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戊型肝炎病毒细胞培养的进展与应用
戊型肝炎是一种严重危害人类健康的疾病,因其致病因子戊型肝炎病毒(HEV)的细胞培养一直不很成功,影响了戊肝研究的深入.学者们在这方面进行了大量研究,尝试了各种不同来源的细胞和不同的培养条件,积累了很多经验,其中一些细胞系已试试用于HEV的检测和疫苗的筛选.本文就HEV细胞培养方面的进展与应用作一介绍.
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戊型肝炎病毒细胞培养的进展与应用
戊型肝炎是一种严重危害人类健康的疾病,因其致病因子-戊型肝炎病毒(HEV)的细胞培养一直不很成功,影响了戊肝研究的深入.学者们在这方面进行了大量研究,尝试了各种不同来源的细胞和不同的培养条件,积累了很多经验,其中一些细胞系已试用于HEV的检测和疫苗的筛选.本文就HEV细胞培养方面的进展与应用作一介绍.
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不同培养条件对CHO细胞表达EPO的影响
促红细胞生成素(Erythropoietin, EPO)是一种高糖蛋白激素.EPO分子中糖链结构末端的唾液酸的含量对其生物活性有重要影响.我们研究不同培养条件(培养基和pH)对CHO细胞表达EPO的产量和质量的影响,结果表明:不同培养基对EPO的表达有非常显著的影响,但对EPO的糖基化程度几乎没有影响;pH对EPO的表达无显著影响,但对EPO的糖基化程度有显著影响. 我们的研究表明,选择适合的培养基和控制适当的pH可显著提高EPO的产量和质量,降低EPO的生产成本,为工业化生产EPO提供基础.
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粘质沙雷氏菌适培养条件筛选
目的:通过对粘质沙雷氏菌适宜培养条件的筛选,进一步指导灵杆菌素生产提高收率和质量.方法:以发酵液吸光度和菌体干重作为发酵的评价指标,通过单因素和多因素试验的方法学手段,对粘质沙雷氏菌发酵过程中各种营养因素影响进行考察.结果:培养基各种组分对粘质沙雷氏菌发酵培养过程影响显著,碳源、氮源和生长因子影响较为明显.结论:佳培养基配比为:葡萄糖0.8%、蛋白胨0.8%、氯化钠0.6%、KH2PO4 0.4%、K2HPO4 0.1%、酵母膏0.6%.
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紫红曲霉产生淀粉酶的优化研究
通过研究紫红曲霉在不同培养条件下对产生淀粉酶的影响,以及对紫红曲生淀粉酶活力的测定,初步确定了紫红曲的培养条件.实验表明,采用糯米淀粉作为培养基碳源,硝酸钠作为氮源,同时补充各种微量元素,发酵周期144 h,控制培养温度为35℃,保持培养基初始pH值为4.5,接种量控制在9%左右,紫红曲霉产酶活力能达到56 U/ml.
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正交试验设计在优化酿酒酵母培养条件中的应用
本文以优化酿酒酵母培养条件为例,详细阐述了正交试验设计的应用过程,包括正交试验设计中的具体环节如:定指标、选因素、定水平、列因素水平表、选正交表等.具体采用了L9(33)正交表对影响酿酒酵母生长的关键因素:培养时间、培养温度和摇床转速进行了正交试验设计,同时详细阐述了如何对试验结果进行方差分析和极差分析.
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不同初始温度及培养时间对绿豆芽生长的影响
绿豆芽是一种常见的豆类芽苗菜,是人们日常生活中常见的食物。豆芽中含有大量的维生素C、蛋白质、粗纤维和碳水化合物,且培养条件简单,生长周期短,是一种居家生产的食物。本课题通过对绿豆种子不同初始处理温度后出芽率及对不同培养时间豆芽生长状况的探讨,可以发现佳的浸种处理温度及佳培养时间,为人们日常生活提供非常有益及实用的指导,使人们在没有豆芽机的情况下,能够生产出真正绿色无污染的食物。
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1-24 茶多酚、维生素C对石英致肺泡巨噬细胞DNA损伤的保护作用
目的探讨体外培养条件下石英粉尘对肺泡巨噬细胞DNA的损伤作用及茶多酚和维生素C的保护作用.方法将肺灌洗收获的肺泡巨噬细胞分别与石英粉尘悬液共同培养后,用单细胞凝胶电泳技术检测肺泡巨噬细胞DNA损伤的状况.结果大鼠肺泡巨噬细胞与不同浓度石英粉尘共同培养后,彗星出现率、DNA迁移长度增加,与阴性对照组比较,差异有显著性(P<0.05).随着石英粉尘与肺泡巨噬细胞作用时间的延长,彗星出现率及DNA损伤也呈增加的趋势.在培养液中加入茶多酚和维生素C能减轻石英粉尘所致肺泡巨噬细胞DNA的损伤.其中以40μg/ml的茶多酚及30μg/ml的维生素C保护效果较好.结论石英粉尘能诱导肺泡巨噬细胞DNA损伤.且随着粉尘浓度的增加以及作用时间的延长其DNA损伤程度有增加的趋势.茶多酚及维生素C对石英粉尘所致的DNA损伤有一定的保护作用.
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人前列腺间充质干细胞在不同培养条件下体外诱导分化能力的初步研究
间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)存在于人体发生、发育过程的许多种组织中,前列腺中也存在MSCs.体外分离培养M SCs所采用的体系一般分为无血清培养体系和有血清培养体系.本研究选取常规无血清M SCs培养液和M EMɑ+10%M SCs金牌血清培养液这两种培养体系同时培养人前列腺间充质干细胞(human prostate-derived mesenchymal stem cells,hPMSCs),观察培养后的人前列腺间充质干细胞诱导分化能力的差异,从而推测有无血清的培养体系对人前列腺间充质干细胞的影响.研究结果表明,与无血清间充质干细胞培养液比较,M EMɑ+10% 间充质干细胞金牌血清培养液中的人前列腺间充质干细胞体外分化能力完全,符合间充质干细胞分化能力标准.本研究结果为临床和实验室科研选用适宜的培养体系提供了初步的依据.
关键词: 人前列腺间充质干细胞 培养条件 分化 -
培养条件对海水中菌落总数测定的影响
目的 了解平板计数法测定海水中菌落总数时适宜的培养条件:培养基、培养温度和培养时间.方法 深圳水域的海水样品在不同培养基、培养温度条件下,经过不同培养时间培养后进行菌落总数计数.结果 在培养温度为25t,3090,36℃条件下,在相同培养时间内,2216E琼脂的菌落总数明显高于营养琼脂的菌落总数及平板计数琼脂的菌落总数(P < 0.05);采用2216E琼脂进行菌落总数测定,在培养温度30℃培养96h后,菌落总数达到高,且菌落总数高于25℃和36℃培养时的菌落总数(P < 0.05).结论 海水中菌落总数测定时应注意培养时间的控制.2216E琼脂适合用于海水菌落总数测定.深圳区域海水中菌落总数测定适宜采用2216E琼脂于30℃培养96h.有关国家标准中海水中菌落总数测定方法所规定的培养温度、培养时间应考虑进行修订完善以准确检测水温较高的南方区域海水.
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人类卵母细胞体外成熟培养的研究进展
在进行体外受精胚胎移植(IVF-ET)时,超促排卵可使妇女在同一周期产生多个成熟和不成熟的卵子.卵母细胞体外成熟培养(in vitro maturation,IVM)为因遗传、免疫及分泌等因素而不孕的患者提供大量成熟卵母细胞,为治疗不孕提供了一条新途径.1935年,Pincus观察到兔卵母细胞可在体外成熟-排出第一极体,首次提出IVM观点.此后,许多学者对人卵母细胞体外成熟的调控及培养条件进行深入研究.1983年,IVM技术首次成功应用于临床,1991年,报道了第一例采用IVM技术分娩的"试管婴儿".本文主要对卵母细胞的体外成熟机制、体外培养条件及影响因素等问题进行综述.
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体外精子发生条件研究进展
对体外精子发生进行研究,并构建相应的体外诱导环境,实现在体外环境中形成具有正常功能的精子,对于男科医学领域具有重大科研价值和实际应用意义,同时也为生殖科学技术的发展与进步做出贡献。然而在生物体内精子发生所需的条件十分复杂,并且至今对于精子发生的详细机制尚不明确,从而使精子发生过程在体外条件下实现的难度极大。本文主要针对近年体外精子发生条件的研究进展做一综述。
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信号通路抑制剂和饲养层对猪胚胎生殖细胞建系的影响
胚胎生殖细胞(EGCs)是原始生殖细胞(PGCs)在体外特定条件下,经重编程而形成的、具有和胚胎干细胞(ESCs)相似特性的多能性干细胞.猪EGCs的研究在利用EGCs进行核移植、生产转基因动物以及建立生物反应器方面具有广阔的应用前景.然而到目前为止真正意义上的猪EG细胞系还没有建立,体外培养条件不确定是影响猪EGCs建系的重要因素之一.本研究探讨了猪PGCs体外培养过程中不同信号通路抑制剂以及不同饲养层对其重编程形成EGCs的影响,确定了CHIR99021、SB431542和小鼠成纤维细胞制作的饲养层组合,能够较大程度维持PGCs的增殖及存活能力,实现向EGCs的重编程.
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352 培养条件对萝摩米宁生物合成的影响
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千层塔茎尖组织培养灭菌方法的研究
千层塔为石杉科的蕨类植物,它含有的石杉碱甲素是一种高效胆碱酯醇抑制剂,对重症肌无力症的治疗有效率高达99.2%,且还能提高脑内乙酰胆碱的含量.石杉碱甲素制剂(石杉碱甲素片、哈伯因等)现已应用于临床,用于治疗老年人记忆减退和早期老年性痴呆症.由于全合成石杉碱甲素步骤繁琐、价格昂贵且有副作用.因此,现在无论是结构改造还是直接作为药品,石杉碱甲的主要来源还是少数石杉科植物的提取.该类植物是古老的蕨类植物群,现已大多灭绝,现存的该类植物大多生长缓慢,对环境要求苛刻,且只有千层塔Huperzia serrata、小杉兰Lycopodium selago等少数种类含有石杉碱甲素,故资源极其有限.目前,国内外对石杉科植物的组织培养研究较少.我们采用千层塔为实验材料,对其外植体进行组织培养,筛选出一套理论上较完善的灭菌方法和组织培养条件,且进一步推断出其植株中有内源真菌的共生,并标记了内源真菌的共生部位,为内源真菌的大规模培养提供了依据.
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长柄链格孢菌对熊果酸的生物转化工艺优化
目的:以熊果酸为底物,用长柄链格孢菌AS3.2875对熊果酸进行生物转化,并对培养基和转化条件进行优化.方法:以熊果酸的消耗率和28-O-β-D-吡喃葡萄糖熊果酸酯苷的生成率为指标,考察不同起始pH,磷酸盐,不同种类金属离子,孢子浓度,底物加入量,温度,转速,培养时间对熊果酸在长柄链格孢菌培养液中转化的影响,得到长柄链格孢菌对熊果酸的佳转化条件.结果:优化后的培养条件为初始pH 5.0,0.25 g·L-1MgSO4,1.0 g·L- K2 HPO4,0.083 g· L-1FeSO4,孢子浓度为4%,底物加入量0.3g·L-1,转速140 r·min-1,28 ℃,培养3d.结论:长柄链格孢菌转化熊果酸生成28-O-β-D-吡喃葡萄糖熊果酸酯苷的生成率稳定在5%左右.
关键词: 熊果酸 28-O-β-D-吡喃葡萄糖熊果酸酯苷 长柄链格孢菌 培养条件 生物转化 -
人胚胎干细胞培养与诱导分化的研究进展及其存在问题
人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)指来源于人胚胎的具有无限自我增殖能力和多向分化潜能的细胞,主要由人囊胚内细胞群(inner cell mass,ICM)分离得到.由于胚胎干细胞具有高度自我复制能力及多向分化潜能,可被应用于生命科学的多个领域.本文就人胚胎干细胞培养条件、体外诱导分化技术作一综述.
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我国干细胞转化医学进程探究
随着生命科学的发展,干细胞研究成为当今生物技术和生命科学的热点.干细胞是一类具有高度自我更新和多向分化潜能的细胞,是构成机体所有功能细胞的种子细胞,在体外适宜的培养条件下可以增殖,进而分化为多种功能细胞及组织器官.干细胞治疗克服了临床常规治疗的局限性,为再生医学和其他人类疾病的治疗打开了全新的思路.近年来,随着干细胞研究的快速发展,全球在干细胞治疗领域已经进行了大量探索,取得了一系列令人振奋的成果,且部分研究成果已经在临床试验中得到很好的应用.
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植物内生菌抗病毒活性成分的研究进展
自从1993年首次从短叶红豆杉的韧皮部分分离到一株产紫杉醇的内生真菌后,研究者就开始不断地从内生菌中分离出各种活性代谢产物[1],这其中就包括抗病毒活性代谢产物.乙型肝炎病毒、甲型H1N1和H5N1型高致病性禽流感病毒、人类免疫缺陷病毒( HIV)和严重急性呼吸综合征病毒( SARS-CoV)等引起的病毒性传染病,对人类的健康产生巨大的影响.抗病毒药物已成为全世界新药研发的一个重要课题[2].植物内生菌的次生代谢产物是可以重复利用的资源,可以通过菌种诱变、培养条件改变以及代谢调控等手段进行目标产物的优化,因而在药物研发中发挥了巨大的作用.本文着重论述了国内外新近发现的抗病毒化合物,并按照化学结构官能团进行了如下分类.
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干细胞移植治疗帕金森病的应用研究
干细胞具有自我更新能力,可以通过不对称分裂产生分化方向更加明确的子代细胞,从而产生特定的机体组织,由于其来自于胚囊的内层,所以又称为胚胎干细胞(embryonicstem cell,ES).ES能够在体外培养条件下不断增殖并保持产生各谱系体细胞的能力;而分化方向更加局限的干/前体细胞,则可以在发育过程中不同阶段的组织乃至成年动物或人类体内分离得到.近年,干细胞基础研究的不断进展,加快了ES的体内移植研究的步伐.