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健康人携带金黄色葡萄球菌耐药表型及基因型研究
目的 调查我国健康人携带的金黄色葡萄球菌药物敏感性及大环内酯类耐药基因分布情况.方法 应用E-test方法,对2009-2011年收集的100株健康从业人员携带菌株进行16种抗生素的药物敏感性分析,以D试验测定红霉素对克林霉素的诱导耐药表型.采用spa分型对上述菌株进行分型分析.利用PCR检测基因:甲基化酶[erm(A),erm(B),erm(C),erm(F),erm(T),erm (Y),erm(33)和erm(G)]、ATP结合转运蛋白[msr(A)和msr(D)]、主要易化子[mef (A)]、酯酶[ere(A)]及磷酸化酶[mph(C)],并与猪来源菌株38株(31株MRSA,7株MSSA)和患者来源MRSA菌株20株进行比较.结果 健康人群携带菌株对红霉素和克林霉素耐药率较高,分别为52％和27％.克林霉素诱导耐药率为29％.共鉴定35个spa型别,其中51.0％的spa型别为t189、t571、t002、t796、t437、t034和t701.52株健康人菌株主要携带erm(C) (57.7％)和erm(B)(34.6％),95.0％的临床分离菌株携带erm(A),100.0％猪鼻拭子分离菌株均携带erm(C)菌株.结论 携带erm(C)和erm(B)耐药基因的大环内酯类耐药菌株在健康人群中广泛存在,这些耐药基因在金黄色葡萄球菌中呈散在克隆传播.
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金黄色葡萄球菌肠毒素基因与MLST及spa分子克隆相关性研究
目的 检测不同来源金黄色葡萄球菌18种肠毒素基因(se)携带率,并进行spa分型,研究se基因在MLST、spa分子克隆中的分布特征. 方法 对518株不同来源金黄色葡萄球菌分离株进行spa分型及肠毒素基因测定,同时对其中250株进行MLST分子分型并分析其与spa型别的关系. 结果 518株金黄色葡萄球菌中,有7个基因sea、seb、seg、seo、sem、seq和sel出现的频率高,共形成115个不同基因簇(谱).人源、动物源和食源性菌株se基因携带状况与环境源菌株有较大差异.食源和人源分离株经典se基因sea、seb、sec、sed、see携带率显著高于动物源分离株,而人源、动物源和食源株的egc基因簇基因seg、sei、sem、sen、seo和/或selu携带率相似.大约78％的菌株可以spa分型并产生103种spa型.所有克隆复合体(CC) 239菌株主要的spa型为t030和t037,与sea-sek-seq基因簇高度相关.而CC630菌株主要spa型为t4547、t2196和t377,只携带少数se基因.egc基因簇主要存在于CC5、CC9、CC1281、CC1301和ST25中. 结论 不同来源金黄色葡萄球菌肠毒素基因携带状况及多样性与其分子克隆ST克隆、CCs、spa型别高度相关;非经典肠毒素基因是人类食物中毒的新的潜在危害.
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2010-2011年中国10个主要城市金黄色葡萄球菌分子流行病学研究
目的 了解我国10个主要城市金黄色葡萄球菌近两年耐药情况及其分子流行病学.方法 共收集2010到2011全国10个城市12所教学综合医院的507株非重复金黄色葡萄球菌,所有菌株进行20种药物敏感性检测及其spa分子分型分析.结果 甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA)的流行率是52.9％ (268/507),多重耐药率高达97.4％ (261/268),而甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)的多重耐药率是26.8％ (64/239),主要见于spa-t796 (23.4％,15/64).MRSA中共有34种spa分型,主要是MRSA spa-t030、spa-t037、spa-t002、spa-t570、spa-t437、spa-t311.MSSA中共有58种spa分型,常见spa分型为spa-t701、spa-t189、spa-t796、spa-t091、spa-t571.spa分型具有独特的地理分布差异,其中北京、西安、武汉、天津、重庆主要是spa-t030,而广州以spa-t037为主,上海主要是spa-t037和spa-t002,杭州和沈阳分别以spa-t311和spa-t570为主.值得注意的是,万古霉素MIC≥1mg/L主要见于spa-t037、spa-t570、spa-t701(P＜0.05),spa-t030同利福平耐药相关(P＜0.001),而同其他克隆相比,spa-t437主要表现为低水平苯唑西林耐药(P＜0.001).结论 spa分型具有独特的地理分布差异,主要spa分型与特殊耐药表型相关,提示临床用药要注意这些特殊表型.
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浙江省耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子分型及耐药性分析
目的 探讨浙江省分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的分子分型及菌株的耐药性.方法 连续收集2009年1月至2010年12月浙江省11家三级甲等医院临床分离的MRSA147株.采用琼脂稀释法对13种抗菌药物进行小抑菌浓度(MIC)测定.通过多位点序列分型(MLST)、SCCmec分型和spa分型进行菌株同源性分析,并比较不同分型菌株的耐药谱.利用辛普森指数计算三种分型方法的分辨率并进行比较.结果 147株MRSA菌株共分为14种ST型,其中ST239(75株)、ST5(24株)和ST59(23株)为主要流行克隆;SCCmec分型以Ⅲ型为主(76株),其次是Ⅳ型(32株)、Ⅱ型(24株)和Ⅴ型(9株),6株菌株无法分到已知型;spa基因分型被分为23种,其中以t030、t437、t002和t037菌株数多,分别为57,17,15和12株.药敏结果显示,MRSA菌株除对利奈唑胺、替考拉宁、万古霉素和去甲万古霉素敏感外,对其他常用抗菌药物的耐药率均很高,尤其是主要流行克隆ST239以及SCCmec Ⅲ型菌株耐药情况严重.三种分型方法的分辨率分别为0.6885,0.6577和0.8165,其中spa分型方法对菌株的区分能力更强.结论 浙江省临床分离的MRSA菌株存在主要流行克隆ST239-SCCmecⅢ-t030-MRSA,耐药形势严峻,应加强院内耐药菌株的监测.
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脓疱疮患儿鼻腔与皮损分离金黄色葡萄球菌的同源性
目的 研究脓疱疮患儿鼻腔与皮损金黄色葡萄球菌(SA)分离株的同源性.方法 以2005年8月～2006年11月在北京儿童医院皮肤科就诊的263例患儿为研究对象,对其鼻腔和皮损分离物进行SA培养.随机选择58例鼻腔SA阳性患儿,对其鼻腔分离株和皮损分离株进行spa分型,使用相关专业网站对spa分型结果进行分析,研究鼻腔和皮损SA分离株的同源性.结果 263例患儿中,106例为脓疱疮患儿,其中83例(78.3%)鼻腔SA阳性;157例为非脓疱疮患儿,其中33例(21.0%)鼻腔sA阳性;两组相比差异有显著性(P<0.01).两组患儿鼻腔SA阳性者的年龄主要集中在1～6岁.106例脓疱疮患儿中,30例皮损初发于面部,其中28例(93.3%)鼻腔SA阳性;76例皮损初发于其他部位,其中56例(73.7%)鼻腔sA阳性;两者相比差异也有显著性(P<0.01).spa分型结果显示,在30例脓疱疮患儿鼻腔和皮损SA分离株的对比中.有26例具有相同spa分型.结论 脓疱疮患儿皮损和鼻腔分离的sA间存在较高的同源性,鼻腔SA携带与脓疱疮的发生可能密切相关.
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金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因的检测
目的：对金黄色葡萄球菌（金葡萄）的耐消毒剂基因qacA/B进行检测分析。方法收集重庆市奉节县人民医院2014年1—12月住院患者中分离的金葡菌51株，采用药敏试验、PCR技术进行mecA和qacA/B检测，筛选出的携带有qacA/B基因的金葡菌进行spa分型，并分析相应的临床情况和对16种抗菌药物的耐药模式。结果金葡菌中mecA和qacA/B检测率分别为21.6%（11/51）和13.7%（7/51）；耐甲氧西林金葡菌（MRSA）菌株中qacA/B阳性率为54.5%（6/11），甲氧西林敏感金葡菌（MSSA）菌株中qacA/B阳性率为2.5%（1/40）,阳性率差异有统计学意义（P＜0.05）。7株qacA/B经spa分型发现4个型，分别为t037、t091、t932、t895，其中t037有4株来源于儿科病房，其余菌株各1株，以t037型别为主。结论该院分离出携带耐消毒剂qacA/B基因的金葡菌，MRSA携带率明显高于MSSA，并且可能至少存在1个来自院内的克隆株在儿科病房流行。
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金黄色葡萄球菌临床分离株spa分型和耐药特征研究
目的：研究临床分离金葡菌的耐药性和分子特征。方法对2011年5-11月在成都某医院分离的56株金葡菌进行抗菌药物敏感性检测，检测菌株携带 mecA 基因和 pvl 基因情况，并进行 spa 基因分型分析。结果56株金葡菌中，共检出耐甲氧西林金葡菌（MRSA）21株（37．5％），其中 mecA 基因阳性20株（95．2％）；甲氧西林敏感金葡菌（MSSA）35株（62．5％）。与 MSSA 相比，MRSA 对利福平、左氧氟沙星、莫西沙星、环丙沙星、庆大霉素和四环素的敏感率显著降低（P ＜0．05），MRSA对万古霉素、利奈唑胺、替加环素、喹奴普丁-达福普汀和呋喃妥因全部敏感。MRSA 分为6个 spa 型别，以 t030（66．7％）为主，MRSA-t030、MRSA-t002具有突出的多药耐药特征。MSSA 共分为18个 spa 型别，以 t189、t377和 t034列前3位，分别占14．3％、14．3％和11．4％，并在脓液标本检出1株新 spa 基因型 new1。检出5株杀白细胞毒素（PVL）阳性菌株，其中3株为MSSA-t189。结论t030是医院 MRSA 临床分离株中的 spa 优势型别，具有突出的多药耐药特征，在医院内广泛传播。MSSA 遗传多样性高，以 t189、t377和 t034列前3位。
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我院烧伤科临床分离金黄色葡萄球菌特征及同源性探讨
目的 探讨我院烧伤科临床分离金黄色葡萄球菌的特征及菌株间的遗传关系.方法 ⑴VITEK-2-compact鉴定及检测金黄色葡萄球菌及药物敏感性;⑵PCR等技术检测金黄色葡萄球菌SCCmec基因型、毒力因子及spa型别;⑶根据spaX区核苷酸序列特点,采用MEGA5.05软件聚类分析菌株间遗传关系.结果 ⑴2015年烧伤科共计分离到67株金黄色葡萄球菌,其中MRSA64株,MSSA3株.⑵所有菌株对青霉素耐药;四环素、红霉素、克林霉素、庆大霉素和利福平的耐药率大于60％;环丙沙星、左氧氟沙星和莫西沙星耐药率低于20％;未见万古霉素和利奈唑胺耐药株.⑶SCCmec分型以Ⅱ和Ⅲ为主,共计12株菌分离到PVL基因,Nuc和Coa基因含有率分别为100.00％(67/67)和95.52％(64/67).⑷Spa分型以t030、t062和t002为主;SpaX区聚类分析共计发现6组18人次可能存在流行病学联系.结论 ⑴该院烧伤科MRSA感染率和耐药率高,流行株主要是SCCmecII-t030和SCCmecIII-t002;⑵SpaX区多态性成簇分析菌株间的遗传关系的成本低廉、效果佳.
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2014年四川省部分县市食品从业人员中金黄色葡萄球菌携带情况调查
目的 了解四川省食品从业人员中金黄色葡萄球菌携带情况及其耐药现状,为食品安全风险评估提供参考.方法 选择绵阳市、德阳市、宜宾市等6市县的大型食堂作为采样点,采集相关食品从业人员双手的涂抹样.对分离的可疑致病菌进行鉴定、药敏试验、PCR耐药基因检测和金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)分型.结果 采集1 072份样本,阳性样本124份,检出率为11.57％;其中13株为MRSA,苯唑西林耐药率为10.48％,多重耐药占31.45％.13株MRSA中,11株携带mecA基因.SPA分型有5个型别.结论 四川省食品从业人员中金黄色葡萄球菌携带率较高,耐药情况严重,且菌株型别分布具有地理差异.有必要采取适当措施避免群体性食物中毒事件的发生.
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糖尿病患者分离金黄色葡萄球菌的分子生物学特征研究
目的 探讨本院糖尿病患者分离金黄色葡萄球菌的分子生物学特征.方法 采用VITEK 2 Compact仪器鉴定及检测金黄色葡萄球菌及药物敏感性;PCR检测金黄色葡萄球菌SCCmec基因型、毒力因子及Spa型别.结果 2010年1月-2015年6月就诊的452例糖尿病患者中共计分离到67株金黄色葡萄球菌,其中MRSA 63株,MSSA 4株.所有菌株对青霉素耐药;四环素、红霉素、克林霉素、庆大霉素和利福平的耐药率＞60％;环丙沙星、左氧氟沙星和莫西沙星耐药率低于20％;未见万古霉素和利奈唑胺耐药株.SCCmec分型以2型和3型为主,共计12株菌分离到PVL基因,Nuc67株,Coa 64株,Spa分型以t 030、t 062和t002为主.结论 本院糖尿病患者MRSA感染率和耐药率高,流行株分型主要以t 030和t 062为主.
关键词： 金黄色葡萄球菌 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 spa分型 -
瑞安地区社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌spa分型和耐药特征
目的 研究瑞安地区社区获得性MRSA的PVL毒力基因、spa分型和耐药特征.方法 收集2011年1月-2013年12月,瑞安人民医院分离的社区获得性金黄色葡萄球菌132株,头孢西丁纸片法筛选MRSA;对CA-MRSA患者收集病史资料,PCR法检测PVL基因,PCR测序进行spa分型,采用whonet 5.6进行耐药谱分析.结果 132株社区获得性金黄色葡萄球菌有36株为CA-MRSA,其中17株PVL基因阳性;36株spa分型有18种,其中t437有12株占33.3％;36株CA-MRSA耐药谱主要为POEC(青霉素、苯唑西林、红霉素、克林霉素)占36.1％.结论 瑞安地区CA-MRSA PVL基因阳性比例不高,不能使用PVL基因来确认是否CA-MRSA感染,PVL基因患者主要见于皮肤软组织感染,瑞安地区CA-MRSA spa分型主要为t437,主要耐药谱为POEC的耐药模式.
关键词： 社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 spa分型 杀白细胞素 -
临床分离金黄色葡萄球菌的流行病学特征分析
目的 研究哈尔滨医科大学附属第二医院临床分离金葡菌(Staphylococcus aureus,SA)的耐药情况、临床和分子流行病学特征,为控制SA的流行提供依据.方法 采用纸片扩散法对临床分离的60株SA进行药敏试验,PCR法检测菌株携带mecA基因和vl基因以及其他毒素基因的情况,并spa分型.结果 60株SA包括34株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant S.aureus,MRSA) (56.7％)和26株对甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(methicillin sensitive,S.aureus,MSSA)(43.3％).与MSSA比较,MRSA对利福平、左氧氟沙星、莫西沙星、环丙沙星、庆大霉素和四环素等抗菌药物的敏感性显著降低(P＜0.05).共检出携带毒素基因sea 50株,seb 4株,eta1株,pvl株,且均从CA-MSSA中检出,未检出sec、tst、sasX.spa分型结果:MRSA中t030有31株,t748有1株,无法分型2株;MSSA中有16个spa型别,以t078、t571和t1451位列前3位,分别占23.1％、7.7％和7.7％,检出1株新spa基因型t12444.结论 MSSA遗传多样性高,MRSA优势克隆型集中为t030,有必要加强监测和感染防控措施的落实.
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育肥前期和育肥后期肉猪携带金黄色葡萄球菌监测分析研究
目的 了解育肥前期和育肥后期肉猪及其养殖场环境和养殖人员携带金黄色葡萄球菌耐药、分子分型特点, 为预防和控制相关疾病提供科学依据.方法 在成都某养猪场对同一群肉猪的育肥前期和育肥后期2次进行采样, 进行金黄色葡萄球菌分离鉴定, 对分离株使用肉汤稀释法进行药物敏感性试验;以SPA和PFGE法进行分子分型研究.结果 共采集样本150份, 共分离35株金黄色葡萄球菌;35株分离株均为MRSA株, 均含有mec A基因.主要耐药谱为OXA-ERY-CIP-SXT-CLI-CHL-TET和OXA-ERY-CIP-CLI-CHL-TET.所有分离株SPA型别均为t899型;PFGE分析显示, 该猪场MRSA分离株存在2个明显的优势PFGE型.结论 肉猪及其养殖场金黄色葡萄球菌分离率高, 耐药严重, 肉猪、养殖环境和养殖人员有相互交叉污染和感染的可能性, 为确保人员健康及肉猪屠宰后猪肉质量, 应进一步加强对养殖过程的监测.
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医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌Spa和SCCmec分型研究
目的 对医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(HA-MRSA)A蛋白(Spa)和葡萄球菌mec基因盒(SCCmec)分型同源性研究,为预防和控制医院感染提供依据.方法 采用药敏纸片法(K-B法)、SCCmec分型及Spa分型技术,收集自2013年8月至2014年4月80株HA-MRSA,进行药敏试验和同源性分析,并检测毒力基因杀白细胞毒素(pvl)基因和毒性休克综合征(tsst)基因.结果 药敏结果显示,80株HA-MRSA对青霉素、氨苄西林/舒巴坦、亚胺培南均耐药,对环丙沙星耐药率为90.0％,对克林霉素耐药率为58.8％,对复方磺胺类对药率为13.8％,对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁均敏感.SCCmec分型结果显示,80株MRSA中SCCmecⅡ型占73.75％、SCCmecⅢ型(13.75％)、SCCmec V型(12.5％).Spa分型,28株为t2460型(35％)、9株为t002型(11％)、6株为t030型(8％)、7株为t632型(9％)、5株为t037型(6％),其他Spa型相对分散.pvl基因阳性率为7.5％(6株),tsst基因为阴性.结论 HA-MRSA SCCmec分型以Ⅱ为主,Spa分型以t2460型为主,有较高的同源性;HA-MR-SA对多种药物具有较高的耐药性并且存在多重耐药.
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我国猪源甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌的分离与分子分型研究
目的:近期研究发现,养殖生猪是甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(Methicillin -resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的重要宿主,本研究旨在阐明MRSA在我国养殖生猪中的分布和遗传学特征.方法:从我国河北、陕西、湖北和四川的生猪养殖场或屠宰场采集生猪鼻咽部拭子进行MRSA分离和鉴定,并对分离株进行了表型和基因型的分析.结果:从569份生猪鼻咽部拭子中分离出58株MRSA,这些菌株的耐药表型主要有2种:CIP - CLI - ERY - FOX - GEN - TET - CHL和CIP - CLI -ERY-FOX-GEN-TET;所有菌株均属于spa t899和SCCmecⅢ型,未检出PVL基因.经多位点测序分型分析后发现,我国猪源MRSA菌株以ST9型为主；脉冲场电泳(Pulssed Gel Electrophoresis,PFGE)分型分析显示,猪源MRSA菌株中存在优势的PFGE基因型和基因簇.结论:在我国养殖生猪中广泛存在ST9 - spa899 - SCCmecⅢ型MRSA菌株,这些菌株可能成为社区MRSA感染的新来源.
