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HPLC法测定藤茶的二氢杨梅素含量
目的 测定藤茶的二氢杨梅素含量.方法 采用高效液相色谱法,色谱柱:迪马C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.05％磷酸溶液(35∶65);流速:0.8 mL/min;柱温:30℃;检测波长:290 nm;进样量:5μL.结果 二氢杨梅素在1.31～6.55 μg呈现良好的线性关系,样品溶液在24 h内稳定,平均加样回收率为96.93％.结论 HPLC法精密度高,重复性较好.
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HPLC法测定闽产显齿蛇葡萄中二氢杨梅素的含量
显齿蛇葡萄A mpelopsis grossedentata (Hand-Mazz) W.T.Wang是葡萄科蛇葡萄属的一种野生藤本植物,分布于福建、广西、广东、云南等省,又称藤茶.全株药用,味甘、淡,性凉,具有清热解毒、祛风湿、强筋骨的功效.民间常用显齿蛇葡萄幼嫩茎叶经过类似茶叶加工的方法制成保健茶,用于治疗风热感冒、咽喉肿痛、黄疸型肝炎、急性结膜炎,痈疖等[1].药理研究表明显齿蛇葡萄具有抗氧化、抗菌、保肝、降血脂、降血糖、抗炎、镇痛、抗肿瘤的作用[2].显齿蛇葡萄主要成分为黄酮类成分,其黄酮类成分中二氢杨梅素含量高,我们通过采集福建省尤溪县不同海拔、不同部位的显齿蛇葡萄测定其二氢杨梅素含量,为闽产显齿蛇葡萄的开发利用提供实验依据.
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二氢杨梅素稳定性影响因素及抑菌活性研究进展
二氢杨梅素是藤茶主要活性成分,资源丰富,有广泛的药理活性,具有良好的应用前景.但其稳定性差,容易受多种因素影响而易被氧化,故本文对二氢杨梅素稳定性影响因素进行综述,为提高二氢杨梅素的有效利用提供依据,同时对其抑菌活性进行简述.
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HPLC法测定保健食品中二氢杨梅素的研究
目的:建立保健食品中二氢杨梅素的检测方法.方法:藤茶中黄酮类成分以二氢杨梅素含量为高[1],本文以二氢杨梅素为对照品,采用反相高效液相色谱法(HPLC法)对藤茶类保健食品进行了二氢杨梅素的含量测定.结果:平均回收率为100.6%,RSD=3.11%.结论:该方法简便、可靠、准确,可作为藤茶类保健食品中黄酮类功效成分单体的测定方法.
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藤茶中黄酮类成分的功效研究进展
藤茶是葡萄科蛇葡萄属植物的嫩茎叶,既可以泡茶饮用,又具有很好的保健功效,具有祛瘀消肿、疏风解毒、降血压、降血糖功效,目前已作为新资源食品使用.藤茶含有丰富的多酚和黄酮类物质,尤其以黄酮类中的二氢杨梅素含量高,被认为是藤茶保健作用的重要物质基础,相关作用与机制的研究正在开展.主要对藤茶的化学成分(黄酮类、多糖类、酚类等)、功效作用(抗氧化、抑菌、保肝、抗病毒等)及其机制进行综述,以为其综合利用及全面开发提供科学依据.
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正交法优选二氢杨梅素微囊的制备工艺
目的 选出较优二氢杨梅素微囊的制备工艺.方法 利用正交实验设计优化二氢杨梅素微囊制备工艺,采用高效液相色谱法测定二氢杨梅素含量并计算包封率.结果 单凝聚法制备二氢杨梅素微囊的佳工艺为:药胶比1∶3,明胶溶液浓度4％,搅拌速度60 r/min,成囊温度50℃.结论 单凝聚法制备二氢杨梅素微囊方法操作简单,方便易行.
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二氢杨梅素对戊巴比妥钠致小鼠催眠作用的影响
目的 观察二氢杨梅素对戊巴比妥钠致小鼠催眠作用的影响.方法 将小鼠随机分为二氢杨梅素125 mg/kg组、250 mg/kg组、500 mg/kg组,西咪替丁组和蒸馏水组,观察二氢杨梅素对戊巴比妥钠致小鼠催眠作用的影响,并考察其对小鼠中枢的直接作用以及多次给二氢杨梅素后致小鼠催眠作用的影响.结果 二氢杨梅素各剂量组,西咪替丁组和蒸馏水组比较.能显著延长戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间,缩短潜伏期;二氢杨梅素对小鼠中枢无直接作用.结论 二氢杨梅素可延长戊巴比妥钠的作用,作用机理可能与抑制细胞色素P450,抑制戊巴比妥钠的代谢有关.
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藤茶涂膜剂制备工艺及含量测定研究
目的 制备具有良好性质的外用藤茶涂膜剂,对主要活性成分的含量进行测定.方法 以外观性状、流动性、膜韧性、黏度等指标,单因素考察膜材、辅料用量,并在考察基础上进行正交试验优化处方;采用C18(250mm×4.6mm,5um)柱,以甲醇-0.05％磷酸为流动相梯度洗脱,流速1ml/min,检测波长291 nm、375nm.结果 正交试验得到以5％PVA124、4％甘油、40％乙醇的处方制备的涂膜剂具有良好性质;双氢杨梅素和杨梅素分别在0.0992～0.5952μg(r=0.9993)和0.0148～0.0888μg(r=0.9994)范围内与峰面积呈良好线性关系;低、中、高3水平平均加样回收率结果,双氢杨梅素分别为103.0％、103.3％、102.8％,RSD分别为1.6％、1.1％、1.9％(n=9),杨梅素分别为97.1％、99.7％、99.1％,RSD分别为1.8％、0.6％、0.5％(n=9).结论 该方法制备的藤茶涂膜剂具有良好性质且质量可控.
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二氢杨梅素对高脂诱导动脉粥样硬化兔自噬相关蛋白表达的影响
目的:探讨二氢杨梅素对高脂诱导动脉粥样硬化(AS)兔主动脉弓自噬相关蛋白表达的影响,以阐明其抗AS的分子机制.方法:24只健康雄性新西兰兔随机分为对照组、高脂组、高脂+低剂量(10mg·kg-1·d-1)二氢杨梅素组和高脂+高剂量(40 mg·kg-1·d-1)二氢杨梅素组.高脂组给予高脂饲料,高脂+低二氢杨梅素组给予高脂饲料同时每天灌胃二氢杨梅素.24周后处死动物,检测血脂水平,取胸主动脉行苏丹Ⅳ染色检测斑块面积,颈总动脉石蜡切片,HE染色观察病理形态学变化,Western blot检测胸主动脉中自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin-1和p62/SQSTM1的表达.结果:与对照组比较,高脂组的血清HDL、LDL、TC和TG水平均显著升高(均P＜0.05),胸主动脉管壁内表面呈弥漫性隆起,形成明显AS斑块,AS斑块区域占血管内膜总面积的百分比与对照组相比显著增加(P＜0.01),颈总动脉内膜增生,结构不完整,管腔形成明显AS斑块,斑块中大量泡沫细胞和脂质沉积,血管内中膜界限不清楚.高脂组兔主动脉弓中的Beclin-1、LC3-Ⅱ的表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值均显著降低(均P＜0.05),而p62的表达显著上调(P＜0.05).与高脂组比较,高脂+高剂量二氢杨梅素组的血清HDL、LDL和TC水平均显著降低(均P＜0.05),胸主动脉管壁内表面隆起减少,AS斑块区域占血管内膜总面积的百分比显著降低(P＜0.01),总颈动脉AS病变程度明显减轻,主动脉弓中的Bec-lin-1、LC3-Ⅱ的表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值均显著增加(均P＜0.05),而p62的表达显著下调(P＜0.05).高脂+低剂量二氢杨梅素组上述指标与高脂组比较差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论:二氢杨梅素能抑制高脂诱导新西兰兔AS的形成,其机制与促进细胞自噬有关.
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二氢杨梅素对人乳腺癌细胞MDA-MB-231的体外抗增殖作用
0引言二氢杨梅素( dihydromyricetin,DMY),化学名为3,5,7,3'4'5'-六羟基-2,3双氢黄酮醇,是从藤茶(Ampelopsis grossedentata)等植物茎叶中提取的一种二氢黄酮醇化合物.研究表明DMY具有抗氧化、镇痛、止咳、广谱抑菌、保肝护肝、降血糖、降血脂、增强人体免疫力等多种生理活性[1],且安全低毒.从体外细胞毒抑制实验结果看,二氢杨梅素对人乳腺癌MCF-7细胞、鼻咽癌HK-1细胞、人肝癌Bel-7402细胞、白血病HL-60、K562细胞和肺癌H1299细胞[2-4]都有较强的抑制作用.
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冷却结晶法纯化二氢杨梅素的工艺
目的 建立一种工艺简单,操作方便,适合工业化结晶纯化二氢杨梅素的方法.方法 考察冷却结晶工艺中关键参数如温度、乙醇浓度、活性炭用量、吸附时间等对二氢杨梅素收率、纯度的影响.高效液相色谱法和薄层色谱法验证其纯度,紫外-可见分光光度法测定溶解度与温度和乙醇用量关系,高效液相色谱法测定含量,粉末X射线衍射法和热分析确定晶型.结果 乙醇浓度小于10％,溶剂温度大于85℃,活性炭用量为0.1％～0.3％,吸附时间为1～3 min时,重结晶所得二氢杨梅素收率大于70％,含量大于98％,晶型不变.结论 采用水为溶剂进行结晶纯化,应严格控制温度,温度骤降会导致产率急剧下降,加入10％乙醇即能大幅提高产率,工艺稳健,产率受温度影响较小.
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二氢杨梅素自乳化系统的设计与质量评价
目的：设计并优化二氢杨梅素自乳化系统制剂工艺，并对其质量进行评价。方法测定二氢杨梅素在不同油相、乳化剂及助乳化剂中的溶解度，采用三元相图法和正交设计实验，以乳化速度、粒径、载药量为指标进行综合评分，优化并筛选出佳处方。结果二氢杨梅素自乳化制剂佳处方及比例油酸聚山梨酯-80司盘-80正丁醇=1514714。结论优化的二氢杨梅素自乳化系统明显改善二氢杨梅素的溶解性能，性质稳定，提高二氢杨梅素在人工胃液中的溶出度。
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二氢杨梅素对湿性年龄相关性黄斑变性的影响
目的:探讨二氢杨梅素(DMY)对漫性年龄相关性黄斑变性(AMD)的影响.方法:用532 nm激光对成年日本大耳白兔眼底进行光凝,创建AMD模型.光凝4周后,DMY(100 mg·kg-1·d 1)灌胃给药,酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血中血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)水平;实验结束时,苏木精-伊红染色法检测脉络膜新生血管(CNV);解剖实验动物,分别计算肝脏、肾脏和脾脏指数.结果:给药4周,模型组外周血VEGF降低幅度为63.3％,而模型对照组降低幅度为48.6％;给药8周,模型组外周血VEGF降低幅度为46.7％,模型对照组降低幅度为20.1％.给药4周,模型组外周血PEDF降低幅度为55.9％,而模型对照组降低幅度为58.6％;给药8周,模型组外用血PEDF降低幅度为12.1％,模型对照组降低幅度为53.1％.给药8周,模型对照组可见明显CNV,而模型给药组未见明显CN V;模型给药组肝脏指数和脾脏指数明显低于模型对照组(P=0.147和P=0.223),模型给药组肾脏指数与模型对照组没有明显差异(P=0.874).结论:DMY具有一定的抑制湿性AMD模型日本大耳白兔CNV生长的药理作用,其作用机制可能与其下调VEGF的表达、上调PEDF表达和益气活血、健脾疏肝有关.
关键词： 二氢杨梅素 湿性年龄相关性黄斑变性 脉络膜新生血管 -
二氢杨梅素对衰老模型小鼠的改善作用
目的:研究二氢杨梅素对衰老模型小鼠的改善作用.方法:将50只小鼠随机分为正常组、模型组和二氢杨梅素(250,500,1 000mg·kg-1)给药组,皮下注射S％D-半乳糖,注射量为25 mL·kg-1,每天1次,连续42 d复制小鼠衰老模型.造模同时给药,各组小鼠分别给予相应剂量的二氢杨梅素,连续42 d.末次给药后2h对小鼠学习记忆能力进行测定,然后测定小鼠脑组织丙二醛(MDA)、脂褐素(LF)含量与超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.结果:与正常组相比,模型组学习记忆能力出现显著下降(P＜0.01),MDA、LF水平显著升高(P＜0.01),SOD和GSH活性显著降低(P＜0.01).与模型组相比,给予二氢杨梅素后,小鼠学习记忆能力显著提高(P＜0.01),MDA、LF水平显著降低(P＜0.01),SOD和GSH活性显著升高(P＜0.01).结论:二氢杨梅素能够有效提高机体的抗衰老能力,其机制可能是与二氢杨梅素提高机体的抗氧化能力有关.
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二氢杨梅素对小鼠移植性肉瘤S180化疗的增效减毒作用
目的:探讨二氢杨梅素(dihydromyricetin,DMY)联合阿霉素对小鼠移植性肉瘤的抑制效果.方法:建立小鼠移植性肉瘤模型,观察DMY和阿霉素处理后各组小鼠移植瘤大小和体重变化.结果:DMY治疗组具有抑制小鼠移植性肉瘤生长的作用,100mg·kg-1的DMY治疗组的抑瘤率为48.6％ (P＜0.05);2 mg· kg-1的阿霉素治疗组的抑瘤率为64.4％,而2mg·kg-1的阿霉素联合100 mg·kg-1的DMY治疗组的抑瘤率为75.4％ (P＜0.01).DMY对阿霉素诱导小鼠血清中乳酸脱氢酶(UDH)和谷草转氨酶(AST)增加有明显的抑制作用(P＜0.05).结论:DMY和阿霉素对小鼠移植性肉瘤生长均有明显的抑制作用;DMY能增加阿霉素的抗肿瘤作用,且能降低阿霉素诱导的心肝毒性.
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二氢杨梅素多靶点保护作用的研究进展
二氢杨梅素是一种二氢黄酮醇类黄酮化合物,在藤茶中含量高达30％,具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗高血压和肝脏保护等多种生物活性,受到医药、食品行业的广泛关注.本文综述了二氢杨梅素的多靶点保护作用,为其进一步合理开发与临床应用提出了建议与展望.
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二氢杨梅素对MDA-MB-231人乳腺癌细胞端粒酶活性的影响
目的 以两种不同的方法检测二氢杨梅素(dihydromyricetin,DMY)对端粒酶活性的影响,探讨DMY以端粒酶为药物靶点的抗肿瘤机制的可能性.方法 利用端粒重复序列扩增法(Telomeric repeat amplication protocol,TRAP)检测人乳腺癌MDA-MB-231细胞经不同浓度DMY处理后端粒酶活性的变化;实时荧光定量PCR法检测人乳腺癌MDA-MB-231细胞经不同浓度DMY处理后人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)的mRNA的表达差异.结果 MDA-MB-231细胞端粒酶呈阳性;DMY作用MDA-MB-231细胞48 h后,端粒酶活性明显下降,hTERT mRNA表达量显著降低,呈现明显浓度依赖关系.结论 对肿瘤细胞端粒酶活性的抑制可能是DMY抗肿瘤作用机制之一.
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二氢杨梅素对顺铂肾损伤的保护作用
目的 探讨二氢杨梅素(Dihydromyricetin,DMY)对顺铂(Cisplatin,CIS)致肾损伤的保护作用.方法 将昆明种小鼠(小鼠)分为生理盐水对照组(CK组)、100 mg/kg·d-1二氢杨梅素组(DMY组)、2mg/kg·d-1顺铂组(CIS组)、2 mg/kg·d-1顺铂+ 100 mg/kg· d-1二氢杨梅素组(联合组),实验第24d,测定小鼠体重变化、肾脏指数(KI)、尿素氮(BUN)及肌酐(CRE)水平、肾脏组织中丙二醛(MDA)含量.结果 与CK组相比,DMY组小鼠体重前期无明显差异,后期有明显下降,KI、BUN、CRE及MDA均无显著差异；CIS组及联合给药组小鼠体重及KI显著下降,BUN、CRE及MDA均显著增加.与CIS组相比,联合组小鼠体重前期无明显差异,后期显著增加,KI有一定增加,而BUN、CRE及MDA显著降低.结论 在活体条件下DMY对小鼠CIS引起的肾损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能与DMY增强小鼠肾脏组织抗氧化能力有关.
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二氢杨梅素结构修饰研究进展
二氢杨梅素为蛇葡萄科藤茶中的有效活性成分,具有抗菌、抗氧化、抗血栓、护肝、调节血糖、血脂以及抗癌等药理活性.目前二氢杨梅素结构修饰研究主要是利用前药原理及拼合原理,改善其脂溶性和水溶性,引入一些基团以提高药效和稳定性,且也已取得了一些成果,但还有待进一步研究.对二氢杨梅素的3种结构修饰的目的及方法进行了综述.
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广西不同地区显齿蛇葡萄茎中黄酮类成分含量测定
目的:建立显齿蛇葡萄茎中黄酮成分的含量测定方法,并分析广西不同地区显齿蛇葡萄茎中二氢杨梅素及杨梅素的含量.方法:采用高效液相色谱法,安捷伦Poroshell EC-C18 (4.6mm×250.0mm,4.0μm)为色谱柱,以乙腈—0.1％磷酸为流动相,梯度洗脱,流速1mL· min-1,柱温25℃,检测波长0～23min,330nm;23～50min,375nm.结果:显齿蛇葡萄茎中二氢杨梅素和杨梅素进样量分剐在0.800 5～9.606 0μg(r=0.999 87)和0.100～1.202μg(r=0.999 72)范围内呈良好的线性关系;平均加样回收率分剐为98.1％、99.9％,RSD＜3％,方法的稳定性、重复性和精密度均良好(RSD＜3％).桂林灵川和岑溪大隆的显齿蛇葡萄茎中二氢杨梅素和杨梅素的含量均较高,武鸣双江和金秀互助村的显齿蛇葡萄茎中二氢杨梅素和杨梅素含量均较低.结论:不同地区显齿蛇葡萄茎中二氢杨梅素和杨梅素的含量相差较大.所建立的方法可较好地去除杂质,分离效果好,测定结果准确性、重复性好.
