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重组PCR快速基因定点突变的技术方法
聚合酶链式反应(PCR)是由Mullis等联合研制的一种在体外快速对特定DNA序列扩增的技术[1].本研究通过重组PCR技术对growth associated protein43-(GAP-43)基因Ser41(丝氨酸)AGC定点突变为Ala41(甘氨酸)GCC,此方法比传统的体外基因突变技术更简单、快速而且经济.
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酶立体选择性的定向进化策略
酶立体选择性定向进化的基本方法是用合适的分子生物学手段使酶基因发生随机突变,然后进行基因表达和高通量筛选.本文主要对引入突变技术和高通量筛选方法做一简要综述.
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葡萄球菌肠毒素A 促白细胞增殖与抗肿瘤活性的研究现状
根据抗原性差异,金黄色葡萄球菌肠毒素可分为5个型(SEA~SEE)[1].不少研究资料证实,SEA~SEC是目前所知的哺乳动物或人T细胞增殖和活性为有效的刺激物,在极低剂量时(ng或pg)即可有效地诱导T淋巴母细胞分裂、增殖,起到升白细胞的作用:还可通过促进T细胞释放多种细胞因子,通过细胞因子所产生的细胞毒作用杀伤多种肿瘤细胞[2-4].上述研究结果强烈地提示,SEA~SEC具有开发成升白细胞、抗肿瘤药物的可能性.由于肠毒性及个体差异,SEA在极低剂量时,部分人群仍可出现腹泻、呕吐[4].一些学者通过定位突变技术改变SEA活性基团中的氨基酸种类,获得了低肠毒素毒性、保留促淋巴细胞增殖及抗肿瘤活性的突变体,显示了进一步开发为升白细胞、抗肿瘤多肽药物的实际价值,现综述如下.
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HPRT基因突变技术及其在辐射生物剂量估计中的应用
国内外对急性射线照射事故和职业慢性照射者剂量估计中,常因未佩戴个人剂量计,或虽佩戴但常常超出了剂量计的量程,不能快速准确地给出可靠的剂量数据,此时,生物剂量估计就成为重要的检测方法.