首页 > 文献资料
-
艾灸对克罗恩病大鼠结肠肿瘤坏死因子-α含量及艾灸鼠结肠上清液对培养的结肠上皮细胞内紧密连接蛋白及其基因表达的影响
目的:通过观察温和灸、隔药灸对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)体外诱导大鼠结肠上皮细胞紧密连接--咬合蛋白(occludin)、闭合蛋白1(claudin-1)和闭锁蛋白1(zonula occludens-1,ZO-1)及其基因表达的影响,探讨艾灸对肠上皮屏障损伤的修复/保护机制.方法:将SD大鼠随机分成正常组、模型组、温和灸组、隔药灸组和西药组,各12只.采用三硝基苯磺酸制备克罗恩病(Crohn's Disease,CD)大鼠模型.温和灸组与隔药灸组选择"天枢""气海"穴分别予以温和灸和隔药灸,每日1次,共治疗14次;西药组以柳氮磺胺吡嘧溶液灌胃,每日2次,共14次.治疗结束后剖取各CD组大鼠结肠,制备结肠黏膜上清液;正常组纯化并培养结肠上皮细胞建立肠上皮屏障体外模型.将各CD组结肠黏膜上清液分别与正常大鼠结肠上皮细胞混合培养1周,采用ELISA法检测各组结肠黏膜上清液TNF-α含量,Western blot和荧光定量PCR法观察其对CD大鼠体外结肠上皮紧密连接occludin、claudin-1和ZO-1及其mRNA表达的影响.结果:CD模型组较正常组大鼠结肠黏膜上清液中TNF-α含量有显著增高(P<0.01),温和灸、隔药灸和柳氮磺胺吡嘧治疗后TNF-α含量显著降低(均P<0.01),其中温和灸、隔药灸组优于西药组(均P<0.05);与此同时,温和灸、隔药灸和西药组结肠黏膜TNF-α上清液体外诱导大鼠结肠上皮紧密连接occludin、claudin-1和ZO-1及其mRNA表达较模型组有显著增高(P<0.01,P<0.05),且隔药灸、温和灸两组也优于西药组(均P<0.05).结论:艾灸(隔药灸、温和灸)可能是通过降低CD大鼠结肠黏膜异常增高的TNF-α,进而促进或调节结肠上皮紧密连接.ccludin,claudin 1和ZO-1及其mRNA表达,达到修复/保护肠上皮屏障损伤的目的.
-
缺血性脑卒中对犬肠屏障功能的影响
目的 研究缺血性脑卒中对犬肠黏膜屏障功能的影响以及细胞凋亡和紧密连接蛋白在其中的可能机制.方法 杂犬20只,按随机数字表法分为梗死组和假手术组,每组10只.梗死组采用双硅柱置入法制作缺血性脑卒中模型,假手术组动物不置入栓子,其他同梗死组.光镜下观察肠黏膜形态;免疫组织化学法分析肠黏膜紧密连接蛋白闭锁蛋白和闭锁小带蛋白1的表达;采用TdT介导的dUTP缺口末端标记技术检测肠上皮细胞凋亡.结果 梗死组动物均形成脑梗死.和假手术组相比,梗死组紧密连接蛋白闭锁蛋白和闭锁小带蛋白1表达均明显降低(闭锁蛋白平均光密度值:0.20±0.01比0.22±0.01,P=0.007;闭锁小带蛋白1平均光密度值:0.20±0.01比0.22±0.02,P=0.008);梗死组凋亡指数明显增高(29.04 ±3.79比6.44±1.24,P=0.002);闭锁蛋白与闭锁小带蛋白1呈正相关(R=0.71,P=0.02);凋亡指数与闭锁蛋白和闭锁小带蛋白1均呈负相关(R=-0.91,P=0.00;R=-0.77,P=0.01).光镜下梗死组存在小肠病理损伤,假手术组小肠结构正常.结论 缺血性脑卒中时,肠道屏障功能发生损害.紧密连接蛋白闭锁蛋白和闭锁小带蛋白1表达降低,从而导致紧密连接破坏.肠黏膜细胞凋亡上调是肠屏障障碍的细胞学基础,凋亡是缺血性脑卒中时肠上皮细胞死亡的重要形式.
-
中药清肠栓对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜紧密连接蛋白ZO-1、occludin的影响
目的:探讨复方中药清肠栓对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的UC大鼠结肠黏膜上皮紧密连接相关蛋白-l(ZO-1)、闭锁蛋白(occludin)的修复作用.方法:清洁级♂SD大鼠36只,随机分为正常组、模型组、SASP组、清肠栓高、中、低剂量组,每组6只.选用TNBS诱导的UC大鼠模型.采用免疫荧光的方法观察各组大鼠结肠黏膜上皮ZO-1、occludin和F-actin的表达,并运用图像分析软件进行平均光密度测定,考察了中药清肠栓对UC大鼠结肠黏膜上皮屏障的修复作用,结果:UC发病会对结肠紧密连接和细胞骨架系统造成严重的损害,模型组大鼠结肠黏膜上皮ZO-1、occludin几乎完全被破坏,不规则的分散在细胞外围,荧光染色暗淡.图像分析测其平均光密度较正常组明显降低(1.802±1.304 vs 3.145±0.110; 0.568±0.063 vs l.538±0.220,均P＜0.01).清肠栓能不同程度减轻UC对紧密连接的破坏,使上述两种蛋白表达升高(P＜0.01),从而保护肠道屏障功能,抑制结肠通透性的增加.结论:清肠栓能有效地调节肠黏膜屏障功能,有效抑制UC大鼠结肠通透性的升高,改善肠黏膜屏障功能,促进溃疡愈合.
关键词： 关键词:清肠栓 溃疡性结肠炎 紧密连接相关蛋白-1 闭锁蛋白 -
细菌感染对大鼠呼吸道上皮细胞紧密连接蛋白的影响
肺部细菌感染发生的关键步骤包括细菌感染对小气道和肺泡上皮细胞的损伤作用.其中细菌感染导致小气道上皮细胞紧密连接破坏是较早发生的重要事件.现有实验证实 ,有多种蛋白质分子参与紧密连接复合物的构成,重要的有ZO-1和跨膜蛋白-闭锁蛋白(occludin)等[1].因此,我们探讨肺炎克雷白杆菌感染引起细支气管和肺泡上皮细胞ZO-1和occludin蛋白表达变化规律,以阐明肺部细菌感染发生的早期机制.
-
紧密连接蛋白Occludin在鼻息肉中的表达及调节
目的 探讨紧密连接蛋白Occludin在鼻息肉发病中的作用.方法 采用免疫组化和实时荧光定量聚合酶链反应检测鼻息肉组织(n=20)和健康对照组钩突组织(n=15)中紧密连接蛋白Claudin-1、Occludin及ZO-1蛋白及其mRNA的表达.并通过离体细胞培养模型检测白细胞介素(interleukin,IL)6、IL-13、IL-17、γ干扰素(interferon-y,IFN-γ)、转化生长因子β(transforming growth factor-β、TGF-β)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激对鼻黏膜上皮细胞表达Occludin mRNA和蛋白的调节作用.以SPSS 16.0软件进行统计学分析.结果 紧密连接蛋白Claudin-1、Occludin和ZO-1在鼻息肉与对照组钩突组织中均有表达,主要表达部位在鼻黏膜上皮细胞的细胞膜与细胞质.鼻息肉组Claudin-1、Occludin及ZO-1的平均吸光度值分别为0.187±0.076、0.172 ±0.109、0.098±0.035,均较对照组的0.312 ±0.101、0.220±0.069、0.233±0.093明显减少,差异有统计学意义(t值分别为9.345、3.301、13.323,P值均＜0.01).鼻息肉组织中Occludin mRNA相对表达量为0.000 117 ±0.000 035,低于对照组的0.000464±0.000 134,差异具有统计学意义(Z=-5.0,P＜0.05),而Claudin-1和ZO-1 mRNA在两组之间表达差异无统计学意义(P值均＞0.05).IL-13、IL-17和IFN-γ等促炎因子刺激鼻黏膜上皮细胞后,Occludin mRNA相对表达量分别为0.631±0.039、0.581±0.029、0.648±0.040,与未刺激对照组相比,差异有统计学意义(f值分别为16.299、24.669、14.995,P值均＜0.05).蛋白免疫印迹结果显示上述因子刺激组与未刺激对照组相比Occludin蛋白表达升高,差异有统计学意义(t值分别为9.880、8.442、7.310,P值均＜0.05).结论 紧密连接蛋白Occludin表达降低可能是鼻息肉发生的原因之一.
-
闭锁蛋白和闭锁小带蛋白在慢性胃炎组织中的表达和意义
背景:慢性胃炎发病的过程中,生物因子的改变可影响胃黏膜的生理屏障,增加细胞间连接的损伤风险,导致黏膜上皮屏障破坏.目的:探讨闭锁蛋白(occludin)、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)在慢性胃炎组织中的表达和意义.方法:选取2014年10月—2017年10月于孝昌县第一人民医院就诊的慢性胃炎患者82例,根据内镜活检病理结果分为慢性非萎缩性胃炎(CNAG)组和慢性萎缩性胃炎(CAG)组,选取同期健康志愿者40名作为正常对照组.采用免疫组化方法检测胃黏膜组织occludin、ZO-1表达.幽门螺杆菌(Hp)阳性患者给予 Hp根除治疗,转阴者复查occludin、ZO-1表达.结果:CNAG、CAG组occludin、ZO-1蛋白阳性表达率显著低于正常对照组(P＜0.05);CNAG组occludin、ZO-1蛋白阳性表达率显著高于CAG组(P＜0.05).CNAG Hp阳性组occludin、ZO-1蛋白阳性表达率显著低于Hp阴性组(P＜0.05);CAG Hp阳性组ZO-1蛋白阳性表达率显著低于Hp阴性组(P＜0.05).Occludin、ZO-1蛋白表达与胃黏膜炎症活动度呈线性趋势关系(P＜0.05),随着炎症活动度的增加,两者表达显著减弱.CNAG Hp阳性患者转阴后,occludin、ZO-1蛋白阳性表达率较根除治疗前显著升高(P＜0.05).结论:Occludin、ZO-1在慢性胃炎组织尤其是CAG中表达减弱.两者表达与Hp感染以及胃炎活动度之间存在一定联系.
-
肠上皮细胞紧密连接的生物学功能及在肠屏障中的作用
紧密连接是肠上皮细胞间的主要连接方式,对维持上皮细胞极性及调节肠屏障的通透性发挥着重要的作用.因此,维持肠上皮的完整性对于保护肠道屏障功能、防止细菌内毒素及毒性大分子物质进入体内具有重要意义.作者就紧密连接在肠上皮中的生物学功能、分子调控机制及影响因素作一综述,旨在为改善肠屏障功能提供有益的帮助.
-
紧密连接蛋白occludin在机械通气诱发肺损伤中作用的研究进展
背景 急性肺损伤(acute lung injury,ALI)/急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)是指由心源性以外的各种肺内外致病因素所导致的急性、进行性呼吸衰竭.其发病机制错综复杂,迄今为止尚未完全阐明.机械通气诱发肺损伤(ventilation induced lung injury,VILI)是其中重要的一类,它是指应用呼吸机过程中由于机械通气诸多因素和肺部原发病共同作用导致的肺组织损伤.肺损伤过程中肺泡膜的完整性破坏及通透性的改变是根本原因,细胞连接维持肺泡膜完整性和通透性,它主要包括黏附连接(adherent junction,AJ)和紧密连接(tight junction,TJ),其中TJ在维持肺泡黏膜上皮机械屏障和肺泡膜通透性中起着更加重要的作用,TJ蛋白主要包括ZO-1、跨膜蛋白(claudin)和闭锁蛋白(occludin)等. 目的 通过对TJ蛋白occludin在机械通气诱发肺损伤中作用的研究来指导临床实践. 内容 探讨TJ蛋白occludin在机械通气诱发肺损伤中的作用. 趋向 明确连接蛋白在VILI中的作用,为临床上早期预防与治疗VILI提供理论依据.
-
微波辐射对大鼠睾丸闭锁蛋白和连接黏附分子-1表达的影响
目的:探讨微波辐射后大鼠血睾屏障紧密连接闭锁蛋白(oechdin)及连接黏附分子-1(JAM-1)表达的改变及意义.方法:80只雄性Wistar大鼠经平均功率密度为0、10、30、100mW/cm~2微波辐射5min,于辐射后6h,1、3、7、14 d,采用Western印迹和图像分析技术检测闭锁蛋白和JAM-1蛋白表达的动态变化.结果:10、30和100 mW/cm~2微波辐射后分别在3～7 d、6 h～7 d和6 h～14 d闭锁蛋白表达明显下调(P＜0.05),而JAM-1蛋白分别于辐射后3～7 d、1～7 d和1～14 d表达亦明显下调(P＜0.05). 结论:闭锁蛋白及JAM-1蛋白表达减少可能在微波辐射致血睾屏障损伤中发挥重要作用.
-
麝香配伍乳香对大鼠前列腺上皮细胞紧密连接结构相关蛋白表达的影响
目的:探讨麝香-乳香配伍处理对正常及慢性前列腺炎模型大鼠前列腺上皮细胞紧密连接结构相关蛋白表达的影响. 方法:80只雄性SD大鼠随机分为8组:正常空白对照组、正常麝香-乳香组、正常麝香组、正常乳香组、模型空白组、模型麝香-乳香组、模型麝香组、模型乳香组.制备慢性前列腺炎大鼠模型,造模60 d时根据组别分别给予麝香0.021 g/(kg·d)、乳香1.05g/(kg·d)剂量灌胃,麝香-乳香组给予联合剂量,空白组给予生理盐水灌胃.各组别连续灌胃3d,处死大鼠,取前列腺组织,固定后以免疫组化法检测大鼠前列腺上皮屏障紧密连接功能相关蛋白紧密连接蛋白1、紧密连接蛋白3、闭锁蛋白、胞质附着蛋白1(ZO-1)的表达情况. 结果:在病理状态下,仅紧密连接蛋白1的表达增高有统计学意义.麝香、乳香处理后,在生理/病理状态下对4种蛋白的调节作用不同:生理状态下,单用麝香(824.6±393.3)、乳香(982.0 ±334.0)或配伍处理(1 088.1±640.2)均可大幅度增高紧密连接蛋白1的表达(P ＜0.05,P＜0.01);对于紧密连接蛋白3,单用乳香表达上调(1 009.5 ±243.6,P＜0.05),单用麝香(597.5 ±80.7)差异无统计学意义,配伍麝香(678.4 ±255.1)可降低乳香上调表达作用;单用麝香(693.0±424.8)、乳香(732.1 ±302.0)或配伍处理(560.2±202.3)对闭锁蛋白表达影响差异无统计学意义;单用麝香(290.0±166.8)、乳香(419.7±108.1)对ZO-1表达影响差异无统计学意义,配伍处理后表达明显下调(197.7 ±98.2,P＜0.05).慢性前列腺炎病理状态下,大鼠前列腺组织紧密连接蛋白1(823.0±100.1)、闭锁蛋白(1 160.0±32.2)表达显著增高(P＜0.01,P＜0.05);单用麝香(764.9±179.0)、乳香(468.4±220.4)或配伍(335.1 ±204.0)使用可下调紧密连接蛋白1表达(P＜0.05);单用麝香(700.1 ±223.7)或乳香(744.6 ±94.5)可上调紧密连接蛋白3表达(P＜0.05);单用麝香(749.6±321.7)、乳香(615.0±221.0)或配伍处理(505.8±523.7)均可下调闭锁蛋白表达;单用乳香可上调ZO-1表达(443.2±144.9),与麝香配伍处理后表达下调(213.5±24.9),与单用乳香组比较差异有统计学意义(P＜0.05). 结论:麝香、乳香对生理/病理状态下前列腺上皮屏障结构紧密连接相关蛋白的调节作用具有选择性和双向性,主要通过ZO-1蛋白的下调实现促通透性作用,而通过调节紧密连接蛋白1、紧密连接蛋白3、闭锁蛋白表达以维持结构稳定性.
-
Sirt1在正常人表皮中的表达及其对HaCaT细胞连接蛋白表达的影响
目的:研究Sirt1在正常人皮肤中的表达,明确Sirt1的表达与活化对皮肤角质形成细胞紧密连接蛋白、粘着连接蛋白的影响.方法:利用免疫组化技术检测人正常皮肤中Sirt1的表达与定位;以皮肤角质形成细胞系HaCaT细胞为研究对象,应用Sirt1的特异性激活剂及抑制剂诱导Sirt1的异常表达与活化,经RT-PCR技术检测Sirt1激活剂白藜芦醇、抑制剂烟酰胺对Sirt1基因表达水平的影响;采用Western blotting技术检测相同条件下Sirt1、紧密连接蛋白、粘着连接蛋白的蛋白表达水平.结果:Sirt1在人体正常皮肤组织中有显著表达,主要分布于表皮角质形成细胞的胞质中,在核内也有少量分布.与空白对照组相比,白藜芦醇可显著增加HaCaT细胞Sirt1的转录和翻译水平,Sirt1的表达与活化可明显降低HaCaT细胞紧密连接蛋白和粘着连接蛋白的表达水平.结论:Sirt1可影响HaCaT细胞间连接蛋白的表达.
-
occludin在人宫颈癌中的表达及其临床意义
目的:探讨紧密连接蛋白occludin的表达与人宫颈癌发生、发展、转移和预后的关系.方法:原位杂交检测occludin mRNA的表达;免疫组织化学和Western blot检测occludin的表达,并结合44例患者的临床资料进行分析.结果:occludin mRNA的表达在宫颈癌的大体类型和分化程度间差异均有统计学意义(P<0.05);occludin的表达在宫颈癌分化程度间差异有统计学意义(P<0.05);宫颈癌旁组织的occludin表达水平高于宫颈癌组织(P<0.05);宫颈癌组织与宫颈癌旁组织及正常宫颈组织的occludin表达水平差异均有统计学意义(P<0.01);随访满5年和满3年存活患者的occludin mRNA 和满3年存活患者的occludin表达水平均高于病死患者(P<0.05).结论:occludin在人宫颈癌组织中低表达,其表达与宫颈癌分化程度及患者生存期皆有一定关系,可作为宫颈癌诊断和预后判断的新指标.
-
人参皂苷Rg3对人结肠癌细胞株SW480增殖的影响及其作用机制
目的 观察人参皂苷Rg3对人结肠癌细胞株SW480增殖的影响,并探讨其可能作用机制.方法 取对数生长期SW480细胞,分别加入含160、80、40、0μmol/L人参皂苷Rg3的储备液(分别计为A、B、C、D组)培养24 h,采用MTT法检测人参皂苷Rg3对SW480细胞增殖活性(OD值)的影响,倒置显微镜观察人参皂苷Rg3诱导SW480细胞凋亡形态学改变,流式细胞术检测SW480细胞凋亡率,RT-PCR法检测细胞间黏附分子1(ICAM-1)、闭锁蛋白(Occludin) mRNA,Western blotting法检测ICAM-1、Occludin蛋白.结果 与D组比较,A、B、C组细胞OD值下降,凋亡率增加,ICAM-1 mRNA、蛋白表达降低,Occludin mRNA、蛋白表达升高(P均＜0.05).结论 人参皂苷Rg3可抑制SW480细胞增殖,促进其凋亡,机制可能与ICAM-1表达下调、Occludin表达上调有关.
关键词： 人参皂苷Rg3 结肠癌细胞株SW480 细胞间黏附分子1 闭锁蛋白 -
TGF-β1通过p38MAPK信号通路调节大鼠睾丸支持细胞闭锁蛋白表达的研究
目的 探讨TGF-β1介导的p38MAPK信号通路对大鼠睾丸支持细胞闭锁蛋白表达的作用及意义.方法 体外分离培养大鼠睾丸支持细胞,随机分为空白对照组、刺激组、受体阻滞剂组、受体阻滞剂+刺激组、抑制因子组和抑制因子+刺激组6组;测定各组细胞增殖情况、p38MAPK mRNA和闭锁mRNA的表达水平以及各组细胞闭锁蛋白和P-p38MAPK蛋白表达水平.结果 组间比较差异有统计学意义 (F=4.86,P＜0.05).刺激组细胞增殖活性升高,差异有统计学意义 (P＜0.05) ;刺激组闭锁蛋白mRNA表达比空白对照组降低,p38MAPK mRNA表达升高;抑制因子组p38MAPK mRNA表达降低,差异均有统计学意义 (P＜0.05).受体阻滞剂+刺激组闭锁蛋白mRNA表达比刺激组升高,p38MAPK mRNA表达降低;抑制因子+刺激组闭锁蛋白mRNA表达升高,p38MAPK mRNA表达降低,差异均有统计学意义 (P＜0.05).刺激组闭锁蛋白表达比对照组降低,P-p38MAPK蛋白表达升高;抑制因子组P-p38MAPK蛋白表达降低,差异有统计学意义 (P＜0.05).受体阻滞剂+刺激组闭锁蛋白表达比刺激组升高,P-p38MAPK蛋白表达降低;抑制因子+刺激组闭锁蛋白表达升高,P-p38MAPK蛋白表达降低差异均有统计学意义 (P＜0.05).结论 TGF-β1可能通过p38MAPK信号通路调控大鼠睾丸支持细胞闭锁蛋白的表达.
关键词： TGF-β1 p38MAPK信号通路 闭锁蛋白 -
紧密连接蛋白闭锁蛋白在大肠癌及大肠腺瘤组织的表达
目的 检测紧密连接蛋白闭锁蛋白(Occludin)在正常大肠黏膜、不同病理分型的大肠腺瘤和不同分期的大肠癌组织的表达,探讨其在大肠癌变过程中不同阶段表达的意义.方法 收集内镜下切除的不同病理分型的大肠腺瘤共80例,其中包括管状腺瘤30例,管状绒毛状腺瘤30例,绒毛状腺瘤20例;以及普通外科手术切除的大肠癌组织60例和癌旁正常组织40例,应用免疫组织化学方法检测组织中Occludin蛋白的表达.结果 Occludin在正常大肠黏膜组、大肠腺瘤组、大肠癌组中表达差异有统计学意义(P=0.003),其阳性表达率分别为95.0％、88.7％、71.7％.并且在大肠癌组织中的表达与组织分化程度有关.在管状腺瘤、混合性腺瘤、绒毛状腺瘤中其阳性表达率分别为90.0％、86.7％、90.0％,差异无统计学意义(P=0.901).结论 Occludin在大肠癌组织中表达降低,其表达抑制肿瘤的发生、发展.
-
上皮性钙黏蛋白与闭锁蛋白在慢性鼻-鼻窦炎上皮的表达及意义
目的:探讨上皮性屏障分子E-钙黏蛋白和闭锁蛋白在鼻黏膜上皮中的表达情况和意义.方法:纳入对照组下鼻甲黏膜13例,嗜酸性鼻息肉10例,非嗜酸性鼻息肉14例,单纯性慢性鼻窦炎11例.利用免疫组织化学方法检测屏障分子E-钙黏蛋白和闭锁蛋白在不同类型慢性鼻窦炎上皮的表达情况.结果:伴和不伴息肉的慢性鼻鼻窦炎各组和对照组的E-钙黏蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05),在各组中E-钙黏蛋白表达在黏膜上皮和腺体上皮.而闭锁蛋白主要表达在上皮细胞顶端的外侧,在对照组表达连续,而在慢性鼻窦炎各组上皮细胞顶端闭锁蛋白的表达出现中断、不连续的现象,表达下调.结论:上皮屏障分子E-钙黏蛋白和闭锁蛋白在不同类型慢性鼻-鼻窦炎中的表达情况,提示在鼻黏膜慢性炎症过程中,细胞间黏附分子的表达无明显缺失,而主要紧密连接蛋白在慢性炎症的黏膜上皮表达下调,在上皮细胞的顶端表达中断,引起上皮的屏障功能异常,因而病原微生物更容易侵入,引起鼻黏膜不同程度的炎症,这可能为鼻窦炎发病的机制之一.
-
一种跨膜蛋白--闭锁蛋白的研究现状
紧密连接存在于上皮细胞的连接复合体中,有屏障功能和保持细胞极性的作用,已证实闭锁蛋白、Claudin和JAM位于紧密连接处,其中闭锁蛋白在维持紧密连接的功能方面有重要作用.闭锁蛋白与质膜下蛋白有密切的联系,其功能受到多方面因素的调控.
-
不同胆汁引流方式对梗阻性黄疸大鼠肠黏膜屏障功能的影响及机制
目的:探讨不同胆汁引流方式对梗阻性黄疸(OJ)大鼠肠黏膜功能的影响及其机制.方法:将60只SD大鼠采用胆总管结扎法制作OJ模型,1周后随机均分为无引流组(不行胆汁引流术),内引流组(行胆汁内引流术)和外引流组(行胆汁外引流术),引流时间1周.以20只假手术大鼠为对照组,实验共2周,结束时分别用ELISA法和Western blot法检测各组血清内毒素水平和小肠黏膜组织闭锁蛋白(occludin)及闭锁小带蛋白1(ZO-1)的表达,并观察小肠黏膜组织形态学改变.结果:大鼠造模后出现明显的OJ表现,二次手术后,内引流组大鼠一般情况明显好于无引流组和外引流组.无引流组和外引流组OJ大鼠血清内毒素水平明显升高,与对照组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.01),而无引流组与外引流组间内毒素水平差异无统计学意义(P＞0.05)；内引流组OJ大鼠血清内毒素水平较无引流组和外引流组明显下降(均P＜0.01),与对照组水平无统计学差异(P＞0.05).与对照组比较,无引流组和外引流组OJ大鼠小肠黏膜组织occludin及ZO-1蛋白表达均明显降低(均P＜0.01),且外引流组两者表达水平降低较无引流组更为明显(均P＜0.01)；内引流组OJ大鼠的occludin及ZO-1的表达水平明显高于无引流组和外引流组(均P＜0.01),且基本接近对照组(均P＞0.05).病理学观察显示,无引流组和外引流组OJ大鼠肠黏膜结构破坏,大量或中量炎性细胞浸润,而内引流组OJ大鼠组肠黏膜结构完整,仅见少量炎性细胞浸润.结论:胆汁内引流对OJ大鼠肠黏膜屏障具有保护作用,其机制可能与胆汁维持肠黏膜上皮细胞间紧密连接相关蛋白的表达有关.
-
布地奈德对哮喘小鼠气道上皮细胞闭锁蛋白表达的影响
目的 观察哮喘小鼠气道上皮细胞闭锁蛋白的表达及布地奈德对其表达的影响.方法 将24只雌性BALB/c小鼠随机分为哮喘模型组、布地奈德组及对照组,每组8只.对照组用生理盐水,哮喘模型组和布地奈德组用卵清蛋白腹腔注射致敏及雾化吸入激发建立哮喘模型,布地奈德组每次激发前1h吸入布地奈德混悬液1 mg,连续14d.对照组和哮喘模型组用等量生理盐水代替布地奈德,吸入方法和时间同布地奈德组.小鼠末次激发24h后,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中的嗜酸性粒细胞(EOS),HE和PAS染色观察支气管及周围肺组织的病理改变、杯状细胞增生和黏液分泌;电镜观察气道上皮的超微结构;免疫组织化学和荧光定量PCR检测气道上皮occludin的表达.结果 与对照组比较,哮喘模型组小鼠BALF中EOS计数、气道上皮杯状细胞数及病理学评分明显增高;支气管肺组织occludin蛋白表达明显减弱,差异均有统计学意义(P＜0.01).与哮喘模型组比较,布地奈德组EOS和杯状细胞计数及病理学评分明显降低,occludin蛋白表达增强,差异均有统计学意义(P＜0.01).哮喘模型组气道上皮细胞间的连接结构不完整,细胞间隙增宽,而布地奈德组上述表现较哮喘组减轻.结论 布地奈德能上调哮喘小鼠气道上皮occludin的表达、促进受损气道上皮的修复,可能是吸入型糖皮质激素治疗哮喘的机制之一.
-
实验性结肠炎小鼠结肠紧密连接蛋白的变化及意义
目的 建立小鼠葡聚糖硫酸钠(DSS)结肠炎模型,观察其结肠黏膜炎症情况和紧密连接蛋白的表达变化及意义.方法 20只BALb/c小鼠随机分为DSS组及正常对照组,每组10只.DSS组小鼠每日自由饮用5％DSS溶液,连续7d,第8天后改为饮用正常水3d;正常对照组饮用正常水10d.每天进行体质量测量和疾病活动指数(DAI)评分.于第10天取结肠,检测小鼠髓过氧化物酶(MPO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、闭锁蛋白(occludin)和紧密连接相关蛋白-1(ZO-1)的表达并进行相关性分析.结果 与正常对照组比较,DSS组小鼠体质量下降、DAI评分增高、结肠长度缩短;结肠MPO和TNF-α表达上调,occludin、ZO-1表达降低(均P＜0.05).DSS组小鼠结肠TNF-α表达与occludin、ZO-1表达均呈负相关(r值分别为-0.728和-0.718,P＜0.05).结论 DSS诱导结肠炎小鼠结肠紧密连接蛋白occludin和ZO-1表达下降,TNF-α可能通过下调occludin和ZO-1表达,使肠黏膜屏障功能受损,参与肠道炎症的发生发展.
关键词： 结肠炎 葡聚糖硫酸钠 闭锁蛋白 紧密连接相关蛋白-1
