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复合富血小板血浆的酶处理异种骨修复兔桡骨缺损
目的:自源性的富血小板血浆可促进骨组织及软组织的修复,又不存在疾病传播及免疫排斥的可能.实验拟验证应用复合富血小板血浆的酶处理异种骨修复节段性骨缺损的可行性.方法:实验于2006-07/12在解放军昆明总医院实验动物中心完成.①实验分组:选用新西兰大耳白兔20只,体质量2.0～2.5 kg,共40只前肢,随机分为复合酶组,单纯酶组,脱蛋白骨组,空白组.每组共10个标本.②实验方法:制作富血小板血浆及酶处理的异种骨并制备桡骨中段15 mm的节段性骨缺损模型,将上述骨材料植入兔桡骨缺损处,其中复合酶组:植入复合富血小板血浆的酶处理异种骨;单纯酶组:植入酶处理异种骨;脱蛋白骨组:植入部分脱蛋白骨;空白组:不植入任何材料.③实验评估:分别于术后4,8,12周取材,X线片及苏木精-伊红染色分别观察骨缺损区的新骨形成情况.同时对各组骨密度进行测定.结果:纳入新西兰大耳白兔20只,均进入结果分析,所有手术无术后感染,无动物死亡,植入骨无脱落.①所有动物麻醉苏醒后均恢复进食,2周伤口愈合,未出现感染及渗液等.富血小板血浆中的血小板含量均为全血的4倍以上.②在同一时间点,酶处理后异种骨与部分脱蛋白骨在成骨能力方面差异无显著性意义,而复合富血小板血浆的酶处理异种骨在8周时骨缺损部分修复;12周时完全修复.空白组骨缺损未修复.③8,12周时复合酶组骨密度较单纯酶组、脱蛋白骨组高,差异有显著性意义(P＜0.05);单纯酶组与脱蛋白骨组比较无明显差异(P＞0.05).结论:经酶处理后异种骨可用于节段性骨缺损的修复,复合富血小板血浆后有明显加速骨愈合的作用.
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沙门菌CWDMs氨基酸代谢的检测
采用氨基酸利用生长试验和谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、α-羟丁酸脱氢酶(α-HBD)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、酸性磷酸酶(ACP)定性与定量分析法,检测伤寒杆菌和甲型副伤寒杆菌经L型变异后形成的细胞壁缺陷突变株(CWDM)的氨基酸代谢活性,了解这些CWDMs变异的特点及其机制,探讨CWDMs变异的性质及其与细胞壁缺陷突变的关系.结果表明,沙门菌CWDMs在仅含蛋氨酸或脯氨酸的培养基上不能生长,但在仅含苏氨酸、色氨酸、缬氨酸或亮氨酸的培养基上均能够生长.酶活性检测表明,沙门菌的CWDMs具有GPT、GOT、LDH、CK、α-HBD、γ-GT及ACP活性,并且其活性明显低于其亲代细菌型.从CWDMs返祖的粗糙型伤寒杆菌恢复了与其亲代细菌型一致或相似的氨基酸代谢及酶活性.提示细胞壁缺失将导致沙门菌与某些氨基酸代谢有关的基因受到抑制以及某些氨基酸代谢酶活性改变,以致使CWDMs成为营养缺陷型菌株.
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糖尿病患者的老年白内障晶体上皮细胞超微结构及酶组织化学变化的研究
目的:研究糖尿病患者的老年障晶体上皮细胞超微结构及酶组织化学变化,探讨该类型白内障发病的可能机制.方法:应用眼组织透射及扫描电镜和酶组织化学的制作方法,对17只糖尿病患者的老年障眼的晶体前囊膜上皮细胞进行研究,5只同年龄组老年障眼的前囊膜上皮组织为对照组.结果:发现糖尿病患者的老年障眼的晶体上皮细胞膜出现水泡、细胞核固缩、溶解.胞浆中线粒体减少,并发生气球样变和形成髓鞘样结构.细胞变形,指状突起增多,可见细胞核丢失、死亡细胞及细胞脱落后残存的细胞框架.晶体上皮细胞由琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)、ATP酶(ATPase)活性下降并维持于低水平.结论:晶体前囊膜上皮细胞的变性可能是糖尿病患者的老年障形成的形态学基础,而晶体上皮细胞中参与能量代谢的各种酶活性降低,使Na+-K+泵功能失调,晶体细胞肿胀破坏.
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留居高原不同时间官兵血生化多项指标变化及意义
目的探讨留居高原不同时间官兵胆红素、血脂和酶的变化规律及意义.方法将140名官兵按留居高原时间分为1组(0.5～1年,n=50)、2组(2～4年,n=30)、3组(5～10年,n=30)、4组(>10年,n=30).检测其血清总胆红素(T-Bil)、直接胆红素(D-Bil)、甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙氨酸氨基转换酶(ALT)、门冬氨酸氨基转换酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK).结果与1组和2组比较,3组和4组T-Bil显著下降(P<0.01)、TC增高(P<0.05);与4组比较,1组CK显著增高(P<0.01);与1组比较,4组AST增高(P<0.05).D-Bil,TG,HDL-C,LDL-C,LDH,ALP,γ-GT和ALT在各组间差异均无显著性(P>0.05).结论 T-Bil减低和TC及AST增高,可能与留居高原罹患冠心病风险增加有关;CK增高可能与新进高原乏氧及体能训练强度有关.
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生物催化在手性药物制备中的应用
随着生物催化技术的不断发展,应用于手性药物制备过程中的生物催化也越来越广泛.该文仅就近5年来生物催化在手性药物制备中的应用情况进行综述.
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急性脑梗塞患者血清心肌相关酶活性的变化
目的探讨脑梗塞(CI)患者血清心肌相关酶(以下简称心肌酶)活性变化的临床意义.方法对72例脑梗塞患者的心肌酶进行测定,并对其影响因素进行相关分析.结果1.脑梗塞患者于病后1周血清心肌酶明显升高,1个月时恢复正常,2.病后1周心电图(ECG)异常患者的血清心肌酶明显高于ECG正常患者,3.病后1个月内死亡者其心肌酶高于存活者.结论提示对脑梗塞患者的血清心肌酶进行检测,有助于判定患者的心功能、病情严重程度及预后.
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兔腰神经根持续压迫时脊髓前角运动细胞的酶学变化
目的: 探讨脊神经根持续性受压损伤后相应脊髓前角运动细胞的酶学变化.方法:健康雄性日本大耳白兔30只,随机分成实验组与对照组,各15只.实验组行L7椎板切除术后以微血管夹钳夹右侧L7神经根制成神经根机械压迫动物模型,对照组仅行L7椎板切除术.分别于术后3,7,14 d切取L7脊髓节段,定量分析脊髓前角运动细胞内乙酰胆碱脂酶(AChE)和酸性磷酸酶(ACP)的活性变化.结果: 术后3,7,14 d脊髓前角运动细胞AChE活性以灰度值表示分别为180.88±11.22、207.30±9.12、215.03±7.92,ACP活性分别为155.31±16.24、133.08±7.69、107.41±7.88,与对照组比较差异十分显著(P<0.01).结论: 脊神经根持续受压可导致其相应脊髓节段前角运动细胞功能受损、兴奋性降低.
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RNA酶的发现与启示
酶的本质是蛋白质已经成为生物学领域的共识,然而美国科学家切赫(Thomas R.Cech)和奥尔特曼(Sidney Alt-man)在研究RNA分子剪切机制的时候观察到某些RNA能够自我进行切割和连接,表现出酶的性质,称为RNA酶.这一重大的发现引起了人们对酶的本质和生命起源问题的进一步探索,也使他们荣获了1989年的诺贝尔化学奖.
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加酶超声浸浴配合酸化水在器械清洗中的效果观察
目的:观察加酶超声浸浴配合酸化水在器械清洗中的效果.方法:加酶超声浸浴配合酸化水对医院手术室医疗器械进行清洗消毒,统计2011年至2013年医疗器械处理质量检测结果,分析加酶超声浸浴配合酸化水在器械清洗中的效果和作用.结果:2011-2013年,观察组处理的各种管腔器械与医疗器械共达3220件,合格数为3156件,合格率为98.0%;对照组处理的各种管腔器械与医疗器械共达3125件,经目测法检测合格数为2365件,合格率为75.7;两组差异对比具有统计学意义(P<0.05).结论:通过加酶超声浸浴与酸化水的配合,可以有效清洗医疗器械的残留污渍,对器械的保养和使用具有重要的意义.
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人参降糖活性的体外评价方法研究进展
从细胞和酶两方面,概述了近年来人参降糖活性体外评价及作用机制,主要针对其通过保护胰岛细胞、促进脂肪细胞和骨骼肌细胞对葡萄糖的摄入与消耗、抑制α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性而发挥降糖活性进行综述,为人参治疗糖尿病的进一步研究和开发应用提供参考.
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评价Olympus 2700生化分析仪酶分析系统
目的 对Olympus 2700生化分析仪酶分析系统进行性能评价,判断其分析性能是否满足临床要求.方法 按照国家医学实验室认可及CAP认可要求,依照NCCLS EP5-A文件,分析ALT、AST、ALP、GGT、CK、LDH日内和日间精密度;用能力对比(PT)评价分析方法的准确度;按照NCCLS EP6-P文件评价分析方法的线性范围;评价分析方法的低检测限和携带污染率;并对试剂说明书的参考范围进行验证.结果 ALT、AST、AIP、GGT、CK、LDH的日内精密度小于1/4总分析误差,日间精密度小于1/3总分析误差;分析方法的能力比对结果合格;分析方法的线性范围符合临床要求;试剂说明书提供的分析方法参考范围符合实验室需要;其它指标符合性能评价要求.结论 Olympus 2700酶分析系统符合实验室性能标准.
关键词： Olympus2700生化分析仪 酶 性能 评价 -
过量碘对中枢神经系统影响的实验研究
目的研究过量碘对中枢神经系统的影响.方法本实验分为三组,适碘组、过碘Ⅰ组,过碘Ⅱ组,分别以含碘量为50μg/L、5 000μg/L、10 000μg/L蒸馏水及普通饲料喂养豚鼠6个月,分别测定大脑皮质及海马组织一氧化氮和酶活性及一氧化氮含量.结果过碘组大脑皮质及海马组织一氧化氮和酶活性及一氧化氮含量较适碘组明显降低(P＜0.01),但两过碘组间一氧化氮和酶活性及一氧化氮含量比较无明显差异(P＞0.05).结论过量碘可以引起大脑皮质、海马组织一氧化氮和酶活性及一氧化氮含量的降低进而对中枢神经系统造成损伤,影响学习记忆与智力.
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异丙酚与安氟醚或七氟醚静吸复合麻醉对心肌酶的影响
目的:观察异丙酚与安氟醚或七氟醚静吸复合麻醉对心肌酶的影响.方法:32例择期非心脏手术的全麻病人,随机分为4组(每组8例),分别给予安氟醚麻醉(A组)、七氟醚麻醉(B组)、异丙酚-安氟醚麻醉(C组)、异丙酚-七氟醚麻醉(D组).其中A、B组为对照组,C、D组为观察组.分别于麻醉前、麻醉诱导后2 h和术后3 d采集静脉血测血清磷酸肌酸激酶(CK)及其同功酶(CK-MB)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、α-羟丁酸脱氢酶(HBDH).结果:麻醉诱导后2 h,A组CK、CK-MB值、LDH及HBDH值升高,与麻醉前比较差异有显著性(P<0.01或P<0.05);B组CK和CK-MB值升高,与麻醉前比较差异有显著性(P<0.05或P<0.01).术后3 d,A、B两组CK值升高,与麻醉前和麻醉诱导后2 h比较差异有显著性(P<0.01或P<0.05),AST值升高,与麻醉前比较差异有显著性(P<0.01或P<0.05).而且A、B两组相比较,A组的CK、LDH值升高幅度明显大于B组(P<0.05).C、D两组仅CK值在术后3 d与麻醉前比较差异均有显著性(P<0.01),但其升高幅度均明显低于A、B两组的同时值(P<0.01),其余各项心肌酶的变化在麻醉诱导后2 h及术后3 d差异均无显著性(P>0.05).与C组比较,A组在麻醉诱导后2 h CK、CK-MB、HBDH值升高(P<0.01),LDH值升高(P<0.05);在术后3 d CK值升高(P<0.01).与D组比较,B组CK值在麻醉诱导后2 h及术后3 d升高(P<0.01),CK-MB值在麻醉诱导后2 h升高(P<0.05).结论:安氟醚和七氟醚两者均能使心肌酶升高,但安氟醚所致的心肌酶升高幅度更明显;临床麻醉剂量的异丙酚能有效地防止安氟醚和七氟醚麻醉时心肌酶的升高.
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藻蓝蛋白对家兔心肌缺血-再灌注损伤的影响
目的 研究藻蓝蛋白对家兔心肌缺血-再灌注损伤模型的影响.方法 家兔60只,采用随机数字表编号后随机分为假手术组,缺血-再灌注组,藻蓝蛋白1、2、3组,除假手术组外均建立心肌缺血-再灌注损伤模型.成模后2 h,藻蓝蛋白1、2、3组用藻蓝蛋白混悬液50、200、400 mg/(kg?d)灌胃2周,假手术组和缺血-再灌注组灌等体积生理盐水对照.采用酶联免疫吸附测定法检测2周时家兔各组大鼠血清中肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、内皮素-1(ET-1)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及心肌组织丙二醛(MDA);免疫组化染色检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)阳性表达;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测缺血区血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达.结果 藻蓝蛋白2、3组NO和SOD、eNOS明显提高,iNOS阳性细胞数增多,缺血区组织VEGF、VEGFmRNA高表达,ET-1、CK-MB和心肌MDA显著降低,与模型组比较(P<0.05),差异有统计学意义.结论 藻蓝蛋白对家兔心肌缺血-再灌注损伤有保护作用.
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酶法处理短棒状杆菌的效果分析
目的 探讨酶法处理短棒状杆菌(Enzyme-digested Corynebacterium parvum product,ECPP)的效果.方法 采用热灭活、超声、Pronase酶消化等方法处理短棒状杆菌(Corynebacterium parvum,CP),电镜观察其结构,并测定其蛋白、多糖及核酸含量.将BALB/c纯系小鼠、青紫蓝家兔和NIH小鼠均随机分为阴性对照组(CK,0.9％ NaCl)、短棒状杆菌制剂(C.parvum product,CPP)组(1 000μg/ml CPP)、低剂量ECPP组(ECPPⅠ组,500μg/mlECPP)和高剂量ECPP组(ECPPⅡ组,1 000 μg/mlECPP),观察BALB/c纯系小鼠脾激活情况、异常毒性及血清IL-2、IFNγ及TNF-α的水平,青紫兰家兔热原反应,NIH小鼠抑瘤效果.结果 电镜观察可见,与热灭活的CP相比,ECPP细胞壁外围厚度明显变薄,细菌内部结构无明显变化;ECPP的蛋白、多糖及核酸含量较CPP均明显下降,且差异均有统计学意义(P＜0.01);ECPPⅡ组小鼠的脾激活指数为2.96,能抑制艾氏腹水瘤,存活率为80％,热原试验合格,异常毒性试验显示其体重增长较CPP组显著,能显著提高小鼠血清中IL-2、IFNγ及TNF-α3种细胞因子的水平.结论 酶法处理短棒状杆菌制剂可降低副反应,提高机体免疫功能,具有良好的抗肿瘤作用,是一种有应用前景的新免疫调节剂.
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酶立体选择性的定向进化策略
酶立体选择性定向进化的基本方法是用合适的分子生物学手段使酶基因发生随机突变,然后进行基因表达和高通量筛选.本文主要对引入突变技术和高通量筛选方法做一简要综述.
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酶法处理短棒状杆菌对荷瘤鼠脾细胞免疫功能的影响
目的 探讨酶法处理短棒状杆菌(Enzyme-digested Corynebacterium parvum product,ECPP)对荷瘤鼠脾淋巴细胞免疫功能的影响.方法 将NIH小鼠随机分为5组:生理盐水对照组(NS)、荷瘤对照组(CK)、阳性对照组(CPP)、低剂量ECPP组(ECPPⅠ,500 μg/ml ECPP)和高剂量ECPP组(ECPPⅡ,1 000 μg/ml ECPP).除NS组经腹腔注射0.2 ml 0.9％ NaCl外,其他4组小鼠均经腹腔注射0.2ml艾氏腹水瘤(Ehrlich ascites carcinoma,EAC)细胞悬液(5.0×106个/ml),接种次日,每组小鼠腹腔注射相应药物(注射体积均为0.25 ml),每次间隔1d,连续5次,停药次日,颈椎脱臼处死小鼠,检测腹水量；3H-TdR法检测脾淋巴细胞转化能力；流式细胞术分析T淋巴细胞亚群及NK细胞活性；RT-PCR检测脾淋巴细胞中IFNγ、TNF-α基因mRNA的转录水平.结果 与CK组相比,各给药组均能明显降低小鼠腹水量(P＜0.01),CPP组和ECPPⅡ组间差异无统计学意义(P＞0.05),ECPPⅡ组降低腹水的能力明显高于ECPPⅠ组(P＜0.01)；与NS、CK及ECPPⅠ组相比,ECPPⅡ组可明显提高T、B淋巴细胞的转化能力,增加脾CD4+、CD8+及NK细胞数量(P＜0.01),而与CPP组比较,差异无统计学意义(P＞0.05)；与NS、CK和ECPP Ⅰ组比较,ECPPⅡ组IFNγ、TNF-α基因mRNA转录水平明显提高(P＜0.01),与CPP组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 ECPP能显著提高荷瘤鼠脾细胞的免疫功能.
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精子发生过程中第一次减数分裂相关因子的研究进展
精子发生是生殖细胞经历的一个复杂而独特的细胞增殖与分化过程,其中一些基因及特殊的蛋白因子、RNA、酶等都发挥着至关重要的作用.减数分裂是配子发生过程中一个重要的环节.参与精子发生减数分裂的相关因子非常多,它们的改变或缺失能够造成精子发生阻断,无法形成正常成熟精子,如Scp3、M1 ap、TEX11、Spata 22、Smc6、Ku70、TSF22等基因的缺失突变、相关因子及酶的缺失,都将影响第一次减数分裂,进而影响精子发生.本文将对这些影响第一次减数分裂的相关因子作一综述.
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金属螯合亲和层析的应用研究进展
金属螯合亲和层析是近30年来出现的一种新型的分离纯化技术,它以配基简单、吸附量大、分离条件温和、通用性强等特点,逐渐成为分离纯化蛋白质等生物工程产品有效的技术之一.其在蛋白质、酶和核苷酸纯化以及蛋白质分析等方面具有广泛的应用.而随着研究的进一步深入,其新应用也越来越广泛的被发现.
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酶固化技术新研究进展
酶的本质是一种具有催化功能的蛋白质,能影响化学反应.然而,与传统的天然酶分子比较,固化酶相对更为脆弱,而传统的有机或无机催化剂其活性则比较固定.固化酶对于优化产业生产过程非常重要,近几十年来已开发出多种新型固化酶.本文在回顾酶固定化技术新发展的同时.着重将其新技术分别从吸附于载体,诱惑侦查及交联等三个方面进行综述.
