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澳门特别行政区医院金黄色葡萄球菌耐药性分析及杀白细胞素基因的检测
目的 了解澳门临床分离的金黄色葡萄球菌(S.aureus)对常用抗菌药物的耐药情况及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的感染率;了解MRSA菌株中杀白细胞素(PVL)基因存在的情况.方法 收集2015年11月-2016年4月期间澳门某综合医院临床分离S.aureus 122株;利用Vitek2药敏卡检测S.aureus对常用16种抗菌药物的耐药情况,采用头孢西丁纸片扩散法检测MRSA的表型;PCR法进行mecA基因及PVL基因的检测.结果 122株临床分离的S.aureus样本中,对苄青霉素、红霉素、克林霉素耐药率较高,均>50%;其中MR-SA有49株占40.2%,MRSA组耐药率高于MSSA组,且有9种药物组间差异有统计学意义(P<0.05);MRSA中38株占77.6%mecA基因呈阳性;MRSA中23株占46.9%携带PVL基因,主要分布在脓汁、分泌物样品中,菌株主要来自18~64岁感染者,且以社区获得性MRSA(CA-MRSA)为主占65.2%.结论 澳门S.aureus对常用抗菌药物耐药率、MRSA感染率均较高;MRSA中mecA基因的检出率较低,PVL基因的检出率偏高.
关键词： 金黄色葡萄球菌 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 杀白细胞素 mecA 澳门 -
血培养中表皮葡萄球菌与ica、mecA基因研究
目的 从基因水平探索如何区分血培养中分离的表皮葡萄球菌(SEP)是污染菌或致病菌,为临床医师正确诊断提供科学依据.方法 将73株来源于阳性血培养,导管相关性感染(CRBSI)以及从临床健康医护人员手部、鼻黏膜分别检出的12、70、55株SEP,运用法国生物梅里埃公司全自动细菌鉴定仪进行菌株鉴定,PCR法检测icaA、icaB和mecA基因,比较ica基因和mecA基因在不同标本来源中的检出率.结果 血培养中同时携带ica和mecA基因占52.0％,同时,94.6％的菌株被检测出mecA基因;CRBSI的12株SEP中,有75.0％同时存在mecA和ica基因;从健康人手部皮肤分离的菌则很少同时具有ica和mecA基因,仅有15.8％的菌株携带mecA;健康人鼻黏膜定植的菌同时具有ica和mecA基因的占2l.80％,高于手部皮肤分离率,而ica及mecA基因的携带率分别为60.0％、30.9％,明显高于皮肤定植的SEP.结论 血培养中分离到SEP时,通过检测ica和mecA的存在与否对于区分污染菌和致病菌有重要作用.
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浙江、江西地区MRSA耐mecA、qacA/B基因检测
目的了解浙江、江西地区临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(meticillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)中mecA基因及qacA/B基因存在状况. 方法在2004年1～12月间分别从浙江、江西地区住院患者中分离到42株和31株MRSA,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析技术检测mecA基因及qacA/B基因. 结果 73株MRSA中mecA基因均为阳性(100%),qacA/B基因34株(46.6%)阳性,其中浙江地区qacA/B基因阳性率为52.4%,江西地区为38.7%. 结论浙江、江西地区临床分离的MRSA中mecA基因和qacA/B基因携带率很高或较高.
关键词： 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 mecA qacA/B 基因 -
金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因的检测
目的：对金黄色葡萄球菌（金葡萄）的耐消毒剂基因qacA/B进行检测分析。方法收集重庆市奉节县人民医院2014年1—12月住院患者中分离的金葡菌51株，采用药敏试验、PCR技术进行mecA和qacA/B检测，筛选出的携带有qacA/B基因的金葡菌进行spa分型，并分析相应的临床情况和对16种抗菌药物的耐药模式。结果金葡菌中mecA和qacA/B检测率分别为21.6%（11/51）和13.7%（7/51）；耐甲氧西林金葡菌（MRSA）菌株中qacA/B阳性率为54.5%（6/11），甲氧西林敏感金葡菌（MSSA）菌株中qacA/B阳性率为2.5%（1/40）,阳性率差异有统计学意义（P＜0.05）。7株qacA/B经spa分型发现4个型，分别为t037、t091、t932、t895，其中t037有4株来源于儿科病房，其余菌株各1株，以t037型别为主。结论该院分离出携带耐消毒剂qacA/B基因的金葡菌，MRSA携带率明显高于MSSA，并且可能至少存在1个来自院内的克隆株在儿科病房流行。
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皖北地区MRSA耐药基因研究
目的 了解皖北地区临床分离的耐甲氧西林金葡菌(MRSA)所携带5类药物的7种耐药基因状况,并探讨其耐药特性.方法 应用PCR方法检测64株MRSA中mecA、gyrA、qacA/B/C、qacA、ermA/B/C、ermB、tetM耐药基因.结果 64株MRSA中,mecA基因携带率为100%,tetM、gyrA、qacA/B/C、qacA、ermA/B/C、ermB基因携带率分别为95.3%、81.3%、34.4%、15.6%、39.1%、28.1%;基因组合以mecA+tetM+gyrA模式多,为26.5%.MRSA对万古霉素无耐药,对氯霉素、磷霉素、利福平的耐药性较低,对多种药物表现出较高的耐药性.结论 皖北地区MRSA中,mecA、tetM、gyrA基因携带率较高,而qacA/B/C、qacA、ermA/B/C、ermB基因携带率相对较低.
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金黄色葡萄球菌sasX、psm-mec、pvl三种毒力基因的检测与分析
目的 分析54株金黄色葡萄球菌的mecA基因与sasX、psm-mec、pvl三种毒力基因分布及临床相关性.方法 收集2013年1～5月南京医科大学第一附属医院临床分离的54株金黄色葡萄球菌,用PCR及测序的方法分析mecA、sasX、psm-mec、pvl 基因的携带情况,并结合患者的临床资料,探讨其临床相关性.结果 54株金黄色葡萄球菌中有23株mecA基因检测阳性,31株mecA基因阴性.mecA基因阳性菌株较mecA基因阴性株体外药敏试验呈多重耐药表型.sasX基因阳性1株,阳性率为1.9％;psm-mec基因阳性10株,阳性率为18.5％;pvl基因阳性38株,阳性率为70.4％.mecA基因阳性菌株psm-mec基因阳性率显著高于mecA基因阴性菌株(P＜0.01),pvl基因阳性率显著低于mecA基因阴性菌株(P＜0.05).mecA基因和psm-mec基因与临床感染严重程度显著相关(P均＜0.01).结论 联合检测mecA、psm-mec和pvl基因有利于金黄色葡萄球菌感染的诊断、治疗和预后综合评估.
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临床分离表皮葡萄球菌的耐药性分析及与icaD基因表达关系的研究
目的 了解我院ICU表皮葡萄球菌对抗生素的耐药性,为制定合理的预防控制措施,指导临床用药提供依据.方法 采用K-B纸片扩散法和分子生物学方法 对临床标本和健康人皮肤分离的共125株表皮葡萄球菌的耐药性及其mecA和icaD基因进行检测分析.结果 ①两组在icaD基因的表达与mecA基因表达均存在相关性(r=0.528,P=0.000;r=0.309,P=0.016);②mecA基因表达在临床患者体液组中较健康自愿者非体液组明显增高,差异有统计学意义(P＜0.01),而与icaD基因表达的菌株之间差异无统计学意义;③两组表皮葡萄球菌对利福平、呋喃妥因、利奈唑胺、万古霉素等均具有较高的敏感性;④两组mecA基因表达菌株对抗菌药物的敏感性差异无统计学意义,而基因表达菌株对青霉素、头孢西丁、复方新诺明、红霉素、氯霉素的敏感性差异有统计学意义(P＜0.05).结论 ICU表皮葡萄球菌对常用抗菌药物有较高的耐药性,须加强耐药监测,根据药敏结果 合理用药,控制院内感染.
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PCR 检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌耐药基因
目的:了解安徽省宿州地区临床分离的耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)所携带的7种耐药基因状况.方法:使用聚合酶链反应方法检测133株MRCNS中mecA、gyrA、qacA/B/C、qacA、ermA/B/C、ermB、TetM耐药基因.结果:133株MRCNS中,mecA基因携带率为100.0%,gyrA、qacA/B/C、qacA、TetM、ermA/B/C、ermB基因携带率依次为47.4%、51.9%、45.1%、25.6%、24.8%、12.0%.结论:安徽省宿州地区MRCNS中mecA、qacA/B/C、qacA基因携带情况常见,gyrA、TetM基因携带率较高,而ermA/B/C、ermB较低.
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关于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的研究
[1]1961年Jevons等发现了世界上首例耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcusaureus,MRSA).随后各国MRSA发生率逐渐上升,至[2]80年代后期MRSA已成为全球性的病原微生物,居医院感染病原菌的首位.本文将从MRSA分类、易感人群分布、主要感染部位、流行病学特点,以及与其研究相关的青霉素结合蛋白,mecA,SCmec进行综述.
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凝固酶阴性葡萄球菌生物被膜形成及耐药性分析
目的：分析临床血培养报阳的凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）生物被膜形成能力及耐药性特征。方法收集某院临床血培养报阳的 CNS 126株，采用96孔聚苯乙烯培养板分析生物被膜形成能力，聚合酶链反应（PCR）法检测细菌耐药基因 mecA，并分析菌株的耐药情况。结果126株 CNS 中，87株（占69．04％）生物被膜阳性，105株（83．33％）携带 mecA 基因。CNS 对青霉素、苯唑西林及红霉素的耐药率均＞80％，未发现对利奈唑胺、奎奴普丁／达福普汀、万古霉素和替加环素耐药的菌株；耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）对环丙沙星、庆大霉素、左氧氟沙星、青霉素、利福平和复方磺胺甲口恶唑的耐药率均高于甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球（MSCNS）（均 P ＜0．05）。对苯唑西林敏感的 CNS 中，有2株 mecA 检测阳性。结论临床血液来源的 CNS 具有较高的生物被膜形成能力，绝大部分为 MRCNS，且表现为多重耐药；存在耐药表型与基因型不一致的菌株。
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多重降落 PCR 检测血流感染产 ESBLs 肠杆菌科细菌与 MRSA 方法的建立和应用
目的：探索一种可同时检测产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的肠杆菌科细菌与耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的多重降落 PCR 方法。方法收集某院20l3年3月—2014年9月102份住院患者血培养阳性标本，针对产 ESBLs 肠杆菌科细菌的 SHV、TEM、OXA 基因和 MRSA 的 MecA 基因设计4对特异性引物，分别采用单一降落 PCR 和多重降落 PCR 对各耐药基因进行扩增，并将结果与药敏纸片法进行比较。结果各单一 PCR 均可扩增出特异性条带，并用多重降落 PCR 同时检测了4种耐药基因；建立的多重降落 PCR 对4种耐药基因（MecA、SHV、TEM、OXA）DNA 的检测下限分别为4．37、2．19、4．53和3．59 ng。与药敏纸片法相比，多重降落PCR 总灵敏度与特异性分别为100．00％、88．24％，检测 ESBLs 的灵敏度达100．00％，特异性为87．23％，检测MRSA 的灵敏度和特异度均为100．00％。结论该实验建立的多重降落 PCR 具有高灵敏度与特异性，可用于产ESBLs 肠杆菌科细菌和 MRSA 所致血流感染的快速诊断与流行病学调查，有利于指导临床使用抗菌药物。
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婴幼儿耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染状况和耐药基因的研究
目的 了解感染婴幼儿的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药性和耐药基因,明确检测青霉素结合蛋白2a(PBP2a)和甲氧西林耐药基因(mecA)的临床价值.方法 用金黄色葡萄球菌乳胶凝集试验和梅里埃鉴定金黄色葡萄球菌,同时用纸片扩散法完成12种常用抗生素的药敏试验.对头孢西丁的结果,按当年CLSI标准执行,用于判断菌株甲氧西林的耐药性.采用PBP2检测试剂盒检测PBP2a蛋白,PCR检测mecA基因.结果 2007-2009年婴幼儿共检出245株金黄色葡萄球菌,其中MRSA检出率为17.6%(43/245).MRSA对庆大霉素、复方新诺明、克林霉素、红霉素、氯霉素的耐药性均显著高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(P<0.05),其余抗生素的差异无统计学意义(P>0.05),43株MRSA的PBP2a蛋白和mecA基因的检测结果全为阳性,阳性率为100%.结论 用头孢西丁(30μg)能有效地筛查MRSA,检测PBP2a蛋白和mecA基因均能正确地确认MRSA.且检测PBP2a蛋白方便快捷,特异性好,值得临床推广.
关键词： 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 PBP2a蛋白 血浆凝固酶 耐药性 mecA -
4种检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌方法的评估
目的 评价4种检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)方法的临床应用价值.方法 对287株临床分离的凝固酶阴性葡萄球菌采用苯唑西林纸片扩散法,头孢西丁纸片扩散法和苯唑西林微量稀释法筛选MRCNS,并采用聚合酶链反应(PCR)检测mecA基因作为检测MRCNS的金标准.结果 287株中有218株为MRCNS,头孢西丁纸片扩散法筛选MRCNS敏感性为97.7%,特异性为95.7%;苯唑西林K-B法筛选MRCNS敏感性为99.1%.特异性为66.7%;苯唑西林微量稀释法筛选MRCNS敏感性为98.6%.特异性为60.9%.结论 头孢西丁纸片扩散法可作为医院微生物实验室日常工作中检测MRCNS的简便又准确的实验方法.
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药机制及检测方法研究进展
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)广泛传播是全球重要的公共卫生问题.葡萄球菌染色体mec基因盒元件(SCCmec)在金黄色葡萄球菌中转移是导致MRSA广泛传播的重要原因.SCCmec中的mecA和mecC基因分别编码PBP2a和PBP2c,其结合 β-内酰胺类抗菌药物能力低下,是导致MRSA发生的关键因素,而且mecA和mecC介导的耐药表型存在一定差异.本文就SCCmec的基本结构与功能 、mecA与mecC介导的耐药机制与表型以及MRSA的检测方法等方面做以下综述.
关键词： 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 mecA MECC 头孢西丁 苯唑西林 -
耐药基因mecA阻断策略逆转MRSA耐药性研究
目的 探讨脂质体包裹的靶向耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药基因mecA的硫代寡聚脱氧核苷酸(PS-ODN010)能否有效逆转MRSA对p-内酰胺类抗生素的耐药性.方法 以mecA mRNA为靶点设计合成PS-ODN010;薄膜分散法制备新型的包裹PS-ODN/PEI纳米微粒脂质体并进行质量评估;体外实验测定细菌生长曲线、菌落数(CFU)等;实时定量PCR法检测PS-ODN010对mecA表达的影响.结果 实验结果显示脂质体的包封率为75.9％±3.91％;脂质体包裹的PS-ODN010能浓度依赖性的抑制mecA表达;给予脂质体包裹的PS-ODN010后,苯唑西林明显抑制MRSA的生长(P＜0.01),MRSA的菌落数明显低于对照组(P＜0.01),苯唑西林等5种β-内酰胺类抗生素对MRSA的MIC显著降低.结论 脂质体包裹的抗mecA的PS-ODN010能够选择性抑制MRSA的mecA表达,有效逆转MRSA对β-内酰胺类抗生素的耐药性.
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聚合酶链反应快速检测多重耐药葡萄球菌实验研究
目的:应用聚合酶链反应检测葡萄球菌属菌株所携带耐甲氧西林mecA基因和红霉素抗性基因ermA、ermC与临床药敏试验比较.方法:根据上述抗性基因保守区域选用引物经聚合酶链反应检测成都地区临床分离78株耐药葡萄球菌与临床药敏试验比较并追踪其预后.结果:mecA基因型与表型符合率79.5%,ermA、ermC基因型与表型符合率82.2%,检测mecA、ermA、ermC基因均阳性患者与上述基因阴性患者死亡率存在显著性差异(P＜0.01).结论:多重PCR检测mecA、ermA、ermC基因敏感、快速,可作为判断预后参考指标.
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MecA、femB基因PCR联合扩增法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
目的 了解mecA、femB多重聚合酶链反应(PCR)法对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出效率.方法 对临床分离的71株非重复的金黄色葡萄球菌,采用多重PCR进行检测,结果 mecA、femB多重聚合酶链反应对MRSA的检测的特异性为100%,敏感性为97.87%.结论 mecA、femB多重PCR法可以对临床分离的金黄色葡萄球菌的甲氧西林耐药作出判断,是一种高效、敏感、特异性高的检测技术.
关键词： 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 mecA femB 多重聚合酶链反应 -
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MecA基因的鉴定分析
目的 探讨临床分离金黄色葡萄球菌中PCR检测MecA基因用于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)鉴定的评价.方法 对临床分离的120株金黄色葡萄球菌,根据PBP2a编码基因设计MecA引物采用PCR快速检测MRSA的决定基因MecA.结果 MecA基因片段经PCR扩增,可见MRSA扩增出一条310bp大小的DNA片段,而敏感株和金黄色葡萄球菌标准株ATCC25923均未出现特异长度的DNA片段;在临床分离的120株金黄色葡萄球菌中,MecA检测阳性率为45.0%(54/120).结论 采用PCR方法对金黄色葡萄球菌临床分离株中的MecA基因进行检测,对MRSA的快速、及时检出,有效控制MRSA造成的感染,指导临床用药,限制其传播等具有重要的现实意义.
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多重PCR检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
目的建立一种直接、快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的多重PCR方法.方法设计3对引物,在同一反应管中同时扩增检测mecA、femA和IS431基因,扩增产物经凝胶成像系统分析.结果9株MRSA菌株mecA、fe-mA和IS431均阳性,5株凝固酶阴性的耐甲氧西林的葡萄球菌mecA和IS431阳性,7株甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌femA和IS431阳性,11株甲氧西林敏感的凝固酶阴性葡萄球菌IS431阳性,而大肠杆菌、肺炎链球菌等非葡萄球菌mecA、femA和IS431均阴性;当MRSA菌浓度达102CFU/ml时就可检出.结论通过同时扩增mecA、femA和IS431基因的多重PCR技术,能准确、快速地鉴定耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性的葡萄球菌.
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IDI-MRSA PCR对75例手术患者进行MRSA筛选的使用评价
目的 评价IDI-MRSA PCR检测手术患者MRSA的性能和可靠性.方法 同时使用选择平板法、选择肉汤增菌法、普通PCR和IDI-MRSA PCR对75例手术住院患者进行MRSA筛选检测.并以选择肉汤增菌法为金标准,对其它三种方法进行各项指标比较.结果 选择平板法敏感度为78.6%,特异性为100%;普通PCR敏感度100%,特异性为90.2%;IDI-MRSA PCR的敏感度和特异性均为100%.结论 IDI-MRSA PCR克服了选择平板培养法的灵敏度低、普通PCR的特异性差以及金标准方法的耗时长等缺点,是筛选手术患者MRSA的较好的诊断方法.
关键词： MRSA IDI-MRSA PCR mecA SCCmec orfX
