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PKC信号传导对ITP患儿T淋巴细胞增殖与凋亡的调控研究
经确诊的35例特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿为观测对象,男15例,女20例,年龄1岁~14岁,中位年龄5.3岁.正常对照30例为健康儿童,排除ITP及其它自身免疫性疾病,其中男13例,女17例,年龄1.5岁~12岁,中位年龄4.5岁.收集ITP患儿及健康儿童外周抗凝静脉血,分离纯化T细胞.以20%小牛血清RPMI 1640培养液调整T细胞浓度至106/ml,接种于24孔培养板中,每份标本接种6孔,编为3组,每组2孔.第1组为空白对照组、第2组加入蛋白激酶C(PKC)激动剂PMA、第3组同时加入激动剂PMA和抑制剂H-7,于37℃,5%Co2培养24、72h,采用CCK-8法检测T细胞的增殖能力,运用AnnexinFITC及PI荧光染液作双色流式细胞术检测T细胞的凋亡率.计算各组均数与标准差,用x±s表示,全部数据均经SAS8.22统计软件分析,组间差异的显著性用方差分析的q检验,P<0.05为差异有统计学意义.
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EDTA-K2引起抗凝静脉血血小板计数假性减少4例报道
血小板计数假性减少常见原因有采血不顺利,未及时混匀,在日常工作中发现EDTA-K2的使用引起血小板不正常的粘附、聚集,导致抗凝静脉血血小板结果假性减少,现报道血常规检验中发现的4例典型病例,以引起同行们的重视.
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儿童急性特发性血小板减少性紫癜血清细胞因子水平的测定及意义
特发性血小板减少性紫癜(ITP)是一种与免疫相关的血液系统疾病,近年已有很多报道阐述了细胞因子在该病中的变化及作用[1].近一年来我院也对部分急性ITP患儿进行了血清白介素2、4、8、10(IL-2、IL-4、IL-8、IL-10)和干扰素α(IFN-α)、肿瘤坏死因子(TNF-α)等细胞因子的检测.对象及方法ITP组所观察的儿童均为初次住院的,且符合首届中华血液学会全国血栓与止血学术会议有关急性ITP诊断标准的患儿,共83例,男54例,女29例;1岁以下14例,1~3岁14例,4~6岁19例,7~9岁16例,10~12岁20例.对上述患儿作了血清IL-2、IL-4、IFN-α、TNF-α水平的检测(其中IL-4组1岁以下仅13例).此外还对22例8~12岁儿童的血清IL-8、IL-10水平作了检测.同时,选择相应年龄段与ITP组人数相同的正常儿作为对照组,比较上述细胞因子的水平.分别抽取所观察患儿(ITP患儿在初入院未用药前)的抗凝静脉血2 ml, 采用美国Hyperion MRⅢ型酶标仪,试剂盒由中美合资海南华美生化有限公司提供,运用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清IL-2、IL-4、IL-8、IL-10、IFN-α、TNF-α水平.试验数据以均数±标准差(±s)表示,将IFN-α、TNF-α、IL-2、IL-4的ITP组与正常对照组间的均数进行比较,采用t检验.并采用多变量相关分析方法对22例ITP患儿所测的6种细胞因子(IL-2、IL-4、IL-8、IL-10、IFN-α、TNF-α)各组数据间进行相关分析.以上计算,均应用SPSS统计软件进行.
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重型颅脑损伤患者甲状腺激素与细胞免疫变化的研究
一、资料与方法本组男20例,女8例,平均年龄40.5岁.伤后24h内入院.都为单一急性重型颅脑损伤,GCS评分3~7分.硬膜外血肿8例,硬膜下血肿、脑挫裂伤及脑干损伤20例.正常对照组男15例,女5例,平均年龄39.2岁.分别于伤后第2,7,14,21天晨取外周不抗凝静脉血,分离血清,-20℃保存;肝素抗凝血,立即制备白细胞介素-2(IL-2)待测样品.
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EDTA-K2抗凝静脉血测定血沉的探讨
目前,国内血细胞仪已普遍使用,许多血细胞计数仪采用EDTA-K2抗凝静脉血[1].经细胞仪分析后的标本进行血沉测定可减少病人血样本量,能准确控制血液与抗凝剂比例,为证实其可行性,我们与测定血沉的参考方法魏氏法作相应比较,现报道如下.
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抗凝静脉血放置时间对血常规检测结果的影响
血细胞计数仪测定血常规快速、准确、重复性好,但如血标本采集后不能及时进行测定,可影响结果的可靠性.笔者现将25例抗凝血标本不同时间测定结果报道如下.
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BC-5180血球仪两种模式检测结果比较
我院新进一台深圳迈瑞BC-5180全自动血液细胞分析仪,该分析仪提供全血与预稀释两种分析模式.全自动血液分析仪法按要求标本一般为抗凝静脉血,但在实际操作中由于各种原因需要在预稀释模式下进行分析,预稀释法检测结果的可靠性一直困扰着检验人员.为了探讨静脉全血标本与预稀释标本检测结果之间是否存在差异性,我们对20例随机门诊患者血液标本进行了两种模式的检测,并对其结果进行了对比分析,现报告如下.
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乙二胺四乙酸二钾依赖性假性血小板减少症一例
患者女,64岁,主因食欲不振伴上腹部间歇性隐痛,于2010年4月18日入院.胃镜提示:十二指肠球部占位.咬检组织病理诊断:黏液腺癌.临床诊断为十二指肠黏液腺癌.2010年4月23日取乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝静脉血,使用日本Sysmex1800i全自动血细胞计数仪查血常规(约30 min测定),结果如下:白细胞6 98×109/L,红细胞4 13×1012/L,血红蛋白123 g/L,血小板 28×109/L,提示血小板明显减少,立即做末梢血涂片,结果:血小板均不少见且可见5~10个血小板聚集,与血常规结果不符.次日复查(约30 min测定),结果如下:白细胞6.30×109/L,红细胞3.84×1012/L,血红蛋白116 g/L ,血小板 36×109/L,又提示血小板明显减少,但血涂片同样不少见.为明确原因,于2010年4月25日进行骨髓穿刺,同时做末梢血涂片.结果提示:血片、骨髓片血小板均不少见,与血常规结果不符.
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时间对血小板聚集标本测定的影响
在临床实践中,常常发现时间对血小板聚集标本的测定会有一定影响,本研究对比进行了讨论,报告如下.1材料和方法1.1血液标本:标本来源于对2种抗凝剂均聚集的患者,每次患者抽2管血,乙二胺四乙酸(EDTA)-κ2抗凝静脉血与枸橼酸钠抗凝静脉血,同时采指血做血小板手工镜检.1.2 仪器与试剂:Sysmex-2100血液分析仪(希森美康公司)与配套试剂.OLmpus显微镜.按照操作规程配制的草酸铵血小板稀释液.EDTA-κ2真空抗凝管与枸橼酸钠真空抗凝管(作凝血检查抗凝管).瑞-吉氏染液.
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慢性丙型肝炎患者血清转化生长因子-β1含量测定的临床意义
转化生长因子-β1(TGF-β1)是一种高二聚体多肽,具有促进间质细胞分化和增生,增加细胞外间质的沉积,抑制其降解的作用,是肝纤维化形成过程中一个重要的调控因子,我们采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定了22例慢性丙型肝炎患者血清中的TGF-β1含量,并观察了TGF-β1水平与重组复合α干扰素治疗的关系。1 对象与方法1.1 测定对象:22例慢性丙型肝炎患者均为本院1996年1月至1997年3月内住院患者,病程6个月以上,所有患者血清丙型肝炎病毒抗体(抗HCV)均阳性,13例患者HCV RNA阳性,所有患者均未检出甲、乙、丁、戊、庚和TTV病毒合并感染,治疗用药为重组复合α干扰素(CIFN)9 μg皮下注射,每周3次,共24周。所有病例于治疗前后抽取不抗凝静脉血3 mL,待血块收缩后,2 000 r/min离心10 min,取上层血清置-80 ℃低温冰箱保存,备用。
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外周血涂片检查基本技能及其重要性
外周血涂片细胞形态学检查是临床血液细胞学检验中基本的检查项目.如何做好外周血涂片检查是每个检验人员必需掌握的基本技能,特别是对于基层检验人员尤为重要.1 血涂片的制作及染色1.1 血涂片的制作:取血液[未抗凝静脉血或外周毛细血管血和乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝血均可] 1滴(约10 μL)于洁静载玻片一端,用合格推片以25°~35°角于血滴的前方接触血液,平稳向前推动,使血液均匀地分散于载玻片上,水平放置晾干即可.注意推片时用力需均匀,推片角度、血滴大小与血片的厚薄成正比,血片的厚薄要求与细胞数的多少及检查目的有关,细胞数多应涂薄片,以便观察细胞内部结构,如做寄生虫检查需同时涂厚血片以提高检出率.
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性能评价、方法学评价及参考区间验证在 ALI FAX 血沉检测质量保证中的应用
红细胞沉降率(血沉,ESR)是指抗凝静脉血直立静置于室温下,红细胞在单位时间内沉降的速度。有报道,病理性 ESR 增高与结核、类风湿性关节炎、感染、恶性肿瘤、红斑狼疮、多发性骨髓瘤等许多疾病相关[1],是一项非特异性的检验项目。用于 ESR检测的 Westergren 法被国际血液标准化委员会(ICSH)推荐为 ESR 测定的标准方法[2]。Westerg-ren 法操作简便,但容易受管内抗凝剂稀释,不同厂家血沉管的内径、材质存在差异,检测用血量较大,操作及结果判读费时费力,不适合大批量标本 ESR的检测。本检验科自2008年引进 ALI FAX TEST1血沉仪替代 westergren 法检测血沉以来,通过每12个月对其进行仪器校准,随后评价仪器等准确性、重复性和携带污染率等主要性能指标,并进行参考区间验证,来保证分析过程中的检验质量。为了了解仪器法与 westergren 法检测血沉的差异以及标本存放时间对结果的影响,我们对 ALI FAX TEST1仪器法与 Westergren 法检测结果进行差异和相关性比较,对标本稳定性进行评价。
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冷球蛋白干扰血细胞分析仪细胞计数结果
本文用Coulter JT-IR型血细胞分析仪检查了3156例住院病人抗凝静脉血作血常规检查,发现32例因冷球蛋白的干扰使白细胞直方图出现异常峰,特予报道.
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高血镁引起抗凝静脉血血小板计数结果假性降低及纠正方法
血小板计数假性减低常见原因有采血不顺利,未及时混匀,血液分析仪不能准确分辨的过大、过小血小板,室温过低,EDTA依赖性凝集[1,2].在日常工作中发现,高血镁也能引起抗凝静脉血血小板计数结果假性降低.为研究其干扰程度及纠正方法,我们进行了体内外的实验,现报道如下.
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血细胞分析仪检测后的标本用于临床化学15项指标分析的探讨
临床化学各项指标分析标本通常用血清,而血液细胞分析仪检测标本要求用EDTAK2抗凝静脉血.由于肿瘤病人在化疗期间经常需同时检测血液中的血细胞以及临床化学一些项目.为了探讨血细胞分析仪检测后分离的EDTAK2抗凝血浆对临床化学15项指标的影响,我们进行了实验.现将结果报告如下.
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EDTA-K2抗凝静脉血测定血沉的探讨
目前,国内血细胞仪已普遍使用,许多血细胞计数仪采用EDTA-K2抗凝静脉血[1].经细胞仪分析后的标本进行血沉测定可减少病人血样本量,能准确控制血液与抗凝剂比例,为证实其可行性,我们与测定血沉的参考方法魏氏法作相应比较,现报道如下.
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不同条件保存血液对激光法检测红系参数的影响
随着自动化血球计数仪的日趋先进,不断涌现新的检测参数应用于临床.日本SYSMEX SE-9000全自动血球计数仪用半导体激光流式细胞法直接检测的红细胞,得出RBC、HGB、HCT、MCV、MCHC、RDW、HDW等参数.为了加强分析前质量控制,本文探讨各种条件下保存EDTA-K2抗凝静脉血,其红系各参数的变化.
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抗凝静脉血标本放置时间对血细胞分析结果的影响
目的 研究抗凝静脉血样品放置时间对血细胞分析结果的影响.方法 抽取静脉血置乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝管中,分别在7个时间点测试分析结果.结果 随着放置时间的延长,白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)差异均无统计学意义(P>0.05),血小板体积(MPV)随着时间的延长明显增加(P<0.05),PLT随着时间的延长有所下降.结论 经EDTA-K2抗凝静脉血,8 h内测定结果可以满足日常常规检验工作需求,但MPV在1 h内测定值佳.
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低温保存静脉血不同时间对PLT检测的影响
目的:探讨低温下静脉血存放不同时间对PLT检测结果的影响.方法:选取50份健康人群EDTA抗凝血标本,即刻上机检测(0h),然后将标本存放5℃的冰箱中保存于2h,4h,8h,12h,24h,30h分别检测,将各时段的检测结果分别与即刻上机检测结果比较.计数资料采用x±s表示,组间差异采用T检验.结果:血小板计数(PLT)在2h,4h,8h,12h,24h的检测结果与0h无显著性差异(P>0.05),30h有显著性差异(P<0.05);平均血小板体积(MPV)在2h,4h,8h,12h的检测结果与0h无显著性差异(P>0.05);241h、30h有显著性差异(P<0.05).结论:对PLT检测,如不能及时,应保存于5℃条件下,并于24h内尽快完成.