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聚乙二醇在沙眼衣原体细胞培养中的应用
细胞培养分离沙眼衣原体(CT)一直是诊断CT的“金标准”,此法特异性高,但其敏感性较低。聚乙二醇(PEG)是常用的细胞融合诱导剂,我们对PEG在CT培养中的作用及佳作用浓度进行了初步研究,现将结果报告如下。 一、材料和方法 1.标本采集:(1)CT标准株:B/TW-5(2×108 IFU/ml)。(2)临床标本:新生儿肺炎患儿鼻咽部拭子100份,置入衣原体运输保护液(0.2 mol/L蔗糖-磷酸盐缓冲液)中。24 h内接种或贮存于-70℃待接种。
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戊二醛消毒剂在医院正确安全使用Ⅱ戊二醛消毒效果因素探讨
戊二醛消毒剂在使过程中由于操作者的方法不统一,消毒效果出现差异[1].戊二醛的消毒效果与戊二醛的作用浓度、时间、菌毒性质密切相关,又与作用pH值、温度、有机物性质、含量及防锈剂加入等有很大关系.现介绍如下:
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分解后白术挥发油/环糊精包合物荧光分析方法研究
白术挥发油是白术药材抗肿瘤有效成分,挥发油抗肿瘤作用确切[1]。挥发油中苍术酮不稳定,易氧化分解[2]。
研究表明,分解前、后挥发油对肿瘤细胞株均具有杀伤抑制作用,作用浓度和作用时间与细胞生长抑制率呈正相关。分解前、后挥发油均具有诱导肿瘤细胞发生凋亡的作用。分解前的挥发油主要在凋亡早期发挥作用,分解后的挥发油在凋亡早期、晚期均发挥作用,分解前、后挥发油均具有抗肿瘤药用研发价值[3,4]。对分解前、后挥发油中化学成分种类及其相对含量进行的比较研究结果表明,分解后挥发油中极性成分占总化学成分90%以上,鉴定出的挥发油中的化学成分有27个,占总成分的91%。挥发油中苍术酮分解完成后,挥发油中的其他不稳定成分也随之完全分解,挥发油中各化学成分及其相对含量可处于一种稳定状态[5]。据此,我们确定了分解后白术挥发油为抗肿瘤药用研发对象。 -
硫化型反义寡核苷酸逆转乳腺癌多药耐药的研究
多药耐药(MDR)是恶性肿瘤化疗中经常遇到的现象,我们通过合成互补于多药耐药基因-1(Mdr-1)cDNA起始密码区的反义寡核苷酸(ASODN),以不同的浓度转染乳腺癌耐药细胞株,研究转染后7 d内实验细胞Mdr-1 mRNA及其表达的P-gp每天的变化情况,探讨ASODN转染肿瘤细胞的理想作用浓度和转染后出现大逆转效果的时段.
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黄连解毒汤含药血清对中性粒细胞与血管内皮细胞粘附的影响
目的:探讨黄连解毒汤含药血清对中性粒细胞与血管内皮细胞粘附的影响.方法:以黄连解毒汤连续灌服大鼠3 d,每天2次,每次生药0.3 g/100 g大鼠,末次给药后分别于0.5、1、1.5、2、2.5 h取血制备含药血清.对照血清以生理盐水灌服后同法制备.以常规制备的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)单层细胞与中性粒细胞粘附为模型,各时段血清均以20%、10%、5%及2.5%浓度处理HUVEC 24 h,用MTT法观察其对HUVEC的毒性作用(以细胞死亡率表示);在此基础上,以对HUVEC无毒性作用浓度的含药血清处理HUVEC 24 h后,加入中性粒细胞(5×106/mL)粘附30 min,计算细胞粘附率.结果:各时段含药血清的细胞死亡率均随着浓度的降低而降低,但均高于对照组,其中仅5%和2.5%浓度的细胞死亡率与对照组相接近,无显著差异.故各时段均选用5%和2.5%浓度进行细胞粘附实验.实验发现0.5 h和2 h时段在5%浓度时,能明显降低细胞粘附率(P<0.01).结论:①大鼠黄连解毒汤含药血清对HUVEC有一定毒性;②在连续多次灌胃后不同时段所取的含药血清中仅0.5 h和2 h时段,并在5%浓度时既对HUVEC无明显毒性,又能对细胞粘附有明显抑制作用;③黄连解毒汤含药血清能抑制中性粒细胞与血管内皮细胞的粘附,这可能是黄连解毒汤抗炎免疫作用的机制之一.其有效作用成分及在抑制细胞粘附过程中的分子作用机制还有待于进一步研究.
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Urotensin II诱导HepG2细胞胰岛素抵抗模型的建立及机制探讨
目的:采用Urotensin II( UII)体外诱导法建立HepG2细胞胰岛素抵抗模型,并探讨其机制。方法:采用含不同UII浓度的DMEM培养基培养HepG2细胞,后半小时与1×10-7 mol/L insulin共孵育,葡萄糖-己糖激酶法检测不同时点培养基中葡萄糖含量,以HepG2细胞蛋白进行定量,确定胰岛素抵抗佳作用浓度及时间;多功能酶标仪检测UII诱导hepG2细胞内活性氧( ROS)变化;Western blot法检测胰岛素受体结合物IRS-1及Akt蛋白的表达。结果:hepG2细胞产生胰岛素抵抗的佳作用时间为24 h,佳UII浓度为1×10-7 mol/L。与空白对照相比,UII刺激hepG2细胞后ROS增高明显( P<0.05);且UII孵育组IRS-1及Akt蛋白的表达明显降低(P<0.05),提示UII可能通过增高hepG2细胞中ROS而使hepG2细胞产生胰岛素抵抗。结论:采用UII体外诱导的方法,UII浓度为1×10-7 mol/L,作用24 h后,可建立HepG2细胞胰岛素抵抗模型,且UII可能通过诱导HepG2细胞ROS的增高而引起胰岛素抵抗。
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中药不良反应的防治
1 中药不良反应发生的原因 1 1 剂量过大或疗程过长:近时有的医生为求速效,剂量常有加大,目前且有越来越大的趋势.其实,只有在一定范围内,药物浓度增加,作用可与之俱增.但既达到大作用浓度后,若再增加浓度,则不能再增加治疗作用,甚或出现相反的结果.而且疗程过长也是引起中药不良反应的因素,尤其是使用有毒中药或含有有毒成分的中成药时.