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太原地区急性呼吸道人偏肺病毒和人博卡病毒感染患儿临床特征分析
目的：了解太原地区急性呼吸道感染（ARTIs）儿童人偏肺病毒（hMPV）与人博卡病毒（HBoV）的感染情况及其临床和流行病学特征。方法采集2012年11月—2013年5月及2013年11月—2014年5月就诊的ARTIs患儿549例，采集咽拭子标本，应用实时PCR方法检测hMPV与HBoV。结果549例患儿的咽拭子标本中hMPV阳性56例（10.2%），HBoV阳性15例（2.7%）。其中2012年11月—2013年5月hMPV与HBoV检出率分别为12.3%和2.0%，2013年11月—2014年5月hMPV与HBoV检出率分别为6.5%和4.0%，两时间段hMPV检出率差异有统计学意义（P<0.05），HBoV检出率差异无统计学意义（P>0.05）；不同月份hMPV、HBoV检出率差异无统计学意义（P>0.05）。hMPV与HBoV均在<2岁组中检出率高。hMPV在喘息性支气管炎与毛细支气管炎患儿中检出率高。结论太原地区hMPV和HBoV与部分儿童尤其是婴幼儿ARTIs有关，hMPV是诱发部分婴幼儿喘息性疾病的重要病原体之一。
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上海嘉定地区连续3年儿童人博卡病毒感染的研究
目的 了解上海市嘉定地区2006-2008年儿童下呼吸道感染患者人博卡病毒感染情况.方法 2006年2月-2008年9月期间,共收集843例下呼吸道感染儿童鼻、咽拭子标本,检测人博卡病毒阳性者进一步检测血液标本.并对其中12例博卡病毒阳性病例回访,再次检测鼻、咽拭子,同时留取血、尿标本.鼻、咽拭子和血、尿液标本均采用RT-PCR方法 检测人博卡病毒基因片段.结果 843例鼻、咽拭子标本中博卡病毒阳性90例,阳性率10.7%;其中90例人博卡病毒阳性标本中血标本阳性21例.90例阳性标本中博卡病毒检测阳性率＜1岁16.2%,～3岁10.3%,～6岁8.9%.博卡病毒检测阳性率冬季(1～3月)为13.1%,春季(4～6月)为9.9%,夏季(7～9月)为4.1%,秋季(10～12月)为15.3%.确诊博卡病毒感染后14 d,12例患儿再次取鼻、咽拭子以及血、尿液标本,检测出人博卡病毒.结论 上海市嘉定地区部分儿童患者的下呼吸道感染与人博卡病毒有关;秋冬季节是人博卡病毒的好发季节;人博卡病毒在感染呼吸道后持续排毒,存在病毒血症可能.
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2种不同标本采集方法对儿童博卡病毒检测阳性率的影响
目的 比较鼻咽分泌物抽吸法与吸痰法对人博卡病毒检测阳性率的影响.方法 选取呼吸道感染住院患儿120例按照随机数字表法分为对照组和观察组各60例,对照组采取鼻咽分泌物抽吸法采集标本,观察组采取吸痰法采集标本.比较2组患儿博卡病毒检测阳性率差异、鼻腔黏膜损伤情况及家长满意度.结果 观察组博卡病毒检测阳性率为45％,显著高于对照组博卡病毒检测阳性率8.3％(P＜0.05);观察组患儿鼻腔黏膜损伤发生率低于对照组(P＜0.05),同时观察组家长满意度也高于对照组(P＜0.05).结论 吸痰法可提高儿童博卡病毒检测阳性率、减少儿童鼻腔黏膜损伤发生并提高家长满意度.
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南京地区100例呼吸道感染患儿博卡病毒感染状况初步研究
目的:了解人博卡病毒(human bocavirus,HBoV)在南京地区呼吸道感染患儿中的致病情况.方法:选取2009年11月～2010年6月因呼吸道感染住院的患儿鼻咽吸取物标本共100份,采用聚合酶链反应(PCR)方法检测HBoV的NPI基因片段,并对阳性产物进行测序,利用多功能分析软件DNAstar进行同源性分析,MEGA软件绘制遗传进化树.分析感染患儿的临床资料.结果:在100例鼻咽吸取物标本中共检测到5例阳性,阳性率为5％.DNAStar分析发现5例阳性标本之间核苷酸同源性达99.7％～100.0％·与其他国家HBoV的株同源性为99.4％～ 100.0％.临床资料显示这5例患儿临床症状主要表现为咳嗽、喘息、发热等,临床诊断为肺炎2例、毛细支气管炎1例、支气管炎1例及喘息性支气管炎1例.患儿经常规治疗后均痊愈出院.结论:南京地区呼吸道感染患儿中有HBoV的流行.
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呼吸道感染新发病毒的流行病学
急性呼吸道感染(ARTI)是人类常见的传染性疾病之一,90％以上的ARTI是由病毒引起,目前仍有大约30％的ARTI病原不能确定.近年来,一系列新出现的病原体被发现,如人偏肺病毒、人博卡病毒、人冠状病毒NL-63和HKU1、WU和KI多瘤病毒及Saffold心病毒等.此文就呼吸道感染新发病毒的流行病学研究进展进行综述.
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人博卡病毒与AECOPD相关性研究
目的 探讨人博卡病毒(HBoV)与慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)的关系.方法 PCR检测2008年11月～2009年4月55例慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者诱导痰标本的HBoV,其AECOPD患者26例(47.3%),稳定期COPD患者29例(52.7%).结果 共发现2例HBoV阳性,AECOPD患者和稳定期COPD患者各1例,阳性率分别为3.85%和3.45%.结论 HBoV不是AECOPD呼吸道感染的的重要病原,双者之间无关联性.
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小儿呼吸道感染病毒检测新进展
急性呼吸道感染是威胁儿童健康的主要因素,是儿科发病率高的一类疾病,同时也是儿童主要的公共健康问题之一[1].多数急性呼吸道感染由病毒引起,儿童病毒感染率为46.6％ ～ 66.9％[2],其中下呼吸道感染病毒感染率32.3％～52.3％[3,4],而肺炎则是5岁以下儿童死亡的首位原因,随着抗生素的应用和生活水平提高,病毒感染率呈逐年相对上升趋势.儿童急性呼吸道感染常见病毒为呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(IDV)、流感病毒A、B型(IVA、B)、3型副流感病毒( PIV-1、2、3)和肠道病毒等[5].随着病毒的演变生物医学学科的发展,病毒检测方法也得到迅速发展,特别是近10年来分子生物技术的应用,不断在呼吸道感染标本中发现新的病原性病毒,如人偏肺病毒(hMPV)、SARS冠状病毒、冠状病毒NL63( HCoV-NL63)、冠状病毒HKU1( HCoV -HKU1)、人博卡病毒(HBoV)、C组鼻病毒(RHV-C)、KI多瘤病毒(KIPyV)、WU多瘤病毒(WUPyV)等.同时发展了多种简便实用的非分子生物学检测方法被广泛应用到临床,为疾病的诊断和治疗提供依据.
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人博卡病毒全基因组序列测定与种系分析
目的 了解福州地区人博卡病毒(HBoV)在儿童呼吸道感染中的检出情况,并对其进行全基因组序列测定和种系分析.方法 收集2007年11月至2008年10月在福建省妇幼保健院因下呼吸道感染住院的重症监护病房的57例小儿鼻咽抽取物标本,用一对特异引物通过PCR扩增法对HBoV基因片段进行检测,对检测出的2例HBoV(FZ1和FZ40)用7对全序列引物进行扩增和拼接,获得这两株病毒全基因组序列,上传GenBank并与基因库中国内外其它10株HBoV的全基因组序列和各氨基酸序列进行比对,并做种系分析.结果 FZ1株基因组序列全长为5 299bp,与HBoV参考株st2株序列长度相同;而FZ40株的基因组序列全长少2bp.病毒全基因组编码4种蛋白,分别是非结构蛋白NS1、核蛋白NP-1和衣壳蛋白VP1、VP2.结论 种系分析显示福州的FZ40株与浙江温岭的WLL-1株关系较近,而FZ1株与北京的两株及泰国的CU6株关系较近.
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江西省呼吸道感染儿童人博卡病毒基因特征分析
目的 了解近几年江西省呼吸道感染儿童中人博卡病毒的基因特征和变异情况.方法 挑取2011年8月至2015年12月采集的江西省呼吸道感染儿童的人博卡病毒阳性样本,利用RT-PCR对人博卡病毒全基因进行测序,利用DNAStar和Mega对序列进行拼接分析.结果 共得到22株人博卡病毒全基因组序列,全都属于HBoV 1型病毒,且Ia簇,Ib簇,II组均有流行.毒株间以及与标准株ST2和ST1间的核酸同源性非常高,为97.6%~100%.蛋白质总共有12处氨基酸发生了变异.结论 引起江西省儿童呼吸道感染的HBoV较为稳定,未发生明显的变异,但仍应该关注个别位点的变异是否会对病毒感染性及致病性产生影响.
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江西省2011年-2015年呼吸道感染儿童人博卡病毒感染分析
目的 了解近几年人博卡病毒在江西省呼吸道感染儿童中的流行情况.方法 采集2011年8月至2015年12月1508例江西省呼吸道感染儿童的咽拭子或支气管灌洗液样本,利用RT-PCR对博卡病毒进行检测.结果 1508例患儿呼吸道标本中86例患儿被检测出博卡病毒阳性,阳性率为5.70%.小于等于1岁的儿童的阳性率高,且男性患儿的阳性率大于女性患儿.主要流行时间为5-8月.HBoV感染与其他呼吸道病毒混合感染率达到了60.47%.结论 HBoV是引起江西省儿童呼吸道感染的主要病原体之一,多发于低龄,男性患儿,以夏季高发.且与其他呼吸道病毒有较高的混合感染率.
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人博卡病毒感染的致病机制研究进展
人类博卡病毒(hBoV)是由瑞典学者Allander等于2005年首先从急性呼吸道感染患儿的鼻咽分泌物中分离发现的,其属于细小病毒家族.目前世界上已有不少有关hBoV被检出的报道,但hBoV的致病机制仍不十分清楚.现对hBoV的一般概况及其致病机制的研究进展作一综述.
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儿童重症人博卡病毒下呼吸道感染的临床分析
目的 探索儿童重症人博卡病毒下呼吸道感染的临床特点.方法 回顾性分析首都儿科研究所附属儿童医院重症医学科2016年9月1日至2017年3月31日人博卡病毒检测阳性住院患儿的临床资料.结果 共17例患儿纳入分析,男女比例为15:2,年龄4个月～4岁10个月,＜2岁婴幼儿占82.4％(14/17例),秋冬季节多发.小儿危重评分68～88分,中位数82分,≤70分1例,70～ 80分7例,＞80分9例.临床以肺部受累为主,表现为呼吸困难17例(100％)、发热14例(82.4％)、咳喘13例(76.5％)、肺部喘鸣音及湿哕音13例(76.5％).胸部影像学可见斑片影7例(41.2％)、实变影6例(35.3％).Ⅰ型呼吸衰竭11例(64.7％),Ⅱ型呼吸衰竭6例(35.3％).氧合指数73.9 ～ 296.0 mmHg(1 mmHg =0.133 kPa),中位数176 mmHg,100～ 200 mmHg者7例(41.2％),＜100 mmHg者2例(11.7％);所有患儿均需呼吸机辅助通气,其中无创呼吸机通气6例(35.3％),通气时间25～ 128 h,中位数65 h;有创呼吸机通气11例(64.7％),通气时间42～ 178 h,中位数70 h.肺外脏器受累轻.住院天数3～13 d.治愈好转100％.结论 儿童重症人博卡病毒下呼吸道感染多见于2岁以下婴幼儿,起病急,进展快,临床症状以发热、咳喘、呼吸困难为突出表现,易导致呼吸衰竭,但肺外脏器受累轻,预后良好.
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北京地区婴幼儿急性腹泻病例5种腹泻相关病毒感染状况
目的 了解北京地区婴幼儿急性腹泻病例5种腹泻相关病毒的感染状况.方法 采集北京地区哨点医院2016年1～12月＜ 60月龄急性腹泻患儿便标本,用实时荧光PCR对A组轮状病毒、诺如病毒、肠道腺病毒、星状病毒进行检测;同时用巢式PCR检测人博卡病毒.结果 共采集354份粪便标本,A组轮状病毒检出率13.84％,诺如病毒检出率10.45％,肠道腺病毒检出率4.52％,星状病毒检出率3.95％,人博卡病毒检出率7.34％.混合感染18例,占5.08％.轮状病毒发病高峰为冬季,诺如病毒的发病高峰为春季,其他病毒感染无明显季节特征.2岁以内患儿5种病毒的检出率分别为81.63％、78.38％、81.25％、71.43％、84.62％.结论 北京地区急性腹泻患儿5种腹泻相关病毒检出率从高到低依次为:A组轮状病毒、诺如病毒、人博卡病毒、肠道腺病毒、星状病毒;2岁以内患儿是病毒性腹泻的高发人群.
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2016年武汉地区住院儿童人博卡病毒感染的临床特征及流行病学
目的 了解武汉地区住院儿童呼吸道人博卡病毒(HBoV)感染情况、临床特征及流行病学特点.方法 收集2016年1-12月该院儿科因急性呼吸道感染的住院患儿968例,采用无菌负压吸引法采集新鲜标本检查痰HBoV、RSV、ADV、INF-A/B和PIV-Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ,分析HBoV感染病例的流行情况及临床特征.结果 968例患儿中,HBoV阳性75例,检出率7.75％.男女患儿检出率分别为5.68％、2.07％,不同性别HBoV检出率比较,差异无统计学意义(x2 =2.083,P =0.140);53例(70.67％) HBoV阳性患儿年龄＜1岁,63例(84.00％)HBoV阳性患儿年龄＜3岁,各年龄组检出率比较,差异有统计学意义(x2 =4.60,P =0.043).春、夏、秋、冬HBoV检出率分别为9.78％、5.29％、2.86％、5.20％;除9、10月份外,HBoV在其余月份均有检出,3月份检出率高(为33.33％).17例单纯HBoV感染,58例混合感染,HBoV临床诊断以支气管肺炎为主(26例,占34.67％).HBoV病例主要临床特征为发热(81.33％)、咳嗽和喘息(各占77.33％).结论 HBoV是武汉地区住院儿童呼吸道感染的重要病原体之一,全年均可发生HBoV感染,流行高峰在春季和夏季,无性别差异.住院儿童感染HBoV临床诊断以支气管肺炎常见,主要表现为发热、咳嗽、喘息.
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人博卡病毒载量与儿童急性下呼吸道感染临床特征相关性研究
目的 了解人类博卡病毒(HBoV)在儿童急性下呼吸道感染中的检出情况,并探讨HBoV载量与儿童急性下呼吸道感染临床特征的相关性.方法 收集2011年3月至2014年3月因急性下呼吸道感染住院患儿的鼻咽抽吸物(NPAs) 1554份,采用实时荧光定量PCR检测12种RNA病毒和ADV、HBoV 2种DNA病毒,并同时检测HBoV阳性患儿的病毒载量.结果 1 554份标本中1212份(77.99％)检出病毒,275份(17.70％)HBoV检出阳性.HBoV阳性病例中＜3岁者占94.9％,男性多于女性.275例HBoV阳性病例中,单一感染45例(16.36％),混合感染230例(83.64％),两者病毒载量的差异无统计学意义(P＞0.05).有发热症状的HBoV阳性患儿病毒载量高于无发热者,有喘息症状的病毒载量高于无喘息者,差异均有统计学意义(P＜0.05).轻、中、重度组急性下呼吸道感染患儿之间的病毒载量差异无统计学意义(P＞0.05).结论 HBoV是儿童急性下呼吸道感染重要病原之一.病毒载量高的患儿,临床更易出现发热、喘息等症状,但疾病严重程度及混合感染与病毒载量之间无显著相关性.
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住院呼吸道感染患儿博卡病毒检测分析
目的 了解人博卡病毒(HBoV)在天津地区急性呼吸道感染患儿中的检测情况和基因的遗传进化特征.方法 收集2012年1～12月确诊为急性呼吸道感染患儿的鼻咽抽吸物标本1 259份,提取病毒核酸,采用实时荧光定量PCR法检测HBoV,并采用PCR法扩增阳性标本HBoV核衣壳蛋白基因片段;随机选取部分产物进行测序确证,将所获得的序列与已知的HBoV基因序列进行比对并进行系统进化分析;同时对所有标本进行其他多种呼吸道相关病毒检测.结果 1 259份标本中HBoV阳性检出率为4.53％(57/1 259),其中75％(43/57)发生在6～36月龄的患儿;检出高峰主要集中在夏季(6～8月);存在与其他病毒的混合感染情况.对其中36份阳性标本的PCR产物进行序列分析,证实检测结果确为HBoV,且与已知HBoV的基因序列同源性较高.结论 天津地区部分儿童的急性呼吸道感染可能与HBoV感染相关,且HBoV感染在6～36月龄的婴幼儿中更为常见,夏季为流行高峰;系统进化分析显示与已知HBoV的基因序列同源性高,基因序列变异较小.
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90例儿童人博卡病毒感染临床分析
目的 探讨儿童人博卡病毒(HBoV)感染的临床特征.方法 采集843例下呼吸道感染患儿鼻、咽拭子标本,用多重RT-PCR方法检测HBoV和其他6种常见呼吸道病毒,分析HBoV阳性病例临床特征.结果 843例标本中检测出HBoV阳性90例(10.7%),呼吸道合胞病毒(RSV)131例(15.5%),流感病毒(IFV)117例(13.9%),副流感病毒(PIV)84例(10.0%),鼻病毒(RV)55例(6.5%),冠状病毒(OC43)48例(5.7%),人类偏肺病毒(HMPV)33例(3.7%).HBoV合并其他呼吸道感染者45例(50%),其中HBoV合并1种其他病毒感染者33例(37%),合并2种其他病毒感染者11例(12%),合并3种其他病毒感染者1例(1%).伴喘息的患儿HBoV检出率高于不伴喘息的患儿(17.0% vs 9.2%,P＜0.01).HBoV阳性患儿常见的临床表现为频咳、喘息和发热.HBoV阳性组与RSV阳性组中喘息发生的构成比差异无统计学意义.结论 伴喘息发作的下呼吸道感染患儿中,HboV阳性检出率明显高于不伴喘息发作患儿,提示HBoV可能是除RSV外另一种引起儿童喘息的呼吸道病毒.HBoV与其他呼吸道病毒存在着混合感染.
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人博卡病毒VP2病毒样颗粒的表达、纯化及鉴定
目的 通过杆状病毒-昆虫细胞表达体系,获得纯重组人博卡病毒(HBoV)病毒蛋白2(VP2)病毒样颗粒,为HBoV的血清学检测方法的建立及疫苗研究提供实验基础.方法 采用含有HBoV VP2基因的重组杆状病毒感染草地夜蛾9(SF9)细胞,一定时间后收集细胞及上清,经氯化铯(CsCl)不连续密度梯度超速离心后,获得高纯度人博卡病毒VP2病毒样颗粒.SDS-PAGE鉴定目的蛋白的纯度和分子量,透射电镜观察病毒样颗粒结构,Western blotting鉴定蛋白的抗原性.结果 SDS-PAGE结果显示该研究获得的重组HBoV VP2病毒样颗粒分子量约为60 kD,无明显杂带;该研究获得的HBoV VP2病毒样颗粒能和鼠抗人博卡病毒VP2多克隆抗体结合;电镜下HBoV VP2病毒样颗粒为对称正二十面体结构,直径约为20～ 25nm.结论 该研究成功获得高纯度的重组HBoV VP2病毒样颗粒,可用于人博卡病毒感染的血清学及免疫学研究.
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荧光定量PCR方法快速检测人博卡病毒的研究
目的 建立特异、快速、灵敏的、用于人博卡病毒核酸检测的荧光定量PCR方法.方法 对博卡病毒的nsl基因应用Clustal W 软件进行序列同源性比对,在保守区设计特异性引物和 TaqMan探针,并对荧光PCR反应条件进行优化,验证方法的特异性,并将该方法与国际上通用的针对人博卡病毒nsl,基因和np基因的普通PCR 方法进行灵敏度比对;同时将该方法应用于疑似患者临床标本检测.结果 该方法针对nsJ基因进行扩增,对人博卡病毒核酸检测有高度特异性,与副流感1、2、3型,甲型、乙型流感病毒,呼吸道合胞病毒,腺病毒,冠状病毒229E、OCA3,偏肺病毒以及鼻病毒等均无交叉反应.检测的灵敏度均比国际上通用的扩增nsl基因及np基因的PCR方法高10 倍.用该方法从144份急性上呼吸道感染患者咽拭标本中检出了2份博卡病毒阳性,从病毒核酸提取至检测完成仅需3 h左右;用普通PCR仅能检出1份阳性标本,且耗时需5 h左右.结论 该研究建立的TaqMan荧光定量PCR是一种快速检测人博卡病毒特异、敏感的方法,适用于临床早期诊断.
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2014-2015年广州地区人呼吸道合胞病毒和人博卡病毒的流行病学特征
目的 分析2014-2015年广州地区发热呼吸道感染患者中人呼吸道合胞病毒(RSV)和人博卡病毒(HBoV)的流行特征.方法 采集2014年1月至2015年12月期间广州地区11家哨点医院符合条件的发热呼吸道感染患者的鼻咽拭子标本,采用Real?time PCR的方法对RSV和HBoV进行核酸检测,结合患者的临床资料,分析病毒感染的人口学特征、病例类型、年龄、时间等分布特点,对RSV或HBoV阳性标本同时检测其它7种常见呼吸道病毒以了解混合感染情况.结果 2014-2015年间共收集2146份鼻咽拭子标本,其中RSV阳性标本223例,HBoV阳性标本22例,检出率分别为10.39%和1.03%;RSV住院病例检出率明显高于门急诊病例,差异有统计学意义(χ2=41.868,P<0.05);HBoV住院病例与门急诊病例检出率无差异(χ2=1.379,P>0.05);RSV检出率男性大于女性,差异有统计学意义(χ2=5.855,P<0.05);HBoV检出率男女之间差异无统计学意义(χ2=0.109,P>0.05);RSV和HBoV的检出均与年龄有关,检出率高的年龄组分别为1岁以下婴幼儿和2岁的婴幼儿.RSV的感染高峰在1-4月,HBoV在8月和11月检出率较高.RSV阳性病例中混合感染47例,混合感染率为21.08%,其中双重感染44例,三重感染3例,鼻病毒是常见的混合感染病毒.HBoV阳性病例中混合感染11例,混合感染率为50.00%,其中10例为双重感染,1例为三重感染.结论 2014-2015年广州地区RSV和HBoV均以感染婴幼儿为主.RSV的流行高峰在1-4月,鼻病毒是常见的混合感染病毒;HBoV为全年分布不均,8月和11月检出率较高.
