首页 > 文献资料
-
ABO血型不合的异基因外周血干细胞移植治疗急性白血病1例
1 临床资料患者,男,28岁. 2000-11因发热1 wk入院,血常规示WBC 2.4×109*L-1, Hb 56 g*L-1, PLT 122×109*L-1, 骨髓检查示増生极度活跃,早幼粒细胞0.24,异常中幼粒细胞0.52,确诊急性非淋巴细胞白血病M2b. 染色体检查:46XY. 查体肝、脾、淋巴结无肿大. 采用柔红霉素及阿糖胞苷联合化疗获得部分缓解. 此后予原方案及HA、 MEA、大剂量阿糖胞苷治疗共8疗程,患者仍未达完全缓解. 2001-07采用拓扑替康及中剂量阿糖胞苷组成新的方案化疗(拓扑替康2 mg*d-1,阿糖胞苷1.0 g, d 1～5), 50 d后WBC 5.0×109*L-1, Hb 118 g*L-1, PLT 112×109*L-1, 骨髓形态学检查达完全缓解.
-
人Delta-like4ext-93-217原核表达、纯化及蛋白活性检测
目的:原核表达、纯化融合蛋白TRX/hD114ext-93-217,并对其活性进行检测.方法:采用PCR方法扩增hDll4ext-93-217多核苷酸序列,克隆人pMD18T载体.测序正确后,将其亚克隆入pET32a(+)原核表达载体,获得pET32a(+)-hDll4ext-93-217载体.以该载体转化E.coli菌株BL21,IPTG诱导其表达.以镍离子螯合柱纯化目的蛋白,采用SDS-PAGE,Western Blot方法鉴定目的蛋白的表达;采用萤光素酶报告基因系统检测目的蛋白活性.结果:通过PCR扩增获得了目的片段hDll4ext-93-217,成功构建了该蛋白的原核表达载体pET32a(+)-hD114ext-93-217.采用SDS-PAGE,Western Blot等方法均可检测到目的可溶性融合蛋白TRX/hDll4ext-93-217的表达.融合蛋白TRX/hDll4ext-93-217在25℃,IPTG终浓度0.5mmol/L条件下诱导表达8 h的蛋白表达量高.以镍离子螯合柱纯化,获得纯化融合蛋白TRX/hDll4ext-93-217浓度为1.5g/L,其荧光素酶报告基因的刺激活性与空白对照组及TRX组相比较差异具有显著性(P=0.0154,P=0.0227,P<0.05).结论:通过原核表达获得的可溶性融合蛋白TRX/hDll4ext-93-217可活化Notch信号途径.
关键词： Detla-like4 Notch信号途径 造血干细胞 原核表达 -
多发性硬化患者造血干/祖细胞及其亚群富集纯化的研究
目的: 获得高纯度造血干/祖细胞(HSC/HPC)及其亚群,用于多发性硬化(MS)造血干细胞移植治疗和生物学特性的研究. 方法: 用免疫磁珠法(MiniMACS)从MS患者骨髓中富集CD34+细胞后再用荧光激活细胞分选(fluorescent activated cell sorter, FACS)纯化CD34+/CD38+和CD34+/CD38-细胞亚群. 结果: MiniMACS分选的CD34+细胞群纯度达91%,FACS分选的CD34+/CD38-和CD34+/CD38+两细胞亚群纯度可达98%以上. 结论: MiniMACS和FACS 两者结合可迅速大量纯化HSC/HPC及其重要细胞亚群,可用于临床MS造血干细胞移植、基因治疗和研究HSC/HPC及其亚群生物学特征.
-
血小板因子4对环磷酰胺诱导化学损伤小鼠骨髓细胞的保护作用
目的探讨血小板因子4(PF4)对环磷酰胺(CTX)诱导化学损伤小鼠骨髓的保护作用及机制. 方法环磷酰胺200 mg*kg-1,腹腔一次性注射,造成药物损伤模型. 给CTX前给予PF4预处理,给药后动态观察小鼠外周血白细胞数的变化,并于第5和第8日,分别用流式细胞仪(FCM) 测定骨髓有核细胞DNA的含量及细胞周期变化. 结果注射CTX后4 d,外周血白细胞降至低点,然后逐渐回升,但PF4处理组与单独CTX处理组比较无差异(P＞0.05). 第5日PF4处理组的骨髓有核细胞中,G0/G1期细胞的百分率较CTX组明显提高,细胞的坏死、凋亡率下降(P<0.01),而与PBS对照组基本相同(P>0.05). 第8日PF4处理组的骨髓有核细胞数较单独CTX处理组增加明显(P<0.01). 结论 PF4对CTX损伤的小鼠骨髓细胞有保护作用,可作为肿瘤患者使用烷化剂化疗时的骨髓防护剂.
-
不同冻存条件对造血干细胞保存效果的影响
目的:探讨不同冻存条件对造血干细胞(HSC)的保存效果. 方法: 在脐血HSC中加入冷冻保护液A[100 g/L二甲基亚砜( DMSO)+120 g/L HES+80 g/L人血清白蛋白]或B(50 g/L DMSO+120 g/L HES+80 g/L人血清白蛋白),分别做以下处理:-80℃直接冻存(Ⅰ组); 程控降温后-80℃冻存(Ⅱ组);程控降温后-196℃冻存(Ⅲ组),时间12 mo.比较在不同冷冻条件及不同DMSO浓度的条件下对HSC保存效果. 结果: 脐血HSC加冷冻保护液后在Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ组冷冻条件下,在12 mo期限内保存效果相当. 采用含25 g/L DMSO组成的联合冷冻保护液可在冷冻时间不超过3 mo的条件下对HSC进行冷冻保存. 结论: 在冷冻时间不超过3 mo的条件下,采用含25 g/L DMSO组成的联合冷冻保护液对HSC进行冷冻保存,既可满足移植的需要,又可减少DMSO的输入量. 长期保存HSC,则需要用含50 g/L DMSO的冷冻保护液.
-
急性脑梗死患者外周血造血干细胞测定的临床意义
目的:探讨急性脑梗死患者自体外周血造血干细胞水平的变化及其临床意义.方法:采用流式细胞术方法分别检测40例急性脑梗死患者3,7,10和14d CD34+CD38-细胞百分率.结果:脑梗死急性期外周血CD34+CD38-细胞水平明显高于对照组(P<0.05),梗死后3d CD34+CD38-细胞水平上升,10d达高峰,然后开始下降(P<0.01).脑梗死早期CD34+CD38-细胞水平与Fugl-Meyer量表评分负相关(r=-0.281,P<0.05).神经功能恢复越好,CD34+CD38-细胞水平越高(P<0.05).结论:外周血造血干细胞在参与脑梗死急性期神经的修复过程中起重要作用.
-
自体外周血纯化CD34+细胞移植对系统性红斑狼疮患者外周血CD4+CD25+T细胞表达的影响
目的 研究自体外周血纯化造血干细胞移植对系统性红斑狼疮(SLE)患者CD4+CD25+T细胞表达的影响.方法 15例接受自体外周血纯化造血干细胞移植的SLE患者列入研究,应用流式细胞技术动态监测移植前及移植后3、6、12、24个月的CD4+CD25+T细胞表达水平.结果 自体外周血造血干细胞移植治疗前SLE患者外周血的CD4+CD25+T细胞表达明显低下,移植后3个月出现增高,移植6、12、24个月后达正常水平.复发者外周血CD4+CD25+T细胞的表达水平明显低于非复发者,差异有统计学意义(P<0.01).结论 自体外周血纯化CD34+细胞移植可通过促进CD4+CD25+T细胞的表达发挥治疗作用.
关键词： 造血干细胞 移植 CD4+CD25+T细胞 系统性红斑狼疮 -
自体外周血造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤的临床疗效
目的 分析自体外周血造血干细胞移植(APBSCT)治疗多发性骨髓瘤的疗效和安全性.方法 2007年1月至2009年4月对我院6例Durie分期为ⅡA～ⅢB期的多发性骨髓瘤患者实施APBSCT,其中男性5例,女性1例,中位年龄47.5岁(39～56岁).结果 6例患者均获得造血重建,造血重建中位时间23d(11～62d).移植相关并发症包括发热4例,口腔黏膜溃疡或糜烂3例,转氨酶升高3例,其中1例伴有黄疸,恶心呕吐3例,口腔黏膜血疱1例,腹泻1例.中位随访时间13个月(6～28个月),1例患者于移植后第6个月死于肺部感染,有2例复发,分别在移植后第11个月和第20个月,前者于复发后第4个月死亡,后者经化疗后再次获得缓解.结论 APBSCT治疗多发性骨髓瘤安全、有效、合并症少；前期诱导化疗阶段应用过马法兰可能是某些患者造血重建延迟的原因之一.
-
骨髓间充质干细胞对软骨诱导分化过程中microRNA调控机制
目的:探讨microRNA(miRNA)在骨髓间充质干细胞对软骨诱导分化过程中的调控机制.方法:以大鼠骨髓中分离出的骨髓间充质干细胞(BMSCs)作为研究对象,用转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导MSCs软骨分化,利用基因芯片技术检测软骨诱导分化过程中miRNA表达情况,并用实时荧光定量PCR验证;采用SAM软件筛选出软骨诱导过程中差异表达的miRNA.结果:基因芯片技术共筛选出BMSCs向软骨分化过程中9个表达差异miRNA,其中表达上调的共有7个,分别为miR-34a、miR-130b、miR-193b、miR-30a、miR-152、miR-90a、miR-99a;表达下调的共有2个,分别为miR-424、miR-135.选择软骨诱导分化过程中表达明显升高的miR-130b、miR-193b,及表达明显降低的miR-424、miR-135;在原样本中进行实时荧光定量PCR,结果显示实时荧光定量PCR验证结果与基因芯片结果一致,证实了芯片结果真实可信.结论:高表达的miR-34a、miR-130b、miR-193b、miR-30a、miR-152、miR-90a、miR-99a和低表达的miR-424、miR-135共同参与了骨髓间充质干细胞软骨分化的调节过程.
-
白血病干细胞及白血病靶向治疗研究进展
1白血病干细胞起源早在20世纪70年代，Park 等［1］的研究已清楚地表明，在白血病细胞中，仅仅只有很小一部分具有无限增殖、分化潜力的细胞，但起着重要作用。Bonnet等［2］经过大量研究发现，CD34＋ CD38-与正常造血干细胞（HSC）表面标志相似，可用来鉴别急性髓系白血病（AML）中具有无限增殖、分化能力的细胞，研究表明虽然该类细胞群在AML患者体内所占的比例很少，但它们却是唯一将人类AML成功复制到非肥胖糖尿病／重症联合免疫缺陷（NOD／SCID）小鼠模型的细胞，这些细胞后来即被称为白血病干细胞（LSC ）。这一研究结果也为LSC来源于正常造血干细胞的假说提供了有力证据。另外也有研究结果显示，在 AML患者体内有表达癌蛋白 AML1-ETO［3］的 HSC ，且都为CD90＋细胞，进一步检测这些患者的B细胞，发现表达 AML1-ETO ，提示CD90＋的HSC可能是LSC的来源。LSC的起源、发生等有待进一步研究，但LSC在整个病程中的作用不容忽视，维持着白血病细胞的发生、发展，也是疾病复发的潜在源头。
-
外周血干细胞动员与采集的研究进展
外周血干细胞移植(Peripheral blood stem cell transplantation,PBSCT)具有操作简单、造血重建快、并发症少等优点,有逐渐取代骨髓移植的趋势.外周血中干细胞数量少,有效的动员可使外周血中的干细胞数量成十倍成百倍的增加,运用个性化的采集方案可获得足量的造血干细胞,确保移植成功.本文就近年来外周血干细胞的动员与采集进展作一综述.
-
自然杀伤细胞在妊娠子宫中的作用
自然杀伤(natural killer,NK)细胞起源于多能造血干细胞,是人体免疫系统的重要组成部分.大量的活化和抑制性受体,包括一些新发现的选择性识别主要组织相容性复合物-Ⅰ类分子的受体,严格调控着NK细胞的细胞毒作用及其它功能.
-
骨髓间充质干细胞的生物学特性及临床应用前景
1骨髓间充质干细胞的概念骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)是骨髓中的非造血干细胞,早期分离培养时,其外观呈成纤维细胞样而被称为"成纤维细胞集落形成单位(Colonyforming unit-fibroblastic,CUF-F)"或"骨髓基质成纤维细胞 (Marrow stromal fibroblasts,MSF)".
-
组织干细胞模型的研究进展
目前,已经从许多组织或器官中成功地分离出干细胞,其中包括:ES、造血干细胞、骨髓间充质干细胞(MSC)等.此外,还有近来研究渐多的神经干细胞(NSC)、肌肉干细胞、成骨干细胞、内胚层干细胞及视网膜干细胞等.
-
粘附分子在造血干细胞归巢中的作用
造血干细胞(Hematopoietic stem cell,HSC)的归巢类似于炎性细胞向炎症部位的归巢,是一个高度选择的过程.
-
利妥昔单抗联合化疗治疗非霍奇金淋巴瘤23例护理体会
利妥昔单抗又名美罗华,是一种嵌合型鼠/人单克隆抗体,与细胞表面CD20抗原特异性结合后能很快地清除肿瘤性CD20细胞,属于蛋白制品生物制剂.NHL是临床常见的恶性肿瘤之一,多数起源于B淋巴细胞.95%以上的B淋巴细胞表达CD20抗体,CD20抗原的表达出现在前B淋巴细胞的晚期和成熟B淋巴细胞,在造血干细胞、祖细胞和其他正常组织中无CD20抗原的表达.当B淋巴细胞分化为浆细胞时,CD20抗原的表达也随之消失[1].因此,CD20抗原是免疫治疗B细胞淋巴瘤的理想作用点.笔者在使用利妥昔单抗过程中,对发生不良反应的患者进行了及时的对症处理和精心的护理,使其顺利完成了治疗,现将护理体会报告如下.
-
16例婴儿白血病分析及讨论
婴儿白血病(IAL)是指诊断时年龄在18月以内的白血病,发病率较低.以AML为多.IAL是儿童急性白血病中的较为特殊的类型,其显著特征为肿瘤负荷高,髓外浸润明显,病情进展快,常在确诊时已有明显外周血像异常表现.虽然随着当代化疗的进步和造血干细胞移植术的成熟,儿童急性白血病的治愈率有了明显提高,但是婴儿急白的预后仍然很差.2006年01月至2008年12月止,我院血液肿瘤科共收治婴儿急性白血病16例,占该时期我院儿童急性白血病(247例)的6.4%.
-
小鼠造血干细胞表型的研究进展
到目前为止,无论是在纯化标志物还是评价其潜在的生物学功能方面,造血干细胞是研究深入的成体干细胞.尽管有40多年的研究,但骨髓中的造血干细胞的数量占总的有核细胞的0.01％,这对造血干细胞的纯化及分选,带来了极大的挑战.利用细胞标记免疫表型,遁过磁珠分选和流式细胞术可以分选纯化骨髓造血干细胞.本文就小鼠造血干细胞免疫表型研究做一综述.为后续实验NOD/SCID小鼠免疫重建奠定基础.
-
骨髓血细胞形态浅谈
血细胞发生是造血干细胞经增殖、分化直至成为各种成熟血细胞的过程.造血干细胞是生成各种血细胞的原始细胞,又称多能干细胞.造血干细胞在一定的微环境和某些因素的调节下,增殖分化为各类血细胞的祖细胞,称造血祖细胞,它也是一种相当原始的具有增殖能力的细胞,但已失去多向分化能力,只能向一个或几个血细胞系定向增殖分化,故也称定向干细胞血细胞形态学检验是指应用光学显微镜辨认经瑞氏染色后的外周血和骨髓涂片的细胞形态.可以了解骨髓中血细胞的生成、成熟、释放的程度及病理细胞形态或异常细胞出现的意义,是血液病基础诊断与常规血液学检验的重要项目,是基本的简便实用的检查方法.此方法虽然较为传统,但血细胞形态学检验的质量高低是许多疾病尤其是血液病的诊断、鉴别诊断及预后判断的关键[1].而血细胞形态学检验的主观性较强,检验人员需要积累丰富的工作经验才能胜任.
-
造血干细胞移植临床应用现状及展望
造血干细胞是存在于造血组织中的一群原始造血细胞，具有自我更新及分化成熟为各种血细胞和免疫活性细胞的能力，在人体造血及免疫系统中起着至关重要的作用。本文介绍了骨髓造血干细胞移植、外周血造血干细胞移植和脐带血造血干细胞移植等的临床应用现状及前景。
