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细胞凋亡技术应用于电离辐射遗传损伤的研究
目的 了解不同剂量的辐射及不同时间段对小鼠骨髓细胞凋亡率的影响,比较PI/FITC-Annexin Ⅴ双染和PI单染2种荧光剂检测细胞凋亡方法的差异.方法 以60Co射线照射ICR小鼠,制备不同时间段的骨髓单个核细胞的单细胞悬液,用PI/FITC-Annexin v双染和PI单染法,通过流式细胞仪检测样品的凋亡率.结果 PI/FITC-Annexin Ⅴ方法检测出的骨髓单个核细胞早期凋亡率于6～24 h达到高且与辐射剂量之间无正相关性;较低剂量辐射组凋亡率的下降速度明显高于大剂量辐射.PI单染法只能检测样本的总凋亡率.在各时间点,骨髓细胞的总凋亡率随辐射剂量增大而增高.结论 小剂量辐射相对于大剂量辐射单位剂量下的细胞凋亡率更高,因此能更加有效地清除受损细胞,保护机体.只有PI/FITC-Annexin Ⅴ双染法才能检测出早期细胞凋亡率,有效鉴别细胞凋亡与死亡.
关键词： 电离辐射 细胞凋亡 PI FITC-AnnexinⅤ -
彩色多普勒检测孕妇子宫胎盘床螺旋动脉PI、RI预测妊高征价值
目的本研究采用彩色多普勒检测孕妇子宫胎盘床螺旋动脉搏动指数（PI），阻力指数（RI），预测妊高征的发生、发展及预后。方法选择无慢性高血压，心、肝、肾合并症正常孕妇184例。分正常组154例，异常组30例。从孕32周开始每隔2～3周重复检测一次子宫胎盘床螺旋动脉PI、RI，测量5个以上形态一致的多普勒频谱，取平均PI、RI值。结果两组存在显著差异，异常组PI、RI明显高于正常组（P＜0.01）。结论应用彩色多普勒测定子宫胎盘床螺旋动脉PI、RI来预测孕高征的发生、发展及预后具有临床应用价值。
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经阴道彩色多普勒超声观察卵巢动脉PI、RI与卵巢功能变化的关系
目的 了解女性在排卵周期中卵巢动脉血流的变化和卵巢功能周期性变化的关系.方法 应用经阴道彩色多普勒超声对80例不孕症患者排卵周期中卵巢动脉血流搏动指数(PI)、血流阻力指数(RI)值的变化进行监测,同时监测卵泡及子宫内膜发育.结果 随着卵泡发育卵巢动脉舒张期血流越来越丰富,PI、RI值下降,PI、RI值特征性改变和卵巢新生血管增加,血管阻力下降有关.结论测量卵巢动脉PI、RI值在为不孕症患者准确预测排卵,指导妊娠中有重要的临床应用价值.
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DNA倍体分析和E-CD、Integrin α5β1、MMP-2的表达在肺癌中的意义
目的:研究E-CD(E-cadherin,E钙黏着蛋白)、integrin α5β1(整联蛋白α5β1)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的表达联合DNA倍体和增殖指数(proliferation index,PI)的检测在肺癌侵袭和转移中的意义.方法:免疫组化法观察57例肺癌组织三指标的表达情况,同时用流式细胞术分析这57例组织的DNA倍体和PI.结果:E-CD在肺癌不同组织分化之间存在显著性差异(P＜0.05).E-CD、integrin α5β1、MMP-2在淋巴结转移情况都存在显著性差异(P＜0.05).流式细胞术结果显示PI在TNM分期、组织分化、组织类型中均存在显著性差异(P＜0.05),但和淋巴结转移无关.DNA异倍体与淋巴结有无转移之间存在显著性差异(P＜0.05).结论:随着肿瘤异质性的发生和发展,E-CD、integrin α5β1、MMP-2的异常表达以及DNA异倍体率的增加,表明他们在肺癌侵袭和转移的发生中扮演着重要的角色.但本文研究显示PI的增加和淋巴结转移无关.
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子宫内膜癌患者TSGF表达与细胞增殖的关系
目的:探讨血清TSGF检测对子宫内膜癌的应用价值及其与细胞增殖的关系.方法:对30例子宫内膜癌患者术前外周血TSGF进行检测,同时对肿瘤组织DNA含量进行分析.结果:①子宫内膜癌患者血清TSGF含量及阳性率明显升高,敏感性为64.9%,特异性为62.5%,阳性预测值61.5%,阴性预测值65.8%,正确诊断率63.6%;②TSGF阳性者肿瘤细胞SPF明显升高,显著高于TSGF阴性者(P＜0.05),PI指数略有上升,但无显著性差异(P＞0.05),三者呈平行关系.结论:血清TSGF检测对子宫内膜癌具有一定的诊断价值,并与肿瘤细胞的增殖有关.
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CD3/TCR复合物抗体诱导不成熟胸腺细胞亚群的凋亡
目的:采用AnnexinV,PI染色,流式细胞仪分析的方法、DNA琼脂糖电泳法检测不同CD3/TCR复合物抗体对小鼠胸腺T淋巴细胞亚群的促凋亡作用.方法:新鲜分离胸腺细胞,加入PMA、anti-TCR+ anti-CD28 mAb,anti-TCR mAb等培养20小时,AnnexinV,PI ,CD4,CD8细胞染色以及TCR三染,进行FACS分析,同时抽提培养细胞DNA进行琼脂糖电泳.结果:PMA+IONO诱导胸腺 T细胞的凋亡作用强,anti-TCR+ anti-CD28 mAb次之, anti-TCR mAb弱.结论:AnnexinV,PI细胞染色,流式细胞仪分析的方法可以灵敏检测T淋巴细胞的凋亡;anti-TCR+ anti-CD28 mAb能明显增强anti-TCR mAb促不成熟的CD4+CD8+TCR+和CD4+TCR+细胞的凋亡作用;不成熟T细胞经TCR与自身抗原结合的活性过程能产生克隆删除从而产生自我耐受.
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综合护理方式对老年牙周炎患者治疗效果的影响
目的探讨综合护理干预对老年牙周炎患者的临床治疗效果。方法回顾性分析了2008年9月至2011年9月入住本院的180例老年牙周炎患者的临床资料,将患者随机分为对照组与观察组,对照组( n=90)实施常规护理,观察组(n=90)在常规护理的基础上进行综合护理干预,即在常规护理的基础上实施心理护理及健康教育。通过焦虑自评量表( SAS)、抑郁自评量表( SDS)以及生存质量对两组患者进行评分,对两组患者护理前后心理状况改变情况、健康知识知晓度、生存质量、菌斑指数( PI )、龈沟出血指数( SBI )进行对比,组间差异以P<0.05表示具有统计学意义。结果(1)对照组护理前后SAS及SDS得分差异无统计学意义(P>0.05),观察组在护理前后SAS及SDS得分出现显著的变化,且护理干预后患者上述得分明显低于护理干预前,差异有统计学意义( P<0.01)。护理干预后,对照组与观察组SAS及SDS得分差异有统计学意义( P<0.01)。(2)护理前后对照组健康知识知晓度没有明显的变化,差异无统计学意义( P>0.05)；观察组健康知识知晓度出现了明显的变化差异有统计学意义(P<0.01),且两组患者在护理干预后的健康知识知晓度差异有统计学意义(P<0.01)；(3)根据生存质量评价标准,护理干预后对照组得分为(101±8)分,观察组得分为(129±7)分,两组差异有统计学意义(P<0.01)；(4)两组患者初诊时,PI及SBI值没有明显差异(P>0.05),经2,4个月的随访,观察组PI及SBI值较对照组具有统计学差异(P<0.05,P<0.01)。结论将综合护理干预方式应用于老年牙周炎患者的治疗过程之中,能够促使患者的心理状况转良,提高患者对健康知识的知晓程度,同时生存质量也有明显提高,PI与SBI值也有明显地下降,效果尤佳,应该在临床上加以推广并应用。
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超声双重造影对评判及预测胃癌伴肝转移新辅助化疗的价值
目的 探讨超声双重造影对预测及评判胃癌伴肝转移新辅助化疗患者疗效的应用价值.方法 胃癌伴肝转移新辅助化疗患者82例,根据病情分为有效组(62例)与进展组(20例),对比两组化疗前后超声双重造影参数,统计术后病理组织微血管密度(MVD),分析造影参数与MVD的相关性.结果 治疗后3个周期峰值强度(PI)显著低于治疗前,开始增强时间(RT)、到达峰值时间(TTP)显著高于治疗前(P＜0.05);有效组PI显著低于进展组,RT、TTP均高于对照组(P＜0.05);MVD(68.23±15.21)条/200倍视野显著低于进展组(75.55±10.61)条(P=0.017),PI与MVD呈正相关,RT、TTP与MVD呈负相关.结论 超声双重造影参数、PI能有效预测与评判胃癌伴肝转移新辅助化疗效果,且敏感性较高.
关键词： 超声双重造影参数 胃癌伴肝转移新辅助化疗 PI -
养心汤对近似不稳定性心绞痛家兔模型颈动脉IMT、Vs、PI、RI 的影响
目的：观察养心汤对近似不稳定性心绞痛家兔模型颈总动脉内中膜厚度（IMT）、收缩期峰值流速（Vs）、搏动指数（PI）、阻力指数（RI）的影响。方法：通过球囊损伤颈总动脉加高脂饮食喂养8周的方法建立近似不稳定性心绞痛家兔模型。8周后随机分为模型对照组、阿托伐他汀组、养心汤组，每组7只，另取7只家兔为空白对照组，于8周末、10周末，测量颈总动脉 IMT、Vs、PI、RI，分析数据资料。结果：内皮损伤结合高脂饮食可使家兔 IMT 明显增厚，Vs、 PI、RI 明显增加，养心汤组、阿托伐他汀组的IMT、Vs、PI、RI 值与模型组相比明显下降，差异有统计学意义，养心汤组与阿托伐他汀组比较，IMT、Vs、PI 值下降差异无统计学意义。结论：内皮损伤结合高脂饮食可使 IMT、Vs、PI、RI 增加，而养心汤可显著逆转 IMT 增厚，降低模型的 PI、RI。
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睾丸性不育症间质细胞增殖变化与Livin、Bim蛋白表达的关系
目的 研究睾丸性不育症中睾丸间质细胞增殖变化与相关基因Livin、Bim的关系,为睾丸间质细胞增殖失衡的基因调控机制提供依据.方法 应用免疫组化S-P法检测睾丸间质细胞Ki-67和Livin、Bim蛋白的表达,以Ki-67计数作为增殖指数(PI).结果 在58例睾丸性不育症间质细胞中,PI和Livin、Bim蛋白阳性表达率分别为(0.57±0.08)、36.2%、69.0%;在11例正常睾丸组织间质细胞中,分别为(0.78±0.15)、54.5%、36.4%,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).Livin阳性组PI高于阴性组(P＜0.05),呈正相关;Bim阳性组PI低于阴性组(P＜0.05),呈负相关.结论 睾丸性不育症中睾丸间质细胞增殖失衡与Livin、Bim基因异常表达有关,从而间接影响精子形成.
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乳腺癌特异性多肽介导的HSV-TK/GCV系统的构建及其靶向杀伤效应
目的:研究乳腺癌MDA-MB-231细胞特异性转导多肽PI介导的HSV-TK/GCV抗瘤系统对乳腺癌MDA-MB-231细胞的体外靶向杀伤作用.方法:以PCR从质粒pORF-HSV-TK中扩增目的基因PI -TK,克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建pET-28a(+)-PI-TK载体,转化宿主菌,经IPTG诱导表达PI-TK融合蛋白,利用His-Tag对其进行纯化,SDS-PAGE和Western blotting鉴定PI-TK融合蛋白.将不同质量浓度的PI-TK融合蛋白与MDA-MB-231细胞共培养,联合更昔洛韦(ganciclovier,GCV)作用后,倒置显微镜下观察细胞的形态变化,CCK-8法检测MDA-MB-231细胞的增殖.结果:成功构建了重组原核表达载体pET-28a(+)-PI-TK,获得纯化的PI -TK融合蛋白,SDS-PAGE及Western blotting鉴定PI -TK融合蛋白表达正确.单独PI -TK融合蛋白不影响MDA-MB-231细胞的形态和增殖,但PI -TK融合蛋白联合GCV能剂量依赖性靶向抑制MDAMB-231细胞的增殖,200 μg/ml PI-TK+ 10 mg/L GCV作用的抑制率达(68.9±7.57)％；PI-TK联合GCV抑制MDA-MB-231细胞的IC50值为152.64 μg/ml.上述各作用对MDA-MB-435细胞均无影响(P＜0.05).结论:乳腺癌特异性转导多肽PI介导的HSV-TK/GCV抗瘤系统可靶向杀伤MDA-MB-231细胞.
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高山红景天苷对外周性疲劳大鼠骨骼肌细胞内ATP、AMP以及Pi含量的影响
目的:测定运动大鼠体内ATP、AMP和Pi的含量变化,从而进一步验证红景天苷的抗疲劳作用.方法:在前期工作的基础上采用高山红景天苷灌胃大鼠并采用高效液相法测定大鼠肌细胞内三磷酸腺苷(ATP)和一磷酸腺苷(AMP)的含量,试剂盒方法测定Pi含量变化.高效液相测定结果表明,ATP的质量浓度在0.01～0.1mg/mL范围内,AMP的质量浓度为0.02～5mg/mL范围内,浓度与峰面积均有良好的线性关系,其线性回归方程和相关系数分别为:y=46 555x-106.98,R2=0.999 9;y=20 583x+1 845.6,R2=0.9991.结果:ATP的含量有上升趋势.AMP含量在6～24小时内成现先升高后降低趋势并且在12小时出现大值.各组肌细胞无机磷含量在力竭运动后6小时有大值,然后含量降低.结论:高山红景天苷对于调节和维持细胞能量物质并且对减少疲劳和延缓疲劳具有一定的积极作用.
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肿瘤血管状况与宫颈癌放疗敏感性关系的临床探讨
目地:探讨肿瘤血管状况与宫颈癌放疗敏感性关系及临床应用价值.方法:用彩色多普勒血流显像(CDFI)评估放疗前肿瘤血管状况,主要指标为定量测定肿瘤血管阻力指数(RI);肿瘤血管搏动指数(PI)并观察放疗后肿瘤消退结果.结果:30例宫颈癌患者21例放疗后为完全反应,9例为部分反应,完全反应组平均肿瘤血管阻力指数RI(0.61)高于部分反应组(0.39)(P<0.01),完全反应组平均肿瘤血管搏动指数PI(1.21)高于部份反应组(0.62)(P<0.01).结论:宫颈癌血管生成活性与乏氧细胞活性及放疗敏感性密切相关,通过CDFI分析肿瘤血管状况来评价肿瘤氧合情况,肿瘤血管阻力指数RI和搏动指数PI与放射敏感性呈正相关,可指导宫颈癌放疗及预测放疗效果.
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肾母细胞瘤中MMP-7、DNA倍体、SPF的表达
目的检测肾母细胞瘤组织中MMP-7的表达和DNA倍体、SPF、PI的表达率及其与临床分期、病理分级间的关系.方法应用流式细胞仪测定35例肾母细胞瘤标本的DNA倍体、SPF、PI值;应用免疫组化S-P法检测35例肾母细胞瘤标本中MMP-7的表达,并分析两者间的关系.结果与正常肾组织相比,Ⅰ+Ⅱ期与Ⅲ+Ⅳ期肿瘤的异倍体率、SPF、PI值均显著升高(P＜0.05),但肿瘤各临床分期(Ⅰ+Ⅱ期与Ⅲ+Ⅳ期).间,及病理FH型与UH型.间差异无统计学意义.MMP-7在肾母细胞瘤阳性率(65.7%),显著高于正常对照组中阳性表达率(10.0%)(P＜0.05);肾母细胞瘤组织中MMP-7阳性表达率和DNA异倍体率呈正相关.结论测定肾母细胞瘤的DNA倍体、SPF、PI值并联合检测MMP-7的表达可以了解肾母细胞瘤的某些分子生物学特性,从分子水平上了解其增殖活性,对肾母细胞瘤的诊断及评估预后有一定的意义.
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TT病毒ORF2在Cos7细胞中的表达及蛋白质定位
应用PCR方法从含有TTVirus ORF2的质粒pET-His-TTV2中扩增出606bp的蛋白质编码区,并将其克隆到真核表达载体pEGFP-N1中以表达成GFP-VP2融合蛋白.构建出的重组质粒pEGFPTTV2经过酶切分析和PCR鉴定.用脂质体介导法将pEGFPTTV2质粒DNA转染Cos7细胞,通过RT-PCR分析,证实细胞中存在ORF2基因的转录产物.用共聚焦显微镜结合PI染色技术研究TTV VP2蛋白在细胞中的分布情况.结果表明,TTV VP2分布在细胞质中和细胞核膜内侧.因此推测VP2作为一种非结构蛋白,功能可能是参与病毒DNA的复制或转录.
关键词： 输血传播病毒(TTV)ORF2 GFP VP2 PI 蛋白质定位 -
妊娠期高血压疾病患者孕期子宫动脉血流动力学的变化及意义
目的：探讨妊娠期高血压疾病患者孕期子宫动脉血流动力学的变化，为孕晚期患者选择分娩方式和预测母婴结局提供信息。方法入选80例妊娠期高血压疾病孕妇作为观察对象（观察组），同期产检的80例健康孕妇作对照（对照组），采用彩色超声多普勒监测所有孕妇子宫动脉搏动指数（PI）、阻力指数（RI）、收缩期与舒张末期大血流速度比值（S／D），比较分析上述指标变化及母婴结局。结果观察组子宫动脉RI（0.39±0.08）显著高于对照组（0.28±0.05），PI（0.53±0.27）显著高于对照组（0.31±0.06），S／D（1.86±0.08）也显著高于对照组（1.55±0.09），差异有统计学意义（均P＜0.05）；观察组剖宫产率[25.0％（20／80）]高于对照组[16.3％（13／80）]，早产率[5.0％（4／80）]高于对照组[2.5％（2／80）]，宫内窘迫率[7.5％（6／80）]高于对照组[2.5％（2／80）]，但差异均无统计学意义（均P＞0.05）。观察组新生儿窒息率为6.3％（5／80），而对照组无一例新生儿窒息，两组差异有统计学意义（ P＜0.05）。结论彩色超声多普勒监测孕晚期妊娠高血压疾病患者子宫动脉PI、RI、S／D值明显升高，可为母婴结局及妊娠方式提供客观依据，改善孕产妇及新生儿结局。
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护理干预对外周静脉置入中心静脉导管安全置管时间的影响
目的 实施护理干预对外周静脉置入中心静脉导管(PICC)置管安全时间的影响.方法 将216例手术后静脉置管患者随机分为干预组和对照组.对干预组实施护理干预,对照组采用常规护理,观察置管时间与并发症的关系以及置管末端细菌培养的情况.结果 干预组可使置管安全期延长至(12.5±2)d,并发症发生率为2.5%,细菌培养阳性率为1.29%;对照组置管时间为(6.5±1.5)d,并发症发生率为18%,细菌培养阳性率为9.5%,两组比较有显著的临床意义(P<0.01).结论 干预组可延长PICC置管的安全时间,置管时间5～25天,无1例发生静脉炎,减少感染机会,降低并发症的发生率,减轻患者的痛苦及经济负担,为患者提供了一条方便,安全、有效的救治通路.
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妊娠晚期吸氧对脐动脉血流速度调节的研究
目的:了解妊娠晚期吸氧对脐动脉血流速度调节的影响.方法:选择妊娠28周以上单胎孕妇138例,吸氧前后应用MFM-OBS型产科综合诊断监护系统(脐血流),进行脐动脉血流速度测定,并由仪器自动计算出S/D、PI、RI、FVR及FHR,采用自身对照t检验方法分析吸氧前后的变化.结果:小于标准值下限者53例吸氧后S/D值显著升高(P＜0.001),大于标准值下限或高于标准值上限者85例吸氧后S/D值显著下降(P＜0.001),PI、RI也有相应变化,但FVR及FHR无明显变化.结论:吸氧有利于调节脐动脉血流速度,有利于调节外周血管的阻力,并且其调节方式为双向性,机制有待于进一步研究.
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体外循环术后肾血流搏动指数与急性肾损害的相关性研究
目的：探讨肾血流搏动指数（PI）改变与体外循环手术（CPB）急性肾功能损害（AKI）的可能关系。方法对14例心脏病在实施体外循环心脏直视手术前、术后1、2、4、8、16、24 h ，运用彩色多普勒血流显像分别监测各时点肾主动脉、肾段动脉搏动指数，并同时检测肾功能尿素氮（Urea）、尿酸（UA）、肌酐（Crea），对所有数据进行统计分析。结果肾主动脉PI术后1、2、4、8、16 h与术前相比明显增高，肾段动脉术后1、2、4、16 h PI与术前相比明显增高，肾血流 PI与肾功能指标 Urea、UA、Crea呈正相关。结论体外循环术后肾主动脉、肾段动脉血流PI与Urea、UA、Crea存在相关性。
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经颅多普勒检测偏头痛的频谱类型分析
目的:探讨偏头痛间歇期经颅多普勒(TCD )检测时所表现出来的频谱类型,并对偏头痛患者中血管张力过高时动脉指数(PI)增高与动脉硬化的(PI)增高在频谱形态和有关血液动力学参数方面进行鉴别诊断.方法:应用TCD对297例临床诊断为偏头痛的病例进行血管松弛剂治疗前后的颅底动脉血流动力学频谱检测.结果:血液增快(痉挛型)144例(48%);单纯PI增高(高张力状态型)34例(11.2%);血流速度增快并有PI同时增高43例(14.2%);双侧同名动脉平均血流速度相差15cm/s(不对称型)31例(10.8%),单支血管血流时快时慢(不稳定型)15例(5%),血流动力学参数及频谱形态正常30例(10%);其中增高者经血管松弛剂治疗1～2周后PI下降37例(86%).结论:偏头痛间歇期的TCD表现类型有六种,其中有两类为很少见的血管高张力状态型和混合型,PI可随药物治疗而降至正常范围,此点可以与脑动脉硬化所致的PI增高相区别.
