首页 > 文献资料
-
铅对体外培养大鼠海马神经细胞生长和Oct-2蛋白表达的影响
目的探讨铅对海马神经细胞生长发育和对Ⅱ型POU域蛋白Oct-2表达的影响.方法采用大鼠海马神经细胞体外培养建立细胞模型,醋酸铅的染毒浓度分别为10-1、100、101、102、103 μmol/L,对照组给予等量培养液.染毒后24 h用免疫组织化学法检测神经细胞和神经胶质细胞的标志物神经丝(NF)和神经胶质原纤维酸性蛋白质(GFAP)以及Oct-2蛋白的表达.结果10 μmol/L及以上浓度醋酸铅组海马神经细胞胞体减小、轴突突起长度和细胞间连接减少.GFAP免疫组化结果发现1 μmol/L 醋酸铅即可使GFAP阳性细胞数明显增加,与对照组相比差异具有统计学意义.此外,1 μmol/L的醋酸铅可导致神经元和神经胶质细胞Oct-2表达阳性面积比与对照组相比差异具有统计学意义,10 μmol/L以上浓度醋酸铅作用下,Oct-2表达阳性面积比和吸光度均高于对照组,差异具有统计学意义.结论醋酸铅在抑制神经元生长和分化的同时可刺激神经胶质细胞增生,铅对中枢神经系统的部分毒作用至少与其导致的Oct-2表达增加有关.
-
阿尔茨海默病患者尿液中相关神经丝蛋白含量的诊断价值
目的 探讨阿尔茨海默病(AD)患者尿液中Alzheimer相关的神经丝蛋白(AD7c-NTP)的含量在AD诊断中的价值. 方法 收集就诊于我院门诊AD患者及健康体检者的尿液标本450例,其中AD组共257例,轻度131例、中重度126例,健康对照组193例,应用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定尿样标本中AD7c-NTP水平. 结果 轻度、中重度AD组尿样标本中AD7c-NTP含量为(1.94±0.74)μg/L和(3.92±0.86)μg/L,健康对照组为(0.65±0.80)μg/L,轻度和中重度AD组比较,差异均有统计学意义(t=1.727,P＜0.001),三组比较差异有统计学意义(F=-13.520,P＜0.001).轻度AD组尿样标本中AD7c-NTP含量与MMSE呈负相关(r=-0.23,P=0.006),而中重度AD组尿样标本中AD7c-NTP含量与MMSE无明显的相关性(r=0.59,P=0.113).根据ROC曲线,确定1.50 μg/L为尿AD7c-NTP诊断AD的切点,对应的灵敏度和特异度分别为90.6％和91.8％,ROC曲线下面积为0.94,95％可信区间为0.91～0.97. 结论 尿AD7c-NTP含量检测可作为AD辅助诊断的方法之一.
-
神经丝蛋白轻链在视神经脊髓炎谱系疾病诊断和预后中的意义
目的 研究脑脊液中轴索损伤标志物神经丝蛋白轻链(NFL)检测对视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)诊断及预后的意义.方法 收集2014年1月至2016年8月就诊于海军总医院的NMOSD患者61例作为试验组(NMOSD组),同期就诊的因其他疾病如神经症、偏头痛等行腰椎穿刺者 24例作为正常对照组.收集NMOSD组临床、影像学资料及两组脑脊液标本,以酶联免疫吸附实验方法检测两组脑脊液中NFL浓度并进行比较.比较不同亚型的NMOSD患者脑脊液NFL水平,采用多元线性回归方法分析患者脑脊液中NFL浓度的影响因素.结果 NMOSD组脑脊液NFL浓度[2 729.00(14 862.00) pg/ml]较正常对照组[299.50(308.00) pg/ml]明显升高,差异有统计学意义(进行以10为底的对数转换后行t检验, t=8.588, P=0.000).NMOSD患者年龄(b=0.017, P<0.01)、扩展残疾状况量表评分(b=0.078, P<0.05)、病灶强化与否(b=0.478, P<0.01)对lg(NFL)有影响.性别、病程、血水通道蛋白抗体阳性率对NMOSD患者脑脊液中NFL浓度高低无明显影响.结论 脑脊液NFL水平有助于评估NMOSD患者病情轻重及有无进展趋势.
-
压力对大鼠纯化视网膜神经节细胞存活及轴突生长的影响
目的 研究压力对视网膜神经节细胞(RGC)存活和轴突生长的影响及其与神经微丝蛋白(NF)-H表达变化的关系,探讨压力引起RGC损伤的机制.方法 对照实验研究.纯化培养20只SD乳鼠的RCC.采用开放式压力控制培养系统,建立压力损伤模型,分别检测20、40、60及80 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)压力作用48 h对RGC存活数及轴突生长的影响,测定存活且有轴突的RGC数及其长轴突的长度.采用免疫组织化学染色加图像分析系统,检测压力对RGC表达NF-H的影响,以吸光度(A)值表示.采用SPSS 13.0统计学软件对数据进行分析.组间RGC存活数和细胞轴突长度与对照组比较采用单因素方差分析(One-way ANOVA),组间进一步两两比较采用SNK法(g检验).以P<0.05作为差异有统计学意义.结果 纯化培养的SD大鼠RGC纯度可达96.24%.压力40、60及80 mm Hg作用48 h,RGC存活数和细胞轴突长度与对照组比较明显降低,差异有统计学意义(存活细胞数:P=0.001,0.000,0.000;细胞轴突长度:P=0.000,0.000,0.000),且降低程度随压力增高而增大;NF-H表达差异也有统计学意义(P=0.000,0.000,0.000),且NF-H阳性细胞分布不规则.结论 压力可影响纯化培养的RGC存活数和轴突生长,可能与其下调RGC中NF-H的表达有关,推测压力是引起青光眼视神经损害的机制之一.(中华眼科杂志,2009,45:164-167)
-
氯丙烯对大鼠神经组织神经丝亚单位蛋白含量的影响
目的为了进一步探讨氯丙烯引起的周围神经病的发病机理.方法用Western印迹方法测定了亚慢性中毒大鼠大脑、脊髓、坐骨神经组织低分子量神经丝(NF-L)、中分子量神经丝(NF-M)和高分子量神经丝(NF-H)3个亚单位相对含量的变化.结果氯丙烯使脑组织沉淀和上清液中神经丝3个亚单位的相对含量明显降低;在脊髓组织沉淀和上清液中,NF-M均降低.NF-H在沉淀增加,在上清液中降低.NF-L在沉淀增加;在坐骨神经组织沉淀和上清液中,氯丙烯使NF-M含量降低, 而使NF-H含量增加.NF-L在沉淀中降低、在上清液中明显增加.结论氯丙烯引起的中毒性周围神经病与神经丝亚单位紊乱有关.
-
不同温度与持续时间下射频热凝对兔半月神经节的组织学影响
目的 研究不同温度与持续时间下射频热凝对兔半月神经节的组织学影响.方法 利用R-2000B型温控热凝射频仪和外裸长50 mm,直径0.4 mm热敏电极,对80只兔半月神经节分别进行60、70和80 ℃温控热凝毁损实验,于术后第1、7、14和28天取出受损的半月神经节,HE染色阳性者,按石蜡切片热修复抗原实验程序行免疫组化检测,观察毁损后神经丝蛋白(NF200)、乙酰胆碱酯酶(ACHE)及毒蕈碱乙酰胆碱酯酶受体(M受体)表达情况.结果 毁损半月神经节HE染色阳性表现为神经节细胞退变,神经纤维分布不均匀,髓鞘脱失.免疫组化结果为:NF200阳性表现为神经节细胞胞质和神经纤维细胞胞质内见深棕黄色颗粒,ACHE阳性表现为神经节细胞胞质和神经纤维细胞胞质内见深棕黄色颗粒,M受体阳性表现为神经节细胞胞质和神经纤维细胞胞质内见棕黄色颗粒.同一温度下,射频持续时间相同时,随术后时间的增加,NF200、ACHE、M受体三项指标的阳性表达率逐渐增高;而射频持续1 min与3 min比较,三项指标阳性表达率差异均无统计学意义(均P＞0.05).射频持续时间相同时,70 ℃与60 ℃比较,三项指标阳性表达率均明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);而70 ℃与80 ℃比较,三项指标阳性表达率差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 当射频毁损温度为70 ℃左右时,对半月神经节杀伤力大,神经活性明显降低;这可能是半月神经节毁损的较适宜的温度.
-
尿液AD7c-NTP表达变化对痴呆诊断价值的探讨
目的 探讨尿液阿尔茨海默病相关神经丝蛋白(AD7c-NTP)表达变化对不同类型痴呆的诊断价值.方法 分别采用简易智能状态检查量表(MMSE)和蒙特利尔认知评价量表(MoCA)评价阿尔茨海默病(AD)、遗忘型轻度认知损害(aMCI)、额颞叶痴呆(FTD)和血管性痴呆(VaD)患者认知功能,酶联免疫吸附试验检测尿液ADTc-NTP表达变化,Spearman秩相关分析评价不同类型痴呆患者尿液AD7c-NTP水平与MMSE和MoCA评分的相关性,受试者工作特征曲线(ROC曲线)计算尿液AD7c-NTP诊断痴呆之灵敏度、特异度和准确率.结果 不同类型痴呆患者尿液AD7c-NTP水平差异有统计学意义(P=0.000),其中AD组、aMCI组、FTD组均高于对照组(P=0.000,0.029,0.005),中至重度AD组患者尿液AD7c-NTP水平高于轻度AD组,但未达到统计学意义(P=0.359).相关分析显示,仅轻度AD组患者尿液AD7c-NTP水平与MoCA评分呈负相关(rs=-0.506,P=0.016).ROC曲线下面积为0.838(95％CI:0.732 ～ 0.945,P=0.000),诊断阿尔茨海默病的灵敏度和特异度分别为70.20％和90％,所对应的尿液AD7c-NTP临界值为2.32 ng/ml.约70.18％(40/57)的AD组、63.33％(19/30)的aMCI组和45.95％(17/37)的FTD组患者尿液AD7c-NTP表达异常(＞2.32 ng/ml).结论 尿液AD7c-NTP表达变化在痴呆患者早期诊断和病情评价中具有重要临床参考价值.
-
尿阿尔茨海默病相关神经丝蛋白与外周血 CD45RA+T 细胞亚群联合检测早期诊断阿尔茨海默病
目的：探讨尿阿尔茨海默病相关神经丝蛋白(Alzheimer disease related neural thread protein,AD7c-NTP)与外周血淋巴细胞 CD45RA+ T 亚型联合检测在阿尔茨海默病(AD)早期诊断中的价值。方法根据 Peterson制订的轻度认知功能障碍(MCI)诊断标准和美国精神障碍诊断与统计手册第4版(DSM-Ⅳ)有关 AD 的诊断标准,选取 AD 患者32例(AD 组),MCI 患者30例(MCI 组),另选60例健康者作为对照组。对比各组尿 AD7c-NTP 与CD45RA+ T 细胞亚群变化及诊断价值。结果①CD45RA+ T 蛋白表达水平在 AD 组和 MCI 组显著低于对照组(P <0.01)；②CD45RA+ T 在 AD 组和 MCI 组中的相对表达水平较对照组显著降低(P <0.01),AD 组与 MCI 组间差异无统计学意义(P >0.05)；③尿 AD7c-NTP 在 AD 组和 MCI 组中的含量较对照组显著升高(P <0.01),AD 组与MCI 组间差异无统计学意义(P >0.05)；④CD45RA+ T 与 AD7c-NTP 联合诊断具有较好的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值。结论 AD7c-NTP 与 CD45RA+ T 联合检测是诊断 AD 早期病变的较好指标,提升二者单独应用时的预测价值,为 AD 早期诊断及疗效监测提供参考。
-
不同环境设置对局灶性脑梗死大鼠梗死灶周围神经丝蛋白、胶质纤维酸性蛋白表达的影响
目的 观察不同环境对局灶性脑梗死大鼠梗死灶周围神经丝蛋白(neurofilament,NF)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达的影响.方法 SD大鼠140只.将实验动物随机分为假手术对照组(10只)和大脑中动脉阻断(MCAO)手术组(130只),再将MCAO手术组随机分为独居组(30只)、社会交往组(40只)、探索学习组(30只)和丰富环境组(30只).假手术对照组和各MCAO手术组分别于术后7、28天随机选取5只大鼠处死,采用免疫组织化学染色,观察大鼠梗死灶周围皮质NF、GFAP阳性表达.结果 社会交往组、探索学习组和丰富环境组术后7、28天NF、GFAP阳性表达均明显优于独居组和假手术对照组(P＜0.05或＜0.01).结论 社会交往、探索学习和丰富环境均能促进梗死灶周围NF、GFAP的阳性表达.
关键词： 脑梗塞 大鼠 神经微丝蛋白质类 神经胶质原纤维酸性蛋白质 -
神经丝蛋白在猪胸腰段脊髓火器贯通伤后的早期表达
目的:建立家猪胸腰段脊髓火器贯通伤模型和改良Allen's打击伤后全瘫模型,观察伤后神经丝蛋白的早期表达.方法:实验于2005-05/08在解放军第一七五医院实验室完成.取健康雄性家猪20只,单纯随机分为3组:①火器伤组(n=9):在全麻状态下制作胸腰段(L1～L2)脊髓火器伤模型,分为伤后1,3,6 h 3个时间处死(n=3).②打击伤组(n=9):L1节段脊髓行改良Allen's打击,致伤力为500 g·cm,处死时间同前.③空白对照组(n=2):只麻醉,不造模,伤后6 h处死.各组在伤后相应时间点取脊髓标本(火器伤组取近伤段,打击伤组取伤点),进行神经丝蛋白的免疫组化染色,观察其阳性表达的吸光度(A)值;在伤后6 h火器伤组和打击伤组分别在脊髓伤点、近伤段(距伤点1～3 cm脊髓)、中伤段(距伤点3～7 cm脊髓)及远伤段(距伤点近头侧10～12 cm处的胸髓)取材,观察神经丝蛋白的A值.结果:经补充20只猪进入结果分析.①空白对照组神经丝蛋白的A值为91.1±3.01,打击伤组脊髓损伤后1,3,6 h神经丝蛋白的A值均高于火器伤组(45.7±2.59,39.5±2.48,34.6±4.06;31.8±2.66,27.4±1.99,20.8±1.69),且两组神经丝蛋白的表达随着时间延长而下调(P＜0.001).②伤后6 h打击伤组仅在伤点和近伤段神经丝蛋白的A值低于空白对照组(P＜0.05),而火器伤组各部位神经丝蛋白的A值低于空白对照组(P＜0.05).结论:和脊髓打击伤相似,脊髓火器伤后神经细胞的破坏与修复并存,有一定的时空性,且与损伤程度有关.受伤后1 h即可发现神经元细胞的破坏、崩解,但脊髓火器伤的波及范围较打击伤更为广泛.
-
臂丛损伤后细胞外三磷腺苷对脊髓组织中NT-3和NF-200表达的影响
目的 观察腹腔注射细胞外三磷腺苷(ATP)对臂丛神经切断后脊髓组织中神经营养因子-3(neurotrophin-3,NT-3)和神经微丝蛋白(neurofilament protein,NFP)表达的影响.方法 雌性Wister大鼠60只,体重280～300 g,随机分成2组,造成大鼠右侧臂丛神经根性切断损伤模型.手术后实验组每日腹腔注射三磷腺苷0.4 ml(2 mg/kg),对照组腹腔注射生理盐水0.4 ml.分别于手术后2、4、6周取脊髓G5～T1组织,应用免疫组化染色和图象分析系统方法观察NT-3和NF-200表达.结果 腹腔注射细胞外三磷腺苷能显著地增加臂丛切断损伤后脊髓组织中NT-3和NF-200的的表达(P＜0.05).结论 腹腔注射细胞外三磷腺苷能增加臂丛损伤后脊髓组织的NT-3和NF-200的表达.
-
尿液神经丝蛋白检测对老年阿尔茨海默病患者的临床意义
目的 探讨老年阿尔茨海默病(AD)患者尿液中神经丝蛋白含量检测的临床意义.方法 AD组:门诊以及住院诊断为AD患者66例(AD组),其中男性60例,女性6例;年龄范围75～96岁,年龄(87.27±4.95)岁;对照组:智能正常老人85名,其中男性72名,女性13名;年龄范围74～98岁,年龄(86.93±5.21)岁,所有受试者进行认知功能测评,包括简易智能状态检查量表(MMSE)、临床痴呆评定量表(CDR),Hachinski缺血指数量表(HIS).根据量表评分将AD组分为轻、中、重组.采集尿液标本进行尿液中神经丝蛋白(AD7c-NTP)含量检测.结果 (1)AD组尿AD7c-NTP阳性明显高于对照组,两组阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.001);(2)两组受试者年龄、性别、教育背景与AD7c-NTP含量的相关性分析(Pearson相关分析)显示,两组尿AD7c-NTP含量与以上诸因素均无明显相关性;MMSE分数与AD7c-NTP含量呈负相关,CDR分数与AD7c-NTP含量呈正相关.(3)轻度AD组与中、重度AD组尿AD7c-NTP含量比较差异有统计学意义(F=88.756,P<0.001),提示尿中的AD7c-NTP含量随疾病严重程度增加而上升.结论 通过对老年AD患者尿液中AD7c-NTP含量检测,可以对AD的诊断提供帮助,并可能与病情严重程度有一定的关系.
-
增生期和成熟期皮肤瘢痕中的神经纤维形态学观察
目的 观察不同时期增生性瘢痕(HS)中神经纤维数量和形态的变化.方法 标本取自烧伤或创伤后HS形成1月～23年的患者,分为增生期瘢痕组(≤6月)和成熟期瘢痕组(>6月).正常对照组取自患者的供皮区.利用单克隆抗神经丝蛋白(NF)抗体免疫荧光染色技术,在荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)下观察不同时期瘢痕组织和正常皮肤组织中神经纤维的差异.结果 增生期瘢痕组神经纤维的阳性面积比明显高于正常对照组(P<0.05),神经纤维分布杂乱,形态不规整,有局部的扭曲变细和肿胀断裂;成熟期瘢痕组神经纤维的阳性面积比明显低于正常对照组(P<0.05),神经纤维排列较规整,内部结构和立体结构均接近正常.结论 瘢痕增生过程中神经纤维的密度和形态皆随时间变化而变化.
-
神经微丝蛋白在先天性巨结肠和巨结肠同源病的表达变化
目的 了解神经微丝蛋白(neurofilament protein,NFP)在先天性巨结肠(Hirschs-prung's disease,HD)和巨结肠同源病(allied Hirschsprung's disorder,HAD)肠组织的表达,观察NFP与先天性巨结肠及其同源病的相互关系,进一步探讨两种疾病的发病机制.方法 采用鼠抗人NFP单克隆抗体通过免疫组化法对15例先天性巨结肠,11例巨结肠同源病肠组织NFP的表达进行研究,10例正常结肠组织作对照.结果 对照组正常肠段肌间神经丛中有大量NFP阳性纤维和NFP阳性神经细胞,阳性细胞突起少而粗短;HD狭窄段肠管肌间神经丛中未见NFP阳性细胞,但可见大量着色深的NFP阳性纤维;HAD狭窄段肌间神经丛中可见形态各异的NFP阳性细胞,细胞大,且着色深,突起多,丛中只见少量NFP阳性纤维.HD的扩张段和HAD的扩张段分别与正常结肠比较,NFP的表达无统计学意义(P＞0.05);HD狭窄段分别与HAD狭窄段和正常结肠比较,NFP的表达均有差异(P＜0.01);HAD狭窄段和正常结肠比较,差异也有显著性意义(P＜0.01).结论 NFP可能与HD和HAD的发生均有关系,但NFP在HD和HAD的表达有差异.
关键词： Hirschsprung病 神经微丝蛋白质类 免疫组织化学 -
大鼠脊髓损伤后神经丝蛋白及胶质纤维酸性蛋白表达的变化及意义
[目的]研究脊髓损伤后神经元中神经丝蛋白(NF200)及星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的变化及其关系,探讨不同细胞在再生修复中的作用.[方法]SD大鼠30只,分为正常、伤后1 d,3 d,7 d,14 d,21 d6组,每组5只,用免疫组化染色及图象分析方法观察神经元NF200及星形胶质细胞GFAP的表达,并对二者进行相关性分析.[结果]脊髓损伤后NF200及GFAP的表达均呈进行性增高,二者有显著的相关性;GFAP表达的增高早于NF200的增高,而前角神经元NF200的表达早于后角神经元.[结论]脊髓损伤后,星形胶质细胞可能是刺激神经元功能活跃,促进神经纤维再生的一个重要因素,不同类型神经元对损伤的反应存在着差异.
关键词： 脊髓损伤 神经微丝蛋白质类 神经胶质原纤维酸性蛋白质 -
大鼠头颅侧向旋转致脑弥漫性轴索损伤的NF68免疫组化形态学观察
目的探讨大鼠头颅侧向旋转后脑弥漫性轴索损伤( DAI )的形态学改变。方法大鼠 12只，随机均分为损伤后30 min、2 h、 24 h及对照组，制作头颅侧向旋转脑DAI模型。脑矢状切片经用小鼠抗神经纤维丝 ( NF )蛋白 NF68亚单位的血清、免疫组化ABC法与 DAB+H2O2显色技术等处理。选延髓部分，薄片间包埋，光镜定位，阳性区超薄切片，电镜观察。结果伤后30 min光镜下延髓轴索迂曲肿胀；电镜下髓鞘轻度分离，轴浆NF结构紊乱。伤后2～24 h，轴索破坏随时间渐重，光镜下轴索明显肿胀、断裂并形成轴缩球；电镜下髓鞘显著分离，局部断裂，线粒体空泡变并移向周边，部分胞浆溶解。和正常对照比，伤后轴索轴浆 NF68染色也明显增强；伴随轴索结构的变化， NF68阳性轴索染色强度和数量逐步递增。结论大鼠头颅侧向旋转后脑神经轴索内NF蛋白的 NF68亚单位免疫活性显著增强，引起NF结构紊乱，终致轴索肿胀、断裂并形成轴缩球。
-
烧伤患者Ⅲ度创面不同时期神经形态学观察
目的 了解烧伤患者Ⅲ度创面不同时期肉芽组织中神经纤维数量和形态学变化.方法 切取40例烧伤患者伤后1、2、3、4周Ⅲ度创面肉芽组织,同时取其中10例患者的供皮区组织作为正常对照.采用单克隆抗神经丝蛋白抗体免疫荧光染色,存荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)下观察不同时期肉芽组织和正常皮肤组织中神经纤维的变化. 结果 荧光显微镜下观察到,伤后1周创面神经纤维稀疏短小,神经纤维阳性面积百分比为(0.14±0.08)%,低于正常对照[(0.62±0.12)%,P＜0.05];伤后2周神经纤维稍增多,单根走行,无分支,神经纤维阳性面积百分比为(0.40±0.09)%,仍低于正常对照(P＜0.05);伤后3周神经纤维明显增多,常交错呈网状,有较多分支,神经纤维阳性而积百分比为(0.73±0.16)%;伤后4周神经纤维数量较伤后3周无明显改变,多根聚集,神经纤维阳性面积百分比为(0.66±0.13)%,接近于正常对照.LSCM下,伤后1～2周创而神经纤维极为短小;伤后3周肉芽组织中的神经纤维形态不规则,有部分肿胀和扭曲、变细,局部出现断裂和空洞;伤后4周神经纤维形态与伤后3周相似,分支减少;正常皮肤中的神经纤维内部结构连续完整,无明显病理改变. 结论 烧伤创面中神经纤维的数量和形态变化与肉芽组织形成的时间有关.
