首页 > 文献资料
-
Cariporide对胆囊癌细胞株GBC-SD转移及基质金属蛋白酶表达的影响
目的 研究钠氢交换蛋白1(NH1)特异性抑制剂Cariporide对人胆囊癌细胞株GBC-SD体外转移能力的影响,初步探讨其作用机制.方法 采用双羧乙基碳氧荧光素四乙酰氧甲酯(BCECF-AM)荧光染料和酚红检测细胞内外氢离子浓度(pH)值.采用细胞-基质黏附实验、细胞划痕实验和细胞迁移侵袭(Transwell)实验分别检测Cariporide对GBC-SD细胞的黏附、迁移和侵袭能力的影响;实时PCR、蛋白印迹法分别检测Cariporide对GBC-SD细胞基质金属蛋白酶(MMPs) mRNA及蛋白表达的影响.结果 Cariporide处理后GBC-SD细胞的细胞内pH和NHE1活性明显下降,胞外pH明显上升.细胞-基质黏附实验结果显示,Cariporide处理后的GBC-SD细胞体外黏附率降低至对照组的80％和61％,差异有统计学意义(P＜0.05).细胞划痕实验和Transwell侵袭实验结果显示细胞损伤愈合的速度和穿过滤膜的细胞数量均少于对照组.实时PCR及蛋白印迹结果表明Cariporide可显著降低MMP-2和MMP-9 mRNA和蛋白水平的表达量(P均＜0.05).结论 Cariporide可有效抑制人胆囊癌细胞株GBC-SD的体外转移能力,其作用机制可能与细胞内外pH值改变降低MMPs的表达有关.
-
Cariporide对未成熟兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用
目的探讨甲磺酸苯甲酰胍类化合物Cariporide对未成熟兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制. 方法以离体灌注幼兔心脏为模型,将24只幼兔心脏随机均分为对照组(应用St.ThomasⅡ液)和实验组(应用Cariporide +St.ThomasⅡ液),常温缺血60 min,期间每20 min灌注1次保护液,恢复灌注后,测定心率、心律、平均动脉压、冠脉流量、左心室收缩压、左心室舒张末压、左心室压力微分(±dp/dt)和心肌酶.将另6只幼兔的心肌单细胞悬液随机均分为基础(未予缺氧处理)、钙对照和钙实验组(经缺氧、再复氧处理,钙实验组于缺氧时加入Cariporide 1 μmol/L),用激光共聚焦显微镜测定心肌细胞内游离钙([Ca2+]i)浓度,以钙荧光强度比值表示. 结果与对照组相比,实验组缺血、再灌注后室颤发生率低,心肌酶漏出量少,平均动脉压、左心室收缩压、冠脉流量及±dp/dt均明显增加,左心室舒张压低.未成熟兔心肌细胞内[Ca2+]i浓度,钙实验组比钙对照组明显减少(P<0.01),钙实验组与基础组差异无显著意义(1 446±128与1 375±102,P>0.05).结论 Cariporide对未成熟心肌缺血再灌注损伤有保护作用,其机制是抑制心肌细胞内[Ca2+]i超载引起的缺血再灌注损伤.
关键词： Cariporide 心肌 细胞保护 -
Cariporide在不同pH停搏液中心肌保护作用的比较
目的 研究特异性Na+/H+交换抑制剂卡立泊来德(cariporide)在不同pH停搏液中的心肌保护作用.方法 64只SD雄性大鼠随机分成8组(每组8只),对照组4组,停搏液为pH值分别为6.2、7.0、7.4、7.8的改良St.ThomasⅡ停搏液;实验组4组,停搏液为加入cariporide,pH值分别为6.2、7.0、7.4、7.8的改良St.Thomas Ⅱ停搏液.离体鼠心在改良Langendorff灌注模型上30 min预灌注,60min停搏,30min再灌注,监测心脏缺血前及复灌后血流动力学变化,心肌酶CK-MB、LDH变化,电镜观察心肌超微结构改变,评价心肌保护效果.结果 再灌注后,实验组不同pH值停搏液与对照组相应pH值停搏液比较,可显著促进低温缺血心肌的功能恢复,降低心肌酶CK-MB、LDH的漏出(P＜0.05或P＜0.01),明显减轻心肌超微结构损伤.实验组中pH值分别为6.2、7.0、7.4的停搏液与pH值7.8的停搏液相比,低温缺血心肌功能恢复更好,心肌酶CK-MB、LDH的漏出量更低(P＜0.05或P＜0.01),心肌超微结构损伤更小,尤以pH值为7.0的更佳.对照组中,pH分别为6.2、7.0、7.4的停搏液比pH值7.8的停搏液更有助于低温缺血心肌的功能恢复,降低心肌酶CK-MB、LDH的漏出量(P＜0.05),心肌超微结构损伤较轻.结论 特异性Na+/H+交换抑制剂cariporide加入弱酸性的St.ThomasⅡ停搏液更有助于低温缺血心肌的功能恢复,对心肌的保护作用更强.
关键词： 心麻痹液 心肌再灌注损伤 氢离子浓度 Cariporide -
钠氢交换蛋白抑制剂Cariporide对MCF-7/ADR细胞化疗敏感性影响机制研究
目的 肿瘤细胞膜内外pH值的改变对于肿瘤的侵袭、转移密切相关,通过细胞内外的H+/Na+交换维持细胞内环境的稳态,细胞的凋亡水平与化疗药物耐药的发生密切相关.本研究观察钠氢交换蛋白1(sodium hydrogen exchange 1,NHE-1)抑制剂 Cariporide(CP)对人乳腺癌细胞MCF-7/ADR增殖、凋亡和对多柔比星(adriamycin,ADR)敏感性影响,并探讨其相关作用机制.方法 以终浓度分别为3、6、9、12、60和100 μg/mL的CP处理MCF-7和MCF-7/ADR细胞48 h,以终浓度分别为1、5、50和100 μg/mL的ADR以及2种药物联用分别处理MCF-7/ADR细胞24、48 h,CCK8法检测其对细胞的增殖影响,Graphpad prism 5分别计算单用及药物联用时的IC50,CompuSyn软件计算2种药物的联用指数(CI);采用流式细胞术检测药物单用及联用后对细胞凋亡率的影响;RT-PCR法检测MDR-1、NF-κB等相关核转录因子的表达;蛋白质印迹法检测CD44、MDR-1、NF-κB p65、Caspase-3/9和Bcl-2的表达.结果 CP对乳腺癌细胞有增殖抑制作用,呈剂量及时间依赖性,CP与ADR联用可以明显降低ADR对MCF-7/ADR细胞的IC50值,其值由(82.45±5.86) μg/mL下降至(42.2±2.03) μg/mL,t=7.57,P<0.05.流式细胞术检测结果显示,对照组、单用ADR组、单用CP组、药物联用组细胞的凋亡率分别为(4.02±0.19)%、(6.34±0.39)%、(9.55±0.47)%和(15.12±0.65)%,F=666.2,P<0.001.荧光定量PCR结果表明,单用CP及CP联用ADR组MDR-1、NF-κB mRNA 表达均下降.蛋白质印迹法结果显示,单用CP及CP联用ADR耐药相关蛋白CD44、MDR-1表达下调,NF-κB p65表达下调,抑凋亡蛋白Bcl-2表达下降,凋亡相关蛋白cleaved Caspase-3和cleaved Caspase-9表达上调.结论 CP可以增加MCF-7/ADR细胞对ADR的敏感性,可能是通过下调耐药相关蛋白的表达,活化凋亡相关蛋白,诱导细胞凋亡,从而有效逆转肿瘤细胞的耐药.
关键词： NHE-1抑制剂 Cariporide 乳腺癌 增敏 逆转耐药 -
Na+/H+交换抑制剂cariporide抗心肌缺血再灌注损伤研究进展
Na+/H+交换抑制剂cariporide能减少细胞内Na+和Ca2+的超负荷,减轻心肌缺血再灌注损伤,延缓心肌从缺血到坏死的发展进程.这种保护作用从单个细胞、离体心脏到在体模型均有实验依据.缺血前使用效果明显,再灌注时使用仍有一定效益.采用cariporide治疗心肌缺血高危患者的第一项大规模临床试验已经完成,结果不及想象中好,但仍有进一步研究的必要.
关键词： Cariporide NHE抑制剂 缺血再灌注 -
KATP通道开放剂合用Na+/H+交换阻滞剂对离体大鼠心肌梗死范围的影响
目的:探讨ATP敏感性钾通道(KATP通道)开放剂尼可地尔对离体大鼠缺血后心功能及合用Na+/H+交换阻滞剂Cariporide对心肌梗死范围的影响.方法:用Langendorff装置,观察不同浓度尼可地尔对冠状动脉(简称冠脉)灌流量及缺血后心功能的影响.应用离体大鼠双冠脉分别灌流模型研究心肌梗死面积,将左冠脉灌流量减到原灌流量的5%,行1 h缺血及2 h再灌注.结果:尼可地尔1μmol/L可明显增加冠脉灌流量,20 μmol/L时左室收缩压明显下降,在缺血前应用1 μmol/L尼可地尔有改善缺血后心功能的作用,对照组经1 h缺血及2 h再灌注后心肌梗死范围为(47.2±9.0)%,尼可地尔和Cariporide在缺血中应用缩小心肌梗死范围分别为(26.5±7.6)%和(30.7±6.6)%,两者合用时心肌梗死范围为(19.9±5.3)%.结论:尼可地尔有明显扩张冠脉、保护缺血后心功能及缩小心肌梗死范围的作用.联合应用Cariporide可进一步缩小心肌梗死范围.
关键词： 心肌梗死 心功能 尼可地尔 Cariporide -
Na+ /H+交换阻滞剂Cariporide对离体大鼠心肌梗死范围的影响
目的:探讨 Na+/H+交换阻滞剂Cariporide对离体大鼠心肌梗死范围的影响.方法:用离体大鼠双冠脉分别灌流心肌缺血模型,将大鼠心脏进行45 min的低流量缺血(用原灌流量的5%进行灌流),再灌注2 h.药物在缺血及再灌注的不同时期应用.结果:在缺血及再灌注时和缺血再灌注时联合应用1μ mol/L Cariporide,心肌梗死范围分别是(7±1)%,(7±2)%,(2±1)%,较对照组(20±4)%明显缩小.在缺血后0,10,30 min时分别应用,其心肌梗死范围分别是(7±2)%,(10±1)%,(17±3)%,较对照组(22±3)%明显缩小.在再灌注0,10 min时分别应用,其心肌梗死范围分别是(6±2)%,(15±2)%,而对照组为(19±3)%.结论:Na+/H+交换阻滞剂Cariporide在缺血及再灌注早期应用有明显的缩小心肌梗死范围作用.
关键词： 心肌梗死 Na+/H+交换阻滞剂 Cariporide 大鼠 -
Cariporide对LPC诱导单核细胞与内皮细胞粘附及粘附分子表达的抑制作用
目的 研究Cariporide对溶血性磷脂酰胆碱(LPC)诱导的单核细胞与血管内皮细胞粘附以及细胞间粘附分子(ICAM-1)、P-选择素(P-selectin)表达的影响.方法 人外周血液单核细胞采用Ficoll-Hypaque分离方法获得.在培养的小牛胸主动脉内皮细胞模型上,用蛋白质定量分析方法测定单核细胞与内皮细胞的粘附率;用酶联免疫吸附分析(ELISA)检测P-selectin和ICAM-1在内皮细胞的表达水平;用BCECF荧光染料测量细胞内pH值.结果 LPC 5 mg·L-1明显促进单核细胞与内皮细胞粘附.Cariporide 5、10和20 μmol·L-1剂量依赖性地抑制LPC诱导的单核细胞与内皮细胞粘附及粘附分子表达,使粘附率从36%分别降至23%、18%和16%,使LPC诱导的P-selectin、ICAM-1在内皮细胞上表达率分别从170%降到142%、122%和121%以及从327%分别降至208%、148%和134%.Cariporide降低了内皮细胞内pH值.结论 Cariporide对LPC诱导的单核细胞与内皮细胞的粘附以及P-selectin、ICAM-1的表达有明显抑制作用.其作用机制可能与Cariporide抑制Na+/H+交换蛋白、降低细胞内pH值有关.
关键词： Na+/H+交换蛋白 pH值 溶血性磷脂酰胆碱 Cariporide 粘附分子 -
Cariporide对离体鼠心缺血再灌注损伤的保护作用
目的 探讨特异性Na+/H+交换抑制剂卡立泊来德(Cariporide)加入停搏液中对缺血再灌注心肌的保护作用.方法 20只SD雄性大鼠随机分成2组(每组10只),即对照组(停搏液为改良St.ThomasⅡ停搏液)和实验组(停搏液为加入Cariporide的改良St.ThomasⅡ停搏液).离体鼠心在改良Langendorff灌注模型上30 min预灌注,60 min停搏,30 min再灌注,监测心脏缺血前及复灌后血流动力学变化,心肌酶CK-MB、LDH变化,电镜观察心肌超微结构改变,评价心肌保护效果.结果 再灌注后,实验组心功能、心肌超微结构的改善明显优于对照组;心肌酶CK-MB、LDH的漏出明显低于对照组(P＜0.05).结论 特异性Na+/H+交换抑制剂Cariporide作为停搏液的辅剂可显著减轻心肌缺血再灌注损伤,改善低温缺血心肌的功能恢复.
关键词： Cariporide 再灌注损伤 心肌保护 -
Cariporide对晚期氧化蛋白产物损伤血管内皮功能的保护作用
目的 研究晚期氧化蛋白产物在体外能否直接损伤大鼠离体胸主动脉的内皮功能,及观察Cariporide对晚期氧化蛋白产物诱导的血管内皮损伤是否具有保护作用并探讨其可能的机制.方法 雄性SD大鼠在戊巴比妥麻醉下,开胸切取胸主动脉,制成3～4 mm血管环备用,按文献方法制备晚期氧化蛋白产物.用不同浓度晚期氧化蛋白产物(1、2和3 mmol/L)和Cariporide孵育大鼠离体胸主动脉环, 分别检测乙酰胆碱引起的内皮依赖性舒张反应和硝普钠引起的非内皮依赖性舒张反应.并测定血管组织中超氧化物歧化酶的活性、丙二醛及一氧化氮的含量. 结果晚期氧化蛋白产物能损伤乙酰胆碱诱导的内皮依赖性舒张反应,且血管组织丙二醛含量增加,超氧化物歧化酶活性下降,一氧化氮释放减少.Cariporide (0.01～1 μmol/L)与晚期氧化蛋白产物(3 mmol/L)共同孵育血管环90 min,能改善晚期氧化蛋白产物对血管内皮依赖性舒张反应的损害,丙二醛含量减少,超氧化物歧化酶活性升高,一氧化氮释放增加.结论 Cariporide对晚期氧化蛋白产物所致血管内皮依赖性舒张反应的损害具有明显保护作用,其机制可能与抗氧化作用和促进一氧化氮的合成或释放有关.
-
糖基化终末产物所致大鼠肾皮质损伤与Na+/H+交换蛋白1关系的探讨
目的 观察Na+/H+交换蛋白1 (NHE-1)抑制剂cariporide对糖基化终末产物(AGEs)所致肾皮质损伤的影响,探讨NHE-1在AGEs所致肾损伤中的作用.方法参考文献方法制备肾皮质薄片,用外源性AGEs与肾薄片在DMEM培养液(37 ℃,95% O2 和5%CO2)孵育120min,以乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、丙二醛(MDA)含量,谷胱甘肽(GSH)活性和NHE-1表达为指标,观察NHE-1抑制剂cariporide、anti-RAGEs对AGEs所致肾皮质损伤的影响. 结果 AGEs能明显上调肾皮质NHE-1表达,使肾皮质中MDA含量和孵育液中LDH漏出率分别升高2.2倍和2.4倍(P<0.01), GSH活性降低3.5倍(P<0.01);Cariporide(0.1、1 μmol·L-1)能显著抑制AGEs引起的这些变化(P<0.01).anti-RAGE也能明显阻断AGEs对肾皮质的损伤作用(P<0.01).结论 AGEs引起的肾皮质损伤主要是通过与受体RAGE结合所导致,NHE-1激活可能参与了AGE-RAGE反应引起肾损伤.
-
Cariporide对糖基化终末产物所致血管内皮损伤的保护作用
目的 观察选择性Na+/H+交换蛋白1(NHE-1)抑制剂Cariporide对外源性糖基化终末产物(AGEs)所致大鼠血管内皮功能损伤的保护作用.方法 将体外制备的糖基化牛血清白蛋白(AGEs-BSA)通过尾静脉注射的方法,1次·d-1,连续4周,诱导大鼠血管功能损伤,治疗组同时给予Cariporide(0.1、1 mg·kg-1·d-1)灌胃.4周后处死动物,取胸主动脉用于血管内皮依赖性舒张功能的检测,主动脉弓做NF-kB-p65免疫组化检测,并测定血清NO及MDA含量.结果 大鼠注射AGEs-BSA后,主动脉对乙酰胆碱诱导的内皮依赖性舒张反应明显降低,大鼠血清MDA水平增加,NO水平降低;Cariporide呈剂量依赖性改善AGEs-BSA所致大鼠胸主动脉内皮依赖性舒张反应降低,抑制AGEs-BSA引起的血清MDA浓度升高和血清NO的减少;给予AGEs-BSA后大鼠血管内皮NF-kB活性明显增加,Cariporide能明显抑制AGEs-BSA诱导的NF-kB活化.结论 Cariporide对外源性AGEs诱导的大鼠血管内皮功能损伤具有保护作用,其保护作用可能与降低氧化应激、抑制血管内皮细胞的NF-kB活化有关.
关键词： Cariporide 糖基化终末产物 内皮细胞 氧化应激 炎症反应 -
Cariporide对热缺血大鼠停跳心脏颈部移植术后bcl-2和bax基因表达的影响
目的:对热缺血死亡大鼠停跳心脏异位移植术后的供体进行有关bcl-2和bax基因表达的研究,以观察cariporide对大鼠停跳心脏供体的保护作用.方法:取清洁级Sprague-Dawley雄性大鼠共112只,随机分成7组,每组16只,即正常心脏对照组(C组);心脏停搏后10,30,45min取心组(S10,S30,S45组);心脏停搏后10,30,45 min取心并用cariporide灌注组(SH10,SH30,SH45组);对实验组大鼠均采用热缺血死亡处理,再用颈部Cuff法进行异位心脏移植.S10,SH10,S30,SH30组于移植后48 h取供心标本,S45,SH45组于移植术后取供心标本.然后采用RT-PCR法检测标本心肌细胞的bcl-2和bax基因的表达.结果:大鼠腹主动脉横断放血后9～11(10.11±0.59)min死亡;RT-PCR检测bcl-2基因的电泳图显示实验C组的表达强,相对光密度ROD值大,bax基因的表达弱,ROD值小;S10组、S30组bcl-2基因ROD值小于SH10组、SH30组;而bax基因的ROD值正好相反,差异具有统计学意义(P<0.05);S45和SH45组比较ROD值结果无统计学差异(P>0.05).结论:热缺血死亡大鼠颈部异位心脏移植模型是进行NHBD的心肌保护研究的理想模型;cariporide能抑制热缺血死亡后(30 min内)大鼠心脏心肌细胞凋亡的发生.
-
Cariporide 对兔心房电重构的影响
目的:探讨钠氢交换体Ⅰ型(NHE-1)特异性抑制剂cariporide对快速起搏所致兔心房电重构的影响.方法:30只兔随机等分为3组:对照组、起搏组和cariporide组.起搏组和cariporide组给予6 h 600 beats/min的快速心房起搏.测定各组不同时点的心房有效不应期(AERP200,AERP150,AERP130),连续刺激6 h后取左右心耳组织,用Western blotting测定NHE-1的含量.结果:在快速起搏后1 h后,起搏组的AERP200较起搏前明显缩短,2 h时达高峰,相对缩短量为(15.63±9.04)ms,而对照组和cariporide组AERP未发生明显变化,起搏2h时相对缩短量为(1.43±2.44)ms和(1.43±6.90)ms(P<0.05,与起搏组相比),这些变化一直保持至快速起搏后6 h;起搏组的AERP频率适应性下降,起搏前AERP130较AERP200缩短(11.88±15.57)ms,起搏后6 h只缩短(4.38±5.63)ms.而cariporide组的AERP频率适应性则未发生显著变化.起搏组右心耳组织的NHE-1含量显著少于对照组(P<0.05),cari-poride组的右心耳组织NHE-1含量与对照组差异不显著.结论:Cariporide可有效阻止快速心房起搏引起的AERP缩短,但不影响起搏引起的NHE-1含量的下降.
关键词： 心房颤动 钠氢反向转运物 Cariporide -
钠氢交换抑制剂的抗心律失常作用
钠氢交换体在心律失常发生中有重要地位.钠氢交换抑制剂可抑制心肌细胞缺血时钠氢交换引起的Na+内流及继发的Ca2+超载,从而抑制心律失常的发生.本文对钠氢交换抑制剂阿米洛利及其衍生物和苯甲酰胍类如HOE-694和Cariporide等的抗心律失常作用作一综述.
关键词： 钠氢交换抑制剂 抗心律失常 阿米洛利 HOE-694 Cariporide
