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骨髓间充质干细胞成软骨分化研究进展
骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是存在于骨髓基质中的一种多能干细胞,在特定的培养条件下,MSCs可分化成成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、成纤维细胞等多种间充质细胞[1,2].由于它们可以作为滋养层支持造血干细胞的生长,因此也被称为骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs).
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脐带血间充质干细胞的研究进展
人脐带血是胎儿出生时脐带内及胎盘近胎儿一侧血管内的血液,富含干细胞和祖细胞,其中主要是造血干细胞和间充质干细胞(MSC).MSC是目前备受关注、具有自我更新能力和多向分化潜能的组织干细胞,与骨髓来源的MSC相似,但来源更充足、抗原性更低,能无创获取并规避伦理学困扰.本文就脐带血MSC的研究进展及应用前景进行综述.
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大鼠胚胎卵黄囊内和腹腔内人脐血造血干细胞移植的比较
目的:探讨人脐血造血干细胞宫内移植的更好途径.方法:将人脐血单个核细胞注入大鼠胚胎的卵黄囊及胎鼠腹腔内,并设阴性及空白对照组,观察手术并发症及妊娠结局,待出生后1个月及2个月,分别用流式细胞仪和免疫组化检测移植情况.结果:胎鼠腹腔途径组的手术并发症发生率、胎鼠丢失率显著高于卵黄囊途径组(P＜0.001,P＜0.05).出生后实验组仔鼠外周血中检测到逐渐增加的人CD3细胞,卵黄囊组的增殖量高于腹腔途径组(P＜0.05).卵黄囊组的种植率为89.7%,腹腔组的种植率为64.0%,二者比较有显著性差异(P＜0.05).出生后2个月在仔鼠的肝、脾及胸腺组织中均检测到人CD3、CD20及CD34+阳性细胞,卵黄囊组的表达量明显高于腹腔组(P＜0.001).结论:大鼠胚胎的卵黄囊途径是人脐血造血干细胞进行宫内移植的一条较好途径.
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人脐血CD34+内皮祖细胞的体外分化
目的:研究人脐血CD34+细胞群体中内皮祖细胞在体外分化为内皮细胞的过程中,干细胞标志以及内皮细胞表型随时间的变化.方法:将免疫磁珠细胞分选法(MACS)得到的CD34+细胞体外培养于纤连蛋白和无纤连蛋白处理的培养皿中,以免疫细胞化学鉴定贴壁细胞的内皮标志Flk-l和vWF,并以流式细胞仪分析其干细胞标志ACl33.结果:贴壁细胞的内皮标志Flk-1和vWF是逐步出现的,d 3时有27.0%贴壁细胞表达Flk-1,vWF不表达,d 7时已100%表达vWF和Flk-1.纤连蛋白促进贴壁细胞内皮标志Flk-1和vWF的表达,d 3时的表达百分率分别为34.0%和47.0%,d 7时Flk-1和vWF的表达均为100%.在培养过程中,AC133阳性细胞的比例迅速下降,但纤连蛋白对AC 1 3 3的表达无显著影响.结论:在内皮祖细胞分化的过程中,干细胞标志迅速消失,向内皮细胞分化,内皮细胞的表型是逐步出现的.纤连蛋白促进内皮祖细胞的分化.
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造血干/祖细胞遗传学修饰对4-氢过氧化环磷酰胺、长春新碱和柔红霉素的联合抗性
目的：探讨经醛脱氢酶基因(ALDH-3)和多药耐药基因(MDRl)遗传学修饰的人外周血造血干/祖细胞能否同时增强活性环磷酰胺(4-HC)和MDRl基因靶药的抗性.方法：构建同时含ALDH-3和MDRl双耐药基因的逆转录病毒表达质粒G1Na-ALDH3-IRES-MDRl，经电穿孔导入PA317包装细胞，将免疫磁珠分离系统(MACS)分离纯化后的人外周血CD34+细胞用含有ALDH-3和MDRl双耐药基因重组病毒的上清感染，用PCR、RT-PCR、Southem blot、Northem blot、ACS和MTT等方法检测外源ALDH-3与MDRl基因在CD34+细胞中的转移和表达.结果：用PCR与酶切分析法鉴定了双顺反子逆转录病毒载体构建的正确性，双耐药基因已整合入转染靶细胞中基因组，并获得有效表达，应用集落计数测定基因转导效率为18％.巢式PCR及补救分析均未检测到辅助病毒存在.经双耐药基因修饰的CD34+造血干/祖细胞对4-HC的IC50较对照组提高4.5倍，对多药耐药基因靶药(长春新碱和柔红霉素)的IC50较未转染细胞分别高6.6和7.8倍.结论：逆转录病毒载体介导双耐药基因转导外周血造血干/祖细胞高效共表达可降低联合化疗骨髓毒性.
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ABMT与APBSCT治疗白血病和淋巴瘤的初步效果
①目的探讨自体骨髓移植(ABMT)、自体造血干细胞移植(APBSCT)治疗急性白血病和恶性淋巴瘤的效果.②方法应用ABMT和APBSCT治疗6例急性白血病和4例恶性淋巴瘤,全部病人随访1. 0～4.3年.③结果 10例病人移植后全部造血功能重建,无1例病人发生移植相关死亡,ABMT和APBSCT后中性粒细胞恢复至＞0.5×109/L时间分别为12(9～15)和10(9～12)d,血小板恢复至＞20×109/L时间分别为16(13～22)和13(8～41)d;移植后无病存活期为1.4(0.3～4.3)年,4例病人至今已无病生存1.3,1.4,3.8,4.3年,6例病人在移植后0.3～3.3年复发.④结论 ABMT和APBSCT是治疗急性白血病和恶性淋巴瘤的安全、有效方法.
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脐血造血干细胞移植对肿瘤化疗病人骨髓功能的影响
①目的探讨脐血造血干细胞移植对因化疗所致骨髓功能抑制的恶性肿瘤病人骨髓造血功能重建的临床意义.②方法从健康人脐血中纯化制备造血干细胞,每例病人每天静脉输注2×109个造血干细胞,连续5d.以治疗前后自身对照进行疗效评价.③结果治疗前白细胞计数为(2.78±1.72)×109/L,治疗后第7天为(4.55±1.01)×109/L,两组比较有显著性差异(F=18.50,q=6.95,P＜0.01);治疗前血红蛋白含量为(121.56±11.27)g/L,治疗后第14天为(130.72±12.58)g/L,治疗前后比较差异有极显著意义(F=14.02,q=4.90,P<0.01),且治疗后第21天比治疗后第7天增高(F=14.02,q=6.26,P<0.01);治疗前血小板计数为(192.38±18.21)×109/L,治疗后第21天为(201. 57±17.86)×109/L,治疗前后比较差异有极显著意义(F=9.01,q=3.99,P<0.01).④结论脐血造血干细胞移植对于重建或改善骨髓造血功能有一定疗效.提升白细胞速度较血红蛋白及血小板为快.
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瑶乡干部捐献造血干细胞
刘瑞安(化名)是湖南省南端大瑶山沟里的一名基层公务员,近日,他在湖南省中南大学湘雅医院成功地为一名白血病患者捐献了造血干细胞.刘瑞安出生于1981年,瑶族,中共党员,永州市江华瑶族自治县沱江镇某村人.2001年参加工作,是该县一名基层公务员.2011年在第4次无偿献血时,他志愿报名成为一名造血干细胞捐献志愿者.
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东海大学生村官热血献社会
"三九"时节,无偿献血进入"淡季".面对中心血站街头采血量骤减,各种血型库存短缺的情况下,江苏省东海县委组织部,组织全县229名大学生村官开展了"弘扬文明新风,无私救死扶伤"的献血活动.在此次献血活动中,东海县229名大学生村官成功献血91600毫升和部分造血干细胞.
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首例江华瑶胞捐献造血干细胞
9月17日上午，湖南省江华瑶族自治县史上首例两位造血干细胞捐献志愿者在受邀参加县卫生局举行的欢送仪式后，乘专车赴长沙为两名血液病患者捐献造血干细胞。
伍爱辉和欧江勇都是中华造血干细胞资料库的志愿捐献者，今年1月10日、5月4日，两名自愿者的HLA分型资料历经了初配、高配、体检等程序后，均符合捐献条件。据悉，HLA造血干细胞血型匹配成功率极低，该县今年一次同时产生两名捐献者在全省尚属首例。 -
造血干细胞低温保存与复温操作规程（讨论稿）
低温保存造血干细胞的效果受诸多因素的影响，如温度、降温速率、细胞含量、低温保护剂、解冻复温过程、保存时间以及检测指标，由于各研究中心之间所用方法存在一定差异，导致结果可比性差，循证力度较弱。因此至今为止，国内尚无相关操作指南，国外也只有欧洲的国际细胞治疗学会和血液及骨髓移植组联合认证委员会指南。作者结合自身多年血细胞低温保存工作经验和各种文献，起草了适用于医院小型低温保存库的操作规程，供同行参考，并期待大家批评指正。
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糖尿病对多发性骨髓瘤造血干细胞动员及骨髓巨噬细胞极化的影响
目的：研究2型糖尿病（ T2DM）对多发性骨髓瘤干细胞动员效果的影响及机制。方法收集行造血干细胞（hematopoietic stem cells，HSCs）动员采集的多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）患者48例，其中合并糖尿病（ DM）的MM患者15例，不合并DM的MM患者33例；男29例，女19例；中位年龄55.2（41～63）岁。观察2组采集的CD34＋细胞数量有无差异，检测2组骨髓CD11c阳性与CD206阳性细胞数，以2者比值即CD11 c／CD206数值代表骨髓巨噬细胞M1型／M2型，进一步探讨巨噬细胞极化状态与采集的CD34＋细胞数量的相关性。结果①MM患者采集CD34＋细胞数目为（4.63±1.75）×106／kg，合并DM的MM患者采集CD34＋细胞数目为（3.12±1.84）×106／kg，MM组采集的CD34＋细胞数目明显高于合并DM的MM患者组（P＜0.05）。②MM患者CD11c／CD206细胞比值为1.42±0.16，合并DM的MM患者CD11c／CD206细胞比值为3.08±0.37，提示合并DM的MM患者骨髓MΦ发生M1型极化。③6例干细胞采集数＜2×106／kg的患者CD11c／CD206为2.87±0.42，14例＞2×106／kg干细胞采集数＜5×106／kg的患者CD11c／CD206为1.91±0.28，8例干细胞采集数＞5×106／kg的患者CD11c／CD206为1.48±0.25，3组差异均具有统计学意义（P＜0.05），提示巨噬细胞极化与干细胞采集数目之间可能具有相关性。结论 DM是多发性骨髓瘤干细胞动员采集的不利因素，其作用可能与DM促使骨髓巨噬细胞M1极化有关。
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补肾中药诱导干预骨髓间充质干细胞成骨分化研究进展
干细胞是一种具有自我更新,高度增殖和多向分化潜能的细胞.骨髓组织中有两种干细胞,即造血干细胞和骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSCs),后者早期称为克隆形成单位成纤维细胞(colony-forming-units fibroblasts,CFU-F)或骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs).BMSCs在体外的概念是指能够快速贴壁,容易克隆和持续扩增的骨髓来源的细胞.
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rhTPO联合大剂量激素冲击治疗一例儿童阵发性睡眠性血红蛋白尿的疗效分析
阵发性睡眠性血红蛋白尿症(paroxysmal nocturnal hemoglobinuria,PNH)是一种罕见的后天获得性造血干细胞获得性基因突变使糖化肌醇磷脂连接细胞表面的锚连蛋白缺乏,对补体敏感性异常增高引起的一种慢性血管内溶血性疾病.临床表现主要有血管内溶血、骨髓衰竭和反复血栓形成.此病主要发生在成人,儿童少见[1,2].
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程序降温冷冻保存自体造血干细胞移植治疗恶性血液病
目的探讨程序降温冷冻保存对造血干细胞活性的影响.方法临床观察比较4℃保存和深低温保存两组自体造血干细胞移植患者的造血恢复时间,同时采用台盼蓝拒染法与流式细胞仪Annexin-V/PI标记法检测两组造血干细胞的活性.结果深低温保存移植组移植后血小板上升时间较4℃保存移植组缓慢(但P＞0.05),4℃保存对造血干细胞活性影响不大,深低温保存可引起造血干细胞发生大量凋亡和死亡,导致存活率明显降低.采用流式细胞仪Annexin-V/PI标记凋亡测定法检测造血干细胞活性的敏感性明显优于传统的台盼蓝拒染法.结论目前临床上应用的造血干细胞冷冻保护剂仍有较大缺陷,需开发具有抗凋亡作用的新型冷冻保护剂.造血干细胞活性检测选用流式细胞仪凋亡测定法较为可靠.
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低剂量粒细胞集落刺激因子动员健康供者造血干细胞的研究
目的 探讨低剂量(5μg·kg~(-1)·d~(-1))粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对健康供者CD_(34)~+细胞动员的效果及造血干细胞佳采集时间.方法 对2006年2月至2009年4月108例健康供者给予G-CSF 5μg·kg~(-1)·d~(-1),在动员后的第4天至第6天收集标本,检测相应时间点的外周血白细胞(WBC)计数、采集物单个核细胞(MNC)计数、采集物中CD_(34)~+细胞的比例、粒-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)培养.结果 动员后采集物中第4天至第6天CD_(34)~+细胞比例分别为(0.71±0.08)%、(1.09±0.09)%、(057±0.08)%.第4天至第6天CFU-GM产率分别为:(93.33±44.51)/105MNC、(124.61±57.85)/105MNC和(80.25±49.24)/105MNC.CD34+细胞比例和CFU-GM产率均在第5天达到峰值(P<0.05),第4天次之(P<0.05).第6天再次之(P<0.05).动员后采集物中第4天至第6天CD_(34)~+细胞量分别为(3.33±1.36)×10~6/kg、(4.14 4±1.67)×10~6/kg、(2.79±1.47)×10~6/kg,第5天达到峰值(P<0.05),第4天次之(P<0.05),第6天再次之(P<0.05).108例供者采集2次(第4天、第5天)均可满足移植标准.所有供者均无严重不良反应发生.结论 单一低剂量G-CSF能够有效动员健康供者造血干细胞.动员后于第4、第5天行干细胞采集优于第5、第6天.
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异基因外周血造血干细胞移植联合骨髓移植治疗白血病30例
目的 观察异基因外周血干细胞移植联合骨髓移植对白血病的疗效.方法 白血病患者30例,平均年龄32.6岁,其中急性髓细胞白血病(AML)11例,急性淋巴细胞白血病(ALL)14例,慢性粒细胞白血病(CML)5例,供者均为HLA相合同胞,动员方案为每天G-CSF 5 μg/kg,共5 d,并于外周血干细胞回输当天采集供者骨髓300 ml回输;预处理方案采用Bu/Cy,移植物抗宿主病(GVHD)预防采用环孢素A(CsA)联合甲氨蝶呤(MTX)、吗替麦考酚酯(MMF).结果 回输外周血单个核细胞(5.13±2.6)×108/kg,骨髓单个核细胞(1.3±0.6)×10B/kg,30例患者均成功植活,其中中性粒细胞>0.5 x 109/L的时间为(12.1±3.25)d,血小板>0.5×109/L的时间为(14.0±5.33)d;Ⅰ～Ⅱ度aGVHD发生率为40.0%(12/30),Ⅲ～Ⅳ度发生率3.3%(1/30),cGVHD发生率为43.3%(13/30),严重cGVHD发生率为3.3%(1/30);2年无病生存率达72.0%.结论 异基因外周血造血干细胞移植联合骨髓移植是治疗白血病的有效方法,并有可能减少重度急、慢性GVHD的发生.
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41例骨髓增生异常综合征诊断分析
骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome，MDS)属异质性恶性克隆性血液病，不仅有造血干细胞异常，而且有造血基质细胞和微环境的缺陷及功能异常。我院自1994年1月—2001年7月收治41例，现分析如下。……
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羟基喜树碱联合方案治疗慢性粒细胞白血病加速期／急变期10例
慢性粒细胞性白血病(CML)是一种起源于多能造血干细胞的血液系统恶性疾病。临床根据其进展情况分为慢性期(CP)、加速期(AP)和急变期(BC)，CML一旦进入AP和BC后疗效很差。我们试用国产羟基喜树碱联合VP(16)治疗10例CML的AP和BC患者，效果较好，现报告如下。……
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结核后骨髓增生异常综合征5例临床分析
骨髓增生异常综合征是一种异常造血干细胞衍生的恶性克隆性疾病.主要表现为外周血中血细胞减少,无效血生成以及病态造血等.目前MDS的发病原因尚不十分清楚,多认为与免疫异常有关.我院5年间共收治MDS123例,其中5例为结核病后发病,现报告如下.
