超声辐照减轻兔股动脉损伤后内膜增生实验研究

目的探讨一定能量超声辐照对兔损伤动脉内膜增生的影响.方法 24只健康新西兰大白兔,随机分为股动脉内膜损伤组和股动脉损伤加超声辐照组(5.0 MHz、20 W/cm2),观察2 d、14 d后分别检测内膜增生厚度,及增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组化分析.结果所有动脉经球囊扩张损伤后均有不同程度的内膜增生,但经超声辐照后14 d组内膜增生不明显,新生内膜平均厚度为(217.2±133.5)μm vs(389.8±197.9)μm,差异有显著性意义(P＜0.05).免疫组化染色结果显示增殖细胞核抗原阳性率第2d对照组及治疗组分别为(34.6±4.9)%vs(16.7±3.3)%,P＜0.05;第14 d为(21.8±3.5)%vs(9.3±2.9)%,P＜0.05,差异均有显著性意义.结论超声辐照能降低兔股动脉损伤后细胞的增殖活性,减轻血管损伤后内膜增生.

自制脂质微泡联合超声辐照介导pGL3-Promoter-EGFP质粒转染卵巢癌细胞的实验研究

目的 探讨超声微泡介导基因转染卵巢癌细胞的可行性及转染效率.方法 (1)以不同声强作用SKOV3细胞60 s,筛选出对细胞活性无明显抑制的声强;(2)将筛选出的声强分别与不同浓度的微泡联合作用于SKOV3细胞,筛选出对细胞无明显抑制的适声强和微泡浓度的组合;(3)将SKOV3细胞分成5组,不同方式转染pGL3-Promoter-EGFP质粒:(1)裸质粒组;(2)质粒+微泡组;(3)质粒+超声组;(4)质粒+超声+微泡组;(5)质粒+脂质体组,比较各组转染效率.结果 (1)声强0.5、0.75 W/cm2的超声辐照,细胞死亡率＜10%;(2)0.24×108/ml或0.12×108/ml浓度的微泡联合0.5W/cm2超声辐照,细胞死亡率＜10%;(3)第4组与第5组转染效率无区别(P=0.133),但高于第1、2、3组(P＜0.001).结论 适当浓度微泡联合超声辐照能将外源基因在卵巢癌细胞中高效转移.

低强度非聚焦脉冲超声波辐照鼠胃溃疡的初步研究

目的 探讨低强度非聚焦脉冲超声是否能够促进鼠胃溃疡的愈合.方法 用乙酸致大鼠胃溃疡模型的方法对SD大鼠进行建模,将48只模型鼠随机分为空白对照组(A组),药物组(B组),超声组(C组),超声十药物组(D组).分别于辐照5d后、11d后,通过大体形态及组织切片观察鼠胃溃疡的情况,并通过ELISA测定其血清一氧化氮(NO)含量.结果 A组、B组、C组、D组鼠胃溃疡消失率分别为2/8只(25％)、3/8只(37.5％)、10/16只(62.5％)、11/16只(68.75％)；辐照5d后A组、B组、C组、D组血清NO含量分别为59.87 μmol/L、61.18 μmol/L、62.03μmol/L、70.61μmol/L,成依次增高；辐照后11d测得A组、B组、C组、D组血清NO含量分别为68.42 μmol/L、67.76 μmol/L、66.96μmol/L、66.37 μmol/L,成依次降低,但总体水平比6d前的高.结论 低强度非聚焦脉冲超声波能够促进鼠胃溃疡的愈合,其效果优于雷尼替丁.

超声辐照参数对体外基因转染效果的影响

目的 探讨超声辐照参数对体外基因转染效果的影响及佳转染条件.方法 将293T细胞种植于24孔板内,24 h后更换为转染液进行超声辐照,EGFP质粒浓度为1 mg/ml,每孔加入15 μg;超声强度分为1.5、2.0、2.5W/cm2,辐照时间分为30、45、60 s,微泡浓度分为20％、30％、40％;每个参数相互组合并重复4次.转染后72 h于荧光显微镜下观察细胞内绿色荧光蛋白的表达,以流式细胞仪检测荧光细胞比例,CCK-8检测细胞存活率,计算转染效率.结果 超声声强、辐照时间、微泡浓度均对转染效率有显著影响.辐照条件为2.0 W/cm2、辐照时间45 s、微泡浓30％时转染效率高,可达(35.25±1.40)％.结论 超声辐照参数共同影响转染效果,低条件下相互协同,高条件下相互抑制,选择合适的辐照参数是超声介导体外基因转染的重要因素.

经多功能心腔内超声导管超声辐照破坏微泡对犬心肌组织的生物学效应

目的 观察经多功能心腔内超声(ICE)导管超声辐照破坏微泡对动物心肌产生的生物学效应,探索基因治疗缺血性心脏病的新方法.方法 15只犬随机分为US+ MB组、US组、对照组3组,每组5只.以介入法将多功能ICE导管送入犬心室.对US+ MB在ICE监控下向左心室游离壁注射0.5 ml微泡,并以1 W/cm2的声能对注射部位辐照1 min;对US组以相同条件行左心室壁辐照,但不注射微泡;对照组在插入导管后不进行任何处理.术后3天处死动物,观察心肌组织大体改变,并行HE染色观察细微结构变化.结果 ICE能对注射针的进针深度、微泡注射及辐照过程进行实时监控.观察期内所有动物均正常存活.US+ MB组心肌辐照部位出现充血、心肌细胞间隙增宽、少量炎性细胞浸润等改变,US组心肌组织仅出现轻微充血；对照组动物心肌无异常变化.结论 经ICE导管超声辐照破坏微泡能在靶区域产生相应生物学效应,内置ICE可对心肌内微泡注射、超声辐照过程进行实时监控.此款新型多功能导管可能为基因治疗缺血性心脏病提供新的、更加安全有效的途径.

超声辐照诱导细胞凋亡的研究进展

超声治疗由于其非侵入性等优势及其确切的临床疗效受到了越来越多的关注.初期的研究重点主要集中在超声波导致组织凝固性坏死作用机制的研究.但是,随着研究的不断深入,研究者发现超声波也能够诱导细胞凋亡[1].细胞凋亡是细胞在特定信号诱导下产生的"程序性细胞死亡",整个过程中始终没有细胞内容物的释放,因此一般不会造成机体炎症反应的发生[2].鉴于此,超声治疗过程中导致的细胞凋亡现象逐渐成为研究热点.本文对此做一综述.

优化超声辐照条件促进EGFP在293 T细胞内转染的实验研究

目的：探讨超声辐照促进EGFP转染至293T细胞的佳条件。
　　方法：将293T细胞种植于24孔板内，细胞密度1.5×105/孔，24 h后更换为转染液进行超声辐照。根据辐照条件分别优化输出功率、辐照时间、微泡浓度。质粒浓度固定选择15μg/ml；输出功率选择1.5 w/cm2、2.0 w/cm2、2.5 w/cm2；辐照时间选择30s、45s、60s；微泡浓度选用20%、30%、40%。转染液为EGFP、微泡、Opti-MEM的混合液，总体积为1 ml，微泡选用sonovue，EGFP质粒浓度为1μg/μl。辐照仪器为超声基因转染仪，辐照后4 h更换为不含抗生素含血清的DMEM培养基。每个条件相互组合，重复4次。转染后72 h荧光显微镜下观察细胞内绿色荧光蛋白的绿色荧光，流式细胞仪检测荧光细胞比例，CCK-8检测细胞存活率，计算转染效率=荧光细胞比例×细胞存活率。统计方法采用多因素方差分析。

超声辐照对大鼠颈总动脉损伤后内膜增生的影响

超声辐照对大鼠颈动脉损伤后早期c-jun、hsp70与BAX表达的影响

超声辐照对血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

维生素E抗B超辐照早孕大鼠的仔鼠神经行为致畸的观察

本文研究维牛素E抗B超辐照早孕大鼠的仔鼠神经行为致畸的效应.40只受孕Wistar大鼠随机分为4组:B超加维生素E(VE),B超,VE组及空白组.观察仔鼠神经行为致畸指标.结果表明,活胎数、体重、体格发育、早期反射及感觉功能、运动和协调功能、学习和记忆等B超组与空白组间、B超加VE组与B超组间比较有不同程度的显著性差异,提示VE对20分钟诊断剂量超声辐射早孕大鼠所致仔鼠神经行为致畸有一定的干预效应.

超声辐照后胎鼠脑Fos蛋白的表达与细胞凋亡的关系

超声造影剂在基因转染中的应用进展

目前基因治疗学已成为研究的热点,然而基因转染仍缺乏高效的载体.超声微泡造影剂可作为一种良好的基因载体,通过靶位的超声辐照破坏基因微泡,实现基因的靶向转染.

超声微泡造影剂在血管新生中的应用研究进展

随着对超声微泡造影剂研究的不断深入,人们发现超声微泡造影剂在一定强度的超声辐照后会产生一系列的生物学效应[1,2]:可使细胞膜通透性增加,毛细血管内皮间隙增宽;局部组织微血管破裂,刺激内源性血管生长因子分泌,引起局部组织内微环境改变,促进血管新生与重构.

孕期超声辐照次数与婴儿出生身高体重关系分析

自超声诊断(简称B超)应用于产科以来,因其主要用于胚胎及胎儿期的诊断,故超声诊断的安全性是共同关注的焦点.长期以来,有关学者对此进行了大量的实验研究.超声对胚胎及胎儿整体生长发育的影响主要是可导致生长发育的改变,如何改变,研究方法不同,结论不同.

低频率彩色多普勒超声辐照对ECV304细胞作用研究

近年来，随着超声诊断新技术的不断开发，彩色多普勒超声（CDUS）诊断技术的临床应用越来越广泛。在进行彩色多普勒超声检查时，通常根据患者需检测部位或器官的组织结构及深度而选用高、中和低频率的超声波长。任何频率的超声幅照都会产生不同程度的空化作用、热化作用及生物效应造成的组织损伤。前期研究发现，高和低频CD U S辐照对人脐静脉内皮细胞功能有明显的影响，并随辐照时间延长作用更为明显［1，2］。低频率CDUS探测波长（2．5～3．5）MHz，主要用于深部组织和器官的探测［3］，常用于腹主动脉和其他深部组织器官等的检查。本研究以人脐静脉内皮细胞ECV‐304为模型，探讨低频率 CD U S 对脐静脉内皮细胞EC V‐304生长和功能的影响，为临床具有敏感血管的组织进行超声探查的安全时限提供实验依据。

超声微泡介导pEGFP-N1转染大鼠牙囊细胞：细胞生物学性质相对稳定

背景：利用超声波和微泡对比剂相互作用，产生空化效应和机械效应，破坏细胞膜的完整性，产生暂时性、可逆性的小孔，增加细胞膜的通透性，增强微泡载体对基因的转移，提高基因转染率。
　　目的：探讨在超声波辐照下微泡对比剂介导pEGFP-N1质粒转染SD大鼠乳鼠牙囊细胞的效率及安全性。
　　方法：体外原代培养新生SD大鼠牙囊细胞并传至第4代，在不同条件下采用pEGFP-N1质粒转染乳鼠牙囊细胞。以不同的超声辐照时间(15，30，45，60 s)和辐照强度(0.5，1 W/cm2)两两组合进行辐照，筛选较高转染效率的参数组合并应用于后续实验。实验分组为质粒组、微泡+质粒组、超声+质粒组、超声+微泡+质粒组和脂质体+质粒组。转染48 h后倒置荧光显微镜观察pEGFP表达，MTT法检测转染后的乳鼠牙囊细胞增殖抑制率。
　　结果与结论：超声强度为0.5 W/cm 2且辐照时间为30 s时转染率明显高于其他超声参数组合。该条件下超声微泡介导pEGFP-N1质粒对乳鼠牙囊细胞的转染率高于传统脂质体介导的转染率，且对细胞活力无明显影响。提示超声微泡能安全、高效介导pEGFP-N1质粒转染大鼠牙囊细胞，其细胞生物学性质相对稳定，可为牙周组织工程提供一种较理想的基因转染方法。

超声微泡介导内皮抑素基因转染人脐静脉内皮细胞的实验研究

目的：探讨超声微泡介导内皮抑素（endostatin，ES）基因对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells ，HUVECs）转染的效率及可行性。方法 HUVECs种于24孔板内，培养24 h后加入5μg pIRES2-EGFP-ES质粒及超声造影剂SonoVue微泡，启动超声照射进行转染，设定MI分别为0.7、1.0、1.5，辐照时间分别为10 s、30 s、60 s、120 s，微泡浓度分别为10％、20％、50％。转染24 h后观察绿色荧光蛋白表达，计数活细胞数，MTT检测细胞增殖抑制率。结果超声爆破微泡介导了内皮抑素基因转染HUVECs，并具有强度、时间及微泡浓度依赖关系，但随着强度、微泡浓度增加及辐照时间延长，细胞凋亡率增加、细胞活力下降，转染率随之下降，当超声强度MI1.5、辐照时间60 s、微泡浓度20％转染率相对高。结论超声微泡可介导内皮抑素基因转染脐静脉内皮细胞，但转染受多因素影响，在相对佳转染条件下可实现内皮抑素的高表达。

诊断超声辐照对子代大鼠生长发育及脑组织超微结构的影响

目的:探讨孕期大鼠超声辐照后对子代生长发育及大脑组织超微结构的影响,从而进一步了解孕期超声检查的安全性.方法:以诊断剂量的超声辐照对孕8 d SD大鼠分别在孕8 d(早期)、孕12 d(中期)及孕16 d(晚期)进行3次时长分别为0 min(无超声辐照,正常对照组)、5、10及20 min的超声辐照后观察子代大鼠生长发育及其大脑组织超微结构的变化.结果:超声辐照20 min组子代大鼠P1、P3、P5、P7体重明显低于对照组(0 min组),差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),首次睁眼时间亦明显推迟,差异有统计学意义(P<0.01),前臂悬挂时间也短,差异有统计学意义(P<0.05).超声辐照5 min组和10 min组与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论:孕期大鼠在孕早中晚期分别进行一次超声辐照,每次超声辐照时长20 min,可影响子代大鼠生长发育并引起其大脑组织超微结构发生病变.

微泡造影剂及超声促进绿色荧光蛋白质粒在人肝癌细胞HepG2内表达的实验研究

目的 研究微泡造影剂与超声辐照是否能提高绿色荧光蛋白质粒在人肝癌细胞HepG2中的转染率.方法 将培养的HepG2细胞分为四组:第一组为对照组;第二组以脂质体转染;第三组加入微泡造影剂SonoVue并予以超声辐照;第四组加入脂质体和微泡造影剂SonoVue并予以超声辐照,将含有绿色荧光蛋白报告基因的真核表达质粒pEGFP-N1转染人肝癌细胞HepG2,24小时后以荧光显微镜观察人肝癌细胞HepG2中的绿色荧光蛋白表达情况,并用流式细胞仪测算转染率.结果 脂质体转染组与微泡造影剂+超声辐照组有显著性差异(P<0.05),脂质体+微泡造影剂+超声辐照组与微泡造影剂+超声辐照组有显著性差异(P<0.01) 结论 微泡造影剂和超声辐照协同脂质体能提高目标基因在肝癌细胞内的转染率.