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  • 医院感染金黄色葡萄球菌的耐药性和SCCmec基因型分析

    作者:牟冬梅;张鹏;张文芳;郑珊;刘运德;吴尚为

    目的 了解天津市肿瘤医院医院感染金黄色葡萄球菌对抗菌药物的耐药状况和葡萄球荫盒式染色体mec(SCCmec)基因型特点.方法 检测89株医院感染金黄色葡萄球菌对抗菌药物的敏感性及其mecA携带率,用多重PCR法对mecA阳性菌株进行SCCmec基因分型.结果 89株金黄色葡萄球菌中表型甲氧西林耐药率为23.6%(21/89),mecA基凶检出率为43.8%(39/89),两者比较差异有统计学意义(χ2=8.146,P=0.004).耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)表现出多药耐药特点,未发现万古霉素耐药株.SCCmec基因型以Ⅲ型为常见,占66.7%(26/39).结论 天津市肿瘤医院分离的MRSA具有多重耐药特点,SCCmee基凶型以Ⅲ型为主.

  • 浙江省耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子分型及耐药性分析

    作者:朱佩琼;蒋琰;王燕飞;裘云庆

    目的 探讨浙江省分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的分子分型及菌株的耐药性.方法 连续收集2009年1月至2010年12月浙江省11家三级甲等医院临床分离的MRSA147株.采用琼脂稀释法对13种抗菌药物进行小抑菌浓度(MIC)测定.通过多位点序列分型(MLST)、SCCmec分型和spa分型进行菌株同源性分析,并比较不同分型菌株的耐药谱.利用辛普森指数计算三种分型方法的分辨率并进行比较.结果 147株MRSA菌株共分为14种ST型,其中ST239(75株)、ST5(24株)和ST59(23株)为主要流行克隆;SCCmec分型以Ⅲ型为主(76株),其次是Ⅳ型(32株)、Ⅱ型(24株)和Ⅴ型(9株),6株菌株无法分到已知型;spa基因分型被分为23种,其中以t030、t437、t002和t037菌株数多,分别为57,17,15和12株.药敏结果显示,MRSA菌株除对利奈唑胺、替考拉宁、万古霉素和去甲万古霉素敏感外,对其他常用抗菌药物的耐药率均很高,尤其是主要流行克隆ST239以及SCCmec Ⅲ型菌株耐药情况严重.三种分型方法的分辨率分别为0.6885,0.6577和0.8165,其中spa分型方法对菌株的区分能力更强.结论 浙江省临床分离的MRSA菌株存在主要流行克隆ST239-SCCmecⅢ-t030-MRSA,耐药形势严峻,应加强院内耐药菌株的监测.

  • 分型方法结合DL MRSA Library数据库研究MRSA医院感染

    作者:曹晶晶;王玫;孔宪玺;孙宇峰;李丽红;白婕;鲁辛辛

    目的 探讨引发医院感染的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的抗药性、来源和分子流行病学特征.方法 采集北京同仁医院2007-2008年分离的明确致病MRSA 57株,结合K-B法、MIC法、多重PCR、自动化重复序列PCR(REP-PCR)分型平台及DL MRSA Library数据库信息比对来分别描述MRSA的抗生素耐药表型、潘顿-瓦伦丁杀白细胞素基因(pvl)携带、Stapblococcal cassette chromosome mec(SCCmec)分型及REP-PCR分型情况.结果 根据对利福平、克林霉素、左氧氟沙星、复方磺胺甲恶唑的耐药差异,57株MRSA被分为(a~f型)6种抗生素耐药表型.SCCmecⅢ和SCCmecⅡ型MRSA分别为52株和3株,占研究菌株的91.23%和5.26%,仅1株MRSA pvl阳性.通过自动化REP-PCR分型平台,研究菌株被分为REP-A~F共6型和3株"单克隆株".REP-C型菌株数量多(52.63%,30/57).6株REP-D型MRSA菌株中,3株分离自喉科病房.本院REP-C-SCCmecⅢ型与DL MRSA Library中的Brazilian clone-SCCmecⅢ型遗传学接近.结论 社区相关性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)引起的医院感染在北京同仁医院还较罕见.REP-C-SCCmecⅢ-a型MRSA为该院医疗相关性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(HA-MRSA)的主要流行株,REP-D-SCCmecⅢ-d型菌株是喉癌术后医院感染的相对特有菌株.自动化REP-PCR检测平台结合DL MRSA Library数据库的方法是研究医院感染的快速、有效工具.

  • 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌pvl及tst基因分布与感染类型研究

    作者:沈利蒙;张易进;孔江英;董华丽;张传领

    目的 了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)临床菌株携带杀白细胞毒素(PVL)编码基因pvl和中毒休克综合征毒素-1(TSST-1)编码基因tst情况、流行特征及感染类型,为该类感染的临床治疗提供依据.方法 收集2012年1-12月临床分离的MRSA 96株,采用PCR检测96株MRSA中pvl和tst基因,采用全自动微生物分析仪检测11种临床常用抗菌药物的敏感性,采用多重PCR对携带pvl基因(pvl+)或tst基因(tst+)的MRSA进行mac分型(SCCmec),了解与分析pvl+或tst+ MRSA感染类型.结果 96株MRSA中20株检出pvl基因占20.8%,13株检出tst基因占13.5%,未发现同时携带pvl和tst基因的菌株;除左氧氟沙星和莫西沙星外,pvl+/tst+ MRSA对其他抗菌药物耐药率与pvl-/tst-菌株相似;20株pvl+ MRSA中7株社区获得性感染菌株、13株医院获得性感染菌株,其中17株分离自皮肤和软组织感染患者脓液,13株tst+ MRSA均为医院获得感染菌株,其中8株分离自肺部感染患者痰液;20株pvl+ MRSA中,SCCmecⅢ型11株、SCCmecⅣa型5株、SCCmecⅡ型2株,2株未能分型;13株tst+ MRSA均为SCCmecⅢ型.结论 pvl+ MRSA在社区和医院内均有流行,主要引起皮肤和软组织感染;tst+ MRSA仅在医院内流行,主要引起肺部感染;pvl+和tst+ MRSA均以SCCmecⅢ型为主.

  • 医院感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性与SCCmec分型及同源性研究

    作者:魏军;贾伟;赵志军;杨宝忠;师志云;李刚;张楠;纵帅

    目的 研究医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性及分子流行病学特点,为预防和控制医院感染提供参考.方法 采用药敏纸片法(K-B法)、SCCmec分型及葡萄球菌A蛋白(spa)分型技术,2009年3-4月对烧伤科、ICU、呼吸内科、急诊科、血液内科、儿童急救科和儿童呼吸科住院患者、医务人员及环境分离的MRSA,进行了药敏试验和同源性分析,并检测其杀白细胞毒素(pvl)基因.结果 从1352份标本中分离出108株金黄色葡萄球菌,MRSA为54株占50.0%,主要分离于烧伤科42株占77.8%;分离的临床菌株总体耐药率较高,除万古霉索外耐药率均>50.0%,未发现万古霉素耐药株;SCCmec分型结果显示,54株MRSA以Ⅲ型为主占68.5%,pvl基因均为阴性;进行spa分型研究的23株MRSA中,22株为t030,1株为t2270,呈现高度的克隆一致性.结论 医护人员MRSA带菌率较高,部分医务人员、住院患者和环境中分离的MRSA有较高的同源性,存在人与人和人与环境之间的MRSA传播.

  • 临床分离耐甲氧西林溶血性葡萄球菌的SCCmec分型及同源性分析

    作者:李睿;李浩;熊自忠;陶胜来

    目的 了解临床分离耐甲氧西林溶血性葡萄球菌(MRSH)的SCCmec基因型别及相同SCCmec型别菌株的同源性.方法 多重PCR进行SCCmec分型,ERIC-PCR法对相同SCCmec型别菌株进行同源性分析.结果 83株临床分离MRSH菌株中,SCCmec Ⅰ型有23株(27.7%),SCCmec Ⅱ型有10株(12.1%),SCCmecⅢ型有24株(28.9%),SCCmecⅣ型有1株(1.2%),Ⅰ、Ⅱ混合型有8株(9.6%),Ⅰ、Ⅲ混合型有6株(7.2%),Ⅱ、Ⅲ混合型有5株(6.0%),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ混合型有3株(3.6%),未分型3株(3.6%).ERIC-PCR结果显示,23株SCCmec Ⅰ型分为Ⅱ型,其中A型5株,B型5株,C型3株,其余8株各为1型,2株未分型;10株SCCmecⅡ型分为6型,其中D型4株,E型2株,3株各为1型,1株未分型;24株SCCmec Ⅲ型分为9型,其中F型11株,G型2株,H型2株,Ⅰ型2株,5株各为1型,2株未分型.结论 临床分离MRSH中,SCCmec Ⅰ、Ⅲ型为多,部分菌株呈混合型别;相同SCCmec型别的部分菌株之间可能存在克隆传播.

  • 重症监护病房金黄色葡萄球菌分离株基因分型研究

    作者:林琳;王晶;万献尧;肖晓光;李岩

    目的:研究我院重症监护病房2011年1月-12月分离的金黄色葡萄球菌的耐药情况并进行同源性分析。方法收集2011年1月-12月大连医科大学附属一院重症监护病房分离金黄色葡萄球菌共41株,采用 MIC法检测其多种抗生素的耐药性和杀白细胞毒素(PVL)检测,利用脉冲场电泳技术(PFGE)进行同源性分析,使用 SPSS11.5软件进行数据分析;并对其中的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)采用多重PCR方法进行 SCCmec分型及多位点序列分型(MLST)。结果共分离金黄色葡萄球菌41株,甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)34株(34/41,82.9%),甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)7株(7/41,17.1%),MRSA对万古霉素,利奈唑胺全部敏感,对氯霉素,复方新诺明高敏感率,与 MSSA相比较P均大于0.05,没有显著性差异。对于β-内酰胺类,喹诺酮类,大多数氨基糖苷类抗生素均呈高耐药率,与 MSSA相比较,P≤0.05,具有统计学意义。脉冲场电泳(PFGE)共分为18个性别,以G型为主,共19株(19/41,46.3%);R 型4株(4/41,9.8%),O,F 型各2株(2/41,4.9),其余型别各一株(1/41,2.4%)。;41株金黄色葡萄球菌分离到1株携带 PVL毒素;SCCmec分型以Ⅱ型为主,共20株(20/34,58.8%),Ⅲ型11株(11/34,32.4%),Ⅳ型2株(2/34,5.9%),未分型1株,无Ⅰ型分离;多位点序列分型(MLST)共分为9个型别,分别为 ST5,239,1,15,7,630,20,946,59,以 ST5型为主,共21株(21/34,61.8%),ST239 型4株(4/34,11.8%), ST15型和 ST7型各2株(2/34,5.9%),其余型别各1株(1/34,2.9%)。结论 MRSA是2011年度金黄色葡萄球菌的主要分离株,PFGE分型以 G型为主;MRSA主要克隆株为 ST5-MRSA-SCCmecⅡ,具有独特的地理分布。

  • 社区相关性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子分型研究

    作者:潘宏升;荀凤娇;田素飞;年华;褚云卓

    目的 研究社区相关性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)的分子生物学特性,为防控CA-MRSA感染提供依据.方法 收集2007年1月-2008年9月间分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌共5株,采用PCR方法检测进行SCCmec分型,多位点序列分型(MLST),葡萄球菌A蛋白(SPA)分型.结果 5株CA-MRSA菌株SCCmecⅣ基因分型为3株,SCCmecⅤ型2株;MLST分型为SCCmecⅣ型菌株均为ST59型,SCCmecⅤ型中1株为ST7型,另1株未能成功进行MLST分型;SPA基因分型将3株SCCmecⅣ型菌株归属为t437,另2株分别为t163和t796.结论 流行传播的CA-MRSA感染主要以SCCmecⅣ型菌株为主,应引起密切关注,并做好防控工作.

  • tst和pvl基因阳性金黄色葡萄球菌流行情况及分子特征

    作者:赵焕强;邹玉涵;金姝;舒文;汤荣;刘庆中

    目的:了解中毒性休克综合征毒素-1的tst基因和杀白细胞素的pvl基因阳性金黄色葡萄球菌(金葡菌)流行情况及其附属基因调节子(agr)和葡萄球菌盒式染色体(SCCmec)型别。方法收集上海市及浙江省共7所医院的916株金葡菌,聚合酶链反应(PCR)检测tst、pvl、mecA和mecC基因,并对tst或pvl基因阳性菌株作agr及SCCmec(针对甲氧西林耐药金葡菌,MRSA)遗传学分型。结果916株金葡菌中tst阳性208株,阳性率22.7%;pvl阳性35株,阳性率3.8%;mecA阳性665株(MRSA),未检测到mecC基因。在665株MRSA中,tst阳性198株(29.8%),agr和SCCmec分型均以2/Ⅱ型为主,分别占97.0%和94.4%;pvl阳性14株(2.1%),agr分型以1型(85.7%)为主,SCCmec分型以Ⅲ型(42.9%)和Ⅳa型(28.6%)为主。在251株甲氧西林敏感金葡菌(MSSA)中,tst阳性10株(4.0%);pvl阳性21株(8.4%)。tst阳性率在MRSA菌株中较MSSA中高,而pvl检出率则在MSSA菌株中较高,且浙江地区MRSA中 pvl的阳性率高于上海菌株,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 tst基因在MRSA菌株中阳性率较MSSA高;pvl阳性率相对较低,但因其与某些严重的金葡菌感染相关,临床应予以关注。

  • 杀白细胞毒素基因阳性MRSA的临床和实验研究

    作者:周晓兰;李光辉;徐晓刚;张婴元;汪复

    目的 了解2003-2006年我院MRSA临床分离株中杀白细胞毒素(PVL)基因的分布、SCCmec分型、药物敏感性及其临床特征.方法 对2003年1月至2006年12月我院1366株MRSA临床分离菌株,用PCR方法筛选PVL基因阳性菌株,用多重PCR方法进行SCCmec分型;并进行回顾性研究,分析PVL基因阳性及阴性株所致感染的临床特点及相关危险因素;用琼脂稀释法测定其对临床常用抗菌药的敏感性(MIC).结果 在1366株MRSA菌株中共筛出5株PVL基因阳性菌株,阳性率为0.37%.50株MRSA临床分离菌株中,SCCmec Ⅰ型1株,占2%(1/50);SCCmec Ⅱ型26株,占52%(26/50);SCCmecⅢ型16株(其中包括SCCmecⅢA1株),占32%(16/50);SCCmec Ⅳ型1株,占2%(1/50);SCCmec Ⅴ型2株,占4%(2/50);4株(8%)未能分型.5株PVL基因阳性株中SCCmecⅢ型1株,SCCmec Ⅳ型1株,SCCmec Ⅴ型2株,未分型1株.MIC结果显示PVL基因阳性株较阴性株对多种非β内酰胺类抗生素更为敏感,未发现万古霉素不敏感菌株.该5株PVL阳性菌株所致感染分别为皮肤软组织感染2例、肺部感染2例和尿路感染1例.结论 PVL基因阳性MRSA已在我院检出,应加强医院感染控制防治其播散流行.

  • 医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌中PSM-α基因检测及相关研究

    作者:于淼;赵自云;刘成玉;牟晓峰

    目的:了解某地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)中α型-酚溶调制蛋白(PSM-α)基因携带情况及对人外周血中性粒细胞的影响,为指导临床治疗及明确该地区 MRSA 致病机制提供理论依据。方法收集临床标本中分离并经SCCmec分型的MRSA 90株,采用聚合酶链反应(PCR)方法扩增PSM-α基因,并通过细胞形态学方法研究PSM-α对人外周血中性粒细胞的影响。结果86株医院获得性 MRSA(HA-MRSA)中,PSM-α基因阳性者78株,PSM-α阳性率为90.70%;4株社区获得性 MRSA(CA-MRSA)中,2株为PSM-α基因阳性,阳性率为50.00%;PSM-α阳性组中性粒细胞死亡率与生理盐水组、PSM-α阴性组和ATCC 25923组间比较,差异有统计学意义。PSM-α阳性组死亡率高于其他3组,而PSM-α阴性组和ATCC 25923组差异无统计学意义。结论该地区 HA-MRSA携带PSM-α基因,且PSM-α基因阳性的 MRSA菌株分泌的PSM-α具有促进中性粒细胞溶解的活性。

  • MRSA分子流行病学研究

    作者:宗春辉;孙兰菊;李东华;朱广莉;吴尚为

    目的 采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型及多重聚合酶链反应(PCR)SCCmec分型技术对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)进行基因分型,以了解医院感染MRSA的流行情况.方法 收集天津市南开医院2007年1月-2008年12月住院患者送检标本分离的MRSA 40株,进行耐药谱分析、PFGE分型和SCCmec分型.结果 40株菌耐药谱高度相似,可被分为A-E 5个PFGE型,其中A型21株,B型8株,C型4株,D型6株,E型1株;SCCmec分型:Ⅰ型1株,Ⅲ型33株,Ⅳ型1株,Ⅴ型5株.通过对医院内菌株发生的时间和空间分析,明确了感染的发生和传播情况,即在2007年1月-2008年12月存在MRSA散发感染.结论 PFGE可有效鉴定菌株间的亲缘关系.SCCmec分型对是否为医院感染菌株有提示作用,两种分型方法 相结合可更好地鉴定流行菌株的特征,为医院感染的监控提供依据.

  • 62株临床分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec基因分型及耐药性分析

    作者:王蕾;李武平;刘冰;孙惠英;宋向阳

    目的 了解医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的SCCmec基因型别及耐药特征.方法 应用聚合酶链反应(PCR)技术检测MRSA菌株的mecA基因并对其进行分型,应用E-test法测试MRSA对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺、左氧氟沙星和利福平5种药物的MIC值.结果 62株MRSA的mecA基因全部阳性,SCCmecⅢ型60株,SCCmecⅣa型1株,还有1株用本实验方法未能分型.药敏试验显示所检菌株对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺均敏感,对左氧氟沙星和利福平的耐药率分别为96.8%和82.3%.结论 该院以SCCmecⅢ型为主要流行类型,治疗MRSA仍首选万古霉素等糖肽类抗菌药物.

  • 医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌Spa和SCCmec分型研究

    作者:李艳萌;赵瑞珂;黄宝丽;张险峰;韩清珍;顾国浩;陈泽良;史进方;徐杰

    目的 对医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(HA-MRSA)A蛋白(Spa)和葡萄球菌mec基因盒(SCCmec)分型同源性研究,为预防和控制医院感染提供依据.方法 采用药敏纸片法(K-B法)、SCCmec分型及Spa分型技术,收集自2013年8月至2014年4月80株HA-MRSA,进行药敏试验和同源性分析,并检测毒力基因杀白细胞毒素(pvl)基因和毒性休克综合征(tsst)基因.结果 药敏结果显示,80株HA-MRSA对青霉素、氨苄西林/舒巴坦、亚胺培南均耐药,对环丙沙星耐药率为90.0%,对克林霉素耐药率为58.8%,对复方磺胺类对药率为13.8%,对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁均敏感.SCCmec分型结果显示,80株MRSA中SCCmecⅡ型占73.75%、SCCmecⅢ型(13.75%)、SCCmec V型(12.5%).Spa分型,28株为t2460型(35%)、9株为t002型(11%)、6株为t030型(8%)、7株为t632型(9%)、5株为t037型(6%),其他Spa型相对分散.pvl基因阳性率为7.5%(6株),tsst基因为阴性.结论 HA-MRSA SCCmec分型以Ⅱ为主,Spa分型以t2460型为主,有较高的同源性;HA-MR-SA对多种药物具有较高的耐药性并且存在多重耐药.

  • 中山地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性分析及基因分型研究

    作者:林颜玉;陈文伟;王柏旺;卢玉平

    目的 了解中山地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)临床分离株耐药性及基因型,为MRSA治疗及感染控制提供数据及分子生物学支持.方法 收集2015年1月至2015年10月中山市7家医院临床分离到的MRSA,采用WOHONET 5.6对耐药数据进行统计分析,PCR检测MRSA耐药基因mecA携带情况,采用多重PCR对分离株进行葡萄球菌染色体mec基因盒(SCCmec)分型.结果 2015年1月至2015年10月7家医院共分离到50株MRSA,所有MRSA分离株均检出mecA基因,检出率为100%.SCCmec各分型数量依次为Ⅰ型1株(2%),Ⅱ型2株(4%),Ⅲ型28株(56%),Ⅳ型6株(12%),Ⅴ型12株(24%),有1株不能分型.中山市古镇人民医院分离MRSA株主要为SCCmecⅢ型,其他6家医院主要为SCCmecⅣ型及Ⅴ型.MRSA对青霉素耐药率为100%,对红霉素(90%)、庆大霉素(86%)、左氧氟沙星(84%)、诺氟沙星(84%)、克林霉素(76%)耐药率较高,对奎奴普丁/达福普丁(4%)耐药率较低,未检出替考拉宁及万古霉素耐药株.SCCmec Ⅲ型菌株对庆大霉素、利福平、左氧氟沙星、诺氟沙星、复方新诺明、克林霉素、红霉素、奎奴普丁/达福普丁及四环素耐药率高于SCCmec Ⅴ型菌株.结论 mecA是MRSA携带常见的耐药基因,中山地区分离MRSA株在规模较大的医院主要以SCCmec Ⅲ型为主,基层医院以SCCmec Ⅳ及Ⅴ型为主,SCCmec Ⅲ型对常用抗菌药敏感性较差,耐药机制较为复杂,临床科室及医院感染控制部门应重点监控该型细菌,避免院内感染暴发.

  • 金黄色葡萄球菌耐药相关基因及SCCmec分型研究

    作者:刘静;杨似玉;孙渭歌;张锐;郗园林;段广才;杨海燕

    目的 对郑州地区分离的金黄色葡萄球菌进行耐药性研究,了解其耐药基因携带情况,为临床抗感染治疗提供依据.方法 对2013年7月-2014年7月郑州某三甲医院分离的86株金黄色葡萄球菌,测定25种药物敏感性,应用普通PCR测定10种耐药基因,同时采用多重PCR方法对28株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin Resistant S.Aureus,MRSA)进行葡萄球菌染色体mec基因盒(Staphyloccoccal Cassette Chromosome mec,SCCmec)分型.结果 菌株对抗菌药物呈多重耐药,其中青霉素耐药率高,为95.3%.有1 1种抗生素的耐药率大于50%;10种耐药相关基因检测结果显示acc(6,)/aph(2″)、aph(3′)-Ⅲ、ant (4′,4″)、ermA、ermB、ermC、msrA、tetM、tetK阳性率分别为100%、72.1%、86.0%、95.3%、79.1%、93.0%、58.1%、97.7%、81.4%,未检测出blaTEM;28株MRSA中14株为SCCmecⅢ型,8株为SCCmecⅠ型,4株为SCCmecⅣE型,2株未能分型.结论 郑州地区分离的金黄色葡萄球菌呈多重耐药,携带较多耐药基因,本地区MRSA以SCCmecⅢ型为主.

  • 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec分型和耐药特点以及同源性分析

    作者:张宇琼;张仪;陆文香;高晶晶;张宇蔺;朱琴芳;袁垆;徐卫东

    目的 对临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)进行葡萄球菌染色体mec盒(SCCmec)分型并了解其耐药性,同时结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术对其进行同源性分析.方法 收集2016年鉴定出的100株MRSA,同时加做K-B法验证耐药表型.普通PCR检测mecA基因,多重PCR进行SCCmec基因分型,MALDI-Biotyper软件进行同源性分析.结果 SCCmec分型为:SCCmecⅡ型38株(38%),SCCmecⅢ型9株(9%),SCCmecⅣ型12株(12%),SCCmec Ⅴ型35株(35%),未分型6株(6%).同源性分析结果将100株MRSA分为MS1和MS2两大群,其中MS1又分为MSla和MSlb两个亚群.各型MRSA对替考拉宁、利奈唑胺和万古霉素的耐药率均为0,MS2群的MRSA对其他非β-内酰胺类抗生素的耐药率明显高于MS1群.结论 临床分离MRSA以Ⅱ型和Ⅴ型为主,多重耐药较为严重,MALDI-TOF MS技术可以准确鉴定金黄色葡萄球菌,结合SCCmec分型技术可以有效区分Ⅴ型社区感染菌株和Ⅱ型院内感染菌株.

  • 重庆某医院重症监护室耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子流行病学

    作者:常李军;贾蓓;魏晓宇;黄文祥;刘成伟

    目的 了解重庆市某医院重症监护病房耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性及分子流行病学特征.方法 收集该院2008年9月至2009年6月神经外科ICU和中心ICU 31株非重复金黄色葡萄球菌,PCR方法检测mecA基因,琼脂稀释法测定其对13种抗菌药物的低抑菌浓度(MIC),多重PCR方法进行SCCmec分型,脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)分析亲缘关系.结果 31株金葡菌中,MRSA占83.9%(26/31),其中25株为SCCmecⅢ型,1株未能分型.26株MRSA对头孢吡肟、头孢唑啉、四环素、红霉素、左氧氟沙星、克林霉素均耐药,对利福平、万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺均敏感.PFGE分型26株MRSA有4型(A~D),以A型流行株为主.结论 重庆市某医院2008年9月至2009年6月神经外科ICU和中心ICU病房MRSA分离率较高,MRSA菌株为多重耐药菌,未发现VISA或VRSA.SCCmec以Ⅲ型为主,神经外科ICU病房可能有MRSA的流行,需要采取积极措施阻止其进一步播散流行.

  • SCCmec相关的psm-mec在血液来源人葡萄球菌中的分布

    作者:杨永长;陈亮;肖代雯;喻华;刘华;黄文芳

    目的 探讨SCCmec相关的psm-mec在血液来源人葡萄球菌中的分布,了解人葡萄球菌的分子特征.方法 收集血培养阳性并经过全自动微生物鉴定系统准确鉴定的人葡萄球菌25株,通过PCR扩增mecA和psm-mec基因,采用多重PCR对耐甲氧西林人葡萄球菌SCCmec分型,分析psm-mec在人葡萄球菌中的分布.结果 PCR扩增结果显示,21株为耐甲氧西林人葡萄球菌,4株为甲氧西林敏感人葡萄球菌;耐甲氧西林人葡萄球菌psm-mec基因的检出率为47.6%,甲氧西林敏感人葡萄球菌中未检出psm-mec基因.多重PCR结果显示,21株mecA阳性人葡萄球菌中,3株属SCCmec类Ⅰ型,1株属SCCmecⅢA型,1株属SCCmecⅢB型,4株属SCCmec类ⅢA型,1株属SCCmec类ⅢB型,3株属SCCmec类Ⅳ,8株属SCCmec新型别.在psm-mec阳性菌株中,1株分布于SCCmecⅢA,1株分布于SCCmecⅢB,4株分布于SCCmec类ⅢA,1株分布于SCCmec类ⅢB,3株分布于SCCmec新型别.结论 SCCmec相关的psm-mec广泛存在于血液来源的耐甲氧西林人葡萄球菌中,主要分布于SCCmecⅢ型、类Ⅲ型和SCCmec新型别.

  • 血液来源携带psm-mec基因人葡萄球菌SCCmec型别分析与生物被膜能力的研究

    作者:陈亮;王晓燕;杨永长;肖代雯;胡洪华

    目的 研究血液来源携带psm-mec基因人葡萄球菌SCCmec型别和psm-mec基因与生物被膜的相关性,为其临床感染的防治提供依据.方法 收集临床血液来源经全自动微生物鉴定仪确认的人葡萄球菌.通过PCR扩增mecA基因区分耐甲氧西林人葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus hominis,MRSHo)和甲氧西林敏感人葡萄球菌(methicillin-susceptive Staphylococcus hominis,MSSHo).体外粘附实验(Microtite Plate Assay,TCP)检测生物被膜.PCR扩增psm-mec基因并测序,分析其与生物被膜的相关性.PCR扩增psm-mec与mecR1及xylR基因的间隔序列和对psm-mec基因阳性菌株做SCCmec、mec和ccr型别检测,探究其在SCCmec上的定位与分布特征.结果 共收集菌株55株,其中46株检出mecA基因为MRSHo,18株携带psm-mec基因,35株产生物被膜.携带与未携带psm-mec基因的菌株形成生物被膜的比率分别为83.33%和54.1%,二者差异显著(P=0.03).DNA测序显示,3株psm-mec阳性生物被膜阴性的菌株中,2株于psm-mec编码区上游-12处发现G>A的点突变.所有psm-mec与mecR1及xylR的基因间隔序列阳性.携带psm-mec基因菌株分为,2株SCCmecⅢ型,7株Ⅲ型的变异型,9株SCCmec新型别;所有菌株均为Class A类mec;6株为ccr type 1,1株为ccr type 1+2,2株为ccr type 1+3,2株为ccr type 3,7株未扩增出ccr.结论 在血液来源人葡萄球菌中,psm-mec基因与生物被膜存在相关性,其定位于mecR1与xylR两个基因之间,主要分布于SCCmecⅢ型、Ⅲ型变异型和新型别中,ccr基因存在高度变异,是造成SCCmec多态性的原因.

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