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高血压患者血黏度增高怎么办
血黏度增高的情况,到底有没有必要担心呢?血黏度增高,通俗地讲,就是血液过度黏稠了.此时,血液中的红细胞聚集成串,使血液的黏稠度增加,循环阻力增大,出现微循环障碍.引起血粘度增高的原因血细胞浓度过高:例如老年人体内水分相对减少,血液中的水含量也减少,血细胞的比例就会相对增高.
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人眼球后和其它部位成纤维细胞的差异
研究表明,眼球后成纤维细胞活性增强在Graves眼病(Graves ophthalmopathy,GO)的发生中起重要作用。但是成纤维细胞具有多相性,不同部位成纤维细胞在相应部位疾病的发病中所起的作用不同。本文选用人眼球后和腹部皮肤成纤维细胞进行这方面的研究,初步探讨两种成纤维细胞在结构和功能方面的某些差异。 1 材料与方法 眼外肌(部分)及周围结缔组织取自一位22岁因眼外斜视手术的男性病人;腹部皮肤组织块取自一位9岁因脂肪瘤手术的男性儿童,患者均无自身免疫性疾病史。按照Bahn方法,进行原代和传代细胞培养。实验中为防止传代细胞某些功能发生较大变化,仅选用3~10代的细胞。在培养的两种成纤维细胞内(球后和皮肤成纤维细胞浓度各为6×104和4×104个cell/mL),分别加入不同药物,同时设不加药物的阴性对照,每个浓度设3或4个复孔。适时加入3H-TdR,后测定每分钟计数值。
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IL-12、IFN-γ在急性移植物抗宿主病发病中作用的临床研究
急性移植物抗宿主病(aGVHD)是异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)的并发症之一,也是移植成功的主要障碍,因此,研究aGVHD 的发病机制是当今移植免疫的热点课题。本文采用双夹心酶联免疫吸附法研究allo-HSCT患者的外周血单个核细胞(PBMC)体外分泌的IL-12、IFN-γ浓度,以探明IL-12、IFN-γ在临床aGVHD发病中的作用。 30例异基因移植患者,年龄12~53岁(中位年龄为34岁),其中慢性粒细胞白血病19例,急性髓细胞白血病7例,急性淋巴细胞白血病4例。aGVHD的诊断主要依据临床表现,部分病例进行皮肤活检取得病理学依据。移植后发生aGVHD的患者症状出现48h尚未进行药物治疗时、未发生aGVHD的患者于移植后30d采集外周血10ml。分离外周血单个核细胞,细胞浓度调至2×105/ml,经LPS 30μg/ml刺激48h后收集上清检测IL-12浓度;经PHA 25μg/ml、 IL-2 200U/ml刺激48h后收集上清检测IFN-γ浓度(或-20℃保存)。IL-12、IFN-γ的检测采用双夹心ELISA法。
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PKC信号传导对ITP患儿T淋巴细胞增殖与凋亡的调控研究
经确诊的35例特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿为观测对象,男15例,女20例,年龄1岁~14岁,中位年龄5.3岁.正常对照30例为健康儿童,排除ITP及其它自身免疫性疾病,其中男13例,女17例,年龄1.5岁~12岁,中位年龄4.5岁.收集ITP患儿及健康儿童外周抗凝静脉血,分离纯化T细胞.以20%小牛血清RPMI 1640培养液调整T细胞浓度至106/ml,接种于24孔培养板中,每份标本接种6孔,编为3组,每组2孔.第1组为空白对照组、第2组加入蛋白激酶C(PKC)激动剂PMA、第3组同时加入激动剂PMA和抑制剂H-7,于37℃,5%Co2培养24、72h,采用CCK-8法检测T细胞的增殖能力,运用AnnexinFITC及PI荧光染液作双色流式细胞术检测T细胞的凋亡率.计算各组均数与标准差,用x±s表示,全部数据均经SAS8.22统计软件分析,组间差异的显著性用方差分析的q检验,P<0.05为差异有统计学意义.
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多次储存式自体血回输对肝癌患者围手术期免疫功能的影响
肝癌是常见的消化系统肿瘤,能否实施根治性切除手术很大程度上决定了其预后结果。据统计,接受根治性切除的肝癌患者5年生存率可达到70%以上[1]。然而,肝脏本身血供丰富、解剖复杂,肿瘤生长的部位各异,且常常侵犯肝内大血管,要实施规范标准的肝脏切除手术经常会遇到术中大量失血的问题。目前,常用的输血方式包括异体输血及自体血回输,但均各有弊端。异体血回输常常存在血源紧张的问题,且容易产生免疫抑制。自体血回输包括储存式自体血回输,稀释式自体血回输,以及回收式自体血回输三种,然而术中回收式自体血回输可能造成脱落的肿瘤细胞回输入血液循环,是肿瘤患者的禁忌。储存式自体血回输,通过术前储血、术中输血的方式,理论上可以降低术中丢失血液的红细胞浓度,控制实际失血量,能避免大量的异体血输入,减少相应的并发症。本文旨在研究该输血方式在临床中实际应用的可行性及对患者术后免疫功能的影响。
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HMG-CoA还原酶抑制剂的非调脂作用及机制(下)
11抑制组织因子组织因子是细胞因子-干扰素受体蛋白超家族的一个成员,它的产生在SMC迁移和炎症反应的过程中是增加的,在人类动脉粥样硬化病变中也是上调的.组织因子抗原和活性在不稳定心绞痛和急性心肌梗死中较症状稳定的患者明显增高,在巨噬细胞浓度增加的动脉粥样硬化的斑块区域其活性也是增加的,表明了它在对斑块破裂和冠脉粥样硬化终过程的不同的临床反应中起重要作用.
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IL-2联合IL-12激活A-NK细胞治疗人肝癌HepG-2
目的:研究A-NK细胞体外抗肿瘤作用及小鼠体内抗肿瘤作用.方法:用淋巴细胞分离液分离健康人外周血中的血单个核细胞,PME(5 mmoL/L)室温处理40 min,PME处理后的人外周血单个核细胞重悬于AIMV中.分为四组分别为:IL-2(6 MU/L)组,IL-2(1MU/L)组,IL-12(5 ug/L)组,IL-2(1 MU/L)+IL-12(5 ug/L)组;每瓶细胞浓度为5×109/L,于37℃,50 mL/L CO2饱和湿化空气的培养箱中水平培养4-5 h,移去含未黏附于塑料表面的细胞悬液,收集黏附于塑料表面的细胞(即A-NK细胞),MTT比色法检测A-NK细胞体外细胞毒作用;然后建立肝癌细胞株裸鼠皮下移植瘤模型,以肿瘤体积、抑瘤率、生存期等指标观察A-NK对移植瘤的抑制作用.结果:A-NK+IL-2+IL-12组细胞毒活性明显高于其他三组(aP<0.05),体内实验表明A-NK+IL-2+EL-4/IL-12治疗组的移植瘤生长速度缓慢,体积明显小于生理盐水对照组(bP<0.05),生存期显著延长(cP<0.05).结论:IL-12辅助IL-2激活的A-NK细胞的体外杀伤活性较单独用IL-2或IL-12强,体内实验显示具有明显的抗肿瘤作用.
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胰高糖素样肽GLP-1(7-36)NH2对β细胞内游离钙和胰岛素分泌的影响
GLP-1(7-36)NH2是“肠-胰岛轴”中重要的调节胰岛素释放的激素,我们采用新生大鼠胰岛细胞单层培养的方法,探讨了GLP-1(7-36)NH2对胰岛素分泌的作用,并以Fluo-3为探针,用粘附式细胞仪,研究了它对胰岛β细胞内游离Ca2+的作用。 一、材料与方法 1.胰岛细胞培养:出生2~3d的Wistar大鼠,无菌取出胰腺,Hanks液漂洗,剪碎,加入0.2%胰蛋白酶和2g/L V型胶原酶(Sigma公司产品),置38℃水浴中反复振荡消化5~8min,用冰冷的Hanks液终止消化,及时分离消化物,离心收集细胞,加入含15%小牛血清的RPMI-1640培养基[1]。调整细胞浓度,接种于75mm3细胞培养瓶,置37℃、5% CO2和95%空气的培养箱中培养16h后,转入24孔培养板中,同时取一定量的细胞悬液接种于改良的Petri皿中(细胞浓度均为1×109个/L,记为0 d),培养48h后,用新配制的碘乙酸2.5mg/L处理3~5h,再换无碘乙酸培养液继续培养,每两天换培养液一次,培养7d后,选生长良好的细胞用于实验[1]。
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MTT法测定鸦胆子对人瘢痕成纤维细胞生长的影响
采用MTT法测定不同剂量的鸦胆子粗提物对正常皮肤(NF)与增生性瘢痕(KF)成纤维细胞的抑制作用,探讨该药在治疗瘢痕增生的体外效果,为临床应用贴敷制剂提供依据。1 材料与方法1.1 材料:DMEM培养液,MTT(四氮甲基唑蓝),0.1g*ml-1鸦胆子仁乙醇溶液。1.2 细胞培养:取增生期瘢痕和正常皮肤进行培养,以第5代后对数生长期的细胞试验。 1.3 药物敏感试验:以细胞浓度为4×104ml-1接种96孔板,细胞贴壁后分为对照组和实验组,对照组只加细胞不加药物,实验组加入不同浓度的鸦胆子,每浓度4个复孔,C O2孵箱培养,48h后加入MTT,继续培养4h,测定吸光度A值。1.4 数据处理:生长抑制率=(1-用药组A/对照组A)×100%,以SPSS软件统计。
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无创性产前诊断:从梦想到现实
无创性产前诊断(non-invasive prenatal diagnosis,NIPD)是一个长期追求的目标.几十年来,研究人员一直在努力寻找有效方法,去分离、纯化,并识别存在于母体循环中的少量胎儿细胞,胎儿细胞浓度约为每毫升母血中1~6个[1].
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冷冻手术过程中冰球形成物理参数的意义
一、材料与方法取预先配制的D-Hanks液,DMEM培养基,全血,G422胶质瘤细胞悬液(用D-Hanks液稀释,细胞浓度为1×107个/ml)和双蒸水各1000ml,分别盛于1000ml的烧杯中,在冷冻前1个小时将烧杯置于37℃的恒温浴槽中预热1小时,用直径3mm的LCS-3000型冷冻治癌机实施冷冻.冷冻过程中,分别在1,3,5,7,9,11,13,15分钟各复温一次,在各时间点用游标卡尺测定冰球的横径、纵径后溶解称重.将各参数与时间参数输入电脑,用EXCEL软件作图,得出一系列曲线.
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高效液相色谱法测定血液中阿奇霉素浓度
阿奇霉素(azithromycin)为新一代的大环内酯类抗生素,抗菌谱较红霉素广,并且在酸性环境中有较高的稳定性,具有吸收好、生物利用度高、半衰期长、部位组织及细胞浓度高、能向病灶定向转运、毒性低及耐受性好等优点.为了研究注射用阿奇霉素在动物及人体内的药动学参数,本实验建立了高效液相色谱法测定阿奇霉素血药浓度的方法.
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精液中炎性细胞对精子运动功能的影响
材料与方法:人精液标本6份,总活率大于50%,a级+b级精子≥38%.过氧化物酶甲苯胺蓝法证实白细胞总数小于106 ml-1.1∶2(体积比)加入孵育液,300×g离心15 min,弃上清,重复操作操作3次.调节细胞浓度至20×106个/ml.取24孔板每孔加入0.5 ml,实验组加入L-NAME,终浓度为1 mmol.L-1,37 ℃孵育.不同时间观察精子活动率的变化.孵育结束后Gresis试剂测定上清液中NO的生成.
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紫杉醇联合IFNα-2b明显增强对K652细胞的诱导凋亡作用
紫杉醇是一种作用于微管的广谱天然抗癌药,目前主要用于治疗实体瘤,能缓解多种进展期实体瘤.但用于治疗髓系白血病效果较差.我们通过实验发现紫杉醇联合INFα-2b对K652细胞的诱导凋亡及杀伤作用均明显增强.实验的主要方法为:(1)将K562细胞浓度调为2×105/ml后接种于96孔板上,每孔100μl,分为4组,空白对照组不加药物,另设一组单独加入100u/ml INFα-2b作为干扰素INFα-2b对照组,均设4个复孔,A组加入浓度分别为20、50、100μmol/L的紫杉醇100μl,B组分别加入上述浓度的紫杉醇及1000u/ml的INFα-2b 100μl,A组及B组每浓度均设4个复孔.在细胞培养箱中设37℃、5CO2%培养48h待检测.
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不同细胞接种浓度影响人脐带间充质干细胞生长及多向分化
背景:在干细胞培养过程中寻找合理的细胞接种浓度,从而得到能稳定、高效生长的干细胞非常重要.目的:观察不同接种浓度对人脐带间充质干细胞原代培养及分化为神经元样、胰岛样、脂肪样细胞的影响.方法:分离人脐静脉内皮及内皮下层细胞,按不同接种浓度分组进行原代培养,记录原代培养时间并进行传代.取第1代人脐带间充质干细胞,体外诱导其向神经元样、胰岛样、脂肪样细胞分化.结果与结论:原代培养发现以5×105~1×106/cm2细胞浓度接种的人脐带间充质干细胞生长状态佳.经β-巯基乙醇诱导6 h,细胞即表达Nestin、神经丝蛋白及胶质纤维酸性蛋白;经尼克酰胺,活化素A,胰高血糖素样肽1诱导21 d可见明显的胰岛样细胞团,双硫腙染色呈砖红色;经成脂诱导培养基诱导后细胞油红O染色阳性,有明显脂滴出现.可见选取合适的细胞浓度可以快速获得大量的人脐带间充质干细胞,且该细胞经体外诱导可向神经元样、胰岛样及脂肪样细胞分化.
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组织工程化软骨修复运动性关节软骨损伤
背景:组织工程学的出现及发展为解决运动性关节软骨缺损、重建关节功能提供了新思路,使软骨组织缺损的完全再生成为可能。
目的:了解组织工程研究的基本原理,分析组织工程化软骨构建的影响因素,探究组织工程化软骨修复运动性关节软骨损伤的可行性。
方法:通过检索近年来关于组织工程化软骨的构建及应用的研究成果及动物实验相关文献,分析应用组织工程学方法在体内形成新生软骨组织的可能性,着重论述组织工程化软骨构建及在软骨损伤和修复研究中的应用,为组织工程化软骨修复运动性软骨缺损提供理论基础。
结果与结论:种子细胞、支架材料和体外培养环境,构成了软骨组织工程学注重的两个要素,二者组成了一个相互促进相互制约的整体,在组织工程化软骨修复运动性关节软骨损伤过程中,注重三者的恰当配置应是治疗中着重解决的关键问题。 -
造血干细胞移植供者的护理5例
造血干细胞移植为近40年新兴的临床应用科学,已广泛应用于急性白血病、慢性白血病、淋巴瘤等多种疾病的治疗[1].由于异基因造血干细胞移植具有复发率小,采集的干细胞浓度高等优势,因此在临床已被广泛应用.为了避免移植被排斥或移植成功后发生严重的移植物抗宿主病(graft versus host disease,GVHD),供受者之间需要做人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)配型检查.因此可以认为,供者是异基因造血干细胞移植成功的第一要素.
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非亲缘异基因造血干细胞移植供者的护理
造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation)为近40年新兴的临床应用科学,已广泛应用于急性白血病、慢性白血病、淋巴瘤等多种疾病的治疗,而异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation)具有复发率低,采集的干细胞浓度高等优势,因此在临床已被广泛应用[1].
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大鼠骨髓间充质干细胞培养浓度的即时监测
目的 探讨大鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)培养过程中即时监测细胞浓度的可行性.方法 将6~8周龄的SD大鼠处死,分离MSCs,在24孔板上半连续灌注培养和自制的生物反应器上连续灌注培养,通过实时检测培养过程中的葡萄糖消耗率(Glucose consumption rate,GCR)、乳酸累积率(Lactic acid production rate,LPR)及相应的干细胞浓度,并计算葡萄糖的比细胞得率( qGlu)及乳酸累积比细胞得率(qLac),分析其稳定性及细胞浓度与GCR和LPR之间的关系.结果 所分离培养的MSCs形态均一,轮廓鲜明,呈典型的短小梭形.在24孔板上半连续灌注培养的qGlu和qLac分别为1.84和1.74 mg/(106个·d);生物反应器连续灌注培养的qGlu和qLac分别为1.66和1.61 mg/(106个·d),二者比细胞得率均为恒值.结论 MSCs培养过程中,GCR、LPR与细胞浓度具有良好的线性关系,通过对葡萄糖浓度和乳酸浓度的测定,可以实时监测MSCs的浓度.
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组织工程化软骨形成的细胞浓度选择
目的探讨兔组织工程化软骨形成的合适细胞浓度.方法分离培养兔关节软骨细胞,体外扩增后以1,2,4,6,8,10×107/ml 6种不同浓度种植到PLGA支架上.在体外培养软骨细胞支架复合物,4周终止培养,进行HE、Masson组织学染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色.结果体外培养的软骨组织,与正常软骨组织有相似的组织学特性,形成软骨组织适宜细胞浓度为4×107/ml.结论体外形成兔软骨组织的适宜细胞接种浓度为4×107 /ml.