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磷脂转运蛋白参与烟草提取物诱导的Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡
目的：研究磷脂转运蛋白(PLTP)在烟草提取物对大鼠Ⅱ型肺泡上皮凋亡中的作用。方法体外培养大鼠肺泡上皮RLE-6TN细胞株24 h，分别加入0.5%，1.0%和2.0%烟草提取物共培养24 h或48 h；委托上海吉玛公司合成siRNA-PLTP，并将siRNA-PLTP转染入RLE-6TN中，下调PLTP的表达后，观察烟草烟雾对RLE-6TN细胞凋亡的影响。Hochest染色后观察细胞核的形态学改变；流式细胞术检测细胞凋亡率；蛋白质印迹法（Western blot）检测PLTP的表达量和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的活性。结果经不同浓度的（0.5%，1.0%，2.0%）烟草提取物作用后，细胞早期凋亡率由（1.68±0.098）%增加至（18.663±0.964）%（P<0.001）；Hoechst染色可见部分凋亡细胞，核发白、固缩、染色质边集等现象；PLTP的表达和caspase-3的活性增加；将PLTP敲降后，可部分逆转烟草提取物诱导的RLE-6TN细胞中caspase-3的活性的增加（P<0.05）。结论 PLTP参与烟草提取物诱导大鼠肺泡上皮细胞的凋亡。
关键词： 烟草提取物 大鼠肺泡上皮细胞 凋亡 磷脂转运蛋白 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 -
Caspase-3和Bcl-2蛋白在产时发热胎盘组织中的表达及其与新生儿脑病相关性
目的 研究产时发热患者胎盘组织中Caspase-3和Bcl-2的表达及其与新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)的相关性,进一步探讨产时发热导致HIE的可能机制,为其防治提供新路径.方法 收集产时发热患者胎盘组织60例(HIE组30例,非HIE组30例)和正常孕妇组30例,采用免疫组织化学染色法检测胎盘绒毛滋养层Caspase-3和Bcl-2蛋白的表达,通过免疫组化积分判断其表达高低.结果 HIE组胎盘滋养层Caspase-3和Bcl-2表达的免疫组化积分分别为5.05±0.78、1.54±0.43,非HIE组分别为3.03±1.36、3.51±1.59,正常孕妇组分别为2.87±0.68、4.03±0.64.HIE组Caspase-3的表达明显高于非HIE组和正常组(JP＜0.05),而Bcl-2则明显低于非HIE组和正常组(P＜0.05).Caspase-3与Bcl-2在HIE组胎盘组织中的表达呈负相关(r=0.79,P＜0.05).结论 Caspase3在HIE组胎盘组织中的表达增高,Bcl-2的表达降低,两者在胎盘组织中的表达平衡失调可能是HIE发生的原因之一.
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脂氧素对大鼠心肌缺血再灌注后心梗程度和细胞凋亡的影响
目的:观察脂氧素A4 (lipoxins,LXA4)对大鼠心肌缺血再灌注后心梗程度和细胞凋亡的影响.方法:36只大鼠随机分成假手术组(S组,n=12)、缺血/再灌注组(I/R组,n=12)和I/R+LXA4治疗组(L组,n=12),分别以HE染色光镜下观察心肌组织病理学变化,通过RT-PCR和Western blot法检测缺血心肌Caspase-3、Bcl-2和Bax的表达水平.结果:L组心肌组织病理学损伤较I/R组减轻.I/R组中基因Bax和Bcl-2的表达均增强,Caspase-3的含量升高(P＜0.01).L组中基因Bax、Caspase-3表达明显减弱,Bcl-2表达增强(P＜ 0.01).结论:脂氧素通过抑制Caspase-3和Bax活化,增强Bcl-2的表达而对缺血再灌注的心肌有一定保护作用.
关键词： 心肌再灌注损伤 脂氧素 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 凋亡 -
脊髓损伤后早期应用FK506抑制半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3表达及细胞凋亡的实验研究
目的:观察FK506对脊髓损伤大鼠后肢运动功能及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)表达和细胞凋亡的影响.方法:成年雄性Wistar大鼠60只,采用Allen's法建立脊髓损伤模型后,随机分为应用FK506治疗组(n=30)和应用生理盐水对照组(n=30),于伤后不同时间点取材,行苏木精-伊红(HE)染色观察损伤脊髓组织病理变化,免疫组织化学染色检测caspase-3的表达,原位末端标记法(TUNEL)检测神经细胞凋亡,同时以BBB评分法评价后肢运动功能恢复情况.结果:HE染色显示治疗组脊髓组织病理学改变明显轻于对照组;治疗组和对照组均存在caspase-3的表达和神经细胞凋亡,两者都于伤后24 h达高峰,但治疗组较对照组明显减少(P＜0.01,P＜0.05);治疗组后肢运动功能评分显著优于对照组(P＜0.05).结论:FK506能抑制脊髓损伤后caspase-3的表达和神经细胞凋亡,从而减轻继发性损害,促进脊髓功能恢复.
关键词： 脊髓损伤 吞噬作用 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 FK506 -
鼻用激素治疗鼻息肉对髓样细胞白血病1基因和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3基因表达的影响
目的 探讨鼻用激素治疗鼻息肉的机制及对其髓样细胞白血病1(MCL-1)基因和半胱氨酸天冬氨酸酶蛋白-3(Caspase-3)基因表达的影响.方法 选取35例鼻息肉患者作为观察组,均在接受丙酸氟替卡松鼻喷剂治疗14 d后行内镜下鼻息肉切除术治疗,分别留取治疗前后鼻息肉组织,将激素治疗前采集的鼻息肉组织作为单纯鼻息肉组,将激素联合手术切除术后采集的鼻息肉组织作为鼻息肉激素组;另选取35例同期单纯鼻中隔偏曲患者作为对照组,采集其正常的中鼻甲组织作为鼻腔黏膜组.3组标本均行常规苏木精-伊红(HE)染色和免疫组化染色.记录10个高倍视野中的嗜酸性粒细胞(EOS)数量,比较3组MCL-1、Caspase-3表达水平.结果 单纯鼻息肉组、鼻息肉激素组的EOS数量均多于鼻腔黏膜组,且单纯鼻息肉组的EOS数量多于鼻息肉激素组(P<0.05).单纯鼻息肉组、鼻息肉激素组和鼻腔黏膜组的MCL-1阳性率依次降低(均P<0.05);单纯鼻息肉组、鼻息肉激素组和鼻腔黏膜组的Caspase-3阳性率依次升高(均P<0.05).单纯鼻息肉组和鼻息肉激素组的MCL-1表达与EOS浸润程度呈正相关,Caspase-3表达与EOS浸润程度呈负相关(P<0.05).结论 丙酸氟替卡松鼻喷雾剂作为经典的鼻用人工合成类固醇激素,可有效治疗鼻息肉,其作用机制可能与下调MCL-1表达和促进Caspase-3活化有关.
关键词： 鼻用激素 鼻息肉 髓样细胞白血病-1 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 -
血清PARP-1和Caspase-3蛋白在肝癌患者中的表达及意义
目的 检测肝癌患者血清聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达水平,并探讨其在肝癌发生发展中的临床意义.方法 收集2016年8月至2017年8月在盐城市大丰人民医院的65例肝癌患者以及25例健康体检者血清样本,应用酶联免疫吸附试验法检测血清中PARP-1、Caspase-3蛋白水平,并分析肝癌患者血清PARP-1、Caspase-3蛋白水平与临床特征的相关性及对患者生存期的影响.结果 与健康人相比,肝癌患者血清PARP-1蛋白水平明显升高[(407±139)pg/mL vs(246±123)pg/mL],血清Caspase-3蛋白水平明显降低[(7.31±2.49)pg/mL vs(10.28±2.37)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05);在有转移、饮酒史和乙肝表面抗原(HBsAg)阳性的肝癌患者中,血清PARP-1蛋白水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);在有转移和HBsAg阳性的肝癌患者中,血清Caspase-3蛋白水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与血清PARP-1蛋白阴性的患者相比,PARP-1蛋白阳性的肝癌患者的总体生存期明显缩短[(18.5±6.3)个月vs(9.6±5.7)个月],差异有统计学意义(P<0.05);与血清Caspase-3蛋白阳性的患者相比,Caspase-3蛋白阴性的肝癌患者的总体生存期明显缩短[(17.9±6.5)个月vs(10.8±4.2)个月],差异有统计学意义(P<0.05);肝癌患者血清PARP-1与Caspase-3蛋白水平表达呈负相关(r=-0.369,P<0.05).结论 PARP-1和Caspase-3在肝癌的发生、发展过程中起着重要作用,两者联合检测对肝癌的早期诊断具有一定价值.
关键词： 肝癌 聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 血清 相关性 -
复方甘草酸苷减轻HepG2细胞凋亡的机制
目的研究复方甘草酸苷(SNMC)保护人肝母细胞瘤HepG 2细胞,减轻细胞凋亡的作用和机制.方法肿瘤坏死因子α(TNFα)和放线菌素D(ActD)诱导HepG 2细胞凋亡后,分别加入0、2、20、100、200、800μg/ml终浓度的SNMC作用12h.流式细胞仪分析凋亡细胞百分率;电镜观察细胞超微结构的变化;琼脂糖凝胶电泳观察细胞内片段化DNA的形成;Western blot检测此过程中细胞内凋亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase 3)及B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因关联x蛋白(Bax)的表达情况.结果不同浓度SNMC处理TNF α等作用的HepG2细胞12h后,随药物浓度增加,HepG2细胞凋亡率降低,凋亡特有的细胞内片段化DNA形成减少,细胞内Caspase3相对分子量32×103的酶原表达增加,17×103活性成分表达减少,同时Bcl-2表达增加,Bax表达减少.另外,电镜下可见模型组细胞呈现凋亡后典型核浓缩,而100μg/ml药物保护组未见此现象.结论 SNMC 可抑制TNFα和ActD诱导的HepG2细胞凋亡,其机制可能通过调控凋亡相关蛋白的表达而实现.
关键词： 肝疾病 细胞凋亡 复方甘草酸苷 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 -
黄芪多糖对CLP诱导的脓毒症小鼠急性肝损伤MDA、caspase-3和ICAM-1的影响研究
目的:探讨黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)对脓毒症诱导的小鼠急性肝损伤丙二醛(methane dicarboxylic aldehyde,MDA)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)和细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的影响.方法:将小鼠随机分为假手术组(SHAM组,n=25)、脓毒症组(SEP组,n=25)、APS处理组(APS组,n=25)、生理盐水处理组(NS组,n=25),采用盲肠结扎穿刺术(cecal ligation puncture,CLP)造模,APS组经腹腔注射APS 50 mg/(kg·d),NS组经腹腔注射等量生理盐水,SHAM组和SEP组不做特殊处理.染色观察肝脏组织病理变化;检测①血浆中MDA、caspase-3和ICAM-1变化;②肝组织匀浆MDA和caspase-3变化;③肝脏组织中caspase-3蛋白的表达.结果:SEP组12 h开始表现肝细胞水肿进行性加重,48 h达到高峰.APS干预后,肝细胞损害严重程度较SEP组明显改善.通过APS处理后,24、48 h APS组血浆中MDA[(29.69±4.62) mol/ml,P=0.041;(23.95±4.10) mol/ml,P=0.003]、caspase-3[(33.12±9.01)μmol/L,P=0.000; (31.25±8.68) μmol/L,P=0.000]和ICAM-1[(439.49±71.66)μg/L,P=0.009; (321.87±68.64) μg/L,P=0.000]浓度降低,肝组织匀浆MDA与caspase-3浓度亦在相应时相点开始降低.24、48 h APS组easpase-3蛋白[(19.93±4.53) μmol/L,P=0.005;(16.91±4.76) μmol/L,P=0.000]表达较SEP组明显降低.结论:APS可有效减轻急性肝损伤,其作用可能与降低MDA、ICAM-1以及抑制caspase-3表达有关.
关键词： 黄芪多糖 脓毒症 急性肝损伤 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 -
孕酮通过NF-κB调控脑损伤后大鼠海马神经元COX-2和Caspase-3的表达
目的 研究NF-κB对脑损伤大鼠海马神经元环氧合酶-2(COX-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达调控作用，探讨孕酮(progesterone，PROG)对脑损伤(TBI)后大鼠海马神经元保护作用及其可能机制。方法 雄性SD大鼠45只按抛硬币法分为假手术组、损伤组和PROG组，按照改良的Feeney自由落体损伤装置制作大鼠脑损伤模型，用Nissl染色法、免疫组织化学法及免疫蛋白印记法，观察大鼠伤侧海马CA1区NF-κB、COX-2以及Caspase-3的表达变化和孕酮对上述指标变化的影响。结果 损伤组大鼠海马CA1区NF-κB(24.0±2.5)、COX-2(35.9±2.7)、Caspase-3(25.1±2.7)阳性神经元的数量较假手术组NF-κB(1.9±0.9)、COX-2(1.5±0.7)、Caspase-3(1.8±0.8)显著增加(P<0.05)；PROG组与损伤组比较，海马CA1区NF-κB(14.2±1.8)、COX-2(16.6±2.7)、Caspase-3(11.2±2.4)阳性神经元的数量明显减少(P<0.05)。结论 NF-κB对脑损伤后大鼠海马神经元COX-2和Caspase-3表达起调控作用；PROG通过NF-κB对脑损伤后大鼠海马神经元起保护作用。
关键词： 脑损伤 孕酮 核因子-κB 环氧合酶-2 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 -
Caspase-3在大鼠中枢神经系统的表达研究
目的研究caspase-3在大鼠中枢神经系统的表达及其意义.方法用western-blot方法对出生1天和3个月SD大鼠的大脑皮质、中脑和小脑组织的caspase-3进行半定量测定.结果出生1天大鼠脑的caspase-3表达较高,出生3个月大鼠脑的caspase-3表达较低.结论caspase-3在中枢神经系统的发育成熟过程中对神经元的凋亡起着关键性作用.
关键词： 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 脑 细胞凋亡 Western印迹法 -
Caspase-3在血管瘤组织中的表达及其意义
目的探讨半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达及其与血管瘤消退的关系.方法采用免疫组化SP法检测Caspase-3在79例血管瘤和5例正常皮肤组织中的表达.结果79例血管瘤患者血管组织的Caspase-3阳性表达率在增殖期、消退期、退化期分别为52.4%、91.2%和83.3%,退化期、消退期的阳性表达高于增殖期(P＜0.05,P＜0.01),也明显高于正常对照组(P＜0.01),而增殖期与正常对照组阳性表达的差异无统计学意义(P＞0.05).结论Caspase-3参与了血管瘤由增殖期转变为消退期的病理发生过程,Caspase-3的活化诱导了细胞凋亡的发生,这可能是血管瘤自发消退的主要因素之一.
关键词： 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 血管瘤 凋亡 -
乌司他丁对肾毒性大鼠肾小管上皮细胞凋亡及Caspase-3蛋白的影响
目的 研究乌司他丁(Ulinastatin,UTI)对造影剂肾毒性大鼠肾小管上皮细胞凋亡和凋亡相关基因半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达的影响.方法 将大鼠随机均分为正常组、模型组、UTI低、高剂量组(2.5 ×104、5.0×104IU·kg-1).除正常组外,其余各组均于大鼠后腿深部肌肉注射25％甘油(10 mL·kg-1),48 h后于尾静脉iv76％泛影葡胺(10mL·kg-1)造模.UTI组大鼠分别在注射造影剂24、48 h后给药,测定血清中胱抑素C(Cys C)和肌酐(Scr)的水平;光镜下观察肾组织的病理学变化,进行Paller评分;TUNEL染色检测肾小管上皮细胞的凋亡;免疫组化法检测Caspase-3蛋白的表达.结果 模型组大鼠的肾小管上皮细胞出现明显水肿、空泡变性和颗粒变性、刷状缘丢失以及肾小管扩张等;与正常组比较,模型组的血清Cys C和Scr水平、Paller评分显著升高,肾小管上皮细胞凋亡增多,Caspase-3蛋白表达显著上调,与模型组比较,UTI组的血清Cys C、Scr水平明显降低,肾组织损害减轻、Paller评分下降,肾小管上皮细胞Caspase-3蛋白的表达显著下调,细胞凋亡率明显降低.结论 UTI可下调大鼠肾小管上皮细胞Caspase-3蛋白的表达,抑制肾小管上皮细胞的凋亡,对造影剂肾毒性大鼠起保护作用.
关键词： 造影剂肾毒性 乌司他丁 凋亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 -
孕酮对大鼠创伤性脑损伤后的神经保护作用
目的 观察孕酮对大鼠创伤性脑损伤(TBI)后皮质核因子-κB(NF-κB)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达的影响.探讨孕酮神经保护作用的可能机制.方法 将♂SD大鼠随机分为假手术组、脑损伤组、治疗组.按改进后的Feeney自由落体损伤装置制作大鼠脑损伤模型,于伤后6、24、48h时取材;采用免疫组织化学方法检测各组大鼠脑组织中NF-κB和Caspase-3的表达.结果 治疗组大鼠的NF-κB和Caspase-3表达较损伤组减少,伤后6、24、48 h时,治疗组的NF-κB和Caspase一3阳性细胞数与脑损伤组之间的差异有统计学意义(P<0.05).结论 孕酮可能通过抑制脑损伤后NF-κB的活性.下调Caspase-3的表达而发挥神经保护作用.
关键词： 孕酮 创伤性脑损伤 核因子-κB 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 -
尤瑞克林对糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注后细胞色素C及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3表达的影响
目的 对尤瑞克林(urokallikrein)干预糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后细胞色素C(Cytochrome-C,Cyt-C)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cysteinylaspartate specific proteinase-3,caspase-3)表达的变化进行观察,探讨尤瑞克林对糖尿病合并急性脑缺血再灌注损伤神经细胞的保护机制.方法 82只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为3大组:假手术组10只,缺血组36只,尤瑞克林组36只.以无菌链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)腹腔注射制作糖尿病大鼠模型,继而制作大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)模型.采用Bederson评分标准进行神经功能评分,原位缺口末端标记法(TUNEL法)检测细胞凋亡数目,免疫组织化学染色法检测Cyt-C及caspase-3表达.结果 ①尤瑞克林组的神经功能评分在各再灌注时间点均低于缺血组;②尤瑞克林组的凋亡细胞数在各再灌注时间点均少于缺血组;③尤瑞克林组的Cyt-C及caspase-3表达在各再灌注时间点均低于缺血组.结论 尤瑞克林对糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的抑制作用可能是通过下调Cyt-C及caspase-3的表达而实现.
关键词： 尤瑞克林 糖尿病 脑缺血再灌注 细胞色素C 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 -
Caspase-3和Caspase-8在婴幼儿血管瘤中的表达和意义
目的:探讨半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(Caspase-8)在各阶段婴幼儿血管瘤组织中的表达及其与婴幼儿血管瘤消退的关系.方法:采用Western blot和RT-PCR方法检测Caspase-3和Caspase-8及mRNA在15例不同时期婴幼儿血管瘤组织中的表达.结果:Caspase-3和Caspase-8在各期均有表达,在增生早期和中期表达较弱,增生晚期表述强,消退期表达减少,但仍有表达;Caspase-3 mRNA和Caspase-8 mRNA在各期均有表达,增生晚期表达显著,消退期表达减少.结论:Caspase-3和Caspase-8参与了婴幼儿血管瘤细胞的凋亡过程,它们的活化诱导了细胞凋亡的发生,可能在婴幼儿血管瘤自发消退的过程中发挥着作用.
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Caspase-3、Bcl-2与Bax在血管瘤组织中的表达及其意义
目的:探讨半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、Bcl-2与Bax的表达及其与血管瘤消退的关系.方法:采用免疫组化SP法检测Caspase-3、Bcl-2与Bax在34例血管瘤和6例正常皮肤组织中的表达.结果:Caspase-3、Bcl-2与Bax在34例血管瘤组织中的阳性表达率,增生期分别为31.3%、81.3%、37.5%,消退期分别为72.2%、38.9%、77.8%,而在正常皮肤均不表达,其中,Bcl-2在增生期中表达高于消退期,差异有统计有统计学意义(P＜0.05),Caspase-3及Bax在消退期中的表达高于增生期,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:Caspase-3、Bcl-2与Bax参与了血管瘤由增殖期转变为消退期的病理发生过程,Caspase-3的活化及Bcl-2与Bax的平衡诱导了细胞凋亡的发生,这可能是血管瘤自发消退的主要因素之一.
关键词： 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 Bcl-2 Bax 血管瘤 凋亡 -
小白菊内酯对帕金森病小鼠模型黑质多巴胺能神经元的保护作用
目的:探讨小白菊内酯在帕金森病小鼠模型中抑制核因子NF-κB(nuclear factor kappa B)信号通路对多巴胺(DA)能神经元的保护作用.方法:将C57BL/6N小鼠随机分为模型组、干预组和对照组.通过行为学、免疫组织化学和免疫蛋白印记法观察各组小鼠中脑黑质区酪氨酸羟化酶(TH)、核因子NF-κB、环氧合酶-2(COX-2)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspasc-3)的表达变化情况.结果:与对照组相比,模型组小鼠出现典型PD症状,TH阳性神经元明显丢失、蛋白水平下降,NF-κB、COX-2和caspase-3阳性细胞大量表达,蛋白水平显著升高(P＜0.01).抑制剂组小鼠上述变化明显减轻(P＜0.01).结论:在MPTP所致PD模型小鼠中,小白菊内酯通过抑制核因子NF-κB信号通路减少凋亡蛋白caspase-3表达,从而发挥神经保护作用.
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孕酮抑制大鼠脑损伤后炎症反应诱导的神经细胞凋亡
目的:研究孕酮(progesterone,PROG)对大鼠脑损伤后皮质COX-2、iNOS、NF-κB和caspase-3表达的影响,以探讨PROG脑保护作用的可能机制.方法:雄性SD大鼠45只,随机分为假手术组、脑损伤组和PROG治疗组,按照改良的Feeney自由落体损伤装置制作大鼠脑损伤模型.PROG治疗组伤后1,6 h腹腔注射PROG 16mg/kg,各组于伤后24 h取材.用免疫组织化学法及免疫蛋白印迹法,观察大鼠皮质COX-2、iNOS、NF-κB和caspase-3的免疫阳性细胞数和蛋白表达水平变化.结果:与假手术组大鼠相比,脑损伤组大鼠皮质COX-2、iN-OS、NF-κB和caspase-3阳性细胞数和蛋白表达水平较假手术组COX-2、iNOS、NF-κB和caspase-3显著增加(P<0.05);PROG治疗组与脑损伤组比较,大鼠皮质COX-2、iNOS、NF-κB和caspase-3阳性细胞数和蛋白表达水平明显减少(P<0.05).结论:PROG可通过抑制NF-κB的活化,阻断NF-κB和iNOS自身强化的炎症反应过程,降低COX-2、caspase-3的表达,抑制脑损伤后的炎症反应和细胞凋亡,从而发挥脑保护作用.
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双氢青蒿素对UVB照射小鼠皮肤损伤的光保护作用
目的 研究双氢青蒿素对中波紫外线照射后小鼠皮肤组织白介素(interleukin,IL)-1,IL-6及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(cysteinylaspartic speahc proteinase)-3,Caspase-8表达的影响,初步探讨青蒿素光保护作用的可能机制.方法 40只BALB/C小鼠随机分为4组,即对照组(C),NB-UVB照射组(UVB),双氢青蒿素组(DHA),双氢青蒿素+NB-UVB组(DHA+ UVB).C组给予生理盐水灌胃,UVB组给予生理盐水灌胃后NB-UVB照射,DHA组给予双氢青蒿素灌胃,DHA+ UVB组给予双氢青蒿素灌胃后进行NB-UVB照射.各组灌胃100mg/(kg·d),持续2周.UVB照射剂量为1 J/(cm2·d),共2周,累积剂量14 J/cm2,14天后取小鼠背部皮肤组织,采用酶联免疫吸附试验检测各组小鼠皮肤组织IL-1,IL-6水平,RT-PCR,WT-blot检测各组小鼠皮肤组织Caspase-3,Caspase-8变化情况.结果 与C组相比,UVB组皮肤组织中IL-1,IL-6明显增加,Caspase-3,Caspase-8 mRNA表达及其蛋白水平均增加,差异均有统计学意义(均P ＜0.05),DHA组小鼠皮肤组织IL-1,IL-6水平没有明显变化;Caspase-3,Caspase-8表达降低,但差异均无统计学意义(均P ＞0.05).DHA+UVB组与UVB组相比,IL-1,IL-6的浓度增加明显减少,Caspase-3,Caspase-8 mRNA表达及蛋白水平降低,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 双氢青蒿素对紫外线所致小鼠光损伤的炎症因子IL-1,IL-6及凋亡蛋白Caspase-3,Caspase-8的产生有一定的抑制作用.提示系统性应用双氢青蒿素对UVB致小鼠光损伤有保护作用.
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糖尿病早期大鼠视网膜神经细胞凋亡与caspase-3表达的关系
目的:观察糖尿病早期大鼠,视网膜神经细胞凋亡与caspase-3表达变化的关系.方法:健康雄性8周龄SD大鼠36只,建立糖尿病大鼠模型18只,正常对照18只.再各自分为4,8,12wk 3组,每组6只大鼠.TdT介导DNA缺口末端的dUTP标记(TUNEL)法检测视网膜神经细胞的凋亡程度;免疫组织化学方法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)蛋白表达水平,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测caspase-3 mRNA表达情况.结果:正常对照组4,8,12wk大鼠均未见视网膜神经细胞凋亡.糖尿病组大鼠于建模后4wk即出现视网膜神经细胞凋亡,8wk和12wk大鼠视网膜神经凋亡程度较同期正常对照组大鼠均明显增强.神经细胞凋亡主要位于视网膜神经节细胞层及内核层.正常对照组4,8,12wk大鼠视网膜均未见caspase-3蛋白阳性表达,糖尿病组大鼠4wk即可见caspase-3蛋白阳性表达,8和12wk时表达增强.正常对照组4,8,12wk大鼠caspase-3 mRNA表达RQ值分别为1.6±0.6,1.5±0.5,1.6±0.3;糖尿病组4,8,12wk大鼠caspase-3 mRNA表达RQ值分别为5.7±1.2,12.6±2.3,14.3±2.1;较同期对照组均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论:糖尿病早期视网膜神经细胞凋亡可能与capase-3表达增强有关.
关键词： 糖尿病 视网膜 神经细胞 凋亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3
