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高效液相色谱法测定藤茶中二氢杨梅素和杨梅素含量
目的:建立以高效液相色谱法同时测定藤茶中二氢杨梅素和杨梅素含量的方法.方法:采用高效液相色谱法.色谱柱为SUPELCO Discovery C18 HPLC Column (25cm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-0.03％磷酸溶液,采用梯度洗脱,流速为0.8mL·min1-,杨梅素和二氢杨梅素检测波长分别为373nm和290nm.结果:藤茶中二氢杨梅素和杨梅素分别在0.15～94.0mg·L-1(R2=1)和0.62～77.50 mg·L-1(R2 =0.999 7)浓度范围内有良好线性关系;平均加标回收率分别为89.7％、93.5％,RSD＜4.5％.结论:该法简便、快速、准确,可用于藤茶的质量标准研究及其质量控制.
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二氢杨梅素-锌配合物的合成及其体外抗肿瘤作用
目的:合成二氢杨梅素金属锌配合物,并对其体外抗肿瘤活性进行初步研究.方法:以二氢杨梅素为配体合成其金属配合物,利用紫外光谱、红外光谱对配合物进行表征.采用MTT,RT-PCR方法对其体外抗肿瘤活性进行考察.结果:二氢杨梅素金属锌配合物成功合成;MTT显示细胞凋亡率,随配合物作用时间,浓度增加而增加;RT-PCR显示caspase-3随配合物浓度增加而上调,bcl-2基因表达随配合物浓度增加而下调.结论:配合物显示了较强的抗肿瘤活性.有关配合物的研究有待进一步深入.
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复方藤茶降脂颗粒提取工艺的实验研究
目的:优选复方藤茶降脂颗粒的提取工艺,为今后的新药研究提供实验依据.方法:以出膏率与二氢杨梅素与荷叶碱的提取率为考察指标,采用正交试验法优选佳提取工艺参数.结果:佳提取工艺为加10、8、8倍量90％乙醇回流提取3次,每次1h、0.5h、0.5h.结论:研制优选的复方藤茶降脂颗粒提取工艺技术路线合理可行,为进一步开发中药藤茶降脂颗粒奠定了基础.
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二氢杨梅素在大鼠体内的药动学研究
目的:建立大鼠血浆中二氢杨梅素(DMY)的定量检测方法,并用于其药动学研究.方法:大鼠经单剂量灌胃方式给药后,不同时间点断头取血.血样经乙酸乙酯萃取后,采用反相高效液相-紫外检测法,以乙腈-0.1％磷酸为流动相进行梯度洗脱,在波长292nm检测,以二氢杨梅素/卡马西平峰高比定量.结果:二氢杨梅素和内标与血浆中杂质能完全分离;在标准曲线线性范围(20～1000μg/L)内线性关系良好,所得回归方程r=0.9999,检测限为20μg/L,定量下限为40μg/L.日内及日间精密度RSD分别为0.94％～9.1％、5.5％～5.9％,准确度RE为5.5％ ～9.1％,相对回收率为89.5％～104％.大鼠灌胃给予二氢杨梅素的血浆药物浓度-时间曲线符合二室模型.结论:本方法灵敏、准确,符合生物样品分析指导原则的方法学要求,适用于二氢杨梅素在大鼠体内的药动学研究.
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二氢杨梅素的生物活性研究进展
文章利用较多文献资料综述了二氢杨梅素抗氧化、抗菌消炎、护肝、调节血糖血脂及对平滑肌的作用,较为系统地阐述了其生物活性的研究进展.
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二氢杨梅素与糖尿病肾病的研究进展
二氢杨梅素(dihydromyricetin,DHM)是一种葡萄科属的植物,主要活性成分是黄酮类化合物.黄酮类化合物在藤茶中含量丰富,又称长寿藤,因是蛇葡萄科植物的提取物,所以又将其称为蛇葡萄素.近年来,DHM具有的降血糖、抗氧化、抗炎、抗肿瘤及护肝等作用已被科学家们用多种方式证实.其中一些研究证明DHM在糖尿病肾病的发生发展过程中也发挥一定的作用,但其具体机制还未完全阐述清楚.
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二氢杨梅素对肝癌细胞黏附、侵袭及迁移的抑制作用及机制
目的:研究二氢杨梅素(DHM)对肝癌细胞黏附、侵袭和迁移能力的影响及其可能机制.方法:用不同浓度DHM处理肝癌MHCC97L细胞后,分别检测细胞的黏附能力、迁移与侵袭能力,以及E-cadherin、MMP-2、MMP-9和VEGF蛋白表达.结果:与空白对照细胞比较,DHM处理后的MHCC97L细胞黏附力明显降低、侵袭与迁移力明显减弱(均P＜0.05);E-cadherin表达明显上调,而MMP-9、VEGF蛋白表达明显下调的水平(均P＜0.05),但MMP-2蛋白的表达无明显改变(均P＞0.05).结论:DHM可能通过调控E-cadherin、MMP-9和VEGF蛋白的表达抑制肝癌细胞的黏附、迁移和侵袭.
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二氢杨梅素通过抑制ADAM 17影响乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的研究
目的 探究二氢杨梅素(DHM)通过抑制ADAM 17对乳腺癌细胞MCF?7增殖和凋亡的影响及其发生机制.方法 采用DHM对人乳腺癌MCF?7细胞进行干预,MTS分析细胞的增殖抑制率,流式细胞仪分析细胞的凋亡率,Western blot检测干预后细胞内ADAM17、JAK2和STAT3的表达.结果 40 nmol·L?1 DHM可显著抑制MCF?7细胞的增殖(P<0.05),干预24 h、48 h、72 h后,细胞增殖抑制率分别为(19.72±2.23)％、(69.35±2.41)％、(87.29±2.92)％,组间差异有统计学意义(P<0.05).40 nmol·L?1 DHM可显著促进MCF?7细胞凋亡(P<0.05),干预24 h、48 h、72 h后,细胞凋亡率分别为(5.02±0.13)％、(9.37±0.21)％、(13.25±0.33)％,组间差异有统计学意义(P<0.05);40 nmol·L?1 DHM干预后,细胞内ADAM17、JAK2和STAT3表达水平显著降低(P<0.05).结论 DHM可有效抑制乳腺癌细胞MCF?7增殖并促进其凋亡,其机制与下调ADAM17、JAK2和STAT3的表达相关.
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二氢杨梅素含片在实验兔体内的药物代谢动力学研究
目的 研究2个不同剂量的二氢杨梅素含片在实验兔体内的药物代谢动力学.方法 实验兔按500、1000 mg/只口腔给药后,HPLC-UV法测定血药浓度,采用DAS 3.0软件拟合药动学参数.结果 500、1000 mg/只剂量下的t1/2分别为:(3.37±2.51)h和(3.08±3.52)h;AUC0～t分别为:(329.76±174.48) μg·h·L-1和(407.99±369.87) μg·h·L-1;AUC0～∞分别为:(471.04±305.25)μg·h·L-1和(607.16±511.45) μg·h·L-1;Cmax分别为:(131.37±81.57) μg·L-1和(113.45±82.01)μg·L-1;tmax分别为(2.67±1.21)h和(4.50±3.02)h.2个剂量组间的t1/2无明显差别,Cmax未见与剂量相关的差异.AUC、tmax随剂量的增加有增加的趋势,但AUC的增加与剂量增加不成比例关系,这可能与含片在动物口腔内给药后的崩解速度有关.结论 本实验模拟人临床给药方式,对二氢杨梅素含片在实验兔体内的药动学过程进行了研究,为临床用药提供了一定的实验参考.
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二氢杨梅素对兔复发性口腔溃疡模型的作用
目的 研究二氢杨梅素(DMY)对兔复发性口腔溃疡(ROU)的作用.方法 采用同种异体口腔黏膜匀浆与弗氏完全佐剂制成的免疫抗原,给兔脊柱两侧多点皮内免疫注射,2周1次,注射5次,制备ROU模型.第5次免疫注射后7d,口腔黏膜表面给DMY 4 d；末次给药后次日,取口腔黏膜做组织病理学检查,取血清测MDA含量和SOD活性,取血浆测TXB2、6K-PGFlα含量,分离淋巴细胞测CD4+和CD8+细胞数.结果 兔ROU模型口腔黏膜发生炎症、坏死、溃疡等病理改变,血清SOD活性、血浆6K-PGFlα含量和CD4+数量降低,血清MDA、血浆TXB2含量和CD8+数量升高.DMY(75 mg·kg-1)能使兔ROU模型口腔黏膜病理改变明显减轻；升高血清SOD活性,减少MDA生成；降低血浆TXB2含量(T)、升高6K-PGFlα含量(P),使T/P比值降低；升高CD4+细胞数,降低CD8+细胞数,使CD4+/CD8+比值增加.结论 DMY可能通过调节T淋巴细胞亚群活性、血管舒缩物质水平和抗氧化损伤而对兔复发性口腔溃疡产生作用.
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二氢杨梅素心血管保护作用的研究进展
二氢杨梅素是藤茶中主要的黄酮类化合物,不仅具有抗氧化、抗肿瘤、降血糖、抗菌消炎、解酒保肝的药理活性,还具有调血脂、抗血栓和防治动脉粥样硬化的作用.本文综述了二氢杨梅素的心血管保护作用和机制,为其进一步的开发与临床应用提供参考.
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二氢杨梅素药理研究进展
二氢杨梅素为3,5,7,3′,4′,5′-六羟基-2,3-双氢黄酮醇(dihydromyricetin;DMY),又名蛇葡萄素(ampelopsin),是一种重要的黄酮类化合物,存在于葡萄科、杨梅科、杜鹃科、藤黄科、大戟科及柳科等植物中,在葡萄科植物中大量存在.显齿蛇葡萄Ampelopsis grossedentata的幼嫩茎叶中DMY含量高达38%[1],粤蛇葡萄Ampelopsis cantoniesis(Hook.et Arn.)planch.又名无刺,幼嫩茎叶中DMY含量达25%以上[2].近几年来,国内外学者对DMY的生物活性进行了研究,发现DMY具有多种药理作用.
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藤茶中二氢杨梅素β-环糊精包合物制备工艺研究
目的 研究二氢杨梅素β-环糊精包合的佳工艺.方法 运用紫外分光光度计,采用正交实验法,以包合温度、包合时间、β-环糊精与二氢杨梅素的比例为考察因素,以二氢杨梅素包合率为指标,优选包合的佳工艺.结果 β-环糊精包合二氢杨梅素的佳制备工艺为:包合温度为70℃,包合时间为60 min,β-环糊精与二氢杨梅素为1:2.5.结论 优选的β-环糊精包合工艺简单,方便实用.
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尤溪县不同地区藤茶黄酮含量及其质量评价
藤茶是葡萄科蛇葡萄属中的显齿蛇葡萄(AmpeLopsis grossedentata) (Hand-Mazz) W.T.Wang的嫩茎叶[1],主要分布在湖南、湖北、广东、广西、江西、福建、云南、贵州等省区[2].尤溪县地处戴云山脉北段西部,地貌以中低山地为主.境内东西山岭耸峙,丘陵起伏,千米山峰林立,山间盆地错综;中部尤溪河谷斜贯南北.各地海拔差异较大,高峰大模山海拔1472米,低处尤溪口码头闽江江面海拔仅31米.尤溪县地貌差异较大,主要有有四大类型:山地、丘陵、山间盆地、河谷平原.本文采用紫外分光光度法(UV),以二氢杨梅素为指标性成分,对藤茶中总黄酮进行含量测定.
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二氢杨梅素对丙泊酚麻醉引起的大鼠认知功能障碍的影响及机制
二氢杨梅素(DMY)具有神经保护作用.本研究观察DMY对丙泊酚诱导的大鼠认知功能障碍的影响,并从小胶质细胞极化的角度探讨其机制.10周龄SD大鼠先进行腹腔注射丙泊酚(100 mg/kg)一次,然后灌胃给药DMY(每天200 mg/kg),共7天.Morris水迷宫测试发现DMY改善了丙泊酚诱导的认知功能障碍,Western blot分析发现DMY下调了丙泊酚诱导的大鼠海马组织中CD68和iNOS的表达,而上调海马组织中Arg1的表达.ELISA法检测发现DMY降低丙泊酚诱导的大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-6的水平,而增加IL-4和IL-10的水平(均P<0.05).本研究结果阐明DMY改善了丙泊酚麻醉引起的大鼠认知功能障碍,其机制可能与调节小胶质细胞极化有关.
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二氢杨梅素对裸鼠腹腔移植人胃癌细胞中 Caveolin-1表达的影响
目的 观察二氢杨梅素(DMY)对裸鼠腹腔移植人胃癌细胞生长的抑制作用及对腹腔瘤组织中Caveolin-1表达的影响.方法 复制人胃癌腹腔移植的裸鼠模型.将复模成功的24只裸鼠随机分为4组,即移植瘤模型组,DMY低、中及高剂量处理组.分别观察荷瘤裸鼠的腹腔移植瘤的生长和成瘤情况,测量肿瘤的重量、长短径并计算肿瘤的体积.采用免疫组织化学法和Western blot检测人胃癌腹腔移植瘤腹腔瘤体中Caveolin-1和Ki67的表达.结果 与移植瘤模型组比较,100和200 mg/(kg·d)DMY中、高剂量组腹腔移植瘤成瘤个数,腹腔瘤体的重量及腹腔瘤体的体积均降低,呈现剂量依赖性(P<0.05),裸鼠的食欲、活动情况和精神状态等一般情况改善.与移植瘤模型组比较,100和200 mg/(kg·d)DMY中、高剂量组腹腔移植瘤体表达Caveolin-1的阳性细胞百分率和Caveolin-1的蛋白表达水平均增加,呈现剂量依赖性(P<0.05);而Ki67的阳性细胞百分率和Caveolin-1的蛋白表达水平均降低,也呈现剂量依赖性(P<0.05).结论 二氢杨梅素以剂量依赖的方式抑制人胃癌腹腔移植瘤的生长,其作用机制可能与上调Caveolin-1的表达有关.
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二氢杨梅素调控自噬抑制氧化低密度脂蛋白诱导人脐静脉内皮细胞损伤的研究
目的 观察二氢杨梅素(DMY)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的影响,并探讨自噬在其中的作用.方法 DMY(0.01、0.10、1.00和10.00μmol/L)预处理HUVECs 2 h,用100.0 mg/L ox-LDL继续培养细胞24 h.以辛伐他汀作为阳性对照组.采用噻唑蓝法检测细胞活力,Hoechst 33258染色观察细胞核形态,透射电镜观察自噬体,Western blot检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin-1和p62/SQSTM1的表达,观察自噬抑制剂对DMY作用的影响.结果 与对照组比较,ox-LDL组细胞的存活率降低(<0.05),细胞核呈集中高强度蓝色荧光,固缩致密浓染或碎块状致密浓染,颜色发白,细胞核较小,形态不规则,自噬体和自噬溶酶体数量增加;Beclin-1、LC3-Ⅱ的表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值上调,而p62的表达下调(<0.05).与ox-LDL组比较,0.1、1.0和10.0μmol/L DMY预处理组细胞存活率均升高;细胞核荧光强度降低,核固缩致密浓染和碎块状致密浓染减少,形态较规则;1.0μmol/L DMY预处理组的自噬体和自噬溶酶体数量增加;Beclin-1、LC3-Ⅱ的表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值上调,而p62的表达下调(<0.05).自噬抑制剂3-MA部分抵消DMY抑制ox-LDL诱导的HUVECs存活率降低(<0.05).结论 DMY能抑制ox-LDL诱导的HUVECs损伤,其机制与诱导自噬有关.
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二氢杨梅素对PC12细胞氧化损伤的保护及机制研究
目的:探讨二氢杨梅素(Dihydromyricetin,DMY)对硝普钠(SNP)诱导的PC12细胞氧化损伤的保护作用及机制.方法:建立硝普钠诱导的PC12细胞氧化损伤模型,采用噻唑蓝(MTT)比色法及Hoechst染色法考察二氢杨梅素对PC12细胞活力的影响;DCFH-DA荧光探针检测细胞间活性氧(ROS)的含量;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测Akt和ERK1/2的磷酸化水平.结果:MTT显示硝普钠剂量依赖性损伤PC12细胞,而二氢杨梅素可保护硝普钠所致的细胞损伤.ROS结果表明二氢杨梅素能显著降低硝普钠诱导的活性氧增加.丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂PD98059和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂LY294002可抑制二氢杨梅素对硝普钠诱导细胞损伤的保护作用.Western blot结果显示LY294002和PD98059可分别抑制二氢杨梅素对Akt和ERK1/2的磷酸化作用.结论:二氢杨梅素对硝普钠诱导的PC12细胞损伤具有显著的保护作用,这一作用可能是通过上调Akt和ERK1/2的活性来介导的.
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藤茶中二氢杨梅素的含量测定
应用薄层扫描法测定藤茶中二氢杨梅素的含量,回收率为98.5%,RSD为1.6%,该法准确可靠.
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藤茶中二氢杨梅素含量变异研究进展
藤茶是近年来研究较多的药食两用植物资源之一,湖南省、福建省、广西壮族自治区等地方中药材标准均有收载.藤茶的主要功效成分为二氢杨梅素,其含量受到很多因素的影响.该文对文献资料进行归纳总结,从产地、栽培、采收期、采收部位、加工、提取方法等方面阐述多种因素与二氢杨梅素含量变异的关系,以期为二氢杨梅素的进一步开发利用提供依据.
