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冠心病患者血清磷脂转运蛋白及胆固醇脂转运蛋白水平与中医证型相关性研究
目的 探讨冠心病患者血清磷脂转运蛋白(phospholipid transfer protein,PLTP)、胆固醇酯转运蛋白(cholesteryl ester transfer protein,CETP)水平与中医病证的相关性,为冠心病证候客观化和开发临床治疗药物探索新的途径.方法 选择经冠状动脉造影确诊为冠心病的患者201例,采用国内外公认标准,构建证候四诊合参数据库,进行中医辨证.随机选取健康体检者20名为健康对照组.取静脉血分离血清,分别以酶联免疫法测定血清PLTP、CETP表达;采用乙酰丙酮显色法测定甘油三酯(triglyceride,TG)含量;采用沉淀漂浮酶联法测定总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)含量.结果 各证型冠心病患者血清PLTP、CETP、TC明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);各证型组血清TG、HDL-C、LDL-C与健康对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).标实证组各证型血清PLTP与本虚组各证型比较,差异有统计学意义(P＜0.05).标实证组各证型血清TG、HDL-C、LDL-C与本虚组各证型比较,差异有统计学意义(P＜0.05、P＜0.01).结论 标实证冠心病患者血清PLTP表达明显升高.标实证冠心病患者血清脂质改变较本虚证更为显著.
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磷脂转运蛋白在烟草诱导RLE-6TN细胞株发生上皮间质转化中的作用
目的 探讨磷脂转运蛋白(PLTP)在烟草提取物(CSE)诱导大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞株RLE-6TN发生上皮间质转化(EMT)中的作用.方法 体外培养RLE-6TN细胞株24 h,分为4组,每组3孔,分别加入0％、0.25％、0.5％和1％ CSE培养2d,检测E-钙黏蛋白和波形蛋白mRNA表达以及细胞和CSE共培养3d检测PLTP、EMT相关蛋白(E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白和波形蛋白)的表达量.将siRNA-PLTP转染入RLE-6TN中,Western blot法检测CSE对转染后PLTP和EMT相关蛋白的影响.结果 不同浓度的CSE作用后,E-钙黏蛋白mRNA分别为1.01±0.05、0.74±0.05、0.65±0.03、0.30±0.08,呈浓度依赖下降;波形蛋白mRNA在1％ CSE组(1.88±0.49)表达与对照组(1.01±0.20)相比增加.PLTP蛋白含量分别为0.42±0.02、0.89±0.25、1.08 ±0.18、1.61±0.06;E-钙黏蛋白蛋白含量分别为1.61±0.04、1.08 ±0.10、0.63±0.08、0.68±0.17;N-钙黏蛋白蛋白含量分别为0.60±0.15、0.57±0.26、0.88±0.30、1.94±0.54;波形蛋白蛋白含量分别为0.61±0.05、0.98±0.16、1.07±0.14、1.34±0.19.1％组与对照组比较差异有统计学意义(均P＜0.05).siRNA-PLTP和CSE处理细胞后,E-钙黏蛋白蛋白表达量较对照组明显增加(P＜0.05),N-钙黏蛋白和波形蛋白蛋白表达量较对照组明显降低(P＜0.05),siRNA-PLTP可部分逆转CSE诱导RLE-6TN细胞发生上皮间质转化.结论 PLTP能促进烟草诱导RLE-6TN发生上皮间质转化.
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半枝莲总黄酮对ApoE基因敲除小鼠血清PLTP、IL-6、CRP表达的影响
目的 探讨半枝莲总黄酮对载脂蛋白E基因敲除小鼠AS病变形成早期血脂水平与血清磷脂转运蛋白(PLTP)、Il-6、C反应蛋白(CRP)表达的影响.方法 载脂蛋白E基因敲除小鼠随机分为模型组、辛伐他汀组、银杏叶胶囊组、半枝莲总黄酮高、中、低剂量组,取正常C57BL/6小鼠为对照组,各6只.除模型组、对照组给予等容量羧甲基纤维素钠外,其他各组分别给予阳性对照药与受试药8周.处死小鼠,ELISA法检测血脂、PLTP、IL-6及CRP的表达水平.取主动脉制作切片、HE染色,观察形态学变化.结果 半枝莲总黄酮中、高剂量组TG、TC、LDL-C水平明显低于模型组,高剂量组HDL-C水平高于模型组,半枝莲总黄酮各组PLTP、IL-6、CPR的表达水平较模型组明显降低,有统计学意义.PLTP与IL-6水平呈正相关,与CRP水平呈正相关,IL-6与CRP水平呈正相关.结论 半枝莲总黄酮可通过降低载脂蛋白E基因敲除小鼠TG、TC、LDL-C水平,升高HDL-C水平,降低PLTP、IL-6、CPR水平而发挥抗AS的作用.
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PLTP在香烟诱导HBECs合成IL-8中的作用
目的：：研究磷脂转运蛋白(PLTP)对香烟诱导人支气管上皮细胞(HBECs)合成白介素8(IL-8)的影响。方法：Wistar大鼠连续3 d被动吸烟,收集支气管肺泡灌洗液( BALF),苏木精-伊红( HE)染色,免疫组织化学法( IHC)检测蛋白表达；体外培养HBECs,不同浓度烟草提取物( CSE)刺激；PLTP siRNA干扰后,进行CSE刺激。 MTT法检测细胞增殖,同时检测IL-8含量及PLTP表达。结果：烟熏组BALF白细胞计数以及分类计数较对照组均明显升高( P<0.01), IHC显示烟熏组PLTP和IL-8蛋白表达高于对照组；高浓度CSE (2%、4%)抑制HBECs增殖( P<0.001)；不同浓度的CSE作用24 h后, IL-8 mRNA及蛋白表达量增加,而PLTP蛋白表达量下降,并且IL-8蛋白分泌呈现时间依赖性；PLTP siRNA处理后,IL-8表达量明显升高(P<0.001)。结论：PLTP基因缺失促进香烟诱导HBECs合成IL-8。
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磷脂转运蛋白和内毒素的研究进展
磷脂转运蛋白（ PLTP）主要参与磷脂在脂蛋白之间的转移，与动脉粥样硬化的形成有密切关系〔1，2〕。近有研究指出PLTP和脂多糖（ LPS）的代谢密切相关，可以促进LPS和高密度脂蛋白（ HDL）的结合，然后以类似胆固醇逆转运（ RCT）的形式运回肝脏，通过胆汁排出体外，从而使血浆中游离LPS浓度下降，减少脓毒血症的发生〔3〕。研究表明肝脏的X受体（ LXR）和组成性雄甾烷受体（ CAR）对LPS诱导的肝脏和肺损伤具有保护作用，而且能够调节PLTP、胆固醇酯转运蛋白（ CETP ）等参与LPS降解的脂蛋白的表达〔4，5〕，但其是否通过促进胆汁酸的分泌促进LPS通过肠道排出，来完成LPS在体内代谢的后步骤尚不清楚，这些发现对于治疗和预防内毒素血症及其导致的严重并发症有着重要的作用，可能成为其临床治疗学和药物研发的新的分子靶点。
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磷脂转运蛋白和巨噬细胞移动抑制因子在支气管肺发育不良小鼠血清中表达及意义
目的探讨支气管肺发育不良（BPD）小鼠血清巨噬细胞移动抑制因子（MIF）及磷脂转运蛋白（PLTP）水平变化及意义。方法96只4日龄小鼠，随机分为氧气组和空气组。氧气组置于氧浓度为65%的氧箱中，空气组暴露于空气中。分别于实验的第7、14、21、28天时每组随机选取12只小鼠，留取血标本和肺脏；通过酶联免疫法（ELISA）测定血液MIF及PLTP水平，HE染色观察肺组织形态变化。结果氧气组小鼠肺组织病理表现为肺实质增厚、肺纤维化明显，放射性肺泡计数明显低于空气组，差异有统计学意义（P<0.01）。空气组小鼠PLTP水平在第7、14、21天逐渐升高，第28天开始降低；而氧气组小鼠在第7、14天升高，第21、28天降低。空气组小鼠MIF水平无明显改变；氧气组小鼠在第7、14、21天逐渐升高，第28天下降。结论 MIF及PLTP可能是BPD的生物学标志。
关键词： 支气管肺发育不良 巨噬细胞移动抑制因子 磷脂转运蛋白 肺损伤 -
急性冠脉综合征患者血清磷脂转运蛋白活性与N末端脑钠肽前体水平的 相关性及预后意义
目的:分析急性冠脉综合征(ACS)患者血清磷脂转运蛋白(PLTP)活性与N末端脑钠肽前体(NT-proB-NP)水平的相关性及预后意义.方法:2014年至2016年期间,无锡市锡山人民医院心血管内科顺序入选ACS患者121例,测定PLTP活性和NT-proBNP水平、行心脏彩超及常规实验室检验,随访一年.结果:高NT-proB-NP水平患者PLTP活性明显高于低NT-proBNP水平患者,多重线性回归提示NT-proBNP水平与PLTP活性相关(Beta=0.214,P=0.014).左室收缩功能降低患者PLTP活性与NT-proBNP水平明显增高.Logistic回归分析提示高PLTP活性(OR=1.024,P=0.000)与高NT-proBNP水平(OR=1.000,P=0.027)是不良心脏事件的独立预测因子.ROC曲线显示高PLTP活性与高NT-proBNP水平预测不良心脏事件发生的曲线下面积分别为0.798与0.757.结论:ACS患者血清PLTP活性与NT-proBNP水平相关且能预测不良心脏事件的发生.
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磷脂转运蛋白在毕赤酵母中的高效表达
为深入了解磷脂转运蛋白的结构和功能,从中国人胎肝组织总RNA成功克隆了磷脂转运蛋白成熟肽基因,所得磷脂转运蛋白基因通过同源重组整合至毕赤酵母细胞染色体的醇氧化酶AOX1基因中,甲醇诱导后经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳显示诱导表达蛋白分子量约75 kDa,薄层扫描显示表达蛋白占酵母蛋白总量的28%,为大量制备重组磷脂转运蛋白奠定了基础.
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冠心病患者血清磷脂转运蛋白活性与冠状动脉病变严重程度的相关分析
目的 分析冠心痛患者血清磷脂转运蛋白活性水平与冠状动脉病变严重程度的相关性.方法 2015年6月至2016年6月期间,无锡市锡山人民医院心血管科顺序入选胸痛患者202例,行冠状动脉造影术后分为冠心病组(n=121)和非冠心病组(n=81),计算Gensini评分,测定血清磷脂转运蛋白活性水平并行常规实验室检查.结果 冠心病组磷脂转运蛋白活性水平和Gensini评分显著高于非冠心痛组[90.3(67～ 118) mg/dL比77.4(54.6～103.3) mg/dL,P＜0.05;29(8～48)比2(0～6),P＜0.001].70～79岁与69岁及以下、男性与女性、糖尿病与非糖尿病患者相比,磷脂转运蛋白活性水平和Gensini评分明显升高(P＜0.05).多重线性回归分析提示冠心病组患者磷脂转运蛋白与Gensini评分相关(Beta=0.356,P＜0.001).ROC曲线分析显示磷脂转运蛋白曲线下面积为0.749(P＜0.001).结论 冠心病组磷脂转运蛋白活性水平与冠状动脉病变严重程度相关,磷脂转运蛋白活性水平可预测冠状动脉病变严重程度.
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中国人磷脂转运蛋白基因克隆及序列分析
为探讨中国人磷脂转运蛋白的基因结构、组成及特点,克隆了中国人磷脂转运蛋白基因.首先提取人胎肝组织总RNA,以此为模板利用逆转录-聚合酶链反应法成功钓取了磷脂转运蛋白成熟肽基因片段, DNA序列分析所得基因片段由1 428个碱基组成.
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磷脂转运蛋白与脂蛋白代谢和动脉粥样硬化
动脉粥样硬化性心脑血管疾病是困扰人类健康的首要慢性炎症性疾病.而脂蛋白代谢异常是公认的动脉粥样硬化主要危险因素.2001年哥伦比亚大学的研究人员发现磷脂转运蛋白可以通过影响脂蛋白代谢进而改变动脉粥样硬化的易感性,从而开启了长达十多年的磷脂转运蛋白热点研究.从动物实验到人群调查使得人们对磷脂转运蛋白在脂蛋白代谢和动脉粥样硬化中作用的认识不断深入.
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磷脂转运蛋白在高密度脂蛋白代谢和胆固醇逆向转运中的生物学作用
磷脂转运蛋白(PLTP)活性与糖尿病、肥胖、动脉粥样硬化等疾病明显相关的作用机制主要与其参与脂蛋白代谢有关.其中引人注目的是PLTP在高密度脂蛋白(HDL)代谢和胆固醇逆向转运(RCT)中发挥的复杂生物学作用.PLTP可否通过影响HDL和RCT而发挥对动脉粥样硬化的作用?本文通过近年的文献复习并结合我们的相关工作与读者一同寻找答案和线索.
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性别差异对磷脂转运蛋白基因敲除小鼠胆固醇逆转运效率的影响
目的 观察磷脂转运蛋白基因敲除(PLTP-/-)后雌雄小鼠血浆脂质水平的差异,比较PLTP-/-对雌雄小鼠胆固醇逆转运(RCT)效率的影响.方法 选择8周龄同窝出PLTP-/-小鼠雌雄各8只,喂饲高脂饲料4周后,酶法检测小鼠血浆中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-Ch)和非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-Ch)水平,Western blot检测血浆载脂蛋白A1(apoA1)表达,小鼠腹腔注射含3H-胆固醇的巨噬细胞,48 h后,取小鼠血浆、肝脏、胆汁、小肠和粪便,利用液闪计数仪检测小鼠各组织中的放射活度,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝组织清道夫受体BI(SR-B1)、低密度脂蛋白受体(LDL-R)、三磷酸腺苷结合转运蛋白G5/G8(ABCG5/G8)、肝X受体α(LXRα)、胆固醇7α羟化酶(CYP7A1)、小肠ABCG5/G8和肝x受体α(LXRα)的基因表达.结果 相比于雄性PLTP-/-小鼠,雌性PLTP-/-小鼠血浆中TC、TG、HDL-Ch和non-HDL-Ch的表达无明显改变,但apoA1水平,差异有统计学意义(P＜0.05),雌性PLTP-/-小鼠升高;体内RCT实验显示:与雄性PLTP-/-小鼠相比,雌性PLTP-/-小鼠血浆和小肠中放射活度无变化,肝脏、胆汁和粪便中放射活度,差异有统计学意义(P＜0.05),雌性PLTP-/-小鼠升高;RT-PCR显示:与雄性PLTP-/-小鼠相比,雌性PLTP-/-小鼠肝脏中RCT相关因子LXR α、ABCG5/G8及CYP7A1表达,差异有统计学意义(P＜0.05),雌性PLTP-/-小鼠升高,而SR-B1、LDL-R表达无明显变化;小肠壁LXRα、ABCG5/G8表达未见明显变化.结论 磷脂转运蛋白基因敲除后,雌性PLTP一-小鼠的胆固醇逆转运效率较高于雄性PLTP-/-小鼠,肝脏中RCT相关蛋白基因表达增加.
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磷脂转运蛋白参与烟草提取物诱导的Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡
目的：研究磷脂转运蛋白(PLTP)在烟草提取物对大鼠Ⅱ型肺泡上皮凋亡中的作用。方法体外培养大鼠肺泡上皮RLE-6TN细胞株24 h，分别加入0.5%，1.0%和2.0%烟草提取物共培养24 h或48 h；委托上海吉玛公司合成siRNA-PLTP，并将siRNA-PLTP转染入RLE-6TN中，下调PLTP的表达后，观察烟草烟雾对RLE-6TN细胞凋亡的影响。Hochest染色后观察细胞核的形态学改变；流式细胞术检测细胞凋亡率；蛋白质印迹法（Western blot）检测PLTP的表达量和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的活性。结果经不同浓度的（0.5%，1.0%，2.0%）烟草提取物作用后，细胞早期凋亡率由（1.68±0.098）%增加至（18.663±0.964）%（P<0.001）；Hoechst染色可见部分凋亡细胞，核发白、固缩、染色质边集等现象；PLTP的表达和caspase-3的活性增加；将PLTP敲降后，可部分逆转烟草提取物诱导的RLE-6TN细胞中caspase-3的活性的增加（P<0.05）。结论 PLTP参与烟草提取物诱导大鼠肺泡上皮细胞的凋亡。
关键词： 烟草提取物 大鼠肺泡上皮细胞 凋亡 磷脂转运蛋白 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 -
熊去氧胆酸联合S-腺苷蛋氨酸改善妊娠期肝内胆汁淤积症临床疗效及对患者血清中磷脂转运蛋白、白细胞介素1表达水平的影响
目的：探讨熊去氧胆酸联合S-腺苷蛋氨酸治疗妊娠期肝内胆汁淤积症( ICP)的临床疗效以及对磷脂转运蛋白(PLTP)、白细胞介素18(IL-18)表达水平的影响。方法选取ICP患者116例，将其随机分为观察组与对照组各58例。对照组给予S-腺苷蛋氨酸治疗，观察组在此基础上使用熊去氧胆酸。治疗前后分别对两组患者的瘙痒评分以及血清总胆汁酸( TBA)、间接胆红素( DBIL)、血清总胆红素( TBIL)、谷草转氨酶( AST)、谷丙转氨酶( ALT)水平进行评价，分析新生儿情况以及治疗过程中的药物不良反应，并采用ELISA法检测两组ICP患者血清中PLTP、IL-18的浓度水平。结果治疗前两组ICP患者的瘙痒评分及血清中TBA、DBIL、TBIL、AST、ALT水平差异均无显著性(P>0.05)；观察组瘙痒评分及血清生化指标治疗后均低于对照组水平(P<0.05)。对新生儿情况进行统计，包括宫内窘迫、早产、新生儿窒息、产后出血率在内，观察组均明显低于对照组，在Apgar评分方面观察组显著高于对照组(P<0.05)。此外，两组治疗后PLTP、IL-18水平相比较差异有显著性(P<0.05)。结论熊去氧胆酸联合S-腺苷蛋氨酸对ICP显示出较好的疗效，同时降低了患者血清中PLTP、IL-18水平，为熊去氧胆酸治疗ICP提供了理论基础。
关键词： 妊娠期肝内胆汁淤积症 熊去氧胆酸 S-腺苷蛋氨酸 磷脂转运蛋白 白细胞介素18 -
血清巨噬细胞移动抑制因子和磷脂转运蛋白在支气管肺发育不良中的变化
目的 探讨早产儿血清巨噬细胞移动抑制因子(MIF)和磷脂转运蛋白(PLTP)表达及在支气管肺发育不良(BPD)中的临床意义.方法 选择2013年1至2014年10月我院新生儿重症监护病房收治的体重＜2000 g、诊断为新生儿呼吸窘迫综合征和(或)予以机械通气的早产儿,超过28天仍氧依赖者为BPD组,日龄不足28天就已停用氧气者为对照组.入选患儿分别在生后第1、7、14、21、28天留取血清,用酶联免疫吸附(ELISA)法测定MIF和PLTP含量.结果 BPD组共纳入15例,对照组共纳入25例.BPD组各时间点血清MIF水平(ng/ml)均高于对照组[1天(19.5±1.4)比(8.0±7.0),7天(19.0±1.9)比(10.3±8.5),14天(18.6±2.3)比(11.2±8.3),21天(18.8±1.9)比(11.3±7.4),28天(19.1±1.4)比(1 1.6±7.8),P＜0.05],14、21、28天时血清PLTP水平(ng/ml)低于对照组[14天(13.4±1.5)比(17.1±2.2),21天(14.0±1.6)比(21.7±3.0),28天(14.9±1.5)比(24.4 ±1.7),P＜0.05].结论 BPD患儿血清中MIF高度表达,PLTP表达水平相对较低,提示二者水平调控可能与BPD发生有关.
关键词： 支气管肺发育不良 巨噬细胞移动抑制因子 磷脂转运蛋白 婴儿 早产
