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定量与半定量方法评估DXA影像发现椎体骨折的比较
目的 比较形态学定量评估方法和Genant半定量方法对DXA影像进行椎体骨折评估的一致性.方法 对217例≥50岁绝经后女性作骨密度检测的同时进行胸腰椎T4～L5正侧位扫描,采用形态学定量评估方法和Genant半定量方法进行椎体骨折评估,比较二种方法确定椎体骨折的一致性和二种方法确定椎体骨折组与无椎体骨折组的临床特征.结果 形态学定量评估方法确定59例椎体骨折,椎体骨折率为27.19％;Genant半定量方法确定60例椎体骨折,椎体骨折率为27.65％.kappa一致性分析,κ=0.80.二种方法确定椎体骨折组与无椎体骨折组的临床特征无统计学差异.结论 Genant半定量方法和形态学定量评估方法均是评估椎体骨折的有效方法.
关键词： 椎体骨折 Genant半定量方法 定量测量 OXA -
亚胺培南耐药的鲍氏不动杆菌OXA、AdeABC、CarO基因及生物膜的研究
目的：通过对临床分离的亚胺培南耐药和敏感鲍氏不动杆菌 OXA、AdeABC、CarO基因及生物膜形成分布进行调查，进一步分析鲍氏不动杆菌对亚胺培南的耐药机制。方法对2014年11月－2015年10月医院临床分离106株亚胺培南耐药和102株亚胺培南敏感的鲍氏不动杆菌运用PCR技术分别进行 OXA、AdeABC、CarO基因的检测；采用96孔微量滴定板法体外构建生物膜并对其进行定量。结果在所有检测菌株中亚胺培南耐药和敏感菌株OXA‐23检出率分别为99．1％和2．9％，差异有统计学意义（P＜0．05）；OXA‐24基因仅在1株耐药菌株中检出；OX A‐51基因均为阳性，而OX A‐58基因均为阴性；而 A deA BC基因在耐药和敏感菌株分布具有较大差异。结论 OX A‐23基因是流行的基因，是医院耐亚胺培南鲍氏不动杆菌的主要OXA 亚型；临床鲍氏不动杆菌所引发的感染多数与生物膜的形成有关，对医院临床治疗提供了有效的科学依据。
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郑州地区ESBLs基因型分布研究
目的 明确ESBLs在郑州地区的基因型分布.方法 收集78株临床分离产ESBLs革兰阴性杆菌,混合后提取总质粒作为模版,用特异性引物进行PCR扩增.结果 显示TEM、SHV、OXA1、OXA20、CTX-M1、CTX-M14和CTX-M25的泳道有阳性条带.结论 郑州地区目前已有TEM、SHV、OXA和CTX-M四种亚型的ESBIs流行.
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D类碳青霉烯酶的研究进展
碳青霉烯酶(carbapenemases)是指能够明显水解亚胺培南或美罗培南的一类β-内酰胺酶,它包括AMBLER分子分类的A、B和D三类酶.其中,B类为金属酶,属于BUSH功能分类的3群;A、D类为丝氨酸酶,分别属于BUSH分类的2f和2d亚群[1,2].
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黑龙江地区耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌表型检测及同源性分析
目的：对黑龙江地区耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌（ carbopenems antibiotics resistance acinetobacter baumannii ，CRAB）表型检测及同源性分析，了解该地区耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的耐药机制及耐药菌株的克隆动向。方法采用改良Hodge试验，多底物-多抑制剂协同法分类检测碳青霉烯酶（carbapenem-hydrolyzing β-lactamases，CHBLs）；应用PCR扩增OXA-23、OXA-24、OXA-58、OXA-51等对收集的菌株进行分子分型，分析其耐药菌株之间的亲缘性关系。结果319株CRAB的临床分离株中，286株改良Hodge试验阳性即产碳青霉烯酶，其中187株CRAB产丝氨酸类碳青霉烯酶（SCHBLs），无金属类碳青霉烯酶（ MCHBLs）。187株CRAB碳青霉烯类酶基因扩增显示OXA-51为阳性扩增，OXA-23基因阳性率为98％，OXA-24和OXA-58基因未扩增出特异条带。结论 OXA-23基因是在黑龙江地区流行的CRAB主要基因型。
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重组人p53腺病毒联合奥沙利铂对结肠癌细胞的生长抑制作用
目的 观察外源p53基因在结肠癌细胞内的表达、对肿瘤细胞生长的影响,及对结肠癌细胞化疗敏感性的作用和机制.方法 用重组人p53腺病毒注射液(rAd-p53)及奥沙利铂(OXA)单独及联合作用于结肠癌细胞株SW1116不同时间后,CCK-8法检测其对体外培养细胞的抑制率,免疫组织化学S-P法检测p53蛋白的表达情况,流式细胞仪(FCM)分析其细胞凋亡蛋白caspase3的表达情况.结果 rAd-p53及OXA单独作用时,随药物浓度及作用时间的增加,细胞的生长抑制率逐渐增高;二者联合作用24 h,在较低浓度时细胞生长抑制率即明显增高(P值均<0.05);OXA(6.25 μg/ml)与rAd-p53(5×105、5×106、5×107、5×108、5×109 vp/ml)联合作用24 h后,与对照组比较,结肠癌细胞caspase-3蛋白的含量升高,但p53蛋白无明显升高.结论 OXA和 rAd-p53单药可抑制结肠癌细胞SW1116的生长 , 二者联合对结肠癌细胞的抑制作用增强; rAd-p53有增强OXA化疗敏感性的作用,其机制与通过线粒体途径激活下游的 caspase- 3诱导细胞凋亡有关.
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铜绿假单胞菌OXA-1编码基因的克隆及序列分析
目的研究一株铜绿假单胞菌产生的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型.方法采用聚合酶链反应(PCR)扩增该株细菌的编码基因片段,克隆入PET-28s载体中,表达于大肠杆菌BL-21感受态细胞,并对PCR产物测序,分析其基因型.结果测序结果显示该株细菌产生的ESBLs为OXA-1亚型,其基因序列与GeneBank中OXA-1编码基因的同源性>99%.结论被研究的铜绿假单胞菌的ESBLs亚型为OXA-1.
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重组人p53腺病毒联合奥沙利铂对胃癌细胞SGC-7901的生长抑制作用
目的 观察外源p53基因在胃癌细胞SGC-7901内的表达及其对胃癌SGC-7901细胞生长的影响、对胃癌细胞化疗敏感度的作用及机制.方法 用重组人p53腺病毒注射液(rAd-p53)及奥沙利铂(OXA)单独及联合作用于胃癌细胞株SGC-7901不同时间后,CCT-8法检测其对体外培养SGC-7901细胞的抑制率,免疫组织化学SP法检测p53蛋白的表达情况,流式细胞仪(FCM)分析其细胞凋亡蛋白Caspase-3的表达情况.结果 rAd-p53及OXA单独作用SGC-7901细胞时,随药物浓度及作用时间的增加,细胞的生长抑制率逐渐增高;两者联合作用48h,其在较低浓度时即可显著抑制细胞生长(P＜0.05);OXA(6.25μg/ml)与rAd-p53(5×107、5×108、5×109vp/ml)联合作用48h后,胃癌细胞caspase3蛋白的含量较对照组升高,但p53蛋白无明显升高.结论 OXA和rAd-p53单药可抑制胃癌细胞的生长,两者联合对胃癌细胞的抑制作用明显增强;rAd-p53有增强OXA化疗敏感度的作用,其机制与通过线粒体途径激活下游的caspase-3诱导细胞凋亡有关.
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多重降落 PCR 检测血流感染产 ESBLs 肠杆菌科细菌与 MRSA 方法的建立和应用
目的：探索一种可同时检测产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的肠杆菌科细菌与耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的多重降落 PCR 方法。方法收集某院20l3年3月—2014年9月102份住院患者血培养阳性标本，针对产 ESBLs 肠杆菌科细菌的 SHV、TEM、OXA 基因和 MRSA 的 MecA 基因设计4对特异性引物，分别采用单一降落 PCR 和多重降落 PCR 对各耐药基因进行扩增，并将结果与药敏纸片法进行比较。结果各单一 PCR 均可扩增出特异性条带，并用多重降落 PCR 同时检测了4种耐药基因；建立的多重降落 PCR 对4种耐药基因（MecA、SHV、TEM、OXA）DNA 的检测下限分别为4．37、2．19、4．53和3．59 ng。与药敏纸片法相比，多重降落PCR 总灵敏度与特异性分别为100．00％、88．24％，检测 ESBLs 的灵敏度达100．00％，特异性为87．23％，检测MRSA 的灵敏度和特异度均为100．00％。结论该实验建立的多重降落 PCR 具有高灵敏度与特异性，可用于产ESBLs 肠杆菌科细菌和 MRSA 所致血流感染的快速诊断与流行病学调查，有利于指导临床使用抗菌药物。
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OXA、 AdeABC、 CarO基因及生物膜在鲍曼不动杆菌中的分布研究
目的 通过对OXA、AdeABC、CarO基因及生物膜在临床分离的亚胺培南耐药和敏感鲍曼不动杆菌(AcinetobacterBaumannii,AB)中分布特征的研究,进一步探讨AB对亚胺培南的耐药机制.方法 运用PCR技术对OXA、AdeABC、CarO基因进行检测;采用微量滴定板法制备生物膜模型及定量实验.结果 OXA-23在亚胺培南耐药和敏感菌株中的检出率分别为99.1％和2.9％(P＜0.05);OXA-51基因在所有检测菌株中均被检出.AdeABC在耐药菌株中的检出率为98.1％,而在敏感菌株中的检出率仅为64.7％(P＜0.05).CarO基因在耐药和敏感菌株中的检出率分别为97.2％和99.0％,P＞0.05.产生物膜菌株在耐药和敏感菌株分别为67.9％和75.5％,P＞0.05.结论 OXA-51基因是确认是否为AB的标志性基因;OXA-23基因在AB对碳青霉烯类抗生素耐药机制中起到了重要的作用;AdeABC外排泵在降低AB对亚胺培南的敏感性,增强细菌耐药性方面起着重要作用;外膜蛋白CarO的改变对于降低AB对亚胺培南的敏感性的可能性不大;临床分离的AB所引发的感染多数与生物膜的形成有关.
