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B1和B10细胞在溃疡性结肠炎患者外周血中的表达及黄芩苷对其体外表达的影响
目的:检测与分析溃疡性结肠炎(UC)患者外周血CD19+ CD5+B细胞(B1)及CD19+ CD5+ CD1d+B细胞(B1o)的比例,探讨黄芩苷对其体外表达的影响.方法:收集并分离活动期UC患者其外周血单核细胞(PBMC),以年龄性别相匹配的正常人PBMC为对照,经脂多糖(LPS)+黄芩苷体外刺激淋巴细胞,流式细胞术检测刺激前后外周血B1和B10细胞比例.结果:UC患者外周血中B1和B10细胞占CD19+B细胞的比例(4.83％±3.26％,0.97％±0.48％)低于正常对照组(16.16％±11.89％,5.99％±3.59％),P＜0.05,LPS+黄芩苷体外刺激能上调UC患者B10淋巴细胞的比例(P=0.02),但对正常人该淋巴细胞亚群未见明显影响.结论:B1和B10细胞可能在UC病程中发挥免疫调节作用,黄芩苷可能对UC患者的B10细胞有上调作用.
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江苏省2015年柯萨奇病毒A组16型VP1基因特征
分析江苏省2015年柯萨奇病毒A组16型(CA16)分离株VP1基因特征.对江苏省2015年分离得到的20株CA16毒株进行VP1区基因扩增和扩增产物测序,并应用Mega 6.0和DNA Star软件对其构建基因进化树并分析核苷酸和氨基酸同源性.20株CA16分离株VP1核苷酸和氨基酸同源性分别为88.2％～100.0％和98.0％～100.0％;与A型国际原型株G10核苷酸和氨基酸同源性分别为75.3％～77.4％和90.6％～92.3％;与B1型代表株核苷酸和氨基酸同源性分别为88.3％～98.4％和96.3％～100.0％;与B2型代表株核苷酸和氨基酸同源性分别为88.4％～90.8％和96.6％～100.0％.20株CA16分离株基因亚型均为B1型,其中19株为B1b型,1株为B1a型,并有1个B1b传播链.江苏省2015年CA16分离株属于B1基因亚型,存在B1a和B1b两个进化分支共同进化和循环,其中以B1b为绝对优势流行株.
关键词： 手足口病 柯萨奇病毒A组16型 VP1 B1 -
脓毒症患者血清高迁移率族蛋白B1水平及与临床相关指标的关系
目的 检测脓毒症患者血清高迁移率族蛋白(HMGB1)水平,探讨HMGB1与急性病生理学和长期健康评价(APACHEⅡ评分)及多种临床参数的关系.方法 收集2009年5月至2009年12月天津医科大学第二医院重症监护病房(ICU)收治的脓毒症患者发病24小时内临床及实验室参数,计算APACHEⅡ评分,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法 检测患者发病24小时内及对照组血清HMGBl水平.结果 对照组HMGB1(44.8±16.2)μg/L,脓毒症组HMGB1(83.7±25.6)μg/L,严重脓毒症组HMGB1(146.0±32.8)μg/L,3组比较差异有统计学意义(P<0.05).HMGB1水平与APACHEⅡ评分呈正相关(r=0.318,P<0.05),与其他临床参数未显示相关性(P>0.05).APACHEⅡ评分、多器官功能障碍综合征评分、血小板为影响预后的危险因素,而血清HMGB1水平不是影响预后的独立危险因素.结论 脓毒症患者在发病24小时内HMGB1水平明显升高,在一定程度上反映脓毒症病情严重程度,但尚不能作为预测脓毒症预后的独立危险因子.
关键词： 脓毒症 高迁移率族蛋白 B1 急性病生理学和长期健康评价 -
依帕司他片治疗糖尿病周围神经病变75例疗效观察
糖尿病周围神经病变(DNP)是糖尿病常见的慢性并发症之一,其发病率可达90%以上[1],主要表现为四肢末梢及躯干部位有烧样痛、电击或刀刺样痛、麻木、感觉过敏和深部肌肉痛等,以下肢多见,夜间加紧.严重影响糖尿病患者的生活质量,目前治疗仍是临床难题之一.我们予依帕司他片治疗DNP 75例 ,取得较满意的效果,现报道如下.
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幽门螺杆菌VacA蛋白体外诱导胃上皮AGS细胞内HMGB1的表达
目的 探讨幽门螺杆菌(HP)感染的胃上皮AGS细胞内高迁移率族蛋白B1(high mobbility group box 1,HMGB1)的表达.方法 Hpl1638(CagA+,VacA+)和Hp1638突变株(Hp1638M,CagA+,VacA-)的提取液与AGS细胞共同温育后,收集细胞及培养上清液.裂解AGS细胞,western blot分析AGS细胞内HMGB1的表达,ELISA法检测培养上清液中HMGB1的水平.结果 HpLL638提取液刺激AGS细胞后HMGB1表达量为(123.33±25.2)μg/mL,明显高于Hpll638M提取液刺激后的(46.67±7.23)μg/mL(q=8.49,P＜0.01).Hp11638和Hp11638M提取液刺激的AGS细胞培养上清液中HMGB1的水平分别为(115.59±16.62)和(48.32±6.30)ng/mL,差异有统计学意义(q=12.25,P＜0.01).结论 在胃炎发生、发展过程中,VacA蛋白是刺激细胞中HMGB1高表达的主要因子.
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细胞周期素B1在大肠癌中的表达及意义
目的为探讨细胞周期素B1(cyclin B1)在大肠癌中的表达、临床意义.方法收集80例手术切除的大肠癌标本,同时取距癌灶5cm以外的癌旁组织及10cm以外的正常组织,采用免疫组化SP法检测癌组织、癌旁组织及正常组织中cyclinB1的表达.结果80例标本癌组织中cyclin B1过表达率为55.0%;癌旁组织为2.5%;正常大肠组织中未见cyclin B1过表达,癌组织中cyclin B1的过表达率与正常组织及癌旁组织有显著性差异(P＜0.01).cyclin B1的过表达与患者年龄、肿瘤大小、组织学类型之间存在显著性差异(P＜0.05).结论cyclin B1的过表达可能是大肠癌发生的早期事件,针对抑制cyclin B1表达的措施可能成为治疗早期大肠癌的重要手段之一.
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二烯丙基二硫诱导人胃癌细胞G2/M期阻滞中p-CDK1、cyclin B1和p21WAF1蛋白的表达
二烯丙基二硫(diallyl disulfide, DADS)是大蒜中提取的一种低分子量的脂溶性成分,也是大蒜中的主要有效成分,对结肠癌、乳腺癌、肝癌、肺癌、膀胱癌、前列腺癌和白血病等多种肿瘤均有明显的抑制作用.本实验室以前研究表明[1],DADS对人类白血病细胞HL60有诱导分化作用,对体外[2]和体内[3]的人胃癌MGC803细胞均有生长抑制作用、G2/M期阻滞作用.对体内的人胃癌细胞有诱导分化作用[3],对体外的人胃癌细胞有诱导凋亡作用[4].
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星形细胞瘤复发前后cyclinA、cyclin B1表达及意义
目的探讨细胞周期蛋白(cyclin)A、B1在星形细胞瘤复发前后的表达及意义.方法采用免疫组织化学SP法对12对复发星形细胞瘤石蜡标本中cyclin A、cyclin B1表达进行检测.结果 cyclin A、cyclin B1在原发和复发星形细胞瘤中均有表达,原发星形细胞瘤的cyclin A表达明显小于复发者,其差异有显著意义(P=0.0085),复发后病理级别升高者cyclin A表达面积差值明显高于未升高者(P=0.0185);原发星形细胞瘤的cyclin B1表达低于复发者,其差异有显著意义(P=0.0236),复发后病理级别升高者cyclin B1表达面积差值明显高于未升高者(P=0.0309).结论 cyclin A、cyclin B1的表达与星形细胞瘤的恶性进程和复发密切相关,进一步研究cyclin A、cyclin B1水平的改变机制,有助于防治星形细胞瘤的复发.
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G0/G1期异时相Cyclin B1的表达对细胞凋亡的影响
目的 研究G0/G1期异时相细胞周期素B1(Cyclin B1)的大量表达对细胞凋亡的影响.方法 首先构建了四环素可诱导表达Cyclin B1的单克隆细胞株,其次,筛选出能大程度阻滞细胞于G0/G1期的胸腺嘧啶核苷(Thymidine)浓度,后,在阻滞的时间内加入四环素诱导Cyclin B1表达,并用免疫印迹和流式细胞仪检测证实后,用膜联蛋白/碘化丙啶(Annexin Ⅴ/PI)双染法和API法检测细胞凋亡.结果 终浓度为5 mmol/L的胸腺嘧啶核苷能阻滞单克隆细胞株在G0/G1期,并至少维持48 h;在细胞同步化期间加四环素诱导后,Cyclin B1表达增加,并且G0/G1期特异性细胞凋亡增加.结论 G0/G1期异时相Cyclin B1的表达能诱导细胞凋亡.
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柱后碘衍生法荧光检测黄曲霉毒素的方法探讨
目的：优化柱后碘衍生法检测中药材中黄曲霉毒素G2，G1，B2，B1的含量。方法样品经甲醇－水（70：30）提取后，通过免疫亲和柱净化、柱后碘衍生高效液相色谱－荧光检测器测定。结果在优化条件下，黄曲霉毒素G2、G1、B2、Bl的检出限分别为0.20，0.05，0.15，0.02μg/kg，回收率分别为78.63%，81.75%，79.47%，80.70%。结论该方法简便快速，灵敏度高，重复性好，可满足中药材中黄曲霉毒素含量检测的需要。
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hnRNPB1基因的RNA干扰抑制肺癌细胞A549增殖研究
目的 探讨特异性小分子干扰(small interference,siRNA)抑制肺癌A549细胞核内不均一核糖蛋白B1(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein,hnRNPB1)基因的表达后,对A549细胞增殖的影响. 方法构建hnRNPB1特异性的siRNA真核细胞表达载体并转染人肺癌细胞株A549,观察重组载体分别在第1、4及6周对A549细胞hnRNPB1基因的干扰效果以及对肺癌细胞周期及凋亡的影响.结果 特异性siRNA真核表达可显著抑制肺癌细胞hnRNPB1基因的表达,使hnRNPB1 mRNA的表达减少46%～73%,蛋白表达减少77.69%～83.04%,作用时间至少可维持克隆形成后4周,同时,hnRNPB1基因表达下调抑制了A549细胞在体外的增殖,促进了肺癌细胞的凋亡.结论 特异性siRNA能特异、高效地抑制肺癌细胞株A549细胞hnRNPB1基因的表达,RNAi可能为肺癌的基因治疗提供新策略.
关键词： 肺癌 核内不均一核糖核蛋白 B1 小分子干扰 RNA -
神经生长因子对Aβ1-40诱导海马神经元周期蛋白异常表达的影响
为了探讨神经生长因子(NGF)对β-淀粉样蛋白诱导海马神经元周期蛋白表达的影响.本研究取新生3 d内大鼠海马细胞行体外培养7 d,分别在加入Aβ1-40前后加入NGF和等体积培养液,采用β-tubulin、ChAT免疫组化、cyclin免疫荧光进行检测.β-tubulin免疫组化证实所培养的为特异性结构完整的海马神经元;cyclin免疫荧光检测、ChAT免疫组化显示Aβ1-40导致cyclin A、cyclin B1水平显著增高及ChAT免疫阳性细胞明显减少;而给予NGF可在不同程度上降低cyclin A、cyclin B1蛋白水平,增加ChAT免疫阳性细胞.结果提示,NGF能有效地阻止和轻度地修复Aβ1-40诱导的海马细胞损伤,对Aβ引起的海马神经元内异常表达细胞周期蛋白有一定的抑制作用.
