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卵透明带避孕疫苗研究进展
哺乳动物卵透明带(zona pellucida, ZP)是由卵母细胞及颗粒细胞分泌并覆盖于卵母细胞及着床前受精卵外的一层基质,人和许多动物包括猪、鼠、兔等在内的ZP都是由3~5种糖蛋白组成,称为ZP1、ZP2、ZP3等。ZP蛋白在精卵结合及精子穿透卵透明带中起着非常重要的作用,影响受精过程的成败。ZP蛋白具有很强的抗原性,主动免疫动物可诱发产生抗体,其相应抗ZP抗体与ZP结合能干扰卵子和卵泡细胞间信息交流,使卵子失去与同种精子结合的能力。ZP是一个不影响激素水平的特异性的抗生育阻断位点,国内外已对ZP避孕疫苗进行多层次的研究。随着研究的不断深入,无疑将为人类生殖避孕、鼠类等有害动物不孕控制提供新思路和新途径。本文就ZP疫苗近年来的研究进展进行综述。
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IVF完全受精失败周期分半IVF/ICSI和Re-ICSI结果比较
在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗中,有5%~10%完全受精失败[1].本中心对不明原因原发不孕5年以上可能存在精卵结合障碍的患者,在IVF第1周期分别采用分半IVF/ICSI(Half-ICSI)和短时受精联合早期补救ICSI(Re-ICSI)方法,以期提高妊娠成功率.本文回顾性分析在常规IVF完全受精失败周期,两种方法的受精率、卵裂率、优胚率及妊娠结局.
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抗精子抗体研究的新进展
免疫因素尤其是特异性免疫因素在不孕症病因中占有一定比例,主要包括男性自身产生的抗精子抗体所致的少精、无精、精子活力降低,以及女性体内干扰精子在生殖道正常运行、精卵结合、受精卵着床等免疫因素.
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为什么你总怀不上孩子
为什么总怀不上孩子?怀不上的原因是什么?为什么结婚好多年,备孕很久都没怀上宝宝呢?怎么办?下面总结一些导致怀不上孩子的常见原因,希望能找到症结所在.怀上一个孩子要求必须是正常的精卵结合,并成功着床和生长,只要有任何一个地方出现毛病,就不能怀孕.首先要保证女方的卵子属于健康活跃状态,保证丈夫的精子处于高活性的健康状态(一般可以吃育之缘片提高精子活性与质量),保证同房也没有任何的瑕疵,那么你对照以下几点,看看是哪里出了问题.
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生命演绎·八字探秘
生命之由,其源乃父母洛书之五六交合(精卵结合)[1-2].父母洛书对待(泛指出生到死亡阶段,这里特指性成熟之后到更年期阶段)之四方(精原细胞、卵原细胞)于其合十[3-4]阶段(泛指性成熟之后到更年期阶段,这里特指婚恋阶段)激发中宫生数五(卵子)与乾宫成数六(精子)行五六交合,五六交合为三十(受精卵),如此受精卵河图成数之六产生.
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女性激素可能成为男性避孕的关键因素
科学家近发现孕酮可以识别和引导精子与卵子相会,只有这样才有受精的可能.精子奔向卵子的途径是远比循路而行的奔跑速度更为关键的可能阻碍精卵结合的问题.在射出的千万个精子中终脱颖而出的、足够幸运的那个精子抵达输卵管,卵子则在那里守株待“精”,当然精子还必须穿透围绕在卵子之外的厚厚的凝胶状黏液和细胞层才能获取其战利品.幸运的是精子并不是孤立无援的,《自然》杂志刚刚发表的两项研究表明,精子是如何感觉到围绕在卵子之外的细胞所释放的女性激素孕酮的.这一激素会引导精子接近卵子,而且后还给力推精子一把.这一发现可能给男性避孕提供了新的思路,这是理解精子调节的新进展.过去的研究表明射精后的精子将游向孕酮水平高的地方,激素引起精子尾更加有力的鞭打运动,这种称之为“高度活跃性”的状态使得精子更好地游向卵子.应该说具有充分的理由说明这是对孕酮事态的反应,可是很难肯定这一点.
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哺乳动物精卵融合相关的精子膜蛋白研究进展
哺乳动物的受精是由一系列精卵质膜的相互作用而触发的,这些相互作用的基本过程包括:精卵识别、精卵结合和精卵质膜融合[1].其中精卵质膜融合是受精过程为关键的步骤.精卵质膜融合是一个高度程序化的过程,完成顶体反应是精子发生质膜融合的必要前提.精子膜的不均一性导致融合的起始位点局限于特定的区域.现阶段普遍认为精卵融合开始于精子赤道区,探索精卵质膜融合相关的精子膜蛋白是研究精卵融合过程中一个极为重要的环节.
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如何提高精子质量
受孕是由男方的生殖细胞——精子与女方的生殖细胞——卵子相遇的结果.精子中只有少数在射精后1~3天具有穿透卵子的能力,而卵子却只在排出卵巢后18~45小时期间才具有较强的受精能力.如果机遇适合,精卵便能结合成为受精卵.如果未能结合,卵子死亡,精子也随之死亡.精卵结合后,受精卵经过3~4天会缓缓地从输卵管进入子宫.由此可见,精子在整个受孕过程中扮演着十分重要的角色.
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了解弱精症
[专家说病]弱精症是指精液中前向运动的精子(a和b级)小于50%或a级运动的精子小于25%的病症,通俗地说就是精子活力低下或运动力低下.人类的生殖是以精子与卵子的结合为关键步骤.精子运动能力的强弱是精卵结合的基本要素,只有正常的作前向运动的精子才能到达输卵管壶腹部与卵子结合形成受精卵.
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精液不液化的保健方法
[专家说病]正常情况下精液从阴茎口射出后,由于精囊产生的凝固因子引起精液凝固立即变成胶冻状或凝结块样乳白色物质,此时精子包含在精液内部或附于表面,无法自由游动,这种现象有利于精液在女性生殖道的保留时间.大约经过10~40分钟之后,在前列腺分泌的蛋白分解酶、纤溶蛋白酶催化下胶冻状的精液块变为稀薄流动的液体,以利于精子穿透女性的宫颈黏液达到精卵结合的目的.精液不液化时间超过60分钟,称之为精液不液化.这种情况往往会影响精子的在女性阴道内的运动能力,导致患者不育.
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草原兔尾鼠卵透明带3蛋白的免疫原性及其抗血清对体外精卵结合的影响
目的:大肠杆菌表达的重组草原兔尾鼠透明带3(Recombinant Lugurus zone pellucida 3,r-LZP3)蛋白的免疫原性直接影响抗体的滴度,通过对r-LZP3免疫原性的分析,获得特异性的抗血清,并探讨r-LZP3和抗血清对体外精卵结合的影响.方法:在大肠杆菌中以包涵体形式表达r-LZP3,经过变性、复性及纯化后作为抗原,用LZP3 DNA疫苗初免小鼠后,再用r-LZP3进行免疫加强,产生特异性的LZP3抗血清;通过EL1SA测定抗体应答的水平;蛋白印迹、间接免疫荧光和免疫组化方法检测抗血清同r-LZP3、鼠卵母细胞表面天然ZP的反应性;精卵结合实验观察r-LZP3、抗血清体外对鼠精卵结合能力的影响.结果:用LZP3 DNA疫苗免疫制备的抗血清在免疫鼠中产生了较高的抗体滴度,并且可以识别大肠杆菌表达的r-LZP3以及鼠卵细胞表面天然的ZP,抗血清和r-LZP3也都能在体外抑制鼠的精卵结合.结论:大肠杆菌表达的r-LZP3有较好的免疫原性,r-LZP3和抗血清能够在体外阻止鼠的精卵结合.
关键词: 草原兔尾鼠卵透明带3 免疫原性 抗血清 卵母细胞 精卵结合 -
抗细胞核自身抗原精子蛋白的抗体具有抗生育效果
为了研究抗睾丸型细胞核自身抗原精子蛋白(tNASP)的抗体是否会影响生育,我们成功克隆表达了一段339 bp小鼠睾丸型细胞核自身抗原精子蛋白(mtNASP)的cDNA.本实验以小鼠为动物模型,着重研究重组mtNASP蛋白和合成肽htNASP393-408(人睾丸型细胞核自身抗原精子蛋白第393-408氨基酸序列)的抗生育效果.用mtNASP和htNASP393-408分别主动免疫小鼠,二者都能在小鼠体内产生高效价的抗体.然后用8-10周龄的小鼠进行精卵结合和精卵融合实验.结果显示在不同浓度的抗mtNASP抗体存在下,小鼠卵子与获能精子的精卵结合能力以及去透明带小鼠卵子和获能精子的精卵融合能力都有明显下降.分别免疫重组mtNASP蛋白和htNASP393-408合成肽的小鼠也都能产生明显的抗生育效果,而且用合成肽免疫的小鼠其抗生育效果是可逆的.我们的实验数据表明,用重组的mtNASP蛋白进行免疫可以产生很强的抗体反应并且抑制小鼠生育.
关键词: 抗生育 基因表达 细胞核自身抗原精子蛋白(NASP) 精卵结合 精卵融合 -
芳基硫酸酯酶A在精卵结合中的作用
硫酸半乳糖甘油酯(SGG)是哺乳动物雄性生殖细胞表面主要的硫酸糖脂,它主要存在于睾丸和精子中,在脑白质中也有少量存在[1].在小鼠,SGG占精子总脂质的12%左右(平均106个精子含有0.4nmol SGG),而脑部仅为0.2%.在成熟精子中,SGG位于质膜头部的顶体嵴和顶体后区[2].
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溶脲脲原体感染对精卵结合相关分子硫酸半乳糖甘油酯的影响
目的:研究溶脲脲原体(Uu)感染对精卵结合相关分子硫酸半乳糖甘油酯(SGG)的影响.方法:取成熟小鼠附睾精子制成精子悬液,随机分为4组:Uu组(与Uu悬液共孵育)、培养液组(与Uu培养液共孵育)、正常组和免疫前血清(PRS)组.间接免疫荧光法检测SGG在精子膜表面的定位以及Uu对精子膜表面SGG的影响.结果:SGG主要位于附睾精子头部相当于顶体区的质膜上.与Uu培养液共孵育的精子,其表面SGG的阳性率达82.0%;而与Uu悬液共孵育的精子,其表面SGG的阳性率下降至39.0%(P=0.001).结论:Uu能与精子膜SGG结合,SGG可能是Uu在哺乳动物精子膜上的受体,Uu封闭精卵结合相关分子SGG可能是Uu感染引起男性不育的分子机制之一.
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支原体感染与生殖细胞硫酸半乳糖甘油酯的关系
支原体不仅能引起男性生殖道感染,而且某些支原体如溶脲脲原体(Uu)和一些不明原因的男性不育密切相关.硫酸半乳糖甘油酯(SGG)是主要存在于哺乳动物生精细胞和精子上的一种硫酸糖酯,由早期初级精母细胞合成,通过与卵细胞上的配体--芳基硫酸酯酶(AS-A)的结合而参与精卵识别.近来发现,支原体能与SGG结合,使后者发生脱硫作用成半乳糖甘油酯,阻断SGG与AS-A的结合,从而影响精卵的识别与结合,可能是Uu感染导致不育的原因之一.
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人源类溶菌酶蛋白4在受精过程中的作用及酶学性质研究
目的:对人源类溶菌酶蛋白4(LYZL4)在受精过程中的作用和重组蛋白的酶学性质进行研究,从而揭示LYZL4的生理功能. 方法:细胞免疫荧光法检测LYZL4在精子细胞上的亚细胞定位,RT-PCR分析精子表面LYZL4的来源,通过精子穿透试验分析LYZL4在受精过程中的作用.构建真核重组表达载体pPIC9K-LYZL4,转化毕赤酵母GS115菌株后,甲醇诱导表达;甲壳素亲和层析和凝胶过滤层析从发酵上清中纯化重组LYZL4蛋白(rLYZL4),通过Western印迹进行验证.ELISA测定rLYZL4的透明质酸结合能力,分光光度法测定rLYZL4的胞壁质酶活性、透明质酸酶活性和自由基清除能力. 结果:LYZL4免疫荧光定位于成熟精子头部的顶体膜上,RT-PCR检测表明精子表面的LYZL4蛋白来源于睾丸和附睾的分泌,兔抗LYZL4多克隆抗体可明显抑制精卵结合.毕赤酵母表达系统成功表达了rLYZL4,酶活性分析显示rLYZL4无胞壁质酶和透明质酸酶活性,但能够结合透明质酸,并具有较强的自由基清除能力. 结论:LYZL4由睾丸和附睾分泌后定位于成熟精子头部的顶体膜上,可在精卵结合过程中发挥作用,其还能够结合透明质酸并清除自由基,提示LYZL4可能作为一种多功能分子在精子保护及精卵结合过程中发挥作用.
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不孕症:查查是谁出了问题
如果婚后无避孕,规律生活持续1年没有怀孕,即是"不孕症".中国传统的思想观念,一提到不孕首先想到的就是女性,好像生孩子是女人自己的事情一样.精卵结合是人类整个生育过程中的第一步,只有当精子从阴道进至宫颈口,通过宫腔,在输卵管与卵子结合,才会有一个新生命的开始.在不孕症的病例中,40%~50%病例是因为女性的原因,30%~40%的病例是因为男性的原因.5%~10%是男女两性的综合原因所致.
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精子相关抗原9结构与功能研究进展
精子相关抗原9是近年来发现的一种肿瘤睾丸抗原,精子相关抗原9蛋白的基本结构与c-Jun氨基末端激酶相互作用蛋白相似,参与再生过程中细胞信号传导的调节.精子相关抗原9与精卵结合密切相关,并在一些恶性肿瘤中有较高表达,本文就精子相关抗原9的结构与功能研究新进展作一综述.
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滋养细胞肿瘤化疗的护理
滋养细胞肿瘤,包括葡萄胎、侵袭性葡萄胎、绒毛膜癌三种,来源于精卵结合而成的胚胎,至少有部分来自异体,不象其它肿瘤一样,基本上由自体细胞变异而来.经实践,足量的化疗药物对此类肿瘤有较好的疗效,而化疗能否达到满意效果,能否将副反应降至低限度,护理工作至关重要.我科自1997年至2001年共收治36例,经过化疗与精心护理、治愈率达82.5%,疗效满意.
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小鼠ZP2抗体的制备及其免疫活性研究
目的:制备抗小鼠ZP2(mZP2)抗体并研究抗血清的免疫活性。方法利用Rosetta宿主菌诱导表达mZP2重组蛋白,电泳分离重组ZP2蛋白,切胶制备免疫抗原;利用乳化抗原主动免疫新西兰雄兔制抗血清;通过ELISA测定抗体应答水平;以免疫组化测定抗血清特异性;通过精卵结合实验检测抗血清对小鼠卵子结合顶体反应后精子的影响。结果 ELISA结果说明用重组蛋白免疫新西兰雄兔诱发产生了抗血清。免疫组化实验证明抗血清与小鼠卵巢透明带发生了特异性反应,精卵结合实验显示抗ZP2抗体能抑制顶体反应后精子与卵子结合。结论重组mZP2蛋白诱发产生了抗ZP2抗体,抗体能抑制顶体反应后的精子与卵子结合。
关键词: 小鼠卵透明带mZP2 抗血清 免疫组化 精卵结合