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HCV核心蛋白对胞内信号传导系统的调控
HCV核心蛋白(Core)能与胞内多种蛋白结合,能对MAPK、Jak/Stat、NF-κB、NF-AT、p21等胞内重要信号传导途径进行调节,影响甚至决定了HCV感染细胞的终命运:增殖或凋亡,在HCV感染的病理发生和慢性化及致肝细胞癌等过程中起着重要作用.
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乙肝DNA疫苗
DNA疫苗可以诱导长期的体液及细胞免疫,打破免疫耐受,作为未来治疗病毒、胞内菌、寄生虫等病原体感染及肿瘤的工具已进行了大量研究.本文就慢性乙型肝炎DNA疫苗的研究进行了总结,主要描述了二十一世纪以后乙肝DNA疫苗的发展.
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03 一种截短的丙型肝炎病毒E2糖蛋白胞内型及分泌型的功能定性
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猫立克次体——新出现的全球人类健康威胁
猫立克次体属于立克次体属,由胞内病原体组成,所引起的感染一般被称为立克次体病.还没有已知的亚种,通常分为2个亚群:斑点热群(SFG)和斑疹伤寒群.
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1-14 低氧处理对肝癌细胞生长和NQ01酶活性的影响
目的研究低氧环境下肝癌细胞生长是否被抑制,胞内Ⅱ相解毒酶NAD(P)H:醌氧化还原酶-1(NQ01)活性是否被诱导增高,以及二者之间的关系.方法肝癌细胞SMMC-7721接种于96孔培养板内,5%CO2孵箱培养24h后,换新鲜培养液(已用混合气预先平衡)放入低氧小罐,用5%CO2~95%N2混合气体进行缺氧处理(O2%<0.1%),分别培养6、9、12、24、36 h后,取出培养板,以MTT比色法检测细胞生长情况;NQ01酶活性采用微孔板直接测定法、细胞数用结晶紫染色法测定,NQ01酶活性结果表达为NQ01酶比活力(specifie activity)=A(NQ01酶活力)/B(细胞数).结果低氧处理6 h后细胞NQ01酶比活力较常氧对照组下降,而细胞生长加快.在9 h后,酶比活力呈现时效性升高,且低氧组酶比活力明显高于对照,而细胞生长则减慢(与常氧对照组比较均为P<0.01).将细胞生长曲线与酶活时间曲线作相关分析,统计学上差异无显著性.结论低氧处理在短时程内能够刺激肝癌细胞生长加快,抑制胞内NQ01酶活性;而超过这一时间段之后则使细胞生长减缓,诱导NQ01酶活性升高.
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从HIV阳性者痰液中分离出一株胞内分枝杆菌
近,我们从13例HIV阳性患者痰液中分离出胞内分枝杆菌(Mycobactreium, intracellulare)一株,现报告如下。 一般资料:患者男性,38岁,因吸毒而发现HIV阳性,后到我院就诊并作痰液结核分枝杆菌培养与鉴定和药物敏感性试验,结果培养出胞内分枝杆菌。 细菌培养:痰液用4% NaOH前处理、以pH 6.8 PBS洗涤后接种于BACTEC 12B培养基[1],37℃培养第11天显示阳性,抗酸染色,显微镜下菌体呈分散且长短不一的短杆状。后转种改良罗氏培养基、对硝基苯甲酸培养基(PNB,下同)、噻吩—2—羧酸肼培养基(TCH,下同)和盐酸羟胺培养基(HA,下同),以便按照防痨协会制订的有关规程作进一步生化鉴定[2] 生物状况:菌株为不产色性,能在28~42℃生长,对PNB、TCH和HA(125μg/ml)耐受,能在谷氨酸钠葡萄糖琼脂培养基上生长,在改良罗氏培养基上菌落光滑、湿润、小而扁平、蔓延呈乳酪样。生化反应:耐热触酶、烟酰胺酶、亚硝酸盐还原试验(3天)和芳香硫酸酯酶阳性。烟酸、硝酸盐还原、吐温80水解、尿素酶和β—半乳糖苷酶阴性。根据以上生化反应分析,该菌株应鉴定为:胞内分枝杆菌。为进一步核实,我们以北京市结核病胸部肿瘤研究所提供的标准株胞内分枝杆菌(ATCC 13950)和鸟分枝杆菌(ATCC 25291)作了平行性的生化反应试验,结果胞内分枝杆菌在谷氨酸钠葡萄糖琼脂基上有菌落形成而鸟分枝杆菌未见有生长,其他生物特性和培养条件与我们从患体分离出的菌株生化反应结果一致,从而验证了实验的可靠性。 药物敏感性试验:采用BACTEC法[1],结果显示本菌对异烟肼、链霉素、利福平和乙胺丁醇均耐药,对卡那霉素敏感。 讨论:文献报道[3],自80年代初全球进入HIV/AIDS流行时代以来,人类新老的两大传染病AIDS与结核病相互影响,至90年代前者的流行已成为全球结核病呈上升趋势的主要原因。在HIV/AIDS的分枝杆菌机会感染中,非结核分枝杆菌感染仅次于结核分枝杆菌;在非结核分枝杆菌感染中,又以鸟复合型分枝杆菌为多见,我们从13例HIV阳性标本中分离出一株胞内分枝杆菌就是明证。此外,药敏试验结果显示,非结核分枝杆菌对大多数抗结核药物呈现原始耐受性,给临床治疗带来了极大的困难。因此,对于HIV/AIDS者,分枝杆菌培养、鉴定和药物敏感性试验,是一项必不可少的实验室工作。
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胞内细胞因子佳染色抗体浓度的选择
探讨胞内细胞因子佳染色浓度的选择方法.以人外周血单个核细胞为研究对象, 应用胞内免疫荧光染色和流式细胞仪检测分析, 比较不同浓度商品化IFNγ-FITC单抗和IL4-FITC单抗与实验室制备的IFNγ-FITC单抗和IL4-FITC单抗的荧光染色效果.结果表明, 应用不同浓度商品化抗体得到的染色率不同.选择与用商品化抗体佳染色浓度得到的染色率相同的实验室制备荧光抗体的染色浓度作为实验室制备荧光抗体的佳染色浓度.
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胞内细胞因子染色中固定和打孔方法的选择
本文采用流式细胞仪分析三种固定/打孔液以及胞内FcR封闭对胞内细胞因子染色结果的影响.结果显示,商品化fix/perm固定/打孔液条件稳定,多聚甲醛固定+0.1%saponin(PBS)打孔液在一定程度上可替代fix/perm固定/打孔液,并且有必要将胞内FcR进行封闭.
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流式细胞仪进行干细胞绝对计数的方法
干细胞移植对于白血病等多种疾病的治疗具有重要意义,而准确的干细胞绝对计数对于干细胞移植的成败又十分重要。流式细胞仪结合荧光单抗技术为干细胞绝对计数提供了一种快速、定量、重复性好的方法。本文介绍利用流式细胞仪进行干细胞绝对计数的原理、方法及意义。 1 流式细胞仪简介 流式细胞仪是对悬浮状态的细胞逐个计数并记录其有关参数的细胞分析仪器,因其测量速度快,在很短时间内可以分析大量细胞,并能测出多个参数,在临床上有广泛的应用。流式细胞仪能测量细胞的五个参数:前向角散射光(FSC)、侧向角散射光(SSC)、绿色荧光(FL-1)、黄色荧光(FL-2)和红色荧光(FL-3)。FSC和SSC是细胞对激发光的散射信号,分别反映了细胞的大小和细胞的粒度:细胞越大,胞内颗粒越多,则FSC和SSC越强。例如在外周血中,根据细胞大小及胞内所含颗粒性物质的多少,可区分出淋巴细胞、单核细胞和粒细胞。粒细胞有较大的核或较多的颗粒,细胞直径也比淋巴细胞大,因而其FSC和SSC均比淋巴细胞强。
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用流式细胞仪测定母血中胎儿红细胞含量的新方法
本文介绍一种快速而准确地测量母血中胎儿红细胞含量的方法.它通过流式细胞仪检测母血中胎儿红细胞胞内的血红蛋白(HbF)和红细胞表面i抗原,可以特异地识别母血中胎儿红细胞.这对预防新生儿溶血症和优生优育具有重要意义.
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人重组蛋白胸腺素B10促进卵巢癌细胞系SKOV3凋亡
β族胸腺素由于具有维持细胞骨架的动态平衡,促进血管生成、伤口愈合、心肌修复等多种生物学功能,并与肿瘤发生、转移具有密切关系而倍受关注.本文研究对象胸腺素B10(thymosinβ 10,Tβ10)定位于胞内,大量文献证实Tβ10与肿瘤的发生发展有关[1-2],但在不同类型的肿瘤中它的功能还存在争议,Tβ10在肿瘤细胞凋亡中所起的作用也鲜有报道.本实验将在卵巢癌细胞系SKOV3中探索Tβ10对其凋亡的影响及其分子机制.
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敏感细胞KB与其耐药细胞KBv200脂质过氧化物含量分析及超微结构观察
肿瘤细胞耐药是化疗失败的重要原因.联系影响抗癌药跨膜转运和胞内分布异常的多药耐药现象,本研究对一对耐药细胞KBv200(其耐药表型为MDR)及其敏感细胞KB的超微结构和脂质过氧化物含量进行了分析.超微结构观察到KBv200细胞多聚核糖体数目较KB细胞增多,这可能与耐药相关的酶蛋白类有关,尤其是P-GP.
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TLR通过激酶TBK1-IKKε驱动糖酵解重组来支持树突状细胞激活的合成代谢需求
树突状细胞在Toll样受体( TLR)激动剂的刺激下会迅速被激活。已有的研究表明,激活后的树突状细胞胞内的糖酵解水平会被长时间持续性地上调,这是因为细胞在激活的过程中内产生了内源性的一氧化氮(NO),NO能抑制线粒体电子的传导,从而抑制了氧化磷酸化,使得细胞代谢发生向糖酵解方向的转换,继而产生ATP维持细胞的存活。
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大肠杆菌胞内的共表达策略
大肠杆菌表达系统因其具有系统工具成熟、表达水平高、易于操作和成本低廉等优点而成为表达外源蛋白常用的表达系统之一.但该系统在表达外源蛋白,尤其是真核蛋白时也存在不少缺陷,其中主要的是由于大肠杆菌胞内缺乏帮助蛋白正确折叠的机制,所以相当一部分在大肠杆菌中表达的外源蛋白都聚集成沉淀,即以包涵体的形式存在,从而丧失了生物活性.
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亲免蛋白功能与自身免疫性疾病关系初探
一、亲免蛋白超家族的组成与结构亲免蛋白超家族由高度保守的蛋白质组成,在胞内高丰度表达,大多具有肽脯氨酰顺和(或)反异构酶(PPIase)或旋转异构酶活性[1].
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接种卡介苗后偶合鸟-胞内分枝杆菌感染1例报告
患儿男性,2003年7月19日出生,第2胎,足月剖腹产,接种疫苗前身体健康,无接种禁忌证,家长自述其家庭成员无癫痫、脑病、惊厥及过敏等病史.出生后第3d,由达州市中心医院儿保科护士(经过计划免疫专业培训,从事预防接种工作6年)到病房为患儿在左上臂三角肌外缘,经消毒后皮内接种卡介苗0.1ml(成都生物制品研究所生产,批号20021101-3,失效期2004-03),观察15min无任何反应后护士离去.当天接种同支疫苗的另外2名儿童接种后无任何反应.
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抗菌药物新靶位
近年来,由于过度使用抗生素,特别是滥用抗生素,病原菌日益广泛的耐药性已成为药物治疗中越来越常见的问题[1].为了克服细菌的耐药性,特别是多重耐药性问题,人们需要运用新的思路去发掘新的抗生素,因此,探索新型抗菌机制已成为目前的迫切需要.本文综述了近几年发现的抗菌药物的新靶位,分别从作用于细菌(真菌)细胞壁、细胞膜、RNA 聚合酶、胞内代谢及调控等 4 方面来谈抗菌药物的新作用靶位.
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鼻腔及面部鸟型胞内分枝杆菌感染一例
患者女,46岁.因鼻腔流脓血、发热(体温39℃以上),贫血伴面部疼痛性红色斑块和结节2年于2011年5月6 日入院.入院前曾在某院行面部斑块活检,提示为"韦格纳肉芽肿",治疗后无好转.体检:面部散在黄豆至蚕豆大淡褐色瘢痕,为活检术后遗留,部分瘢痕区可触及皮下结节,压痛明显,头部CT示双侧上颌窦、蝶窦、筛窦及左侧鼻腔均被软组织填充,窦壁骨质无破坏.取面部结节组织及鼻腔内组织活检.
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HCV感染人LDLR转基因小鼠肝癌细胞的初步研究
近年来在研究HCV与易感细胞的相互作用中发现,血清中的HCV颗粒是与β-脂蛋白或IgG结合形成复合物(HCV-RNA carrying material, HCVrcm),HCVrcm通过与细胞表面的脂蛋白受体分子结合进入细胞,这种复合物的形成有利于HCV与靶细胞的结合和HCV的持续感染.人低密度脂蛋白受体(hLDLR)是一种表达在细胞表面的脂蛋白受体分子,是HCV感染细胞的重要受体,它在介导LDL进入细胞的过程中同时将HCV带入胞内.
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TLR2及 TLR4在巨噬细胞识别结核分枝杆菌中的作用
结核病( tuberculosis,TB)是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)引起的一种慢性传染病,主要以呼吸系统感染为主。近年来,结核病日趋严重,位居由单一病原引起患者死亡的严重传染病之首。目前结核分枝杆菌感染者约占全球总人口的1/3,每年约有930多万人发展为活动性结核病,并有200多万人死于该病[1]。结核分枝杆菌感染人体后,主要被巨噬细胞( macrophage)吞噬,未被机体免疫系统清除而潜伏下来的结核分枝杆菌也主要寄生于巨噬细胞内。巨噬细胞是机体防御系统的第一道屏障,一方面发挥着抵抗结核分枝杆菌的作用,另一方面又是结核分枝杆菌体内滞留造成潜伏感染的主要场所。巨噬细胞与结核分枝杆菌的相互作用对结核病产生较大的影响,因此探讨两者的相互作用机制对结核病的防治尤为重要。TLR2、TLR4主要表达于巨噬细胞,并以识别病原相关分子模式( pathogen-associated molecular patterns, PAMPs)为基础,感知病原微生物存在。然后,通过胞内信号传递,或者直接触发胞内杀菌机制,或诱生免疫炎性因子从而扩大非特异性防御作用,或提供共刺激信号,诱导特异性免疫,一般兼而有之。因此,TLR2、TLR4是极为重要的固有免疫受体。