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葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症患者基因突变32例分析
目的 探讨采用突变特异性扩增系统(amplification refractory mutation system,ARMS)技术检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)缺乏症患者基因突变的可行性.方法 采用突变特异性扩增系统技术对2007至2010年3月在本院遗传诊断中心门诊就诊的云南省本地人群中,既往有葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症生育史,或孕前筛查、新生儿筛查发现葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症患者和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症高风险胎儿,共计32例(男性为15例,女性为17例)进行葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症患者三种常见基因突变检测(本研究遵循的程序符合本院人体试验委员会制定的伦理学标准,征得受试者本人或其监护人的知情同意).结果 32例确诊为葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症高风险患者中,23例检出三种常见基因突变,其中1388 (G→A) 突变为12 例,1376 (G→T) 突变为9 例,95 (A→G) 突变为2例,这三种突变占本组患者的71.9%(23/32).结论 突变特异性扩增系统技术可作为葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症患者常规基因诊断和产前诊断方法.突变特异性扩增系统技术对胎儿,既可检出男性患者,又可检出女性杂合子,但对少数患者仍需采用其他技术检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症患者基因突变.
关键词： 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 基因 突变 突变特异性扩增系统 -
三例Hb Westmead复合东南亚缺失型α地中海贫血1的分析
我们报道广西地区3例Hb Westmead基因突变复合东南亚缺失型α地中海贫血1(SEA-α地贫1)的病例,依据突变特异性扩增系统(ARMS)原理[1],建立了ARMS快速检测Hb Westmead基因突变的方法.
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突变特异性扩增系统方法检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因C1024T及G392T
突变特异性扩增系统(Amplified refractory mutation system, ARMS)法是用来检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)基因已知点突变的简便、快速、准确的方法[1,2].杜传书等发现的中国人中的6种点突变中,占比例较高的G1388A(27.8%)、G1376T(25.0%)[3]及A95G[4]的ARMS方法已经建立[1,2],而占比例较低的C1024T(5.6%) 的ARMS方法还未建立,G392T(8.3%)的ARMS方法虽已建立,但未经测序证实.我们建立了这两种方法,并经测序证实,现报道如下.
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炎症性肠病的MIF-173位点单核苷酸多态性研究
目的:探讨中国浙江地区汉族人群中巨噬细胞移动抑制因子(MIF)基因单核苷酸多态性(SNP)分布,分析其与炎症性肠病(IBD)的相关性.方法:分别应用四引物突变特异性扩增系统(ARMS)法和限制性片段长度多态性(RFLP)-PCR方法对142名健康个体和99例IBD患者MIF基因-173位点SNP多态性进行分型,并将PCR产物克隆及测序鉴定.结果:MIF基因-173位点检测到3种基因型,其基因型分布皆符合Hardy-Weinberg平衡定律.四引物ARMS法和RFLP-PCR两种方法结果完全一致. 统计分析显示,溃疡性结肠炎(UC)患者MIF-173位点CC基因型频率15.5%显著高于正常人中的5.6%(P＜0.05) .MIF-173位点等位基因和基因型频率在IBD患者和正常人群中差异无统计学意义(P＞0.05).进一步分析发现CC基因型与UC患者的临床特征无关.结论:四引物ARMS是一种准确、快速和经济的SNP测定方法.MIF-173位点CC基因型可能与UC的发生相关.
关键词： 巨噬细胞移动抑制因子 多态性 突变特异性扩增系统 炎症性肠病 -
佛山地区小儿G-6PD基因突变型1388检测
红细胞葡萄糖 -6-磷酸脱氢酶( G-6PD)缺乏症是我国南方常见遗传病,佛山地区为高发区.研究 G-6PD基因突变类型和发生频率对临床诊断有重要意义.中国人常见的 G-6PD基因突变型有 3种,即 G1388A( 1388突变)、 G1376T( 1376突变)和 A95G( 95突变).我们应用突变特异性扩增系统( amplificat-
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多重突变特异性扩增系统检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶两种常见的基因点突变
目的 建立多重突变特异性扩增系统(ARMS)检测我国葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)基因常见的两种基因点突变,即G1388A和G1376T.方法 对128例经限制性内切酶分析或DNA直接测序证实为G6PD基因G1388A或G1376T突变的样本,应用多重ARMS法,进行G6PD两种基因点突变分析.结果 多重ARMS法一次即可同时检出G1388A和G1376T两种突变,未发现假阳性和假阴性.结论 应用单管多重PCR法能快速检测出G6PD基因G1388A和G1376T突变,操作简便,结果准确,可应用于临床上G6PD两种基因点突变检测.
关键词： 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 基因突变 突变特异性扩增系统 -
葡萄糖6磷酸脱氢酶缺陷的研究现状
红细胞葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PD)缺陷,是常见的红细胞酶病.常因某些诱因发生溶血,而引起G6PD缺陷的主要原因是G6PD基因突变[1],以往检测已知突变主要用错配PCR/酶切法、寡核苷酸探针杂交法(ASD).近,杜传书等[2]报道用突变特异性扩增系统(ARMS)来检测中国人G6PD基因3种常见的突变,大大加快了寻找新突变的速度.
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ARMS法检测江西省常见的三种G6PD缺乏症基因突变
目的应用突变特异性扩增系统(amplification refractory mutation system,ARMS)检测江西省常见的3种葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症突变基因G1376T、G1388A、A95G.方法用ARMS法对40例江西籍经G6PD/6PGD比值证实为G6PD缺乏者进行检测.结果 40例江西籍G6PD缺乏者检出G1376T11例(27.5%)、G1388A17例(42.5%)、A95G1例(2.5%).3种突变占40例G6PD缺乏者G6PD突变基因类型72.5%,末定型11例.结论 ARMS是一种简单、省时、经济、准确的检测G6PD基因常见突变的方法.
关键词： 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 葡萄糖磷酸脱氢酶缺乏症 基因型 突变特异性扩增系统 江西 -
湖南长沙地区G6PD基因突变型研究
目的研究长沙地区葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症患者的基因突变型.方法应用突变特异性扩增系统(ARMS)方法,检测168例长沙地区G6PD缺乏症患者中的G1376T、G1388A、A95G三种G6PD基因突变类型.结果 168例中检出G1388A37人(22.0%),G1376T74人(44.0%),A95G45人(26.8%),未知突变12人(7.1%).结论 G1376T、G1388A、A95G为长沙地区常见和具有特征性的G6PD缺乏基因突变类型,且G1376T、A95G二型突变占的比例较G1388A高.G6PD基因突变类型具有地区特点、具有种族和地区异质性,对基因突变的研究有利于G6PD缺乏症的临床诊断、防治以及人类进化研究.
关键词： 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症 基因突变 突变特异性扩增系统 -
一例Morquio A综合征高危胎儿的快速产前基因诊断
目的 快速、准确地对Morquio A综合征[又称黏多糖贮积症Ⅳ A型(mucopolysaccharidosis typeⅣ A,MPSⅣ A)]高危胎儿做出产前基因诊断,从而及时而高效地防止患儿的出生,以大程度减少流产对母体的伤害.同时,为今后的植入前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD)创造必要的前提条件.方法 在明确先证者病因及其父母基因型的基础上,应用已建立的突变特异性扩增系统(amplification refractory mutation system,ARMS)直接鉴定法、变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)快速筛检法,结合DNA序列分析法,对1例已孕10周的MPSⅣA高危胎儿的GALNS基因相应突变位点进行快速检测和鉴定.结果 胎儿的DHPLC筛检结果显示第1外显子和第10外显子的PCR产物都有异常双峰,而相应正常对照均只有正常单峰；用GALNS 基因ARMS特异引物扩增的结果显示:胎儿有相应的特异扩增产物,而正常对照无；普通引物扩增产物的测序结果显示:胎儿GALNS基因的第1外显子和第10外显子分别获得了父源性的c.106-111 del(p.L36-L37 del)杂合缺失突变和母源性的c.1097 T＞C(p.L366P)杂合错义突变,为两种突变的复合杂合子.结论 该高危胎儿是一带有与先证者完全相同基因型的Morquio A综合征病胎,应尽早终止妊娠；ARMS法、DHPLC法结合DNA序列分析法是快速、准确产前基因诊断MPS Ⅳ A高危胎儿的有效方法,特别适用于已明确病因的高危胎儿的早期诊断；其中,ARMS法和DHPLC法还特别适用于大批量正常对照组的快速鉴别,对于新突变的致病性鉴定起着重要的作用.
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四引物突变特异性扩增系统法检测巨噬细胞移动抑制因子基因-173位点单核苷酸多态性分布
目的探讨中国浙江地区汉族人群巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor, MIF)基因-173位点单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)分布.方法收集浙江地区142名无血缘关系健康个体的静脉血,提取DNA,分别应用四引物突变特异性扩增系统(amplification refractory mutation sysntem, ARMS)法和限制性片段长度多态性-PCR方法对MIF基因-173位点SNP多态性进行分型,并将PCR产物克隆及测序鉴定.结果 MIF基因-173位点检测到3种基因型,其基因型分布皆符合Hardy-Weinberg平衡定律.四引物ARMS法和限制性片段长度多态性-PCR两种方法结果完全一致.统计分析显示,中国汉族人MIF基因-173位点等位基因和基因型频率分布与欧洲白人差异有统计学意义(P<0.01),与日本人群的差异无统计学意义(P>0.05).结论四引物ARMS法是一种准确、快速和经济的SNP测定方法.MIF基因-173位点等位基因频率分布具有种族的差异性.
关键词： 巨噬细胞移动抑制因子 单核苷酸多态性 突变特异性扩增系统
