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一起食物中毒的致病性弧菌检验
2000年10月22日~24日,在南京市举办了全国警犬观摩会,22日晚约60人就餐,餐后6 h左右 ,陆续有人发生不同程度的呕吐、腹痛、腹泻、水样粪便等急性肠胃炎症状,至23日晚为止 ,共计38人到医院就诊.经流行病学调查及实验室研究证实,是一起由副溶血性弧菌和溶藻弧菌引起的食物中毒,现将结果报告如下.1 材料与方法标本粪便6份,呕吐物1份,剩余食物(盐水鸭)3份. 1.1 主要试剂与仪器 API鉴定系统(法国梅里埃),rapid ID 32E试剂条. 其余试剂为干粉培养基购自上海市疾病预防控制中心培养基室,微量生化管购自杭州天和微生物试剂有限公司.1.2 致病菌检测与鉴定所有检样均按<食品卫生微生物检验方法>GB 47 89-1994[1]及<卫生防疫检验>[2]做沙门氏菌、志贺氏菌、致病性大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、霍乱弧菌、致病性孤菌的检测和鉴定.
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5种干粉培养基对鼠疫耶尔森菌生长的影响
目的 观察不同干粉培养基对鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)的生长作用,筛选优质干粉培养基.方法 分别按照5种干粉培养基(赫氏培养基、营养琼脂、亚硫酸钠琼脂基础、溶血琼脂基础和赫金格尔干粉培养基)说明制作培养基,倾注平皿.将0.1 ml鼠疫菌悬液涂布于制备好的平皿中,于28℃48 h培养后进行活菌计数,观察鼠疫菌在5种干粉培养基中的生长效果.结果 鼠疫菌在赫氏培养基、营养琼脂、亚硫酸钠琼脂基础培养基中的生长情况相互间差异无统计学意义(P>0.05);在溶血琼脂基础、赫金格尔干粉培养基组间差异无统计学意义(P>0.05);鼠疫菌在溶血琼脂基础和赫金格尔干粉培养基中的生长效果优于赫氏培养基、营养琼脂和亚硫酸钠琼脂基础培养基,差异有统计学意义(P<0.05).结论 5种干粉培养基均可用于鼠疫菌的分离培养,但溶血琼脂基础干粉和赫金格尔干粉培养基中鼠疫菌的生长效果优于其他3种干粉培养基.
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探索破伤风双胨干粉产毒培养基配方
破伤风毒素是破伤风梭菌产生的神经毒素,它是至今已知的毒的毒素之一。由1315个氨基酸组成,相对分子质量150700,为获得高价破伤风类毒素,需用营养丰富且能刺激毒素形成与增长的培养基。因此在获取破伤风毒素的工艺中大多选取以蛋白水解液为基础,再添加适当氨基酸与维生素的培养基。目前使用酪蛋白胰酶消化液与牛肉胃酶消化液作为基础液制备的破伤风产毒培养基,虽然能够达到相对稳定的产毒量,但其制备工艺繁冗,原材料不可标准化,由此带来的不可确定因素较多,给培养基的批量生产带来不便。因此分别选用蛋白胨与酪蛋白胨干粉培养基将2种基础液进行替换,使得整个破伤风产毒培养基的制备工艺能够更简化,有益于大批量生产的标准化,是获取破伤风毒素的优选择。
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中药复方对大鼠肾小球系膜细胞增殖影响的实验研究
1实验材料中药材:中药人参(Radix Ginseng)、黄芪(Radix Astragali)、大黄(Radix et Rhizoma Rhei)、水蛭(Hirudo)均购自大连市医药采购供应站,由辽宁省药品检验所鉴定.细胞:大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)由武汉大学中国典型培养物保藏中心提供.试剂:MEM细胞干粉培养基Gibco;新生牛血清(FCS),鼎国生物;胰蛋白酶(1:250);乙二胺四乙酸二钠(EDTA);二甲基亚砜(DMSO);L-谷氨酰胺西宝生物;噻唑蓝(MTT)Amresco;其余试剂均为分析纯或生化纯试剂.主要仪器:HEAL FORCE HF-1200超净工作台,上海力申科学仪器有限公司;CK30-12PHP倒置显微镜,OLYMPUS;MDFU4086S-86382L超低温冰箱,日本三洋;HERAEUS BB16 CO2培养箱HERAEUS;TECAN GENIOS酶标仪,奥地利;FACSCalibur流式细胞仪,美国BD公司;96孔培养板;可调式移液器Eppendorf.
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高糖和脂多糖对腹膜间皮细胞β连环蛋白表达及纤维化的影响
腹膜间皮细胞(PMC)在腹膜纤维化中起着关键作用,在炎性反应及非生理性高糖透析液的环境下,其形态、结构及功能都发生了变化.在糖尿病肾病发病过程中,肾小管上皮细胞内的β连环蛋白( β-catenin)含量及表达上调,使下游转分化及致炎、致纤维化因子高表达[1].一、材料与方法1.实验动物:SD大鼠,体质量160~200 g,普通级,由中国医科大学实验动物中心提供.2.药品和试剂:DMEM-F12干粉培养基(美国Hyclone),胎牛血清(天津灏阳),Trizol试剂(美国Invitrogen),实时RT-PCR试剂盒(大连TaKaRa),PCR引物由北京华大基因公司合成,兔抗3-catenin多克隆抗体、SABC试剂盒、DAB显色液(武汉博士德),Wnt通路中的关键酶GSK-3β.