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酶联免疫分析技术在食品检验中的应用
现如今,食品安全问题已经成为人们关注的重点话题.近年来,由于在各种原因的共同作用下,导致各种食品质量安全问题经常发生,甚至出现了食品中毒情况,从中可见食品安全问题对人及食品业产生的影响是巨大的.酶联免疫分析技术(ELISA)可以在食品微生物、食品毒素及残留农药及转基因食品检验中应用,且应用前景广泛.本文主要探讨了酶联免疫分析技术在食品检验中的应用,以期保证今后的食品安全.
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拜发分析系统销售北京有限公司产品1:RIDASCREEN(R)葡萄球菌肠毒素检测试剂盒检测技术:酶联免疫技术检测对象:葡萄球菌肠毒素适用条件:孵育时间为2小时45分钟,符合国家标准.产品性能:适宜大批样品集中检测,具有快速、操作简便、无需贵重仪器设备,且对样品纯度要求不高等特性.
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血液病毒核酸检测与酶联免疫检测比较研究
目的 对酶联免疫检测血样做NAT检测,分析酶联免疫筛查献血者血样误检的原因. 方法 对献血者血样进行HBsAg、HCVAb和HIVAb二次ElLISA筛查,阴性和阳性血样分别做NAT检测,对HBsAg阴性、HBV DNA阳性献血者做HBV两对半免疫检测和罗氏病毒含量定量测定. 结果 对二次EILISA筛查及转氨酶和螺旋体检测合格的29 852份血样进行NAT检测,其中15份HBV DNA阳性,漏检率为0.50‰,未发现HCV和HIV RNA阳性.15份HBV DNA阳性献血者乙肝两对半免疫检测,HBsAg均为阴性,7份HBsAb阳性,1份HBeAg阳性,7份HBeAb为阳性,11份HBcAb为阳性.其中1份HBsAg阴性DNA阳性血样HBV罗氏定量为2 520 IU/ml,血液存在严重传染可能.对151份二次ELISA阳性血样进行NAT检测,有83份阴性,ELISA的灵敏度为81.93%,特异度为99.72%. 结论 二次酶联免疫检测法的灵敏度较低,增加抗原、抗体检测和NAT检测可减少漏检.
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慢性萎缩性胃炎患者血清骨桥蛋白的变化
目的:探讨血清骨桥蛋白(osteopontin,OPN)水平与慢性萎缩性胃炎之间的关系.方法:慢性萎缩性胃炎患者42名,正常人38名,胃癌患者42例应用酶联免疫技术(ELISA法)检测血清OPN表达情况.结果:慢性萎缩性胃炎患者血清OPN水平(25.0±2.8μg/L)低于正常人(41.4±7.5μg/L),低于胃癌患者血清OPN水平(78.9±44.5 μg/L),三者相比差异均有统计学意义(P<0.01).血清OPN水平与慢性萎缩性胃炎患者的性别、年龄无相关性(P>0.05).结论:慢性萎缩性胃炎患者血清OPN明显下降.
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血清中血管内皮生长因子与胃癌侵袭和转移的关系
目的:检测胃癌患者术前血清中血管内皮生长因子(VEGF)浓度,探讨其与胃癌侵袭和转移的关系.方法:应用酶联免疫技术(ELISA法)检测51例胃癌患者和10名健康人血清中VEGF浓度;应用免疫组织化学技术检测胃癌组织中VEGF蛋白表达.结果:胃癌患者血清VEGF浓度高于健康对照(P<0.05),与胃癌浸润深度(P<0.05),淋巴结转移(P<0.01),远处转移(P<0.01),肿瘤分期(P<0.05)及肿瘤组织学分型(P<0.05),生长方式(P<0.05)密切相关,与性别无关(P>0.05).肿瘤组织VEGF蛋白表达阳性的患者血清VEGF浓度明显高于VEGF蛋白表达阴性的患者(P<0.05).结论:血清VEGF浓度与胃癌侵袭和转移密切相关,胃癌患者血清VEGF浓度升高是其对应肿瘤组织VEGF蛋白高表达的结果.
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ELISA法观察组织源性β-G在原发性肝内胆管结石中的变化
目的观察组织源性β-G在原发性肝内胆管结石形成中的作用.方法用高特异性单抗,采用ELISA方法检测肝组织匀浆和胆汁内的组织源性β-G.结果 PIS患者组肝细胞内β-G有轻度升高但未达到相差显著水平,胆汁内组织源性β-G与正常组比较无显著差别.结论组织源性β-G在PIS发病过程中不起主要作用.
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VEGF、EGF在再生障碍性贫血患者血清中的表达及意义
目的 检测再生障碍性贫血患者血清中血管内皮生长因子(VEGF)与表皮生长因子(EGF)的浓度,探讨VEGF和EGF在再生障碍性贫血患者血液中的表达及二者之间的关系和意义.方法 应用酶联免疫技术(ELISA法)检测20例再障患者及40名健康人血清中VEGF和EGF浓度.结果 20例再生障碍性贫血患者血清VEGF的含量为50.5±34.8pg/ml,对照组血清VEGF的含量为108.5±50.6 pg/ml,两组比较有统计学意义(P<0.05).20例再生障碍性贫血患者血清EGF含量为0.15±0.11 μg/L,40例正常对照组血清EGF含量为0.76±0.80 μg/L.结论 再生障碍性贫血患者血清VEGF、EGF浓度显著低于健康对照组,且二者呈显著正相关.
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酶联免疫技术检测乙型肝炎表面抗原的分析性能探讨
目的:本次对酶联免疫技术检测乙型肝炎表面抗原的分析性能进行探讨。方法我院收治的乙型肝炎患者87例,作为实验组同时选取87例健康志愿者,作为阴性对照组,收集所有受检者的血液样本,并进行检测。结果实验组有85例乙型肝炎为阳性,灵敏度为97.7%;对照组中,乙型肝炎阴性为85例,灵敏度为97.7%。结论酶联免疫技术检测乙型肝炎表面抗原的分析性能在分析物浓度为±20%时,检测结果可靠,并且灵敏度高,值得推广。
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应用磁分离酶联免疫技术检测T3、TT4的探讨
磁分离酶联免疫技术(magnetic antibody immnuno assay,MAIA)的固相载体为免疫磁性珠,又称磁珠(Immonumagnetic beads,IMB).IMB为免疫微球类,是一种分子生物学分离的新技术,它是利用表面修饰的磁性颗粒对生物分子或细胞的亲和结合而进行分离的方法,现已用于细胞分类、小分子交联等领域的研究[1,2].我科应用以IMB为固相载体的MAIA方法对62份血清样本进行了三碘甲状腺原氨酸(T3)和总甲状腺素(TT4)测定,现将结果报告如下.
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酶联免疫技术检测乙型肝炎表面抗原的分析
目的 研究分析酶联免疫技术对乙型肝炎表面抗原检测的效果.方法 选取2012年11月至2013年11月期间铁法煤业集团总医院接收诊断的乙型肝炎44例患者设为观察组,与同期就诊的44例健康者进行对比设为对照组.对全部患者运用酶联免疫技术检测乙型肝炎表面抗原,并具体分析其检测结果予以评价.结果 近似临界值分析物的重复性情况:+20%浓度时,临界值分析物检测结果阳性率大于等于95%;-20%浓度时,临界值分析物检测结果阳性率小于等于5%.灵敏度情况:观察组中43例患者乙型肝炎呈阳性,灵敏度约为97.73%;对照组中43例乙型肝炎呈阴性,灵敏度约为97.73%.结论 酶联免疫技术应用于乙型肝炎表面抗原的检测,其临界值为±20%.在检测浓度范围内能够获得很高的灵敏度,对临床诊断意义重大.
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亚临床甲状腺疾病研究进展
近年来,随着酶联免疫技术的迅猛发展,高灵敏促甲状腺激素(TSH)已广泛应用于甲状腺功能的筛查.由于血清TSH对于甲状腺功能的改变比血清T3或T4更敏感(10倍)[1],因此,TSH偏离参考范围比T3或T4更早,并且能显示出亚临床甲状腺疾病属于哪种类型.由于甲状腺功能变化微小,它所引起的代谢和器官功能的改变常常持续多年.认识亚临床甲状腺疾病对于甲状腺疾病的早期诊断和治疗具有重要意义.随着临床医师对亚临床甲状腺疾病认识逐渐深入,本文就有关亚临床甲状腺疾病的研究综述如下.
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保留输血患者血清标本的必要性与可行性
经血传播疾病问题已经引起社会的广泛重视,国家也十分重视这方面的问题,加强了对采供血机构的管理,经血传播疾病呈现逐年下降趋势.现在各地采供血机构用于检测经血传播疾病的方法主要是酶联免疫技术(ELISA),这种方法本身就有一定的漏检率,况且还有"窗口期"问题,再加上试剂质量问题、检验设备问题、操作水平问题等,不可能使检验的准确率达到100%.
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胃癌和癌前病变患者血清中血管内皮生长因子含量与临床病理特征关系
本研究应用ELISA法检测胃癌、胃癌前病变患者和正常人血清血管内皮生长因子(VEGF)的浓度,探讨其与胃癌侵袭和转移的关系.
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层粘连蛋白促进兔角膜内皮细胞bcl-2表达的适浓度测定
目的探索层粘连蛋白促进兔角膜内皮细胞bcl-2表达的适浓度.方法给于体外培养的兔角膜内皮细胞以不同浓度的层粘连蛋白,采用酶联免疫技术找到适作用浓度.结果在一定的浓度范围内(20~60mg·L-1)层粘连蛋白能够促进家兔角膜内皮细胞bcl-2的表达,并且成量效依赖关系,在60 mg·L-1时有佳的促进作用.结论层粘连蛋白可以促进兔角膜内皮细胞bcl-2基因表达的作用,适作用浓度为60mg·L~1.
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皱瘤海鞘正丁醇部位体外抗乙肝病毒的初步研究
目的 对皱瘤海鞘正丁醇部位进行抗乙肝药效筛选.方法 应用酶联免疫技术(ELISA)测定血清中病毒与药物反应12h前后表面抗原(HBsAg)、e抗原(HBeAg)的OD值变化,评价皱瘤海鞘正丁醇部位抗乙肝病毒(HBV)的活性.结果 在药物浓度大于6mg/ml时,给药组与对照组中HBsAg,HBeAg的OD值在统计学上有显著性差异(P<0.05),提示皱瘤海鞘正丁醇部分有明显的抗HBsAg和HBeAg作用.结论 初步提示皱瘤海鞘正丁醇部位对乙肝病毒有抑制、破坏作用.
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皱瘤海鞘提取物体外抗乙肝病毒有效部位的筛选
目的:筛选皱瘤海鞘体外抗乙肝有效部位.方法:应用酶联免疫技术(ELISA)测定血清中表面抗原(HBsAg)、e抗原(HBeAg)的OD值,评价皱瘤海鞘不同部位抗乙肝病毒(HBV)的活性.结果:水溶性提取部位显示明显的抗HBsAg、HBeAg作用,而其他部位作用不明显.结论:皱瘤海鞘提取物在体外具有抗乙肝病毒的作用,有效部位为水溶性成分.
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胎膜早破孕妇阴道液HCG测定的临床应用
于阴道液人绒毛膜促性腺激素(HCG)含量, 国内外鲜有报道.作者采用磁性分离酶联免疫技术(IEMA), 测定并比较正常孕妇与胎膜早破孕妇阴道液HCG水平, 现报道如下.
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急诊术前HIV抗体金标法快速检测的临床意义
目的 论证急诊术前HIV抗体金标法快速检测的必要性及其临床意义.方法 采用免疫胶体金技术(DIGFA)即金标法和酶免疫(EIA)检测方法平行检测急诊术前患者血清艾滋病病毒抗体(抗HIV1/2),并对DIGFA技术参数进行评估.结果 急诊手术患者群中HIV抗体阳性率为1.05%;抗HIV1/2 DIGFA试卡检测特异性为100.00%、灵敏度为80%,检测总效率为99.79%.结论 HIV抗体金标法特异性、灵敏度、检测总效率等符合初筛要求,急诊术前采用金标法快速检测HIV抗体,可节省检测时间以赢得宝贵的手术时间,又可使医生在术中对可疑患者进行针对性预防,降低医源性HIV感染概率.
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磁性分离技术检测T3、T4的应用探讨
磁性分离酶联免疫技术是SERONO公司发明的一种非同位素免疫检测的先进技术,它将免疫磁性微珠分离技术引入酶联免疫测定领域.磁性微珠连接的单克隆抗体与相应的标本抗原结合后,在磁力的作用下,特异性结合的抗原与其它物质分离,再通过酶联免疫显色反应,测定其含量,我们用这一方法对不同浓度的T3、T4进行检测,现报告如下.
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谈使用磁酶免技术应注意的几点要素
磁分离酶联免疫测定技术(磁酶免-MAIA)是近十余年来国内外流行的一种非同位素免疫检测的先进技术.其方法具有无毒性、无放射性污染,操作简便,敏感性好,特异性高,稳定性强,试剂储存寿命长,线性测量范围宽,检测速度快等优点.该仪器和试剂价格也较合理,适用于中、小型医院使用.本院检验科于2002年7月从北京倍爱康生物技术有限公司引进BIOZYME-Ⅲ系统,用于甲状腺激素(T3、T4、TSH)及生殖类激素(PRL、FSH、LH、E2、TEST)等项目的检测,收到了良好的效果.为了尽量减少实验误差,提高检测结果的准确性,本文通过几年来的实践经验总结出使用磁酶免技术应注意的几点要素,供同道们参考.