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临床分离艰难梭菌毒素携带特征研究
目的 对医院细菌室送检粪便标本中分离出的艰难梭菌,进行毒素基因以及耐药基因的初步分析.方法 将细菌室收集到的112份粪便标本,经选择性厌氧培养,谷氨酸脱氢酶(GDH)以及API 20A生化条鉴定后,分离出12株艰难梭菌,分别采用PCR的方法检测tcdA和tcdB基因、二元毒素基因,克林霉素抗性基因(ermB).结果 12株艰难梭菌中8株为毒素基因阳性,其中tcdA+tcdB+为5株,占62.5%;tcdA-tcdB+为3株,占37.5%;二元毒素基因均为阴性;耐药基因ermB阳性为4株,占50%.结论 艰难梭菌tcdA-tcdB+毒株所占比例增加,临床单独检测A毒素易造成漏检;艰难梭菌耐药现象值得关注.
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G群链球菌的分子鉴定及耐药特征分析
目的 探讨16S rDNA测序法鉴定β-溶血性G群链球菌的价值,通过体外药物敏感性试验确定G群链球菌对青霉素、红霉素和克林霉素等抗菌药物的耐药性,并确定红霉素耐药菌株的耐药表型及基因型.方法 采用API 20 Strep链球菌鉴定系统、兰氏抗原血清分型和16S rDNA测序法对复旦大学附属华山医院临床分离的50株β-溶血性G群链球菌进行鉴定.采用琼脂稀释法对该50株G群链球菌进行体外药物敏感性试验,并通过纸片法D试验测定红霉素耐药菌株的耐药表型.通过聚合酶链反应(PCR)检测其大环内酯类耐药基因ermB和mefA.结果 50株链球菌经手工API 20 Strep链球菌鉴定系统鉴定,均为停乳链球菌.16S rDNA PCR扩增及测序,42株为停乳链球菌,8株为咽峡炎链球菌,鉴定概率＞97％.以测序结果为标准,API 20 Strep链球菌鉴定系统鉴定的准确率为84％.兰氏抗原血清分型均为G群.药物敏感性试验结果显示,50株G群链球菌中没有对左氧氟沙星、头孢曲松、万古霉素和青霉素耐药的菌株.红霉素耐药菌株共28株(56％),其中cMLs型耐药菌株26株(52％),Ms型耐药菌株2株(4％),没有发现iMLs型耐药菌株,红霉素中介菌株4株(8％).克林霉素耐药菌株共31株(62％),其中红霉素敏感而克林霉素耐药菌株3株(6％),红霉素中介而克林霉素耐药菌株2株(4％).cMLs型耐药菌株中均检测到ermB基因,2株Ms型耐药由mefA基因介导,4株红霉素中介菌株中检出ermB和mefA基因各1株.结论 16S rDNA测序法能准确鉴定G群链球菌.G群链球菌对红霉素和克林霉素的耐药率有所提高,但对青霉素敏感,β-内酰胺类药物可以作为治疗G群链球菌感染的首选药物.
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皖北地区MRSA耐药基因研究
目的 了解皖北地区临床分离的耐甲氧西林金葡菌(MRSA)所携带5类药物的7种耐药基因状况,并探讨其耐药特性.方法 应用PCR方法检测64株MRSA中mecA、gyrA、qacA/B/C、qacA、ermA/B/C、ermB、tetM耐药基因.结果 64株MRSA中,mecA基因携带率为100%,tetM、gyrA、qacA/B/C、qacA、ermA/B/C、ermB基因携带率分别为95.3%、81.3%、34.4%、15.6%、39.1%、28.1%;基因组合以mecA+tetM+gyrA模式多,为26.5%.MRSA对万古霉素无耐药,对氯霉素、磷霉素、利福平的耐药性较低,对多种药物表现出较高的耐药性.结论 皖北地区MRSA中,mecA、tetM、gyrA基因携带率较高,而qacA/B/C、qacA、ermA/B/C、ermB基因携带率相对较低.
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PCR 检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌耐药基因
目的:了解安徽省宿州地区临床分离的耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)所携带的7种耐药基因状况.方法:使用聚合酶链反应方法检测133株MRCNS中mecA、gyrA、qacA/B/C、qacA、ermA/B/C、ermB、TetM耐药基因.结果:133株MRCNS中,mecA基因携带率为100.0%,gyrA、qacA/B/C、qacA、TetM、ermA/B/C、ermB基因携带率依次为47.4%、51.9%、45.1%、25.6%、24.8%、12.0%.结论:安徽省宿州地区MRCNS中mecA、qacA/B/C、qacA基因携带情况常见,gyrA、TetM基因携带率较高,而ermA/B/C、ermB较低.
