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引物特异性丙肝分型文献资料
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引物特异性HCV基因分型检测方法的建立及应用
[目的] 建立引物特异性HCV RNA基因分型的方法,并应用于临床诊断.[方法] 采用型特异性引物建立单管逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和双管引物特异性套式聚合酶链反应(NEST-PCR)检测技术,1b和3a一管内扩增,1a、2a和2b一管内扩增,分别对147例 HCV抗体阳性的标本,设计HCV 的C区特异性引物,采用Trizol浓缩RNA进行双管巢式PCR分型.[结果] 统计结果表明我国丙型肝炎流行主要以1b(II)和2a(III)2种基因型为主,但有部分1a、2b、3a的HCV感染者检出,其中1a为1.36%(2/147),1b为65.99%(97/147),2a为6.12%(9/147),3a为1.36%(2/147),1b/2a型混合占22.45%(33/147),1a/2b混合型为0.68%(1/147), 未分出型或其它型者分别为2.04%(3/147).[结论] 本文建立的方法具有良好的特异性和敏感性,可同时区分5种HCV 基因型,我国北方地区发现有1a和3a基因型感染病例.
