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中药筋脉通对高糖培养雪旺细胞增殖及NGF表达的影响
目的:从细胞生物学水平观察筋脉通含药血清对高糖培养雪旺细胞(SC)的增殖及其分泌神经生长因子(NGF)的影响.方法:体外培养大鼠SC,采用血清药理学方法制备筋脉通含药血清,观察筋脉通含药血清对高糖培养SC增殖活性的影响,检测筋脉通含药血清对高糖培养SC分泌NGF的影响.结果:高糖培养条件下,SC增殖及分泌NGF的能力明显减弱,筋脉通含药血清可增强高糖培养SC的增殖能力,上调NGF的表达水平,作用与神经妥乐平含药血清相似.结论:中药筋脉通可有效促进高糖环境培养的SC的增殖能力及其分泌NGF的水平.
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扁平疣在共聚焦激光扫描显微镜下的特征性表现
目的:利用共聚焦激光扫描显微镜(皮肤CT)对扁平疣的特征性表现进行研究.方法:选取2015年5月-2017年5月间我科接收的31例扁平疣患者,先选取典型皮损分析其皮肤CT下图像特征,然后对该处皮损进行组织病理学检查,对二者进行研究分析.结果:扁平疣的皮肤CT特征:表皮轻度增生,颗粒层及棘细胞上层细胞大致呈同心圆样排列,近似玫瑰花团样,基底层色素增加,真皮乳头及浅层血管周围稀疏炎细胞浸润.结论:结合临床表现,皮肤CT的图像特征可以为扁平疣的临床诊断及鉴别诊断提供有效的帮助.
关键词： 共聚焦激光扫描显微镜 扁平疣 -
早期人胚羊膜共聚焦激光扫描光学切片及F-肌动蛋白的研究
目的建立羊膜组织共聚焦激光扫描显微镜光学切片的方法,探讨早期人胚羊膜细胞结构、分层及细胞骨架的空间结构. 方法采用共聚焦激光扫描光学切片和荧光探针双重标记技术对妊娠7～9周早期人胚羊膜进行形态观察、细胞F-肌动蛋白表达定量分析、细胞分层及厚度计算. 结果羊膜由两层不同类型的细胞组成,内层细胞为多边形扁平细胞,外层细胞为长梭形细胞;内层细胞胞质中的F-肌动蛋白表达量较低,外层细胞胞质中的F-肌动蛋白表达量明显高于内层细胞,两者差异有统计学意义;7～9周人胚羊膜厚度为30±2μm.其中,上皮层厚度为10μm±2μm,间充质层厚度为14μm±2μm. 结论 1.早期人胚羊膜由两层细胞即内层的上皮细胞层和外层的间充质细胞层组成,胞质中F-肌动蛋白的表达量间充质细胞高于上皮细胞;2.通过共聚焦激光扫描连续光学切片可以计算出羊膜各层的厚度;3.共聚焦激光扫描显微镜光学切片技术结合FITC-鬼笔环肽和碘化丙啶双重标记技术是观察和分析羊膜组织细胞立体结构的良好方法.
关键词： 羊膜 共聚焦激光扫描显微镜 F-肌动蛋白 光学切片 人胚 -
共聚焦激光扫描显微镜技术及相关荧光探针在细胞器研究中的应用
共聚焦激光扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)是上世纪80年代发展起来的先进的分子细胞生物学分析仪器.它在荧光显微镜成像基础上加装了激光扫描装置,利用计算机进行图像处理,把光学成像的分辨率提高了30%～40%,是光学显微镜发展史上的重大突破.它通过其独特的成像原理和技术[1],使用紫外线或可见光激发荧光探针,不仅可观察固定的细胞、组织切片,还可以对活细胞的结构、分子、离子等进行实时动态观察和检测,在亚细胞水平上观察诸如Ca2+,pH值,膜电位等生理信号及细胞形态的变化,成为形态学、分子细胞生物学、神经科学、药理学、遗传学等领域中新一代强有力的研究工具[2].
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共聚焦激光扫描显微镜的三维重建特性
透射电镜、扫描电镜在观察细胞和亚细胞的精细结构方面具有划时代意义,然而限于二维图像水平.在器官水平,螺旋CT、MRI产生的的三维影像弥补了断层图像的局限性,为临床工作提供了极为有价值的信息.
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脊髓损伤后慢性中枢性疼痛与脊髓背角P物质关系研究
目的探讨脊髓损伤(SCI)后慢性中枢性疼痛(CCP)与P物质的关系.方法选取SD大鼠28只,分为正常组(A组)、假手术组(B组),以及用WADE法复制出SCI后无CCP组(C组)和CCP组(D组).取大鼠T13和L2脊髓节段,采用免疫荧光组织化学染色法结合激光共聚焦显微镜技术观察脊髓背角P物质(SP)的变化.结果各组大鼠T13和L2节段脊髓背角SP含量比较为:D组较C组减少( P<0.05),较A组和B组明显减少( P<0.01);C组较A组和B组减少( P<0.05);A组与B组无显著性差异.结论 SCI后CCP大鼠脊髓背角SP可能对CCP有某种程度的抑制作用.
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应用共聚焦激光扫描显微镜对白癜风成像的观察与研究
目的 应用共聚焦激光扫描显微镜观察白癜风皮损及周边皮肤图像特征.方法 对46例白癜风患者69处皮损及周边皮肤进行共聚焦激光扫描显微镜检测,获得白癜风皮损特征性图像.结果 皮损周边皮肤图像显示棘细胞层下部和基底层的角质细胞因含有黑素呈明亮的“圆形”或“椭圆形”色素环,皮损处图像显示色素环的数量及亮度呈不同程度减少或消失.结论 共聚焦激光扫描显微镜是一项新的无创性皮肤影像技术,具有在体、实时、动态三维计算机断层成像的特点,可以直接观察到白癜风患者皮损处及周边角化细胞内黑素的形态变化,可为临床提供客观的评估依据.
关键词： 白癜风 共聚焦激光扫描显微镜 黑素 -
太田痣与颧部褐青色痣皮肤共聚焦激光扫描成像特征分析
目的 探讨太田痣、颧部褐青色痣在皮肤共聚焦激光扫描显微镜(RCM)成像中的特征.方法 由经验丰富的临床医师对面部色素斑进行诊断,选取未经治疗的20例太田痣和25例颧部褐青色痣,上述病例均未合并其他色素异常性皮肤病;应用RCM对上述病例患者皮损进行成像并存储、分析,所有患者皮损周围正常皮肤作为对照.结果 与周围正常皮肤相比,所有患者(100％)皮损处表皮、真表皮交界处均未见色素颗粒增加;12例太田痣(60％)和18颧部褐青色痣患者(72％)真皮浅中层可见散在条索状或者团块状黑素颗粒沉积,8例太田痣(40％)和7颧部褐青色痣患者(28％)真皮中未查及黑素颗粒沉积.结论 RCM成像结果表明:单纯的太田痣和颧部褐青色痣的表皮、真表皮交界处均无色素异常,两者色素颗粒沉积均在真皮,RCM成像有助于太田痣、颧部褐青色痣的诊断.
关键词： 太田痣 颧部褐青色痣 实时 共聚焦激光扫描显微镜 -
ESR和CLSM技术用于促渗剂作用机制及亲水性大分子跨鼻黏膜转运途径的研究
采用电子自旋共振(ESR)和共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)技术研究促渗剂作用机制及促渗剂对亲水性大分子跨鼻黏膜转运途径的影响.比较重组水蛭素-2(rHV2)与促渗剂联合鼻腔用药前后大鼠的生物利用度;采用以5-噁唑烷氮氧自由基硬脂酸、16-噁唑烷氮氧自由基硬脂酸和马来酰亚胺作为自旋标记物的电子自旋共振技术,考察促渗剂对家兔鼻黏膜脂质和蛋白的影响;采用共聚焦显微镜光学切片结合荧光探针标记技术探讨促渗剂对大鼠鼻黏膜上皮细胞骨架肌动蛋白的作用,同时观察在各种促渗剂作用下rHV2的转运途径.壳聚糖(chitosan,CS),羟丙基-β-环糊精(hydroxyl-propyl-beta-cyclodextrin,HP-β-CD),甘草酸单胺盐(ammonium glycyrrhizinate,AMGZ)均能显著改善rHV2的鼻黏膜吸收;CS主要通过细胞旁路途径增加rHV2鼻黏膜转运,这一结果可能与其对细胞骨架肌动蛋白微丝的影响从而打开细胞间紧密连接有关;HP-β-CD可同时增加跨细胞和经细胞旁路两种途径的转运,可能与其既能改变膜质流动性又能影响膜蛋白构象的特性有关;AMGZ主要增加亲水性大分子跨细胞途径的转运,实验观察到其对膜蛋白有作用,但未观察到其对膜质的作用,确切的机制尚有待研究.本实验可为促渗剂及亲水大分子跨细胞膜转运途径的研究提供借鉴.
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固体制剂微环境pH测定技术研究进展
目的:介绍近年来固体制剂微环境pH(pHM)测定技术的新研究进展.方法:对已有文献进行综合、分析与归纳.结果:固体制剂pHM的测定存在较高的技术难度与要求,目前有酸碱指示剂法、微型及表面pH电极法、共聚焦激光扫描显微成像技术和电子顺磁共振成像技术等.结论:pHM测定技术可为pH调节剂的筛选和pHM调控技术作用机制研究提供重要参考指标.
关键词： 微环境 pH调节剂 微型pH电极 共聚焦激光扫描显微镜 电子顺磁共振成像 -
应用共聚焦激光扫描显微镜对脑脊液淋巴白血病细胞线粒体的研究
目的通过共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)对脑脊液淋巴白血病细胞线粒体进行立体、动态、定量研究.方法将所观察的脑脊液细胞分为正常淋巴细胞组、急性淋巴白血病细胞组、鞘膜内注射治疗后急性淋巴白血病细胞组.以线粒体荧光探针Mitotracker Green FM标记后,得到线粒体的断层扫描图像、荧光强度地形立体分布图,定量测量线粒体的荧光强度值.结果急性淋巴白血病细胞(357.13+60.99)与正常淋巴细胞(269.38+5 6.11)、鞘膜内注射治疗后淋巴白血病细胞(317.41+57.57)相比,平均荧光值有非常显著性差异(P＜0.01),线粒体空间立体分布有明显差别.结论采用CLSM对中枢神经系统淋巴白血病的诊断、鉴别诊断、细胞分化程度和功能状态判断有一定意义.
关键词： 共聚焦激光扫描显微镜 荧光探针 线粒体 -
皮肤CT对扁平疣和早期脂溢性角化病的特征分析
目的 应用共聚焦激光扫描显微镜(confocal laser scanning microscopy,CLSM)对扁平疣(verruca planae)和早期脂溢性角化病(seborrheic keratosis)的图像特征进行归纳,从而对之进行鉴别.方法 对2012年6~10月来解放军第二五二医院门诊皮肤科就诊患者30例扁平疣患者和30例早期脂溢性角化病患者皮损进行CLSM检测,获得扁平疣和脂溢性角化病皮损特征性图像.结果 扁平疣患者图像显示表皮上部细胞体积大,大小较一致、胞质折光性低的空泡细胞形成,排列呈玫瑰花瓣样改变;脂溢性角化病患者图像显示明亮的角质层增厚,假性角质囊肿的形成,棘层增厚,乳头瘤样增生.结论 应用CLSM有助于区分临床上容易混淆的扁平疣和早期脂溢性角化病.
关键词： 共聚焦激光扫描显微镜 脂溢性角化病 扁平疣 -
各期白癜风共聚焦激光扫描显微镜下表现
目的 应用皮肤共聚焦激光扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)观察白癜风皮损在不同时期的表现.方法 收集天津市中医药研究院附属医院皮肤科门诊白癜风患者138例,应用CLSM扫描,依次观察白癜风皮损的各层次结构及特点.结果 观察患者进展期83例,稳定期55例.CLSM图像进展期呈现皮损区域边界不清晰,仅见局部残留少量色素环,基底层色素环缺失明显.稳定期皮损边界清晰,周边正常皮肤色素环完整.结论 不同时期白癜风皮损CLSM表现不同,因此CLSM可以作为白癜风治疗期间随访的有效观察手段.
关键词： 白癜风 共聚焦激光扫描显微镜 黑素细胞 -
共聚焦激光扫描显微镜在皮肤科的应用
共聚焦激光扫描显微镜（confocal laser scanning microscope， CLSM）做为无创性的技术手段成为皮肤影像学的研究热点。通过总结皮肤科病毒性皮肤病、汗孔角化症、色素性疾病、基底细胞癌、银屑病、日光性唇炎和光泽苔鲜等疾病的图像特征，并对CLSM的应用现状和前景做出综述。
关键词： 共聚焦激光扫描显微镜 色素性疾病 银屑病 基底细胞癌 -
共聚焦激光扫描显微镜诊断银屑病的研究
目的:论证共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)在银屑病诊断中的作用.方法:对临床确诊为银屑病的44例患者运用CLSM观察银屑病患者皮肤图像,与其病理检查结果进行对比分析.结果:两种检查方法对于角化不全、颗粒层减少或消失、表皮棘层肥厚及表皮突下延和中性粒细胞在表皮中的浸润的检出率比较,差异无统计学意义；真皮乳头毛细血管迂曲扩张达到顶部的比较,CLSM检出率明显高于病理检查,而真皮浅层血管周围单一核细胞浸润的比较,病理检查检出率高于CLSM.结论:CLSM发现银屑病特征性皮肤结构改变的敏感性略优于病理学检查.
关键词： 银屑病 病理学 诊断 共聚焦激光扫描显微镜 -
白斑颗粒剂Ⅰ号方治疗白癜风的临床效果观察
目的：通过应用皮肤共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）动态观察中药白斑颗粒剂Ⅰ号方治疗气滞血瘀型白癜风的皮损色素恢复情况及效果。方法气滞血瘀型白癜风患者92例随机分为2组，试验组49例予口服白斑颗粒剂Ⅰ号方3 g，每日2次；转移因子胶囊每次6 mg，每日3次；外用0.1%糠酸莫米松乳膏每日1次，或0.1%他克莫司软膏（面部），每日2次。对照组43例仅单纯口服转移因子胶囊每次6 mg，每日3次；外用0.1%糠酸莫米松乳膏（面部除外），每日1次，或0.1%他克莫司软膏（面部），每日2次，治疗3个月，观察2组疗效。应用CLSM监测皮损处复色情况和色素恢复等级，以及树枝状黑素细胞数目和炎症细胞浸润的变化。结果试验组和对照组治疗后较治疗前的复色情况均有明显改善，试验组总有效率优于对照组（81.63%vs.69.77%，χ2=3.947，P＜0.05）。CLSM示试验组白癜风皮损色素恢复等级情况与对照组差异有统计学意义、树枝状黑素细胞比例高于对照组，炎症细胞比例低于对照组（P＜0.05）。结论白斑颗粒Ⅰ号方治疗气滞血瘀型白癜风效果较为明显。
关键词： 白癜风 黑素细胞 共聚焦激光扫描显微镜 炎症细胞 白斑颗粒剂Ⅰ号 -
皮肤镜在皮肤肿瘤及非典型皮肤病鉴别诊断中的研究进展
近年由于电离辐射、热辐射、紫外线等环境污染因素造成的皮肤损伤增多,以及接受肿瘤放射治疗和细胞毒药物治疗的患者不断增多,皮肤肿瘤发病率急剧上升.而激光技术的进步和人们对皮肤肿瘤及色素性疾病研究的深入,特别是共聚焦激光扫描显微镜即皮肤镜在临床广泛开展,为临床提供了早期、无创性及可追踪性的诊断和观察疾病病理变化的方法.本文归纳皮肤镜在诊断皮肤肿瘤方面及鉴别常见非典型皮肤病方面的研究进展,有助于科研人员寻找新的研究路线,有助于临床医师预防和诊治皮肤肿瘤,有助于临床非典型皮肤病的鉴别及某些慢性皮肤病治疗效果的追踪观察.同时,尚需广大科研和临床工作者对皮肤镜的应用进一步推广,并进行更为深入的研究及临床观察.
关键词： 共聚焦激光扫描显微镜 皮肤肿瘤 色素性疾病 诊断 -
共聚焦激光扫描显微镜技术在医学研究中的应用
共聚焦激光扫描显微镜(Confocal Laser ScanningMicroscope,CLSM)是上世纪80年代发展起来的一种先进的细胞生物学分析仪器,是一项具有划时代意义的高科技新产品,是近代生物医学图像分析仪器重要的发展之一,有细胞"CT"之称.它是在荧光显微镜成像基础上加装了激光扫描装置,利用计算机进行图像处理,使用紫外线或可见光激发荧光探针,从而得到组织内部微细结构的荧光图像,在亚细胞水平上观察诸如Ca2+,pH值、膜电位等生理信号及细胞形态改变,成为形态学、分子细胞生物学、神经科学、药理学、遗传学等领域中新一代较有力的研究工具.
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开放实验室高端仪器虚拟仿真实验构建与应用
开放实验室高端仪器在基础医学综合性实验课程以及大学生创新实验中的应用日益广泛.因此,仪器使用培训成为开放实验室教学工作中很重要的一部分,而虚拟仿真实验在其中能发挥积极的作用.结合武汉大学基础医学实验教学中心开放实验室共聚焦激光扫描显微镜虚拟仿真实验的构建和教学实践,探讨此类虚拟仿真实验的设计、脚本撰写和制作相关问题以及其在开放实验室教学中的应用.师生共建、虚实结合应用以及即时反馈和完善是保障虚拟仿真实验教学效果的重要环节.
关键词： 实验教学 虚拟仿真实验 共聚焦激光扫描显微镜 -
共聚焦显微镜观测鼠脑损伤后早期的微循环变化
目的: 对鼠脑皮质微循环损伤前、后的变化进行活体的、动态的观测.方法 :将戊巴比妥麻醉下的10只大鼠制成开放性骨窗模型,保持硬脑膜完整.荧光素标记血浆后,应用共聚焦激光扫描显微镜观测血管口径、形状及血流速率在脑损伤前后的变化.结果:伤后10 s即出现血管痉挛,随后管径逐渐增粗,30 min后基本恢复伤前水平.伤后10 s血流量降至低(下降33.6%),以后有所回升,但始终低于伤前水平,处于缺血状态.结论:损伤后早期降颅压对改善微循环具有重要的临床意义.
关键词： 共聚焦激光扫描显微镜 大鼠 脑损伤 微循环
