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济宁市禽流感职业暴露人群血清学和环境禽流感监测分析
目的 了解济宁市职业暴露人群禽流感病毒的接触感染状况和环境禽流感病毒分布情况.方法 2010-2014年采集禽流感职业暴露人群的血清标本,采用马红细胞血凝抑制试验检测职业暴露人群H5N1血凝素抗体,采集环境标本采用Real-time PCR对标本进行A型及H5、H7、H9亚型禽流感病毒核酸检测.结果 本研究共采集677份家禽规模养殖场等禽流感职业暴露人群血清标本,进行H5N1抗体检测结果均为阴性;共采集城乡活禽市场等各类监测点的水、禽类(含候鸟)粪便及笼具表面等环境标本1 754份,经核酸检测A型阳性28份(1.60％),H9亚型阳性10份(35.71％),H5亚型阳性1份(3.57％),A未分型15份(53.57％),2份样本H9、H5均为阳性,未检出H7亚型.仅从城乡活禽市场和规模养殖场检测到阳性标本,野生候鸟栖息地及其他场所未检测出阳性标本.粪便等不同类型标本中均检出阳性标本.结论 济宁市城乡活禽市场和规模养殖场中有H5、H9禽流感病毒存在,城乡活禽市场是禽流感病毒重要的存在场所,存在人感染禽流感风险,应加强禽流感监测并做好综合性防控措施.
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2016年贵阳市数字化禽蛋配送中心禽类外环境禽流感病毒监测分析
目的 探析2016年贵阳市数字化禽蛋配送中心禽类外环境禽流感病毒的分布及来源,为贵阳市人禽流感的科学防控提供依据.方法 采用系统抽样的方法,于2016年每月定期采集贵阳数字化禽蛋配送中心不同类型环境标本,共353份,采用Real-time PCR法检测禽流感病毒核酸,采用SPSS22.0软件统计分析数据.结果 2016年贵阳数字化禽蛋配送中心甲型流感病毒(Influenza A virus,FluA)阳性率为20.68％;各季节均能检出FluA,冬春季高于夏秋季(x2=25.990,P＜0.05);粪便、笼具表面擦拭物、禽类饮水、“其他”类型标本FluA阳性率分别为9.17％、22.69％、30.30％、33.33％,笼具表面擦拭物和禽类饮水均高于粪便(P均＜0.008);旱禽、水禽、飞禽、“混合”禽类标本FluA阳性率分别为17.02％、34.29％、25.00％、16.67％,水禽高于旱禽(P＜0.008);来源于贵阳市、省内其他地区、省外的禽类标本FluA阳性率分别为18.95％、20.00％、22.56％,差异无统计学意义(x2=2.216,P＞0.05).结论 贵阳数字化禽蛋配送中心禽流感病毒污染是严重的、复杂的、多方面的,应长期、重点监测.
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2015年广州市3447份外环境标本高致病性禽流感病毒监测结果分析
目的 分析2015年广州市禽类市场H5和H7高致病性禽流感病毒的污染情况,为人禽流感防控提供基础数据.方法 按随机抽样的方法,对广州市禽类市场进行相关标本采集,用实时荧光定量RT-PCR方法检测禽流感病毒,阳性标本再进行H5和H7亚型禽流感病毒检测.结果 全年共采集标本3447份,A型、H5和H7亚型禽流感病毒阳性率分别为12.56％、0.75％和1.54％.中心城区和周边城区禽类市场均受到H5和H7亚型禽流感病毒的污染,病毒阳性率冬春季节大于夏秋季节.宰杀环节A型禽流感病毒检出率高(15.16％),H5和H7亚型禽流感病检出率高的标本均为地面涂抹拭子(阳性率为别为1.95％和3.41％).结论 广州市禽类市场普遍存在H5和H7亚型禽流感病毒共污染的现象,尤其以冬春季节为严重.在加强禽类市场全面清洗消毒的基础上,应重点关注宰杀环节和地表面环境等高危险因素,采取基于风险的针对性防控措施.
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2017年巴中市活禽交易市场禽流感监测结果分析
目的 了解巴中市辖区内活禽交易市场环境禽流感污染状况,为制定人感染禽流感防控方案提供依据.方法 集中采集市辖5个县区全部活禽市场105个交易点的禽类粪便及所接触表面及水质标本396份,采用实时荧光RT-PCR进行禽流感病毒及H5、H7、H9亚型流感病毒核酸检测.结果 在各县区均检出禽流感,市场的阳性率为28.6％,H5亚型检出率为4.6％(2.6％～6.0％)、H9亚型检出率15.4％ (9.9％ ～ 25.4％)、H7亚型检出率0.3％.禽流感病毒及H5、H9亚型检出率城区市场均明显高于乡镇,且H7亚型1份也在城区市场检出.清洗禽类污水较其他环境样本检出率高.结论 H5、H7、H9亚型禽流感病毒在巴中市广泛存在,活禽市场环境污染严重,鉴于2014年巴中市首次发现国内罕见的人感染H9N2流感病例和人感染H5与H7流感的严重危害性,建议政府相关部门加强活禽交易市场管理,必要时,严格执行清洗、消毒、休市制度,减少环境中病毒污染,降低人感染禽流感的风险.
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四川省遂宁市1例人禽流感调查
目的查找该例人禽流感病例的感染来源.方法调查病例的发病、就诊、暴露等情况,医学观察密切接触者.结果病例所在村落从2006-03-05起出现病死禽现象.病例发病前1周有病死禽及其分泌物或排泄物接触史.病例标本H5N1亚型禽流感病毒核酸阳性,并分离出H5N1亚型禽流感病毒.结论在禽间无明确禽流感疫情的情况下,人间仍可出现病例,可能通过接触污染的环境或吸入被污染的扬尘导致感染.
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2011年郧县外环境禽流感病原学监测结果分析
目的 了解外环境中禽流感病毒污染状况,为人禽流感防控提供科学依据.方法 分别在1、4、7、10、12月每月各采集10份外环境标本,用实时荧光定量PCR法(Real-time PCR)检测禽流感病毒FluA、H5、H9、N1核酸.结果 2011年全年共采集50份外环境标本,FluA阳性17份,阳性率34.00％；H5阳性9份,阳性率18.00％；H9阳性10份,阳性率20.00％；N1阳性1份,阳性率2.00％,所有阳性标本均来自农贸市场家禽屠宰场所.污水、鸡笼和粪便三种标本中均检出FluA、H5和H9核酸,在1份污水标本中检出AH5和AN1.FluA(70.00％)、H5(60.00％)和H9(60.00％)阳性率较高月份是4月和12月,N1阳性检出月份是10月.结论 郧县农贸市场屠宰点为禽流感病毒主要污染场所,冬春季阳性率较高.
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梧州市外环境禽流感病毒污染及职业暴露人群感染状况调查
目的 了解梧州市与禽类动物有接触史的职业暴露人群和禽类养殖、销售、宰杀场地的禽类粪便、污水及笼具表面等环境标本H5、H7亚型禽流感病毒感染情况.方法 对梧州市与禽类动物有接触史的职业人群进行H5、H7亚型禽流感病毒的血清流行病学调查和环境标本H5、H7亚型禽流感病毒感染情况调查.结果 职业人群中的H5、H7亚型禽流感病毒抗体阳性率为0.环境标本H5亚型禽流感病毒阳性率为20.83%.结论 禽类养殖、销售、宰杀场地的环境存在H5亚型禽流感病毒.
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用新的实验方法检测A/H5禽流感病毒
2006-2-3,美国食品药品管理局(FDA)宣布批准检测流感病毒A/H5(亚洲系列)的实时逆转录聚合酶链反应的(RT-PCR)引物以及探针装置,以及灭活了的病毒作为体外定量检测高致病性流感A/H5病毒(亚洲系列)的阳性RNA对照的来源.存在2个系列的A/H5流感病毒:欧亚(亚洲)和北美系列.CDC研制的引物及其探针装置用来检测亚洲系列的高致病性A/H5流感病毒,这些病毒与近在东亚(土尔其和伊拉克)实验室确诊的人感染禽流感病例有关.
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禽流感的流行与控制给我们的几点启示
禽流感是指由禽流感病毒引起的一种人、禽共患的急性传染病.主要发生在鸡、鸭、鸽子等禽类,引起的从呼吸道系统到严重全身败血症等多种症状.自2003年11月中旬开始,由高致病性H5N1禽流感毒株引起的禽流感在韩国、日本、越南、泰国、柬埔寨、老挝和中国等国家爆发.截止3月1日止,越南已有22例人类禽流感H5N1感染病例,15例死亡,截止3月15日止,泰国已有11例人类禽流感H5N1感染病例,8例死亡.
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采用反向遗传学技术构建H5亚型禽流感疫苗株
目的 构建重组H5亚型禽流感疫苗株.方法 采用RT-PCR技术,分别扩增鹅源高产禽流感病毒A/Goose/Dalian/3/01(H9N2)的6条内部基因片段、高致病性禽流感病毒株A/Goose/HLJ/ QFY/04(H5N1)的血凝素(HA)基因和N3亚型参考株A/Duck/Germany/1215/73(H2N3)的神经氨酸酶(NA)基因,并对HA1和HA2连接肽处的5个碱性氨基酸(R-R-R-K-K)的编码序列进行缺失与修饰,然后分别构建这8个基因的转录与表达载体,将其共转染293T/MDCK混合培养细胞单层,对拯救出的重组病毒进行表型分析.结果 利用反向遗传学技术拯救出了全部基因都源于禽流感病毒的疫苗株,其基因序列符合设计要求包括删除HA基因的毒力相关序列,疫苗株的表型为H5N3.结论 构建成功重组禽流感疫苗株rH5N3,为制备H5亚型禽流感疫苗打下了坚实的基础.
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禽流感及其防治对策
禽流行性感冒简称禽流感,是由甲型流感病毒引起的禽类感染性疾病,主要发生于鸡、鸭、鹅、鸽子和野生水禽、迁徙飞禽.病鸡粪便中的流感病毒株会在空气中传播,并被风带走.按病原体的类型,禽流感可分为高致病性、低致病性和非致病性三大类.高致病性禽流感因其传播快、危害大,被世界动物卫生组织列为A类动物疾病.我国将其列为一类动物疾病.早在1981年,美国就有禽流感病毒H7N7亚型感染人类引起结膜炎的报道,1997年香港发生H5N1亚型禽流感,导致6人死亡.近年来又先后获得了H9N2、H7N7、H7N2、H7N3亚型及H5N1亚型变异禽流感病毒感染人类的证据.
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云南省首例H5N6人禽流感病例流行病学调查
目的 调查分析云南省首例H5N6人禽流感病例感染来源和传播途径,为进一步防制人禽流感提供科学依据.方法 对首例H5N6人禽流感患者、密切接触者和患者暴露的野禽栖息地、活禽市场开展流行病学调查,并采集相关人员的呼吸道标本和外环境标本进行检测分析.结果 病例标本检测结果为禽流感病毒(H5N6)核酸阳性,确定该病例为人感染高致病性禽流感患者.病例有明确的禽类接触史,共同暴露人员和密切接触者未出现疑似症状.活禽市场存在禽流感病毒(H5N6、H9N2)的大量污染.结论 此次未出现人传人现象.感染来源可能与农贸市场环境有关.今后要继续加强不明原因肺炎监测,加强活禽市场监管,防止禽间疫情向人间扩散和传播.
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神经氨酸酶抑制剂帕拉米韦的合成及其抗禽流感病毒药效
目的 改进神经氨酸酶抑制剂帕拉米韦合成方法,提高其反应收率,确定其对人工感染禽流感病毒小鼠的防治效果、适宜剂量及给药方式.方法 以文斯内酰胺和2-乙基丁醛为主要原料,经催化开环、氨基保护、环化加成等步骤合成了帕拉米韦,通过1H NMR,13C NMR及MS等方法确定了中间体及目标化合物的结构.考察不同剂量和给药方式的帕拉米韦预防及治疗人工感染H9N2亚型禽流感病毒小鼠的药效.结果 合成帕拉米韦的总收率为52.7%,较文献提高了 28%.帕拉米韦对感染小鼠的保护效果具有剂量和治疗时间依赖性.40 mg/kg剂量的帕拉米韦一次性肌注,对感染小鼠的保护率为100%.感染病毒后2d内给药疗效较好.结论 帕拉米韦对感染禽流感病毒小鼠具有显著的防治效果,肌注效果较好.
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人感染高致病性禽流感病毒痊愈1例
病例 女,8岁零9个月.发病前一周因患儿及家人吃了死鸡肉少许而于2006年4月16日始发烧,体温40.3℃,在当地医治无好转后于23日收入我院.入院时体温39℃,呼吸50次/min,气促,唇发绀,双肺呼吸音粗,胸片示双侧肺炎,左侧胸腔少量积液.
关键词： 禽流感病毒 人感染高致病性禽流感 流感 病毒 -
2014～2015年黔东南州外环境禽流感病毒检测结果分析
目的:了解黔东南州外环境中禽流感病毒流行特点和趋势,为今后制定人感染禽流感病毒防控措施提供科学的参考依据.方法:采集黔东南州凯里市和麻江县活禽市场外环境禽流感标本85份,用实时荧光定量PCR进行甲型流感病毒核酸检测,甲型流感病毒核酸阳性标本进一步做H5、-H7、H9亚型分型.结果:85份外环境禽流感标本中,Flu A阳性57份,阳性率为67.1％,H5、H9亚型及混合型(H5+ H9)阳性率分别为17.6％、31.8％、17.6％,未检出H7亚型;不同类型标本中以地面污水检出阳性率高为92.9％.结论:黔东南州活禽市场外环境存在禽流感病毒污染,存在人感染高致病性禽流感的风险.
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贵州省2012年度禽流感病毒H5N1亚型HA-1基因分析
目的 建立并完善贵州省禽流感病毒基因分析检测技术平台,了解贵州省禽流感病毒H5N1亚型HA1片断与WHO公布的流行株比对有否发生变异.方法 收集禽流感H5N1亚型病毒毒株,提取病毒核酸RNA,通过RT-PCR扩增HA1片断,用电泳观察PCR产物目的条带大小,经过纯化、测序,用Biodeit、MEGA4相关软件进行序列比对,进行差异性分析,构建系统发育树.结果 贵州省禽流感病毒H5N1亚型中鸭来源的禽流感病毒组成一个分支,组内差异性在0.00～5.00之间；鸡来源的禽流感病毒组成另外一个分支,组内高度同源,差异性为零.结论 贵州省禽流感病毒在物种之间存在一定的种属特异性.并且与湖南省的禽流感病毒亲缘关系较近,这与两省之间地理交界有关.
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贵州省黔东南州职业暴露人群禽流感病毒感染状况调查
禽流感(avian influenza,AI)是由A型流感病毒引起的一种禽类感染综合征或疾病综合征.禽流感的发病情况取决于病毒的致病性及宿主的易感性,也受环境因素、饲养营养条件及并发疾病等因素的影响,可变现为无症状感染、轻度的上呼吸道症状、产蛋量下降到急性致死性死亡[1].高致病性禽流感(highly pathology avian influenza,HPAI)可引起禽类100％死亡,是近年对养禽业造成严重危害的病毒性传染病之一.
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贵州省六枝特区活禽市场禽流感感染状况调查
禽流行性感冒(简称禽流感,avian influenza,AI)被国际兽疫局定为A类传染病,同时被列入国际生物武器公约动物类传染病名单,是由A型流感病毒引起的禽类的烈性传染病,可表现为轻度的呼吸系统疾病、产蛋下降到急性致死性疾病等多种形式[1].在禽流感发现后的一百多年中,世界各地都有特定毒株引起的禽流感暴发和流行,造成高致病性禽流感大暴发的禽流感病毒都属于H5或H7亚型,高死亡率和猝死是其主要特征,并导致感染鸡群的全军覆灭.与此同时,在世界各地也不乏有中低致病力H5、H7亚型禽流感病毒的广泛流行.1992年,陈伯伦、张泽纪从广东鸡群中分离到了H9N2亚型禽流感毒株,这是我国早报道的H9N2亚型禽流感.不论以何种致病力形式出现,不同亚型禽流感病毒,尤其是高致病力禽流感病毒引发的禽流感的暴发与流行都给养禽业造成了毁灭性的打击[2].除此之外,禽流感病毒还能感染哺乳动物甚至人,并且有着较强的感染力和致病力.因此禽流感病毒也成了一个严重危害人类生命和健康的公共卫生问题.弄清禽流感病毒的感染状况是一个亟待解决的问题.
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什么是H7N9病毒
截止到4月1日我国发现3起人感染H7N9禽流感病例,其中上海的两例患者已死亡,另一名安徽患者病情危重,正在抢救.H7N9亚型禽流感病毒以往仅在禽类中发现,此次人感染是全球首次发现.3名患者均早期出现发热、咳嗽等呼吸道感染症状,进而发展为严重肺炎和呼吸困难.
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禽流感病毒M2胞外区(M2e)多拷贝片段的原核表达及其免疫原性分析
目的:构建禽流感病毒M2基因胞外区(M2e)多拷贝片段的原核表达载体,并对表达、纯化的重组蛋白进行免疫原性的分析.方法:以含有全长M2基因的质粒19T-M2为模板PCR扩增获得M2e,通过PCR及同尾酶连接的技术构建一系列的M2e多拷贝中间载体,得到顺次连接的9个拷贝M2e(9c),将其克隆到原核表达载体pET-32a中,经酶切和DNA测序鉴定正确后转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导,SDS-PAGE和Western blot分析蛋白表达情况.用纯化后的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,取动物血清作ELISA检测M2e特异性抗体IgG并取脾脏细胞作ELISpot检测细胞分泌IFN-γ的情况.结果:结果显示,重组菌能够表达出一条相对分子质量(M,)约为45 000的可溶性融合蛋白(M2e-9c),该蛋白表达量约占菌体表达量的37.2%.纯化蛋白免疫小鼠后,M2e特异性IgG滴度可达到1×104,:M2e肽段能够刺激免疫组小鼠脾细胞分泌IFN-γ且具有一定的浓度依赖性.结论:M2e多拷贝重组蛋白可以诱导小鼠产生抗M2e特异性的抗体反应和细胞免疫反应,说明该蛋白具有良好的免疫原性,为流感病毒广谱疫苗的进一步研发打下了基础.
