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复合酶法提取远志总皂苷的工艺研究
目的:研究酶法结合传统回流法提取远志总皂苷工艺条件.方法:利用可见分光光度法测定远志总皂苷含量;考察植物复合酶的酶解时间、酶解温度对传统提取工艺的强化效果;通过显微结构图和红外光谱图说明了复合酶法强化传统提取法的作用方式及提取物的结构.结果:酶用量为0.4%时,适宜酶解温度为55℃,优酶解时间为0.5h.结论:复合酶法结合传统回流提取后,可提高远志总皂苷提取率、缩短提取时间、减少乙醇使用量,对于远志流浸膏的高效提取具有一定指导意义.
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远志总皂苷对AD模型大鼠学习记忆及海马nAChRα7亚基的影响
目的 观察远志总皂苷(TEN)对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆及烟碱型乙酰胆碱受体α7(nAChRα7)亚基的影响,探讨TEN对AD干预作用的机制.方法 将雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、TEN低剂量组(12.5 mg/ mL)和TEN高剂量组(37.5 mg/mL),每组8只.模型组予腹腔注射D-半乳糖(D-gal)致衰联合IBO损毁双侧基底前脑Meynert核建立AD模型.TEN低、高剂量组在建立AD模型的同时分别予12.5 mg/mL、37.5 mg/mL的TEN灌胃8周.对照组用等体积的生理盐水代替D-半乳糖(D-gal)和IBO 注射.采用Morris水迷宫实验检测各组大鼠的逃避潜伏期(EL)、跨越原平台次数和原平台象限停留时间；用免疫组化法测各组大鼠海马区nAChRα7表达水平.结果 与对照组比较,模型组EL延长、跨越原平台次数减少、原平台象限停留时间降低、海马区nAChRα7的表达水平减小(P＜0.05)；与模型组比较,TEN高、低剂量组EL缩短、跨越原平台次数增加、原平台象限停留时间延长、海马区nAChRα7的表达水平增高(P＜0.05).与TEN低剂量组比较,TEN高剂量组EL时间缩短(但实验第2天两组间比较无统计学差异)、跨越原平台次数增加、原平台象限停留时间延长、海马区nAChRα7表达水平均明显升高(P＜0.05).结论 TEN可显著提高AD 模型大鼠海马区nAChRα7表达,这可能是TEN改善学习记忆和认知功能的机制之一.
关键词： 阿尔茨海默病 远志总皂苷 学习记忆 海马 烟碱型乙酰胆碱受体α7亚基 -
远志总皂苷增强鹅膏蕈氨酸诱导阿尔茨海默病大鼠的突触可塑性研究
目的 观察远志提取物远志总皂苷(TEN)对D-半乳糖致衰鹅膏蕈氨酸(IBO)诱导阿尔茨海默病(AD)模型大鼠突触可塑性的影响,并探讨其可能机制.方法 将雄性Wistar大鼠随机分为对照组、AD模型组及TEN高、低剂量组,每组8只.通过电生理实验测定各组大鼠长时程增强(LTP)的变化,用免疫组织化学方法测定海马CA1区神经元N-甲基-D-天冬氨酸受体2A亚基(NR2A)积分吸光度(IOD)值,间接观察其表达情况,并进行各组间比较.结果 高频刺激(HFS)后1 min、30 min和60 min对照组LTP值为(203.17±7.468)％、(178.15±8.110)％和(164.17±7.026)％,AD模型组LTP值[(168.63±10.809)％、(120.12±7.382)％和(102.88±2.357)％]较对照组显著降低(均P＜0.05).TEN低剂量组LTP值为(177.67±14.038)％、(141.83±4.956)％和(121.17±4.792)％,TEN高剂量组LTP值为(192.00±2.449)％、(168.00±2.449)％和(141.75±9.251)％,均较AD模型组升高(P＜0.05).与对照组(30.12±3.45)比较,AD模型组IOD值(11.74±1.69)显著降低(P＜0.05);与AD模型组比较,TEN组低剂量组、高剂量组IOD值(分别为20.78±2.66、25.86±2.98)均明显增高(P＜0.05),且TEN高剂量组高于TEN低剂量组(P＜0.05).结论 TEN可能使海马CA1区LTP升高和NR2A表达增加,从而改善AD大鼠突触可塑性.
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大孔吸附树脂吸附远志总皂苷的吸附热力学与动力学研究
目的 研究大孔吸附树脂吸附远志总皂苷这一过程的吸附热力学和吸附动力学特征.方法 以香草醛-冰醋酸-高氯酸为显色剂,采用可见光分光光度法测定了不同温度时的吸附等温线和不同起始浓度下的吸附动力学曲线.结果 吸附平衡数据符合Freundlich方程、Lagergren一级速率方程和Dumwald-Wagner颗粒内扩散方程,相关性均良好.结论 该吸附过程为吸热过程,自发进行,高温有利于吸附,吸附速率主要由颗粒内扩散控制.
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远志总皂苷对AD模型大鼠海马Ng及pCaMKⅡα表达的影响
目的：观察远志总皂苷（TEN）对阿尔茨海默病（AD）模型大鼠海马CA1区神经颗粒素（Ng）以及磷酸化的钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱα亚基（ pCaMKⅡα）表达的影响，探讨TEN防治AD的作用机制。方法将60只雄性Wistar大鼠随机分为对照组，模型组，TEN低剂量治疗组（12．5mg/ml）和TEN高剂量治疗组（37．5 mg/ml），每组15只，模型组予以腹腔注射 D-半乳糖（D-gal）致衰并联合鹅膏覃氨酸（IBO）定向Meynert基底核损毁法建立AD大鼠模型，TEN低、高剂量治疗组则在造模的同时TEN灌胃治疗8w，对照组则用等体积的生理盐水代替D-gal和IBO。采用免疫组化方法来检测大鼠海马CA1区Ng及pCaMKⅡα的表达。结果模型组大鼠海马CA1区Ng 及pCaMKⅡα平均吸光度值比对照组显著降低（ P＜0．01）；TEN治疗组两组平均吸光度值均较模型组显著增高（ P＜0．01）；且TEN高剂量治疗组（37．5 mg/ml）的平均吸光度值比TEN低剂量治疗组（12．5mg/ml）显著增高（P＜0．01）。结论 TEN可显著升高AD模型大鼠海马CA1区Ng 及pCaMKⅡα的表达，且具有剂量依赖性。
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远志总皂苷对AD 模型大鼠海马nAChRα4及PSD-95表达的影响
目的:通过观察中药远志总皂苷(Tenuigenin,TEN)对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)模型大鼠烟碱型乙酰胆碱受体α4 亚基(nicotinic acetylcholine receptor subunit alpha-4,nAChRα4)和突触后致密蛋白95(postsynaptic density 95,PSD-95)表达的影响,旨在探讨TEN 对AD 干预作用的机制.方法:32 只雄性Wistar 大鼠随机分为对照组,模型组,TEN 12.5,37.5 mg·mL-1 剂量组,应用D- 半乳糖致衰老的基础上定向Meynert 基底核损毁建立AD 大鼠模型,TEN 12.5,37.5 mg·mL-1 治疗组则在造模的同时用远志总皂苷灌胃(ig)治疗,采用免疫组化方法来检测大鼠海马CA1 区nAChRα4 及PSD-95 的表达.结果:模型组大鼠海马CA1 区nAChRα4 及PSD-95 平均灰度值显著高于对照组,平均光密度值显著降低(P<0.01);TEN 12.5,37.5 mg·mL-1剂量组大鼠海马nAChRα4 及PSD-95 平均灰度值显著低于模型组,两组平均光密度值均显著增高(P<0.05);且TEN 37.5 mg·mL-1 剂量组的平均灰度值比TEN 12.5 mg·mL-1 剂量组降低显著,平均光密度值增高显著(P<0.01).结论:TEN 可显著提高AD 模型大鼠海马CA1 区nAChRα4 及PSD-95 的表达,并具有剂量依赖性,这可能是其改善认知功能的部分机制.
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远志总皂苷对癫痫模型大鼠nAChRa7亚基表达的影响
目的 观察远志总皂苷(Tenuigenin,TEN)对癫痫模型大鼠海马CA1区烟碱型乙酰胆碱受体a7(nAChRa7)亚基表达的影响,探讨TEN对癫痫继发认知障碍改善的可能机制.方法 雄性Wistar大鼠随机分为对照组、癫痫模型组和TEN防治组3组.采用免疫组化方法对各组大鼠海马CA1区nAChRa7表达进行检测.结果 与对照组相比,癫痫模型组大鼠海马CA1区nAChRa7表达减少(P＜0.05),与癫痫模型组相比,TEN防治组大鼠海马CA1区nAChRa7表达明显升高(P＜0.05).结论 TEN能够显著提高癫痫模型大鼠海马CA1区nAChRa7表达,这可能是其改善癫痫继发认知障碍的部分机制.
关键词： 癫痫 远志总皂苷 海马 烟碱型乙酰胆碱受体a7亚基 -
远志总皂苷对癫痫模型大鼠NMDA受体表达的影响
目的 观察远志总皂苷(Tenuigenin,TEN)对癫痫模型大鼠N-甲基-D天门冬氨酸(NMDA)受体表达的影响,探讨TEN对癫痫继发认知障碍干预作用的机制.方法 32只雄性Wistar大鼠,随机分为对照组(8只)、模型组(12只)、远志总皂苷防治组(12只).采用腹腔注射戊四氮(PTZ)溶液制作癫痫大鼠模型,远志总皂苷防治组在腹腔注射戊四氮的同时给予灌服远志总皂苷,对照组分别注射及灌服等剂量的生理盐水.采用免疫组化方法检测大鼠海马CA1区NMDA受体表达.结果 模型组大鼠海马CA1区NMDA受体平均灰度值显著高于对照组,远志总皂苷防治组大鼠海马CA1区NMDA受体平均灰度值显著低于模型组.结论 远志总皂苷可显著提高癫痫模型大鼠海马CA1区NMDA受体表达,这可能是其减轻癫痫继发认知障碍的部分机制.
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远志总皂苷对癫痫模型大鼠学习记忆及海马LTP的影响
目的 观察远志总皂苷(TEN)对戊四氮(PTZ)点燃癫痫模型大鼠空间学习记忆能力及海马长时程增强(LTP)的影响.方法 雄性Wister大鼠随机分为对照组、癫痫模型组、TEN组,利用水迷宫法观察各组大鼠的空间学习记忆能力,利用电生理学方法通过对高频刺激前后海马CA1区场兴奋性突触后电位(fEPSP)幅度比较检测大鼠海马LTP变化.结果 与对照组相比较,癫痫模型组空间学习记忆能力显著下降,海马CA1区LTP受到显著抑制(P＜0.05);TEN可改善上述指标的异常变化(P＜0.05).结论 TEN可改善癫痫模型大鼠空间学习记忆能力及海马LTP的抑制.
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吸附树脂纯化远志总皂苷的研究
目的:分析不同吸附树脂对远志总皂苷的纯化效果,为吸附树脂的筛选提供指导.方法:采用静态吸附与解吸实验对吸附树脂的纯化性能进行考察,运用紫外-分光光度法和高效液相色谱法分析树脂纯化后的解吸液中的总皂苷类成分的色谱变化情况.结果:D101和X-5型吸附树脂对远志总皂苷的吸附和解吸能力优于其他树脂,色谱法分析结果表明X-5型吸附树脂纯化后的解吸液的水解液,完整地保留了远志皂苷元标准品色谱图中的一系列吸收峰.结论:X -5型吸附树脂纯化远志皂苷的效果好.
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远志总皂苷大孔吸附树脂纯化工艺研究
目的:优选远志总皂苷大孔树脂纯化工艺.方法:在以细叶远志皂苷的纯度为指标,考察多种型号大孔树脂纯化远志总皂苷的吸附及洗脱条件.结果:HPD-100型大孔吸附树脂为佳纯化远志总皂苷的大孔树脂.佳纯化工艺为上样液细叶远志皂苷的质量浓度为0.5 g/ml,以蒸馏水3 BV、30％乙醇、70％乙醇各4 BV以1 BV/h速度依次洗脱,收集70％乙醇洗脱部位.结论:该法工艺可较好地纯化远志总皂苷且稳定可行,为新药研发提供了一定的依据.
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远志总皂苷干预β-淀粉样蛋白致伤神经干细胞Caspase-3及Par-4的表达
背景:远志总皂苷具有良好的神经保护作用.目的:分析远志总皂苷对β-淀粉样蛋白致伤海马神经干细胞的保护作用及机制.方法:自昆明小鼠海马分离培养神经干细胞,取第3代神经干细胞,用含不同质量浓度远志总皂苷与β-淀粉样蛋白致伤体外培养的神经干细胞共孵育.结果:应用免疫组织化学法检测Caspase-3阳性神经干细胞,与对照组相比,远志总皂苷组Caspase-3阳性细胞率及Par-4的表达明显降低,差异具有显著性意义(P<0.05).提示远志总皂苷能够降低β-淀粉样蛋白致伤神经干细胞中Caspase-3及Par-4的表达.
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远志总皂苷对小鼠胃肠运动的作用
远志为远志科(Polygalaceae)远志属植物.主产于山西、陕西、河北、湖北、内蒙古、山东等地,民间常做药用.中国药典收载其来源为远志科植物远志Polygala tenuifolia Wil d .或卵叶远志Polygala sibirical L.的干燥根.其味辛、苦,性温,有祛痰、消肿、安神益智等功效,用于治疗心肾不交、失眠多梦、吐痰不爽、健忘惊悸、乳房肿痛等,是临床常用中药之一[1].<本经>记载:远志"除邪气,利九窍,益智慧,强志倍力".现代药理研究表明,远志皂苷有镇咳、祛痰、平喘、抑菌等作用[2].但远志对胃肠运动的影响报道较少,本实验观察了不同剂量的远志总皂苷对小鼠胃肠运动的影响.
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超声提取-分光光度法测定远志总皂苷的含量
目的:超声提取远志总皂苷,并用分光光度计进行总皂苷含量的测定.方法:超声提取远志总皂苷,以远志皂苷元为对照品,香草醛-冰醋酸-高氯酸为显色剂,采用分光光度法在585 nm处测定远志总皂甙含量.结果:对照品在28～63 μg范围内线性良好(r2=0.9984),平均回收率为100.45%,RSD=1.59%(n=5).超声提取和热回流提取的远志总皂苷含量分别为1.63%,1.50%.结论:超声提取法用时短,提取率高,能达到比传统回流法更理想的效果.分光光度法测定含量简便、快速、准确、可靠.
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远志木部及皮部总皂苷含量比较分析
目的:对远志原药材木部及皮部中总皂苷含量进行比较分析,用以指导临床用药.方法:以齐墩果酸为对照品,香草醛-高氯酸为显色剂,采用紫外-可见分光光度法在575 nm处测定远志总皂苷含量.结果:以此方法对远志木部及皮部中总皂苷含量进行比较、分析,为远志皮部总皂苷含量为3.33 %、木部总皂苷含量为0.69 %.结论:远志中皮部总皂苷含量远远大于木部,远志总皂苷主要存在于根皮中.因此,在提取远志中的总皂苷时,应选用根皮为原料药材.
关键词： 远志总皂苷 含量比较 紫外-可见分光光度法 -
远志总皂苷有效部位含量测定及HPLC-MS定性分析
目的 建立远志总皂苷有效部位质量控制方法.方法 采用高效液相色谱法测定远志有效部位中远志酸、远志皂苷元含量,并采用HPLC-MS技术对远志总皂苷有效部位进行定性分析.结果 有效部位中远志酸平均含量为3.68％,RSD:0.72％,远志皂苷元平均含量为5.57％,RSD:2.54％.HPLC-MS分析初步鉴定5个化合物,分别是远志皂苷A、远志皂苷F、远志皂苷E、远志皂苷B、Polygalasaponina XXXII.结论 该方法可有效控制远志总皂苷有效部位质量.
关键词： 远志总皂苷 远志酸 远志皂苷元 高效液相色谱-质谱联用技术 -
远志总皂苷有效部位质量控制研究
目的 建立远志总皂苷有效部位的质量控制方法.方法 采用高效液相色谱法测定远志有效部位中细叶远志皂苷的含量,并建立总皂苷有效部位碱水解产物的高效液相指纹图谱.结果 细叶远志皂苷在8.2～32.6 μg范围内线性良好,有效部位中细叶远志皂苷的平均含量为27.3％.通过指纹图谱相似度评价,不同批次的远志总皂苷有效部位的化学成分差异较小.结论 该方法可有效控制远志总皂苷有效部位的质量.
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远志蜜炙前后化学成分的对比研究
目的 比较远志蜜炙前后总皂苷和浸出物的含量;初步比较远志蜜炙前后化学成分的异同.方法 以远志皂苷元为对照品,采用香草醛-高氯酸显色法于560 nm波长处分别测定生远志和蜜远志中远志总皂苷的含量;采用药典方法测定和比较远志蜜炙前后70%乙醇浸出物的含量;采用薄层鉴别方法比较生远志和蜜远志正丁醇提取部位化学成分的异同.结果 生远志中的远志总皂苷含量为2.096%、蜜远志中的远志总皂苷平均含量为2.207% ;蜜远志的浸出物为50.50%,生远志的浸出物为36.53%.生远志正丁醇部位色谱和蜜远志正丁醇部位色谱基本一致:紫外灯(365 nm)下二者在相应位置呈相同颜色荧光,香草醛硫酸乙醇溶液显色后二者在相应位置的几个斑点均呈紫罗兰色,且远志皂苷元对照品斑点呈紫罗兰色,而在与其相应位置生远志供试品和蜜远志供试品均未检视到相应斑点.结论 远志蜜炙后化痰止咳作用增强的原因在于蜜炙能增加总皂苷的溶出和有效成分的浸出量,蜜炙对远志化学成分的影响在于量变而非质变.
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远志总皂苷对湿阻中焦大鼠胃及脂质代谢的影响
目的:研究不同剂量远志总皂苷对湿阻中焦大鼠的胃的双向作用以及对脂质代谢的影响.方法:选用湿阻中焦证大鼠模型,采用不同剂量的远志总皂苷予以治疗.给药后,采用病理组织学切片观察胃损伤,测定血清胃泌素及血脂三酰甘油(TG)水平.结果:模型大鼠胃粘膜有少量溃疡点,固有层聚集大量炎性细胞,血清胃泌素水平上升,肝脏呈脂肪肝样变,血脂升高.远志总皂苷400mg·kg-1剂量组大鼠出现胃粘膜充血肿胀,胃粘膜上皮细胞融解,胃泌素水平及血脂没有改变;200,100 mg·kg-1剂量组大鼠胃粘膜炎性细胞,较模型组大鼠胃粘膜明显减少,血清胃泌素和血脂明显下降,比较模型组,P＜0.05.各组大鼠肝脏颜色均正常.结论:给予100 mg·kg-1的远志总皂苷有显著的保护胃粘膜及降脂作用,而给予400mg·kg-1远志总皂苷则具有显著胃刺激性.
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远志总皂苷对AD模型大鼠学习记忆及海马AchE、ChAT活性的影响
目的 建立阿尔茨海默病(AD)的大鼠模型,并观察远志总皂苷对AD模型大鼠学习记忆及胆碱能系统的影响.方法 将70只大鼠随机分为模型组,远志总皂苷高、中、低剂量组,盐酸多奈哌齐组,正常组和假手术组共7组,每组10只.采用双侧海马内一次性注射β-淀粉样多肤25-35片断(Aβ25-35)制作大鼠AD模型;连续给药5周后采用水迷宫检测各组大鼠的学习记忆能力:采用生化法检测各组大鼠脑组织匀浆中乙酰胆碱酯酶(AchE)、胆碱乙酰转移酶(CHAT)活性变化.结果 与模型组相比,远志总皂苷干预治疗组大鼠进入盲端的次数明显减少、游泳时间明显缩短,同时脑内ChAT活性增强,AchE活性降低,差异均具有统计学意义(P<0.01、P<0.05).结论 远志总皂苷对AD模型大鼠的学习记忆能力减退具有改善作用,其作用机制可能与保护中枢胆碱能系统有关.
