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抗-HCV IgM、抗-HCV IgG与HCV RNA的相关性及临床意义
[目的]研究丙型肝炎病毒(HCV)抗-HCV IgM、抗-HCV IgG与HCV RNA的相关性.[方法]收集236例HCV患者标本,用酶联免疫吸附法检测抗-HCV IgM、抗-HCV IgG、同时用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HCV RNA.[结果]168例HCV RNA(+)标本中,抗-HCV IgM阳性率为72.0%(121/168);抗-HCV IgG阳性率为85.1%(143/168),抗-HCVIgM、抗-HCV IgG与HCV RNA的关联系数均为r=1.抗-HCV IgM、抗-HCV IgG与HCV RNA的检出符合率分别为69.1%(163/236)、75.4%(178/236).随着抗-HCV IgG抗体光密度值(OD值)的增大,HCV RNA的检出率亦增加(x2=27.5 P＜0.001).提示两者间存在相互关联性(r=0.93).[结论]HCV感染者血清抗-HCV抗体与HCV RNA的阳性检出率呈正相关,血清中抗-HCV的含量越高,HCV RNA的含量越多,其传染性越强.抗-HCV IgM与HCV病毒复制亦密切相关,可以做为HCV复制的补充指标.
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HCV-NS3抗原基因的克隆表达及活性测定
[目的]研制新的更符合我国HCV感染株的NS3抗原,以进一步提高HCV免疫检试剂的灵敏度.[方法]对HCV/NS3(1192-1457aa)片段序列进行在线Blast分析,根据共有序列(consensus)设计并合成引物.以Trizol法从病人血清中提取总RNA,经反转录PCR扩增获得NS3相应目的基因,插入载体、经测序正确后,克隆表达,表达产物经纯化后用间接ELISA法测定其反应活性.[结果]从病人血清中获得了NS3部分基因片段,测序证明所获得的序列和我们以前的1a型NS3序列有18个不同的氨基酸残基.重组新NS3抗原经活性测定,反应灵敏度有较大提高.[结论]新获得的HCV-NS3可用于试剂盒抗原,以提高对我国HCV感染病人检测的灵敏度.
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丙型肝炎患者HCV分片段抗体的检测及分析
[目的]研究丙肝感染者体内各分片段抗体的分布情况,以及与总抗体和HCVRNA之间的关系.[方法]用一种新的丙型肝炎病毒抗体分片段酶联免疫测定试剂盒检测100份抗HCV总抗体阳性血清和100份抗HCV总抗体阴性血清中四种HCV分片段抗体(HCV-C、HCV-NS3、HCV-NS4、HCV-NS5)[1]的存在情况.[结果]100份抗HCV总抗体阴性血清中97份血清四种分片段抗体阴性,符合率为97%,有三份分片断抗体检测为阳性,分别为HCV-C、HCV-NS3阳性,HCV-C、HCV-NS3、HCV-NS4三抗体阳性,HCV-NS3、HCV-NS4阳性;100份抗HCV总抗体阳性血清中两种(或以上)分片段抗体检测阳性的标本有100份,符合率为100%.[结论] 4种分片段抗体阳性共有15种分布模式,其中HCV-C片段抗体阳性率高有96%,HCV-C(+)、HCV-NS3(+)2个分片段抗体阳性率次之为80%.
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抗HCV酶免筛检试剂的区域性评定研究
[目的]对分片段试剂作出应用效果评价.[方法]对62份4个国内厂家筛检出的抗HCV初步阳性血清,应用4家国产试剂,2家进口试剂,一种分片段试剂,分别进行测定.分片段试剂阳性及分片段试剂阴性而至少其他二种试剂阳性血清,用RT-PCR方法进行测定.[结果]62份标本RT-PCR方法确认阴性34份,确认阳性28份.几个国产厂家检出阳性12～14份,分片段试剂25份,进口厂家22份.[结论]国产厂家检出率低,假阳性率偏高,而进口第三代试剂质量较好.分片断试剂作为一种旁证试剂用于临床诊断试剂有一定的应用价值.
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献血者丙型肝炎病毒的核酸扩增检测
HCV的平均感染率为3%,全球感染人口约1.7亿,主要通过血液传播,应用EIA测定HCV抗体的窗口期约72 d,窗口期漏检是输血后HCV感染的主要原因.为了减少窗口期漏检,发达国家白1999年3月开始应用RT-PCR和TMA技术以混合血样模式筛查献血者HCV-RNA,为保证血筛质量,在常规血液筛查之前,要将所使用的NAT技术标准化.经过5年的血液筛杳,此项技术能够有效地减少窗口期漏检,提高安全输血水平,已经成为不可缺少的献血者血液筛查手段.
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引物特异性HCV基因分型检测方法的建立及应用
[目的] 建立引物特异性HCV RNA基因分型的方法,并应用于临床诊断.[方法] 采用型特异性引物建立单管逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和双管引物特异性套式聚合酶链反应(NEST-PCR)检测技术,1b和3a一管内扩增,1a、2a和2b一管内扩增,分别对147例 HCV抗体阳性的标本,设计HCV 的C区特异性引物,采用Trizol浓缩RNA进行双管巢式PCR分型.[结果] 统计结果表明我国丙型肝炎流行主要以1b(II)和2a(III)2种基因型为主,但有部分1a、2b、3a的HCV感染者检出,其中1a为1.36%(2/147),1b为65.99%(97/147),2a为6.12%(9/147),3a为1.36%(2/147),1b/2a型混合占22.45%(33/147),1a/2b混合型为0.68%(1/147), 未分出型或其它型者分别为2.04%(3/147).[结论] 本文建立的方法具有良好的特异性和敏感性,可同时区分5种HCV 基因型,我国北方地区发现有1a和3a基因型感染病例.
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检测乳汁中HCV-RNA的探讨
目的:探讨丙型肝炎病毒通过母乳传播的可能性.方法:对32例丙型肝炎血清学标志物阳性产妇产后1-7天内的乳汁,及8例丙肝标志物阴性的健康产妇作对照,采用聚合酶链反应(PCR)技术检测HCV-RNA.结果:32例丙肝血清学标志物(抗-HCV)阳性产妇组乳汁中HCV-RNA检出率9.4%(3/32),而对照组无一例阳性.结论:乳汁中存在HCV-RNA,通过哺乳可能导致婴儿感染HCV,不宜哺乳.
关键词： 丙型肝炎病毒 初乳 HCV-RNA聚合酶链反应 -
两种丙型肝炎抗体检测方法的比较评价
目的：寻找一种能进行流行病学调查并能在高危人群、献血员、孕妇等体检中使用的、操作简便、成本较低的丙型肝炎抗体检测方法。方法：分别采用酶联免疫法（ELISA）和金标快速法对60例丙型肝炎患者血清抗 HCV 抗体进行平行检测，比较两法的检测结果。结果：ELISA 法和金标快速法抗 HCV 阳性结果分别是58例和56例，阳性检出率分别为96.7%和96.3%，ELISA 法的敏感性略高于金标法，但无显著差异（P>0.05），ELISA 法和金标快速法对60例正常对照标本的结果均为阴性，两法特异性都是100%。结论：ELISA 法和金标快速法都具有操作简单、特异性好、结果准确等优点。金标法适用于单份标本和急诊检验，但其敏感度低于 ELISA 法，如时间允许，应该选择 ELISA 法检测抗 HCV 抗体，以减少漏检的发生。
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酶免法检测丙肝病毒核心抗原在献血者筛查中的应用分析
目的：分析基层血站大规模筛查献血者HCV感染采用ELISA方法联合检测抗HCV 和HCV C抗原的可行性。方法：采用ELISA法检测献血者样本抗HCV和HCV C抗原，结果：与HCV PCR法进行比较分析。结果：献血者780份抗HCV初复检阴性样本中，HCV C抗原检测结果均为阴性。56份抗HCV初复检阳性样本中，HCV C抗原检测阳性16份，HCV PCR阳性17份；11份抗HCV初检或复检阳性样本中，HCV C抗原检测阳性1份，HCV PCR阳性1份；17份抗HCV初检或复检或初复检结果灰区样本中，HCV C抗原检测阳性3份，HCV PCR阳性4份。结论：ELISA法检测HCV C抗原灵敏度及特异性均较高，适合基层血站开展对献血者HCV大规模筛查，也适合基层医院开展对患者输血前HCV感染的检测。
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丙型肝炎患者中HCV-RNA与血糖的关系
目的：了解丙型肝炎中病毒核糖核酸（HCV-RNA）与血糖之间的关系。方法：对122例（自2008年1月～2012年12月）来自张掖市人民医院住院和门诊确诊丙型肝炎患者中进行抗-HCV、HCV-RNA及血糖检测。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测抗-HCV，采用荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测标本中的HCV-RNA，用全自动生化检测仪测定血糖水平。分析丙型肝炎患者分别在HCV-RNA大于临界值组（≥1000copies/ml）和小于临界值组的HCV-RNA与血糖关系及HCV-RNA、年龄与血糖之间关系。结果：本研究122例丙型肝炎标本中HCV-RNA高于上限值76例，有20例存在血糖升高，血糖水平与HCV RNA含量存在相关性，在通过对HCV-RNA、年龄与血糖之间关系进行分析，年龄大于50岁情况下，患者血糖水平与HCV RNA含量有一定相关性。结论：在丙型肝炎患者中，HCV-RNA与血糖升高存在相关性；对于年龄大于50岁及HCV-RNA定量高的丙肝患者，应注意患者血糖水平。
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ALT、GGT 及 IL28B 基因多态性与 PEG 干扰素联合利巴韦林治疗HCV 基因型1患者早期应答的相关性
目前针对慢性丙型肝炎（Chronic hepatitis C, CHC）的标准治疗方案为聚乙二醇干扰素（Pegylated interferon, PEG-IFN）联合利巴韦林（Ribavirin, RBV），但获得持续病毒学应答（Sustained virogic response, SVR）的患者只有54%-63%，感染丙型肝炎病毒（Hepatitis C virus，HCV）基因型1的患者SVR 率仅为40-50%[1,2]。影响治疗效果的因素既有宿主因素，也有病毒因素。宿主因素包括白细胞介素28B（Interleukin 28B, IL28B）基因多态性、年龄、性别、种族、肝纤维化程度和肥胖等，病毒因素包括 HCV 基因型、病毒载量、治疗过程中病毒的动力学等[3]。其中 IL28B 基因多态性是 CHC 患者治疗 SVR 强的预测因素[4]。
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丙型肝炎病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞功能分析
目的:研究丙型肝炎患者丙型肝炎病毒(HCV)特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的功能.方法:将表达丙型肝炎病毒核心蛋白的真核表达质粒通过基因转染法转染HepG2细胞,并通过筛选获得稳定的转染Hep-Core细胞,使用蛋白质印迹法检测证实有HCV核心蛋白表达;分离患者外周血中的单个核细胞,经体外诱导扩增后得到HCV特异性CTL(HCV-CTL),以Hep-Core细胞和HepG2细胞作为靶细胞,运用乳酸脱氢酶释放法检测HCV-CTL的活性,用酶联免疫吸附法检测培养上清液中干扰素-γ(IFN-γ)的含量,选择10例正常人作为对照组.结果:丙型肝炎组患者HCV-CTL活性为(24.1±4.6)％,正常对照组为(43.2±6.1)％,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).丙型肝炎组患者靶细胞培养上清液中IFN-γ的浓度为(961±239) pg/ml,正常对照组为(3125±676) pg/ml,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:慢性丙型肝炎患者HCV-CTL活性降低,CTL的免疫功能低下与病毒水平和基因型有一定关系.
关键词： 丙型肝炎病毒 特异性细胞毒性T淋巴细胞 功能 -
丙型肝炎病毒及其基因亚型感染与原发性肝癌家庭聚集性关系研究
目的 明确丙型肝炎病毒及其基因亚型Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型的感染及复制在原发性肝癌家庭聚集性中的作用,为原发性肝癌的防治提供科学依据.方法采取配对法选择肝癌高发区中肝癌高发家庭及无癌家庭成员各250例作为研究对象,应用微板核酸杂交-ELISA法(PCR microplate hybridization ELISA)对研究对象的血清进行HCV-RNA定性检测,并对HCV-RNA及HCV-RNA阳性血清进行HCV-RNA基因亚型分型.结果肝癌高发家庭成员组和无癌家庭成员组中HCV-RNA及HCV-RNA基因亚型Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型的阳性率分别为8.0%(20/250)、0.4%(1/250)、7.2%(18/250)、0%(0/250)、0.4%(1/250)和3.2%(8/250)、0%(0/250)、2.8%(7/250)、0.4%(1/250)、0%(0/250).经计数资料配对χ2检验分析,HCV-RNA和HCV-RNA基因亚型Ⅱ型的阳性率在两组间差异有显著性,χ2值分别为5.45和5.09,P值均＜0.025.结论广西肝癌高发区中HCV的感染及复制,尤其是HCV基因亚型Ⅱ型的感染及复制与原发性肝癌发病的家庭聚集性存在密切关系.
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乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒不同模式重叠感染患者临床特征探讨
目的 探究乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒不同模式重叠感染患者的临床特征.方法 选取本院于2017年1月至2018年4月收治的56例乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒不同模式重叠感染患者作为研究对象,统计分析其实验室检查结果及病理学表现.结果 56例患者四种模式患者的住院天数、HBV病史、HCV病史、肝硬化、AST之间的差异无统计学意义(P＞0.05);而四种模式患者的ALT、TBil、PTA、HBeAg之间的差异有统计学意义(P＜0.05).结论 HBV和HCV不同模式重叠感染以HBV DNA(﹢/﹣)/HCV RNA(﹣)模式为主.HBV DNA水平的高低不会对疾病严重程度造成影响,但会影响疾病的进展与转归.HCV RNA水平与肝功能、病情严重程度呈正比关系.
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新疆丙型肝炎病毒基因型特点及临床意义
目的 探讨新疆丙型肝炎病毒基因型特点及临床意义.方法 以新疆地区2014年8月-2016年8月202例丙肝病人为研究对象,采用逆转录PCR荧光法(RT-PCR)检测患者肝炎病毒RNA.回顾性分析患者的临床资料,就丙型肝是病毒基因型特点及其临床意义展开分析.结果 新疆地区丙型肝炎患者存在两种基因型,分别为1b型、3a型,主要以1b型基因为主.其中197人为基因1b型,5人为基因3a型.结论 新疆地区丙型肝炎患者分型主要为1b型和38型,而基因分型、病毒载量、传染途径等均与肝脏损伤程度有关.因此,我们可以通过这些内容判断患者的病情,为此制定个体化的治疗方案.
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酶联免疫法检测丙型肝炎病毒血清型
目的 采用丙型肝炎病毒核心区及NS4区合成肽键建立酶联免疫检测.方法对血清中丙型肝炎病毒抗体进行分型.结果 70例供血者HCV-RNA阳性为30%,抗-HCV阳性率68.6%,其中血清分型阳性率为72.9%.血清Ⅰ型与基因Ⅱ(1b)型相对应,血清Ⅱ型与基因Ⅲ(2a)型相对应.
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三种丙型肝炎病毒检测方法结果分析
目的:比较酶联免疫吸附试验(ELISA)法、胶体金法检测丙型肝炎抗体和荧光定量PCR法检测HCV-RNA三种方法检测丙型肝炎病毒的结果,为临床提供参考数据.方法:采用ELISA法和胶体金法检测2000例患者血清中丙型肝炎病毒抗体;用荧光定量PCR法检测HCV抗体阳性患者血清HCV-RNA.结果:2000例患者ELISA检测抗HCV阳性28例,阳性率为1.40％;胶体金法检测抗HCV阳性27例,阳性率为1.35％;ELISA法检测HCV抗体阳性者荧光定量PCR法HCV-RNA阳性5例,胶体金法检测抗HCV阳性者荧光定量PCR法HCV-RNA阳性5例;荧光定量PCR法HCV-RNA检测阳性患者ELISA法和胶体金法检测结果均为阳性.结论:目前临床检测丙型肝炎病毒感染主要有ELISA法、胶体金法和荧光定量PCR法三种,ELISA法和胶体金法检测HCV抗体阳性率基本一致;ELISA法和胶体金法HCV抗体阳性者荧光定量PCR法检测HCV-RNA结果一致.
关键词： 丙型肝炎病毒 ELISA法胶体金法荧光定量PCR -
护理人员工作中针刺伤原因及防护
护理人员每日处理各种各样的感染性体液和分泌物,处于被病原菌感染的危险之中.因此,必须加强护理人员自身防护与感染管理.各种污染的针刺伤是医院内传播乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HcV)和人类免疫缺陷病毒(HIV)等的重要途径,与其他医务人员相比护士更容易发生针刺伤.
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肝细胞癌机制研究进展及靶向治疗药物研发与应用
肝细胞癌是常见的癌症之一,全球每年新增病例约为75万,且发病率呈逐年上升趋势.我国为肝癌高发地区,发病和致死人数约占全球的50％,因此肝细胞癌为我国特有癌种.肝细胞癌起因复杂,危险因素众多,包括肝炎病毒感染(主要是乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒)、饮酒、代谢综合征、黄曲霉素摄入等[1].同时,肝细胞癌经常伴随着肝硬化和肝功能不全,使得其治疗较其他癌症而言更加困难.
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HCV RNA和抗HCV测定结果的解读
丙型肝炎是由丙型肝炎病毒（HCV）引起的病毒性传染病，属于黄病毒家簇单股正链RNA病毒，其病毒核酸（HCVRNA）的检测是诊断HCV感染敏感的特异手段。
