜在靶基因进行预测并验证.结果 与亲本细胞相比,KYSE-150R中上调超过2倍的miRNA有l0个,为hsa-miR-1539、hsa-miR-1237、hsa-miR-92b等;表达下调超过2倍的有miRNA有25个,为hsa-miR-185、hsa-miR-18b、hsa-miR-17等.软件预测发现其中18个miRNA有潜在的靶基因,10个miRNAs的靶基因多达200个.显著差异表达的miRNA(如hsa-let-7a、hsa-miR-185、hsa-miR-141、hsa-miR-92b、hsa-miR-22和hsa-miR-301a)与放射抵抗密切相关.结论 筛选出的miRNAs可能通过调控其靶基因而参与食管癌放射抵抗,为临床上放射抵抗的逆转提供全新的靶标和策略.
关键词： 食管肿瘤 放射抵抗性 microRNA芯片 -
肾阳虚证患者外周血差异表达microRNAs筛选及功能预测
目的 利用microRNA(miRNA)芯片筛选肾阳虚证差异表达的miRNAs.方法 选择肾阳虚证患者14例作为肾阳虚证组,健康对照者14例作为正常对照组,分别抽取2组受检者外周静脉血5 mL,提取总RNA分离miRNA,应用miRCURYTM LNA Array (v.18.0)(Exiqon)芯片技术筛选2组间差异表达的miRNAs并进行分析,应用Gene ontology (GO)分析差异miRNA生物功能.结果 共筛选出48条有统计学意义的差异表达miRNAs,其中29条表达上调,19条表达下调,这些差异miRNAs主要参与了免疫、信号通路、蛋白翻译合成等调节.结论 肾阳虚证患者和健康对照者存在差异表达的miRNAs.
关键词： 肾阳虚证 microRNA芯片 差异表达miRNA -
miR-21在脑出血患者外周血中表达特点的研究
目的 研究脑出血患者外周血中microRNA的表达特点,探讨miR-21在脑出血患者外周血中的表达与脑出血后时间相关性.方法 采用病例对照研究方法,病例组选择基底节区脑出血患者作为研究对象,正常对照组来自健康志愿者,并要求年龄和性别等因素与病例组匹配.采集4例病例组患者和与之相匹配的4例对照组患者外周静脉血,提取血清,抽提RNA,采用microRNA芯片技术分析microRNA在各组间的表达情况,运用统计学方法分析病例组与对照组临床资料的差异性及microRNA表达的差异性.运用靶基因预测软件及文献复习,挑选出可能与ICH相关的microRNA(miR-21)及其靶基因,采集31例病例组患者在脑出血后6h、24h、72h及7d的外周血,采集1 1例对照组患者外周血,提取血清,抽提RNA,采用real-time PCR方法扩大样本量进一步研究miR-21在脑出血患者外周血中的表达与出血时间的相关性,探讨其可能的分子作用机制.结果 microRNA芯片结果显示,脑出血患者外周血中,共有101种microRNA表达下调(fold change＞ 1.5),53种microRNA有统计学差异;表达上调的microRNA共有10种,其中2种呈差异性表达;通过靶基因预测软件及文献复习,分析miR-21可能与脑出血的多个病理机制相关;real-time PCR验证实验结果与芯片结果一致,miR-21在脑出血患者外周血中表达下调;且miR-21在发病6h、24h、72h及7d各个时间点表达随时间呈曲线变化趋势.结论 脑出血患者血清中存在着特异性的micoRNA表达谱;miR-21在脑出血患者外周血中随时间变化表达下调,且其变化趋势与脑出血后水肿程度相一致.
关键词： 脑出血 外周血 microRNA芯片 Real-time PCR miR-21 出血时间 -
人腺病毒3型感染对H9c2细胞microRNA表达谱的影响
目的 研究腺病毒感染对大鼠心肌来源的H9c2细胞microRNA表达谱的影响.方法 用人腺病毒3型(Ad3)攻击成层和未成层的H9c2细胞,6 h后收获总RNA,基因芯片检测microRNA表达谱.结果 比较未成层与成层的H9c2细胞microRNh的表达谱,H9c2细胞成层后有54种microRNA表达显著下调,7种microRNA表达显著上调.与未感染病毒的细胞比较,Ad3感染的未成层H9c2细胞有41种microRNA表达显著下调,12种microRNA表达显著上调.与未感染病毒的细胞比较,Ad3感染成层H9c2细胞后有8种microRNA的表达显著下调.62种microRNA的表达显著上调.结论 细胞不同的生长状态及Ad3感染显著改变了H9c2细胞的microRNA表达谱.
关键词： 人腺病毒 H9c2细胞 microRNA芯片 心肌炎 -
人桥本甲状腺炎甲状腺组织中miRNAs表达谱的差异性分析
目的:桥本甲状腺炎是一种自身免疫性甲状腺疾病,且其发病率呈逐年上升趋势,在医疗实践中,HT被认为是原发性甲状腺功能减退常见的原因,同时较易发生甲状腺癌和淋巴瘤.另外,HT缺乏早期诊断标准,临床上发病隐匿且表现多样,病人多不易察觉而延误治疗.本文旨在应用microRNA芯片技术系统筛查HT病变甲状腺组织,以此研究并揭示其HT的miRNA表达谱变化.方法:本研究首先采用microRNA芯片技术,对正常甲状腺组织及桥本甲状腺炎甲状腺组织中microRNA的表达进行比较,筛选桥本甲状腺炎中差异性表达的miRNAs.结果:与正常甲状腺相比,在桥本甲状腺炎及其合并甲状腺乳头状癌的一侧桥本甲状腺炎中分另有39个和25个miRNAs分子发生了差异性表达(P＜0.05),比较2组中共有的miRNAs发现,miR-142-3p、miR-338-3p、miR-454、miR-146a、miR-29b-1*、miR-150、miR-223表达上调,miR-654-5p、miR-601、miR-198、miR-1226*表达下调(log2 FC≥2,P＜0.05);而miR-142-5p在原发性桥本甲状腺炎中表达显著性升高近8倍(log2 FC=7.959,P＜0.01).结论:我们通过microRNA芯片,首次直接系统筛查了桥本甲状腺炎病变组织相关miRNA表达谱,总体上初步掌握了与正常甲状腺相比,桥本甲状腺炎及合并甲状腺乳头状癌时其miRNA表达谱的变化情况,为我们后续的研究提供了方向与基础.
关键词： 桥本甲状腺炎 microRNA芯片 差异性 -
脂肪基质细胞脂向分化过程中MicroRNA-21的表达变化
目的:了解脂肪基质细胞(ADSCs)在脂向分化过程中MicroRNA-21(miRNA-21)表达变化情况.方法:从8只出生30 d雄性体健SD幼鼠体内取出脂肪,采用密度梯度离心结合贴壁培养法获得了纯度高的脂肪基质细胞,采用脂向诱导液对第3代的脂肪基质细胞进行诱导培养,并以未诱导的细胞为对照.成脂诱导培养液[DMEM培养液中加入地塞米松(1 μmol·L-1)、3-异丁基-1甲基黄嘌呤(0.5 mmol.L-1)、胰岛素(10 mg·L-1)].应用microRNA芯片技术检测脂肪基质细胞脂向诱导后7 d和未诱导microRNA-21的表达差异.采用实时定量PCR检测microRNA-21在脂肪基质细胞脂向分化前后表达量变化.结果:经显微镜下观察、油红O染色及PPARγ免疫细胞化学染色检测证实脂肪基质细胞已经脂向分化,miRNA芯片及实时定量PCR结果均表明miRNA-21在脂肪基质细胞体外脂向分化过程中表达显著下调.结论:miRNA-21在脂肪基质细胞脂向分化后的表达有显著降低,可能参与调控ADSCs的脂向分化过程.
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转化生长因子β1(TGF-β1)对胃癌细胞microRNA表达谱的影响
目的 探讨转化生长因子β 1 (transforming growth factor β 1,TGF-β1)对胃癌细胞BGC823 microRNA(miRNA)表达谱的影响及其意义.方法 应用microRNA芯片检测TGF-β1处理胃癌细胞BGC823前后的miRNA表达谱；对miRNA表达谱进行差异性分析；实时荧光定量RT-PCR验证差异表达的miRNA;用生物信息学技术分析差异表达miRNA可能调控的靶基因及其意义.结果 TGF-β1处理胃癌细胞BGC823 24 h和36 h后,miRNA的表达谱存在6个相同的差异表达miRNA,包括3个(miR-27a,miR-29b-1和miR-194)表达上调,3个(miR-193b,miR-574-3p和miR-130b)表达下调.实时荧光定量RT-PCR结果与芯片一致.结论 TGF-β1能够影响胃癌细胞miRNAs的表达,这些上调或下调表达的miRNAs可能参与了胃癌的浸润转移.
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再生障碍性贫血患儿骨髓间充质干细胞基因和microRNA表达谱对照研究
目的 拟用干细胞功能分类基因芯片与microRNA(miRNA)芯片对照分析,进一步研究骨髓间充质干细胞(MSCs)在再生障碍性贫血(AA)发病中的作用.方法 选取AA患儿(AA组)和无任何骨髓受累的非血液病患儿(对照组)各10例,体外分离、培养骨髓MSCs,并每组各选2例第3代骨髓MSCs.利用干细胞功能分类基因芯片和miRNA芯片检测AA组与对照组的差异表达基因和miRNA.通过差异基因和差异miRNA比对,挑选出人类miRNA miR-107 (hsa-miR-107),并行实时荧光定量-聚合酶链反应以进一步验证.结果 AA组与对照组表达相差2倍以上的基因共62个,其中下调基因10个,上调基因52个.基于生物信息学预测的方法,将差异基因与差异miRNA进行比对,AA组MSCs中hsa-miR-107的相对表达量显著高于对照组(P＜0.05).结论 人成纤维细胞生长因子2(FGF2)及其对应的miRNA hsa-miR-107表达异常的骨髓MSCs可能在AA患儿的发病中起重要作用.
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microRNA在胚胎干细胞分化的心肌细胞中的表达变化
胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)具有自我更新和多向分化的特性.近年研究显示转录后调控包括microRNAs(miRNAs)的调控在ESC心肌细胞分化(ESC-derived cardiomyocytes,ESCM)命运决定中起着重要作用.然而对决定ESC分化命运的miRNAs的了解还非常有限.为了进一步认识miRNAs对心肌细胞分化的调控作用,本研究采用经典的悬滴法诱导小鼠ESC(mESC)分化成心肌细胞,采用安捷伦8×15k小鼠miRNAs芯片(miRbase V16.0)比较了富含跳动心肌细胞区域与非跳动区域miRNAs表达谱的异同,发现与非跳动区域相比,跳动区域中有19个miRNAs发生了5倍以上的表达变化(n=3,P＜0.05),其中5个miRNAs表达上调、14个miRNAs表达下调.采用定量RT-PCR进一步分析了miRNAs芯片中差异倍数大于10的miRNAs,证明miR-196a,miR-196b和miR-467e在心肌细胞跳动区域的表达丰度明显低于非跳动区域(n=3,P＜0.05).用TargetScan数据库对miR-196a和miR-196b进行靶基因预测,发现其可能与心肌细胞分化呈负相关,提示其在ESC分化命运决定中可能具有一定的调控作用.这些结果为进一步明确miRNAs在ESC分化的心肌细胞中的作用提供了新线索.
关键词： 小鼠胚胎干细胞 microRNA 心肌细胞 microRNA芯片 分化 -
利用microRNA芯片技术筛选神经母细胞瘤发病相关微小RNA
胚胎发育相关性是小儿肿瘤区别于成人肿瘤的显著特点.神经母细胞瘤是小儿肿瘤的典型代表,许多研究表明神经母细胞瘤的发生和胚胎发育异常密切相关[1].微小RNA(microRNA,miRNA)目前被认为是在机体的胚胎发育过程和肿瘤发生中起到重要作用的内源性调控分子,具有诱导分化肿瘤细胞和胚胎十细胞分化的作用[2].本研究通过应用microRNA基因芯片技术,筛查参与胚胎发育和神经母细胞瘤发生的microRNA,从而探索神经母细胞瘤的发病机制.
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结肠癌耐药细胞株LoVo/5-Fu中microRNA表达的初步研究
目的 建立结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU并初步筛选可能的耐药相关的microRNA.方法 采用5-FU浓度递增法建立人结肠癌细胞耐药模型LoVo/5-FU,观察其生长规律并绘制细胞生长曲线；用MTT法鉴定耐药细胞株耐药性并计算耐药指数(RI)；用microRNA芯片技术检测耐药细胞株LoVo/5-FU与其亲本细胞株LoVo中mi-croRNA的表达谱,筛选差异表达的microRNA;用实时荧光定量PCR方法对筛选出的部分差异microRNA在耐药细胞及其亲本细胞中的表达情况进行验证.结果 LoVo/5-FU细胞与LoVo细胞相比,生长缓慢,细胞体积增大,耐药株LoVo/5-FU细胞相对于其亲本LoVo细胞的耐药倍数为8.08.microRNA芯片的结果显示,耐药株LoVo/5-FU细胞与亲本LoVo细胞比较,有10个microRNA表达上调,13个microRNA表达下调；实时荧光定量pcr的结果进一步证实mir-210、mir196a、mir-1281在LoVo/5-FU中显著上调,而let-7fmir-1228显著下调,其中mir-210在LoVo/5-FU与LoVo中的表达有明显差异.结论 LoVo/5-FU细胞株耐药性稳定,筛选获得的差异miRNA可能通过调控其靶基因而参与人结肠癌细胞对5-Fu的耐药,为进一步研究microRNA在结肠癌耐药机制中的作用奠定基础.
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肝细胞癌组织中microRNA表达谱研究
目的 检测人肝癌组织和对应的肝硬化组织microRNA表达的差异谱,为研究microRNA在肝细胞癌变机制中的作用提供实验基础.方法 Trizol法提取25例配对的肝癌和肝硬化组织总RNA,microRNA芯片分析肝癌和肝硬化组织中差异表达microRNA,实时定量PCR验证芯片的结果 .结果 肝癌与肝硬化组织间差异表达的microRNA共12个,其中3个表达上调,9个表达下调.实时荧光定量PCR结果 与芯片一致.结论 肝癌和肝硬化组织存在差异表达的microRNA,这些上调和下调表达的microRNA可能参与了肝癌的发生.
关键词： 肝肿瘤 肝硬化 microRNA芯片 基因表达 -
原发性肝癌术后早期复发密切相关microRNA的筛选及应用
[目的]利用micmRNA芯片技术分析比较两组不同复发倾向肝癌患者的miRNA表达谱,并在更大样品的基础上进行实验验证.[方法]收集10例原发性肝癌组织标本根据术后复发情况分2组:早期复发组与非早期复发组,运用microRNA芯片技术筛选出差异表达显著的microRNAs.结合文献报道,选择mir-144、mir-502-3p作为其他82例肝癌组织标本qReal-time PCR验证的检测指标.并利用生物信息学方法预测其靶基因.[结果]本研究共筛选获得7个差异表达的microRNAs.与非早期复发组相比,在早期复发组中有4个表达上调,3个表达下调.qReal-time PCR验证与microRNA芯片筛选的结果一致.生物信息学方法预测miR-144靶基因可能为Rb1,miR-502-3p靶基因可能为SET.[结论]microRNA芯片筛选的mir-144、mir-451、mir-486-5p、mir-602、mir-551b、mir-96、mir-502-3p与原发性肝癌术后早期复发密切相关.
关键词： 原发性肝癌 早期复发 microRNA芯片 -
脑梗死和脑出血患者外周血中循环microRNA表达谱差异的初步分析
目的：利用microRNA芯片研究急性脑梗死和脑出血患者循环血浆中是否存在相关的miRNAs及有表达差异的miRNAs。方法：分别收集急性脑梗死、脑出血患者和健康对照者全血各3例，运用Norgen血浆外泌体RNA提取试剂盒提取血浆总RNA并通过定量PCR进行质量和浓度检测。采用μParaflorTM microRNA芯片技术进行miRNAs表达谱研究。用相关软件和统计学方法进行数据分析。结果：在脑梗死和脑出血患者血浆中发现8个与脑卒中相关的miRNAs，且有显著差异性表达（P＜0．05）。脑梗死和健康对照者、脑出血和健康对照者间分别有11、24个差异表达miRNAs，但两两比较上调或下调2倍以上的差异表达的miRNAs均无统计学意义（P＞0．05）。结论：脑梗死和脑出血组间miRNA的表达差异可能与不同类型脑卒中的发生发展相关，可为进一步研究急性脑卒中发生的表观遗传学分子机制提供依据。
关键词： 脑梗死 脑出血 循环microRNA microRNA芯片 -
microRNA在重型β-珠蛋白生成障碍性贫血中的表达研究
目的 探讨microRNA(miRNA)在重型β-珠蛋白生成障碍性贫血中的表达情况.方法 采用miRNA芯片检测重型β-珠蛋白生成障碍性贫血和实时定量PCR技术研究miRNA差异表达情况.结果 miRNA芯片结果显示,在样本组中26个表达显著上调,30个表达显著下调.随机挑选表达上调的hsa-miR-618和表达下调的hsa-miR-103a-2-5p进行实时定量PCR检测,结果显示其表达趋势与芯片结果一致,验证芯片结果可靠性.使用数据库软件预测出17个表达上调和24个表达下调的miRNA与重型β-珠蛋白生成障碍性贫血可能相关的靶基因.结论 miRNA在重型β-珠蛋白生成障碍性贫血中存在显著差异表达.进一步研究miRNA在重型β-珠蛋白生成障碍性贫血中的调控通路可为其发病机理研究及疾病治疗提供新方向和思路.
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蛛网膜下腔出血后血管平滑肌细胞凋亡的microRNA芯片检测及分析
目的:采用microRNA芯片技术筛选蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)凋亡中起重要作用的microRNA.方法:首先建立SAH后VSMC凋亡模型.然后采用microRNA芯片筛选差异表达microRNA.后采用qRT-PCR方法对筛选出来的microRNA 145进行验证,并通过生物信息数据库预测其可能的靶基因.结果:通过200 μmol/L氧合血红蛋白(oxyhemoglobin,OxyHb)作用24 h,成功建立SAH后VSMC凋亡模型.MTT检测显示200 μmol/L OxyHb组作用24h后吸光度(absorbance,A)值为0.197±0.131,流式细胞仪检测凋亡率为30.233±7.231,与其他组相比差异明显(P＜0.05).然后通过microRNA芯片检测,获得差异表达microRNA 22个,其中显著上调的16个,显著下调的6个.其中microRNA 145差异变化大.经qRT-PCR验证,SAH后VSMC中microRNA145异常高表达.预测结果显示,Bcl-2/腺病毒E1B19000相互作用蛋白3(Bcl-2/E1B 19 kDa-interacting protein 3,BNIP3)为其可能的靶基因.结论:microRNA 145可能是调控SAH后VSMC凋亡的分子靶点.microRNA 145可能通过BNIP3相关信号途径,导致了SAH后VSMC凋亡,诱发并加重了脑血管痉挛.
关键词： 蛛网膜下腔出血 血管平滑肌细胞 凋亡 microRNA芯片
