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AMH与卵巢储备功能及体外胚胎发育潜能的关系
抗苗勒管激素(AMH)为转化生长因子β超家族的一员,是一种二聚糖蛋白.AMH作为单一指标预测卵巢储备功能,越来越受到重视.卵巢储备功能与女性的生育力及绝经年龄密切相关,准确、客观的评估女性的卵巢储备功能,预测其生育潜能及绝经年龄,利于育龄女性做好家庭生育计划及工作规划.现对AMH在预测卵巢储备功能、胚胎发育潜能的新研究进展进行综述.
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从卵子形态及胚胎质量选择移植胚胎的研究进展
体外受精-胚胎移植技术(ART)的成功取决于该过程中每个独立步骤发挥其大效能.控制性超排卵、取卵技术及胚胎培养条件的改善确保了较高的受精率和可移植胚胎的数目,然而胚胎质量始终是影响妊娠结局的主要因素之一.体外受精(IVF)和卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)周期选择2~3枚胚胎移植可提高妊娠率,但多胎率明显增加,有报道多胎率高达50%[1],而且母亲及胎儿妊娠期风险增加.因此近年来许多中心开展单胚胎移植技术,希望通过减少胚胎移植数目,降低多胎率.但若不能预测单个胚胎的发育潜能,盲目减少移植胚胎数目,妊娠率必然降低.因此,对胚胎发育潜能的早期、准确预测,选择高发育潜能的胚胎移植可提高妊娠率、种植率,降低多胎率.本文从IVF/ICSI过程中卵母细胞形态(D0)、原核期胚胎(D1)、卵裂期胚胎(D2、D3)和囊胚期胚胎(D5)形态学评分进行综述.
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体外成熟对卵母细胞纺锤体及染色体形态的影响
以往的研究发现,未成熟卵母细胞体外成熟培养及体外受精-胚胎移植后着床率低的原因之一,可能是体外成熟的卵母细胞纺锤体和染色体排列发生了异常,引起胚胎发育潜能降低[1].本研究通过观察未成熟卵母细胞体外成熟培养后,卵母细胞纺锤体与染色体的变化,探讨体外成熟培养对卵母细胞纺锤体与染色体的影响.
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不含钙镁离子操作液在胚胎种植前诊断中的应用
自1990年第1例经种植前遗传学诊断的婴儿成功分娩[l]以来,种植前遗传学诊断在遗传性疾病和染色体疾病诊断中得到越来越广泛的应用.然而种植前胚胎所能提供的遗传物质很少,如何在尽量不影响胚胎发育潜能的前提下,有效地获得足够的遗传物质用于诊断,是影响种植前遗传学诊断成功率的重要问题.人类胚胎活检多在6～10细胞期进行,此时部分卵裂球之间已有细胞间连接而给活检操作带来一定困难,本研究将不含钙镁离子的操作液应用于胚胎活检,观察其对活检结果及活检后胚胎继续发育的影响.
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胚胎发育潜能低下患者的冻融策略选择
目的:比较胚胎发育潜能低下的患者在冻融周期中移植不同时期胚胎的妊娠结局,以优化其冻融策略.方法:回顾性分析2015年1月至10月于我院生殖医学中心治疗的57例常规体外受精(IVF)周期或卵胞浆内单精子注射(ICSI)周期中胚胎发育潜能低下患者的冻融周期临床资料.根据移植胚胎的时期分为分裂胚移植组(n=35)及囊胚移植组(n=22),比较两组的临床妊娠率、种植率及早期流产率.结果:冻融周期中,Day3分裂胚移植组与Day5囊胚移植组相比,临床妊娠率(65.71％ vs.63.63％)和种植率(50.00％ vs..52.27％)相近;早期流产率虽无统计学差异,但分裂胚移植组的早期流产率有明显高于囊胚移植组的趋势(8.7％ vs.0).结论:冻融周期中,对胚胎发育潜能低下的患者建议优选囊胚移植,以降低早期流产风险.本研究结果需扩大样本后进一步探讨,为优化冻融周期的妊娠结局提供新思路.
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早卵裂对IVF助孕妊娠结局预测价值的探讨
目的 通过观察早期卵裂来初步预测胚胎发育潜能,探讨早卵裂对移植胚胎选择及助孕妊娠结局的临床应用价值.方法 回顾性分析2016年1月1日至12月31日于河南省人民医院生殖医学中心行常规体外受精-胚胎移植(In vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)助孕的患者1 025例,根据第3天所移植的2枚胚胎是否发生早卵裂将其分为A组(早卵裂组,459例)、B组(混合组,296例)及C组(未发生早卵裂组,270例),比较3组之间的获卵数、获卵率、MII率、2PN率、2PN卵裂率、种植率及临床妊娠率是否有统计学差异.结果 三组患者女方平均年龄、不孕类型、不孕年限、BMI及基础FSH无明显统计学差异(P＞0.05),A组MII卵率(88.59％)相对B组(85.70％)、C组(82.69％)稍高,但获卵率、MII卵率、2PN率、2PN卵裂率三组之间无明显统计学差异(P＞0.05).A组种植率(50.40％)、临床妊娠率(67.32％)及B组种植率(50.00％)、妊娠率(69.57％)明显高于C组(种植率及妊娠率分别为35.71％、46.67％),差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 早卵裂可以更加完善形态学评分系统,初步预测胚胎发育潜能,有助于胚胎筛选,提高种植率及临床妊娠率.
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人类早期胚胎发育潜能的预测方法学进展
有效预测人类早期胚胎发育潜能,可望移植较少胚胎数,获得与移植多枚胚胎同样的植入率和临床妊娠率,同时减少多胎妊娠率.胚胎形态学评定是目前早期胚胎发育潜能预测的主要方法,包括原核期评分、早期胚胎评分和囊胚期胚胎评分.仅从胚胎形态学不能确定遗传物质是否正常,研究发现,对胚胎发育潜能的研究应从胚胎植入前染色体和基因分析开始.而近年研究发现,胚胎代谢产物及分泌的细胞因子,如可溶性人白细胞抗原G、血小板活性因子、胰岛素样生长因子Ⅱ等与胚胎发育潜能密切相关.
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体外培养中代谢分析评估胚胎发育潜能
单胚胎移植(SET)是降低多胎妊娠率的一种有效方法,选择高质量的胚胎是提高单胚胎移植成功率的关键.目前,大多数生殖中心采用的胚胎形态学评分及卵裂率仍然是主要的评估方法,但在评估胚胎活力和预测继续妊娠方面具有一定的局限性.近期研究表明,胚胎代谢分析结合当前的评估方法,可能会更有效地选择优质胚胎,提高妊娠率同时降低多胎妊娠率.
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原核期细胞形态学预测胚胎发育潜能
为了增加辅助生殖技术(ART)的临床妊娠率,同时减少多胎分娩的风险,必须寻求更好的选择胚胎的标准.原核细胞形态学对于胚胎发育潜能的预测已得到了比较广泛的关注.完善原核期评价系统,可以准确挑选移植胚胎,在减少体外培养环节的同时提高妊娠率.现综述原核形态学的指标及其与胚胎发育潜能间的关系.
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人卵丘细胞GREM1基因表达与卵母细胞发育潜能关系研究
目的 探讨辅助生殖技术中人卵丘细胞GREM1基因表达水平与卵母细胞发育潜能的关系.方法 回顾性分析福建泉州市妇幼保健生殖医学中心2012年3月至2014年3月接受卵胞浆内单精子显微注射-胚胎移植(ICSI-ET)治疗的男方因素不孕妇女42例的160个卵母细胞,以形态学评分标准将正常受精的胚胎分为优质胚胎30个和非优质胚胎70个,移植后剩余胚胎冷冻保存或囊胚培养.根据卵母细胞成熟与否、D3胚胎质量及D5/D6囊胚培养情况,实时荧光PT-PCR分别检测其卵丘细胞中GREMl表达水平的差异.结果 成熟卵母细胞的卵丘细胞GREMl表达水平比不成熟卵母细胞高(1.9739±0.5114 vs.J.5105±0.2629,P＜0.001),同样在D3优质胚胎中,检测其卵丘细胞GREMl表达水平比非优质胚胎中的高(2.2693±0.4193 vs.1.9263±0.4912,P＜0.05);进一步的囊胚培养发现,D5/D6囊胚培养成功的卵丘细胞GREM1表达水平比失败纽的明显升高(2.3874±0.2999 vs.1.5943±0.2078,P＜0.001)结论 卵丘细胞GREM1表达水平与卵母细胞成熟及胚胎质量有关,成熟的卵母细胞与后期形成的胚胎质量密切相关,检测卵丘细胞GREM1表达可预测胚胎发育潜能.
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人M Ⅱ期卵母细胞极体及原核期形态分级对预测胚胎发育潜能的研究
目的 对人MⅡ期卵母细胞的第一极体和D1双原核期的原核、核仁及胞浆进行形态分级,以预测胚胎发育潜能.方法 以2009年6月—2012年6月在广西医科大学第一附属医院生殖医学研究中心接受卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)助孕治疗的269对不育夫妇(共269个移植周期)为研究对象.对所有获得的MⅡ期卵母细胞第一极体进行形态观察和分级,同时将D1双原核期的受精卵进行形态分级,分别比较其受精率、卵裂率、优质胚胎率、胚胎种植率及临床妊娠率.结果 根据所移植的胚胎来自不同级别第一极体的MⅡ期卵和不同原核等级分为B组和C组,分别为102例和98例,其余为A组(69例).移植来源于1～2级第一极体的MⅡ期卵母细胞且D1双原核期为Z1 ～ Z2级的胚胎其受精率、卵裂率、种植率、优胚率及临床妊娠率均较高.结论 人MⅡ期卵母细胞第一极体和D1双原核期受精卵的等级越高,胚胎发育的潜能就越好.从而提高ICSI的胚胎种植率及临床妊娠率.
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IVF周期中MⅡ末期卵子形态与胚胎发育潜能的关系
目的:探讨IVF周期中MⅡ末期卵子形态与胚胎发育潜能的关系.方法:收集IVF周期中受精后5～6h脱颗粒细胞MⅡ末期卵子,依据透明带、卵泡浆及两极体形态在光镜下对排出两个极体的卵子进行形态评分分级(Ⅰ～Ⅲ级),统计不同分级组间的高评分原核形成率、卵裂率、优质胚胎率及临床妊娠率和种植率,分析卵子形态与受精及胚胎发育潜能的关系.结果:形态评分较高的卵子与形态评分较低的卵子间受精率和卵裂率均无显著差异(P＞0.05),但优质胚胎率显著增高(P＜0.05)；随着移植胚胎中由高形态评分卵子发育而来的胚胎数目增多,周期临床妊娠率、种植率显著增高(P＜0.05).结论:IVF周期中,早期脱颗粒细胞后MⅡ末期卵子形态对受精率及卵裂率没有影响,但可预测早期胚胎质量及妊娠结局.
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体外胚胎培养液代谢组学分析在评价胚胎发育潜能的研究进展
代谢组学是对溶液、组织、细胞等生物样本中的小分子代谢物进行定性和定量分析，从而得到生物体受外界刺激后其代谢水平的整体变化的结果。其研究过程包括代谢组数据的采集、预处理、多变量数据分析、标记物识别和途径分析等步骤。代谢组学作为一种新兴技术，在辅助生殖技术中具有很好的应用前景。胚胎的发育和代谢是个动态过程，应用质谱分析、光谱分析和磁共振波谱技术能客观、全面、准确、无创地反映胚胎质量及其发育潜能，可作为胚胎形态学评估的补充，从而提高胚胎种植率，提高单胚胎移植的妊娠率。
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ICSI中不同来源精子对卵母细胞受精、胚胎质量及发育潜能的影响
目的：研究卵胞浆内单精子注射技术（ICSI）中不同来源精子对卵母细胞受精、胚胎质量及发育潜能的影响。方法回顾性分析我中心因单纯男性因素行ICSI助孕治疗的197例患者的临床资料，按不同精子来源分为射精组（n=102）、PESA组（n=68）、TESA组（n=27）3组，其中将射精组又分为严重少弱畸精子症组（n=67）和隐匿精子症组（n=35）。比较4组间受精率、优质胚胎率、新鲜胚胎移植周期的着床率及妊娠率，以及低质胚胎继续培养的优质囊胚形成率。结果少弱畸精子射精组、隐匿精子射精组、PESA组、TESA组的正常受精率分别为64.8%、62.1%、75.6%、61.6%，其中PESA组明显高于其它3组（P<0.05），4组的优质胚胎率、新鲜胚胎移植周期的着床率及妊娠率无明显差异（P>0.05）。4组间低质胚胎继续培养的优质囊胚形成率也无显著差异（P>0.05）。结论PESA来源的精子ICSI中正常受精率较高，但在ICSI中不同来源精子对胚胎质量及发育潜能无显著影响。
关键词： 卵胞浆内单精子注射技术 精子来源 胚胎质量 胚胎发育潜能 -
胚胎培养上清液中可溶性HLA-G表达与胚胎发育潜能的关系
为了减少产妇及后代的病死率,全世界都在努力控制体外受精(IVF)或卵胞浆内单精子注射(ICSI)后的多胎出生,据近的辅助生殖协会统计,辅助生殖技术(ART)出生胎儿中49%是多胎分娩[1].国内彭献东等[2]2007年报道其中心IVF/ICSI周期双胎、三胎和四胎的发生率分别为26.32%、4.43%和0.34%.多胎妊娠对母婴健康不利,在不降低妊娠率的情况下选择单一胚胎进行移植,可有效避免多胎妊娠的发生,因此如何选择具有着床及继续妊娠能力的胚胎已成为辅助生殖工作中至关重要的问题.
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早期卵裂与常规体外受精胚胎质量的相关性研究
目的 探讨早期卵裂(EC)与常规体外受精(IVF)胚胎质量的关系,评估EC能否作为胚胎体外发育潜能的一个预测指标.方法 对619个IVF周期共3 646枚正常受精胚胎进行早期卵裂观察和第3天(D3)卵裂期胚胎质量评估;对其中682枚D3优质胚胎和2 180枚D3非优质胚胎进行囊胚培养,于第5天(D5)和第6天(D6)进行囊胚期胚胎质量评估.根据EC观察结果,将胚胎分成三组:EC组、原核消失(PNBD)组和原核还在(NPNBD)组.结果 D3胚胎平均卵裂球数EC组胚胎显著多于PNBD组和NPNBD组(P＜0.05),NPNBD组低;D3优质胚胎率EC组与PNBD组差异无统计学意义(P＞0.05),但是两组均显著高于NPNBD组;EC组D3可冻胚胎率和D3可用胚胎率均显著高于PNBD组和NPNBD组(P＜0.05),NPNBD组低.D3优胚行囊胚培养,D5囊胚形成率和D5优质囊胚率三组之间差异无统计学意义(P＞0.05),D5可冻囊胚率PNBD组显著高于NPNBD组(P＜0.05);总囊胚形成率、总优质囊胚率和总可冻囊胚率在三组之间差异无统计学意义(P＞0.05).D3非优胚行囊胚培养,EC组D5囊胚形成率、D5优质囊胚率、D5可冻囊胚率、总囊胚形成率、总优质囊胚率和总可冻囊胚率均显著高于PNBD组和NPNBD组(P＜0.05).结论 发生EC的胚胎发育速度较快,更容易发育成高质量的D3卵裂期胚胎,EC可以作为D3胚胎质量的一个预测指标.早期卵裂D3优质卵裂胚胎体外囊胚发育结局与非早期卵裂D3优质胚胎相比没有明显差异,EC可能不足以作为D3优质卵裂胚胎囊胚体外发育潜能的额外预测指标.
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体外受精-胚胎移植中原核评分预测胚胎质量
在辅助生殖技术领域中,倍受人们关注的是既能获得优质胚胎进行胚胎移植以提高体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的妊娠率,又能不增加多胎妊娠的危险.目前IVF-ET一般在受精2～3 d后选择胚胎进行移植,选择胚胎的标准通常依据胚胎的卵裂期形态学分级[1].本研究对行IVF-ET周期中胚胎进行原核期形态学评分(PNMS),研究原核评分分值与I级胚胎形成率的关系,从而预测胚胎发育潜能.
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胚胎培养液中人绒毛膜促性腺激素水平与胚胎发育潜能的关系探讨
目的:探讨D3胚胎培养液中人绒毛膜促性腺激素水平与胚胎发育潜能的关系.方法:应用酶联免疫吸附试验法测定体外受精胚胎移植助孕患者D3培养液中hCG水平,比较不同胚胎质量间胚胎培养中hCG水平的差异,并比较妊娠组与未妊娠组、不同种植率组间移植胚胎培养液中hCG水平.结果:D3胚胎培养液中hCG水平与胚胎卵裂球数目、分级无相关性(P＞0.05);妊娠组移植胚胎培养液中hCG水平高于未妊娠组[(1.14±0.10)IU/L与(1.09±0.04)IU/L,(P＜0.05)];胚胎种植率分别为0％、50％、100％对应组的胚胎培养液中hCG水平为(1.09±0.04),(1.11±0.07),(1.29±0.05)IU/L,差异具有统计学意义(P ＜0.01).结论:胚胎培养液中hCG水平可以作为筛选胚胎、预测胚胎发育潜能的一个指标.
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解冻胚胎卵裂球损伤与胚胎发育潜能关系的研究
目的 探索解冻胚胎移植(frozen-thawed embryo transfer,FET)周期中胚胎卵裂球损伤与胚胎发育潜能的关系,为FET周期挑选合适移植胚胎提供依据.方法 回顾性分析2010年1月～2011年12月在第四军医大学西京医院妇产科生殖医学中心进行FET的患者病历,根据解冻后移植胚胎的卵裂球的完整程度分组:解冻后移植胚胎的卵裂球均完整,且卵裂球数＞4,碎片＜15％,为A组(完整组),共214例;解冻后胚胎均有卵裂球损伤,损伤卵裂球1～2个,并且至少仍有6个完整无损伤卵裂球,碎片＜15％,为B组(损伤组),共62例.计量资料组间比较采用t检验,计数资料组间比较采用x2检验以及Logistic回归方法进行分析.结果 A组与B组比较,年龄、体重指数、平均内膜厚度、移植胚胎数的差异无统计学意义(P＞0.05);A组的着床率和妊娠率均高于B组,流产率低于B组,两组比较差异有统计学意义(P =0.047);经Logistic回归分析,校正年龄、体重指数的影响后,B组的胚胎种植与临床妊娠情况仍低于A组,二者之间差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 FET周期中胚胎卵裂球损伤影响胚胎后续发育潜能.
关键词： 解冻胚胎移植(FET) 卵裂球损伤 胚胎发育潜能 妊娠率 种植率 Logistic回归 -
常规IVF短时授精第2极体排出及原核形成与胚胎发育潜能的相关性研究
目的 通过观察常规IVF短时受精中第2极体排出以及受精后原核形成的情况,评估该两项指标与胚胎质量及发育潜能的关系.方法 回顾分析因女方输卵管因素接受常规体外授精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的105个周期,观察受精后3~5 h第2极体排出以及授精后18~20 h原核形成情况.按照第2极体排出以及原核形成与否分为4组,A组(第2极体排出,观察到2个原核),B组(第2极体未排出,观察到2个原核),C组(第2极体排出,未观察到2个原核),D组(第2极体未排出,未观察到原核形成),评估各组对胚胎质量及发育潜能的影响.结果 共观察851枚行常规体外授精的成熟卵子,获胚胎728枚,4组间胚胎形成率及优胚率差异有统计学意义(P＜0.05),D组明显低于其他3组;第3天胚胎卵裂球数目4组间差异有统计学意义(P＜0.05),D组≤6个细胞的胚胎比例明显高于其他3组,而A组和B组介于6~8个细胞的胚胎比例明显高于C组和D组(P＜0.05);第3天胚胎碎片程度4组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 受精后3~5 h见第2极体排出且18~20 h观察到2个原核形成的胚胎具有较好的胚胎发育潜能.
