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miR-182靶向作用环磷酸腺苷反应元件结合蛋白1调控人黑素瘤A375细胞的增殖和侵袭
目的 探讨miR-182对人皮肤黑素瘤细胞系A375细胞的增殖与侵袭能力的影响,及miR-182影响黑色素细胞增殖的机制.方法 利用阳离子脂质体LipofectamineTM 2000将miR-182模拟物或抑制剂转染人黑素瘤A375细胞,以使miR-182过表达或低表达,采用MTT方法检测细胞活力变化,应用Transwell小室法检测A375细胞侵袭能力的变化,同时通过Real-time PCR检测核转录因子环磷酸腺苷反应元件结合蛋白1(CREB1) mRNA的表达情况,采用Western blotting检测CREB1蛋白的表达水平.结果 与对照组相比,miR-182沉默能够显著增强A375细胞增殖和侵袭能力,P＜0.01,显著降低CREB1蛋白与mRNA的表达水平,P＜0.01;miR-182过表达的作用与之相反.结论 miR-182沉默增强A375细胞增殖和侵袭能力可能与降低CREB1蛋白相关.
关键词： miR-182 增殖 侵袭 环磷酸腺苷反应元件结合蛋白1 转染 A375细胞 实时定量聚合酶链反应 人 -
miR-182可以促进耳蜗前体细胞分化为毛细胞
目的：探讨miR-182诱导耳蜗前体细胞向毛细胞分化的作用及机制。方法从新生大鼠耳蜗中分离培养耳蜗前体细胞并用血清诱导分化，BrdU、Nestin免疫荧光染色鉴定细胞自我增殖能力；myosinⅦa和phalloidin免疫荧光染色鉴定其是否具有分化为毛细胞的潜能。分别利用miR-182 mimics和siRNA在新生大鼠耳蜗前体细胞中过表达和低表达miR-182，然后在细胞诱导分化7天后，用流式细胞仪检测分化细胞中myosinⅦa阳性细胞比例，用Western-blot检测支持细胞标志分子中Sox2的变化。结果使用miR-182 mimics进行过表达后，耳蜗前体细胞分化为myosinⅦa阳性表达的细胞比例显著高于对照组，使用miR-182 siRNA进行低表达后此比例显著低于对照组。Western-blot检测显示，Sox2在miR-182 mimics组较对照组降低，miR-182 siRNA组较对照组增加。结论过表达miRN182可以促进耳蜗前体细胞向毛细胞方向分化，Sox2可能是此过程中的靶基因。
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miR-182通过靶向调节细胞周期蛋白依赖性激酶1促进由氧化应激诱导的HLE-B3细胞凋亡
目的探讨 miR-182 在氧化应激诱导下的人晶状体上皮细胞(human lens epi-thelium cells , HLE-B3)凋亡引起白内障发生时的保护作用.方法通过实时定量 PCR (real-time quantitative polymerase chain reaction , qRT-PCR)检测由 H2O2(100 μmol/L , 12 h) 刺激的HLE-B3 细胞中 miR-182 的表达.通过 qRT-PCR 和 Western 印迹检测由 H2O2刺激 HLE-B3 细胞中细胞周期蛋白依赖性激酶1 (cyclin dependent kinase 1 , CDK1)的表达.同时通过 qRT-PCR检测白内障患者和正常健康的患者晶状体前囊膜中 miR-182 和 CDK1 表达.通过生物信息学方法(targetscan 和 miRanda) ,预测 miR-182 潜在的靶基因, Luciferase 报告方法确认 miR-182的靶基因.通过 Western 印迹检测凋亡相关蛋白(Bax、Bad、caspase-3)及靶基因 CDK1 蛋白的变化.结果研究发现, miR-182 在人白内障晶状体前囊膜样品和由 H2O2诱导的 HLE-B3细胞中相对于正常对照组表达上调, CDK1 表达相对于正常对照组降低.过表达 miR-182 能够逆转由 H2O2诱导的 HLE-B3 细胞凋亡.转染 miR-182-inhibitor 后 CDK1 在 mRNA 和蛋白水平表达上调.Luciferase 报告检测结果显示 CDK1 是 miR-182 的直接靶基因.转染 miR-182 mimic 12 h 后,氧化应激刺激12 h ,能够下调 CDK1 的表达,转染 miR-182-inhibitor 12 h 后,氧化应激刺激12 h ,能够上调 CDK1 的表达.而转染过表达 miR-182 后能够逆转由 H2O2诱导的 HLE-B3 细胞中凋亡相关蛋白 Bax、Bad 和 caspase-3 下调.结论研究证明, miR-182 是白内障的功能基因,能够逆转由氧化应激诱导的 HLE-B3 细胞凋亡,而这些功能是通过调控CDK1 表达实现的.这些结果表明, miR-182/CDK1/Rb/P16INK4a的信号通路是一种新型的影响白内障的发生、发展的因素.
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miR-182在前列腺癌组织中的表达及其对前列腺癌细胞增殖和凋亡的影响
目的:观察前列腺癌组织及不同前列腺癌细胞系中miR-182的表达,并探讨下调其表达对前列腺癌细胞增殖和凋亡的影响及机制.方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测30例前列腺癌组织和30例相应的癌旁组织以及前列腺正常上皮RWPE-1细胞、前列腺癌PC-3、LNCaP和DU145细胞中miR-182的表达,进一步采用Lipfectamine 2000脂质体转染miRNA-182 inhibitor和阴性对照miRNA于PC-3细胞后,通过噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫印迹(West-emblot)法检测转录因子FOXO1、血管内皮生长因子(VEGF)和抑癌基因p53蛋白的表达.结果:miR-182在前列腺癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P＜0.05);miR-182在前列腺癌细胞系PC-3、LNCaP和DU145中的表达均高于前列腺正常上皮细胞RW-PE-1(P＜0.05),其中PC-3细胞中miR-182表达水平高.转染miRNA-182 inhibitor至PC-3细胞成功下调miR-182表达后,细胞的增殖能力明显受到抑制,细胞凋亡能力明显增强,FOXO1表达水平显著升高,VEGF和p53的表达明显降低,差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论:miR-182在前列腺癌组织及细胞中呈高表达,下调miR-182的表达可能通过增加FOXO1的表达并减少VEGF和p53的表达,抑制前列腺癌细胞增殖并诱导细胞凋亡.
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大鼠前额叶皮质miR-182与酒精依赖的关系
目的 探讨大鼠前额叶皮质miR-182表达与酒精依赖的关系,以及可能的作用机制.方法 将60只大鼠随机分为持续饮酒组、戒断组和对照组,每组各20只.用灌胃法制备酒精依赖模型,用实时荧光定量PCR检测酒精依赖大鼠前额叶皮质miR-182与BDNF mRNA的表达,并对两者的表达量进行Pearson相关分析.结果 三组间miR-182表达水平的差异有统计学意义(F=44.79,P<0.01),两两比较差异均有统计学意义(P<0.05).持续饮酒组与对照组比较,BDNF的mRNA表达下调,差异有统计学意义(P<0.05).miR-182与BDNF mRNA表达量之间无相关性(P>0.05).结论 酒精依赖大鼠前额叶皮质miR-182表达水平下调,miR-182可能参与酒精依赖的发病过程.
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MiR-182/FOXF2信号通路在三阴性乳腺癌侵袭及血管生成中的意义
目的 探讨miR-182对三阴性乳腺癌侵袭的影响及其与靶基因FOXF2的调控关系.方法 通过CCK-8增殖实验和Transwell实验进行体外细胞功能验证,检测miR-182对乳腺癌细胞增殖和侵袭的影响;采用Targetscan软件预测miR-182靶向调控FOXF2基因表达结果;通过靶点验证及靶点突变测试验证miR-182在基因FOXF2上结合位点;采用qRT-PCR检测miR-182对FOXF2基因表达的靶向调控,ELISA检测HUVEC细胞系中VEGF蛋白表达.结果 体外细胞功能实验证明,miR-182可明显促进乳腺癌细胞的增殖与侵袭(P＜0.01);荧光素酶报告基因实验证实,miR-182可通过结合FOXF2基因3'-非翻译区688～695位点(3'-untranslational region,3'-UTR)而抑制其表达;qRT-PCR检测发现,转染miR-182后MCF-7中FOXF2表达量明显降低(P＜0.01);体外血管生成实验表明,转染miR-182后HUVEC细胞培养液上清液中VEGF蛋白含量显著升高(P=0.004).结论 miR-182作为促癌因素,直接作用于FOXF2基因,引起该基因表达下调,促进血管生成,发挥侵袭作用,可能是促进三阴性乳腺癌转移的生物学因素机制之一.
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miR-182在三阴性乳腺癌中的表达及意义
目的 探讨miR-182在三阴性乳腺癌中的表达及意义.方法 收集30例石蜡包埋的三阴性乳腺癌患者的癌组织和癌旁组织标本,并收集患者的基本资料.RT-PCR测定miR-182的相对表达,分析miR-182在TNBC中的表达与肿瘤的大小、分级、淋巴结转移、远处转移、TNM分期、无疾病生存率、总生存率等的相关性.结果 RT-PCR结果提示,癌组织中miR-182表达为癌旁组织的8.6倍,差异有统计学意义(P＜0.001).miR-182在淋巴结阳性及TNM分期Ⅲ期中表达高于淋巴结阴性(Z=-3.454,P=0.001)及TNM(Ⅰ+Ⅱ)期者(Z=-3.946,P=0.000),差异有统计学意义;COX回归多因素分析显示,miR-182高表达(HR =0.107,95％ CI:0.018 ～0.643,P=0.015)、淋巴结阳性(HR =0.189,95％ CI:0.020 ～1.757,P=0.016)、脉管瘤栓(HR =0.190,95％ CI:0.020 ～1.826,P=0.008)、Ki67≥14％ (HR=0.182,95％ CI:0.041～0.801,P=0.024)、TNM分期(Ⅲ期)(HR=0.501,95％ CI:0.044 ～5.741,P=0.001)是独立的预后因子.结论 miR-182在三阴性乳腺癌中表达上调,与淋巴结转移及临床分期相关,miR-182高表达是三阴性乳腺癌独立的预后因素之一,与预后差相关.
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miR-21、miR-29c和miR-182鉴别诊断良恶性胸腔积液
目的:评价miR-21、miR-29c和miR-182在良恶性胸腔积液鉴别诊断中的应用价值.方法:应用荧光定量PCR检测65例恶性胸腔积液患者及61例良性胸腔积液患者胸腔积液标本中miR-21、miR-29c和miR-182的表达水平,并比较三者在良、恶性胸腔积液中的表达差异.构建ROC曲线,获取曲线下面积(AUC),确定诊断恶性胸腔积液的临界值,计算敏感度、特异度等指标,并与癌胚抗原进行比较.结果:恶性胸腔积液中miR-21和miR-182的表达水平均明显高于良性胸腔积液(P＜0.05),而miR-29c的表达水平则显著低于良性胸腔积液(P＜0.05).ROC曲线显示miR-21、miR-29c和miR-182的AUC值分别为0.873 (95％ CI:0.808 ～0.939)、0.856(95％ CI:0.790～0.920)和0.841 (95％ CI:0.772 ～0.911),高于癌胚抗原(0.822,95％ CI:0.703 ～0.873).miR-21、miR-29c和miR-182诊断恶性胸腔积液的敏感度分别为83.1％、78.5％、83.1％,特异度分别为85.2％、81.5％、73.4％,亦高于癌胚抗原诊断恶性胸腔积液的敏感度及特异度(75.4％和71.2％).联合检测胸腔积液中miR-21、miR-29c、miR-182和癌胚抗原可提高诊断的敏感度(93.8％)和特异度(90.2％).结论:miR-21、miR-29c和miR-182有可能成为临床鉴别诊断良恶性胸腔积液的标志物.
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miR-182在子宫内膜癌中表达及其对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响
目的:检测miR-182在子宫内膜癌组织中的表达,探讨其对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡的影响及其机制.方法:用real-time PCR检测子宫内膜正常组织和癌组织中miR-182的表达;体外使用miR-182抑制剂和(或)si-Foxo1转染子宫内膜癌细胞RL95-2,用MTT和Annexin V-FITC/PI双染法及Western blot分别检测细胞增殖和凋亡水平以及Cyclin D1、caspase3和肿瘤抑制基因Foxo1的表达.结果:miR-182在子宫内膜癌组织中的表达较正常组织显著升高(P<0.05);下调miR-182可抑制RL95-2细胞的增殖活性,增加细胞凋亡百分比,同时可促使Cyclin D1、active caspase3和Foxo1的表达增加.抑制Foxo1可部分逆转miR-182抑制剂的作用.结论:miR-182在子宫内膜癌中表达异常增高;miR-182异常表达可通过抑制Foxo1表达促使RL95-2细胞的增殖,并抑制其凋亡.
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miR-182在多氯联苯(PCB1254)暴露后视网膜神经节细胞内的表达及意义
目的:研究多氯联苯(polychlorinated biphenyls,PCBs)PCB1254引起视网膜神经节细胞毒性作用的可能机制.方法:分别配制浓度为0.125、0.250、0.500、1.000 mg/L的PCB1254对RGC-5细胞进行暴露处理,并设立空白对照及0.01％甲醇对照组,测定细胞内miR-182表达水平;利用miR-182类似物或抑制剂转染RGC-5细胞,使miR-182上调或下调,分别检测细胞凋亡、细胞增殖功能和细胞周期;使用0.5、1.0 mg/L的PCB1254刺激RGC-5细胞,再转染miR-182类似物,分别检测细胞凋亡、细胞增殖功能.结果:随着PCB1254浓度的增高,RGC-5细胞内miR-182的表达逐渐被抑制,当浓度≥0.5 mg/L时,与对照组的差异有统计学意义(P＜0.05).在RGC-5细胞内沉默miR-182可导致Caspase-3活性增高(P＜0.05),表明miR-182沉默促进细胞凋亡;CCK-8法显示miR-182沉默会导致RGC-5细胞活力降低(P＜0.05),表明miR-182沉默会抑制细胞增殖;MiR-182沉默对RGC-5细胞周期无显著影响(P＞0.05).使用miR-182类似物干预0.5、1.0 mg/L PCB1254暴露后的RGC-5细胞,发现细胞内Caspase-3活性下降(P＜0.05)、细胞活力增加(P＜0.05),表明miR-182可改善PCB1254对RGC-5细胞凋亡及增殖功能的影响.结论:PCB1254可能通过抑制miR-182的表达来影响RGC-5细胞的增殖和凋亡,进而导致视功能损害.
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microRNA-182抑制人角膜上皮细胞增殖和迁移
目的:通过体内动物实验与体外细胞实验来阐明microRNA-182(miR-182)在角膜上皮损伤修复中的功能.方法:实验研究.体内实验选取5只C57BL/6J野生型小鼠,通过机械刮伤法构建小鼠角膜上皮损伤修复模型作为实验组,对侧眼作为对照组,通过实时定量RT-PCR法检测miR-182在损伤修复过程(损伤后48 h)的表达.体外实验采用脂质体介导的方法将miR-182和随机序列寡核苷酸链转染入人角膜上皮细胞(HCECs),通过细胞增殖实验(MTS法)和细胞克隆形成实验检测细胞增殖和生长能力,流式细胞术检测细胞周期,细胞划痕实验检测细胞迁移能力.MiR-182表达量及细胞实验各参数2组间比较采用独立样本t检验.结果:体内实验中,与对照组相比,实验组中5个样本量的miR-182在角膜上皮损伤修复过程中表达水平显著下调(t=147.6、79.2、136.8、41.3、89.8,均P＜0.001).体外实验中,miR-182组相对细胞数目为(81±5)％,与阴性对照组(100％)相比显著减少(t=6.6,P=0.003),同时miR-182组细胞克隆数明显少于阴性对照组.细胞周期检测结果显示实验组处于G1期细胞数量比例为(49±7)％,明显高于阴性对照组的(35±4)％(t=-3.0,P=0.041).此外,细胞迁移实验结果显示miR-182组HCECs细胞迁移的距离为(99±12)μrn,而阴性对照组的迁移距离为(213±14)μm(t=10.8,P=0.001),迁移速度明显变慢.结论:miR-182通过抑制角膜上皮细胞的增殖与迁移,从而对角膜上皮损伤修复起到负调控的作用.
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MiR-182对乳腺癌细胞顺铂耐药的相关性研究
目的 探讨miR-182与乳腺癌细胞顺铂耐药性的关系.方法 MTT法检测miR-182对顺铂杀伤乳腺癌细胞能力的影响.利用生物信息学、定量PCR及Western blot法验证miR-182是否能调节乳腺癌细胞BNIP3的表达.运用JC-1染色、Annexin V染色及Western blot法研究miR-182影响顺铂疗效的信号通路.结果 miR-182模拟物可减弱顺铂对MCF-7细胞的杀伤活性,而miR-182抑制剂则增强顺铂对MCF-7细胞的杀伤活性.定量PCR及Western blot实验表明miR-182的靶基因可能为BNIP3.miR-182抑制剂联合顺铂可引起MCF-7细胞线粒体膜电位显著下降并诱导caspase-3的活化和凋亡的发生,转染BNIP3 siRNA后miR-182抑制剂联合顺铂对MCF-7细胞的凋亡诱导效应显著降低.结论 MiR-182在乳腺癌中通过下调BNIP3的表达影响顺铂对乳腺癌细胞的杀伤活性.
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miR-182在体内外肝癌细胞中的表达及对肝癌的诊断价值
目的：探讨miR-182在体内和体外细胞中的表达及对肝癌的诊断价值。方法荧光定量PCR检测正常肝细胞系L-O2与肝癌细胞系HepG2、HepG3B、Huh7的miR-182表达，以及肝癌组和对照组各40例miR-182的表达。并且用ROC曲线分析血浆miR-182对肝癌的诊断效能。结果（1）HepG2、HepG3B及Huh7三种肝癌细胞系的miR-182表达水平均显著高于正常肝细胞系L-O2（均P<0.05）；（2）肝癌组血浆miR-182相对表达量远高于对照组（P<0.05）；（3）肝癌组miR-182的异常表达与性别、年龄、肿瘤大小无显著相关性（均P>0.05），而与肿瘤的分化程度、临床分期、淋巴结转移有关（均P<0.05）；（4）ROC曲线分析提示miR-182诊断肝癌的曲线下面积（AUC）为0.852（95%CI：0.762~0.942），敏感度为87.5%，特异度为80.0%，约登指数为0.675，阳性预测值为△Ct1=5.25，当低于这个值时，提示miR-182表达升高，罹患肝癌的可能性增大。结论血浆miR-182的高表达可能成为肝癌诊断的新方法。
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miR-182在人乳腺癌中的表达及意义
目的 探讨miR-182在人乳腺良恶性组织和细胞株中的表达及其意义.方法 采用实时荧光定量PCR法检测miR-182在2株正常人乳腺细胞、9株人乳腺癌细胞(包括5株低度恶性、4株高度恶性)、11例临床乳腺良性病变组织和22例乳腺癌组织中的表达.结果 乳腺癌细胞株miR-182表达显著低于正常乳腺上皮细胞株,而在高度恶性乳腺癌细胞株中,miR-182表达又显著低于低度恶性乳腺癌细胞株(P<0.001);在乳腺组织中,乳腺良性病变组织中miR-182的表达显著高于乳腺癌组织(P<0.001).结论 乳腺癌中miR-182表达下调,miR-182可能发挥着肿瘤抑制因子的作用.
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Ki-67、miR-182在乳腺浸润性导管癌中的表达及相关性
探究Ki-67和miR-182在乳腺浸润性导管癌的表达及相关性.选取2014年7月-2016年7月70例乳腺浸润性导管癌患者的癌组织和癌旁组织标本为研究对象,免疫组化法检测各样本中Ki-67的表达,同时荧光定量PCR检测各组织样本中miR-182的表达,综合分析乳腺浸润性导管癌中Ki-67和miR-182的表达水平、相关性及其临床意义.70例乳腺浸润性导管癌组织标本中,Ki-67阳性表达率明显高于相应的癌旁组织标本中Ki-67的阳性表达率(P＜0.05).乳腺浸润性导管癌组织中miR-182的表达水平明显高于癌旁组织中miR-182的表达水平(P＜0.05).Ki-67与miR-182的表达呈明显正相关(r=0.435,P＜0.05).乳腺浸润性导管癌中Ki-67和miR-182表达水平明显高于癌旁组织,Ki-67和miR-182的表达呈明显的正相关,可作为乳腺浸润性导管癌分子治疗的新靶点.
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MiR-182在结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞迁移能力的影响
目的 检测miR-182在结直肠癌中的表达情况及与临床病理参数的关系,探讨其对结直肠癌细胞迁移能力的影响.方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测86例患者结直肠癌与对应癌旁组织中miR-182的表达情况,分析其与结直肠癌临床病理参数之间的关系.体外用miR-182 mimics和阴性对照转染结直肠癌HT-29细胞,将实验分为miR-182组、阴性对照组和空白组,transwell小室实验观察miR-182对HT-29细胞迁移能力的影响.结果 MiR-182在结直肠癌的表达显著高于癌旁(P ＜0.001),其表达水平与患者的浸润程度(P=0.028)、淋巴结转移(P =0.003)、远处转移(P=0.006)和临床分期(P =0.005)密切相关,而与年龄、性别、肿瘤类型、肿瘤大小和分化程度无相关性(P均＞0.05).体外实验进一步表明,miR-182过表达的HT-29细胞迁移数显著高于阴性对照组和空白组(P均＜0.05).结论 MiR-182在结直肠癌中高表达且与肿瘤的转移及进展有关,体外能增强结直肠癌细胞的迁移能力,提示miR-182可作为预防和治疗结直肠癌转移的潜在靶点.
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抑制miR-182表达对人乳腺癌细胞迁移、侵袭的影响及其机制
目的 观察抑制微小RNA 182(miR-182)对人乳腺癌细胞迁移、侵袭的影响,并探讨其可能作用机制.方法 89例乳腺癌患者行乳腺癌切除术后留取的乳腺癌组织、癌旁组织.采用实时荧光定量PCR法检测癌组织、癌旁组织miR-182,分析miR-182的表达与乳腺癌患者临床病理参数的关系.另取乳腺癌细胞株SK-BR-3、MCF-7、MDA-MB-231与乳腺上皮细胞HBL-100,采用实时荧光定量PCR法检测miR-182.取对数生长期MDA-MB-231细胞分为观察组、对照组,分别转染miR-182 inhibitor、inhibitor-NC,采用Transwell实验观察两组细胞迁移、侵袭情况,采用qRT-PCR法检测两组细胞FOXO1 mRNA,采用Western blotting法检测细胞FOXO1蛋白.结果 癌组织、癌旁组织miR-182相对表达量分别为6.60±0.53、1.02±0.05,二者比较,P<0.05.miR-182表达与乳腺癌患者TNM分期及淋巴结转移有关(P均<0.01),而与年龄、肿瘤直径、组织学分级、ER状态、C-erbB-2状态、PR状态无关(P均>0.05).SK-BR-3、MCF-7、MDA-MB-231及HBL-100细胞miR-182相对表达量分别为5.46±0.20、4.50±0.47、6.63±0.71、1.03±0.04,与HBL-100相比,SK-BR-3、MCF-7、MDA-MB-231细胞miR-182相对表达量升高(P均<0.01).观察组、对照组侵袭细胞数分别为(53±10)、(118±19)个,二者比较,P<0.05;观察组、对照组迁移细胞数分别为(78±9)、(181±17)个,二者比较,P<0.05.观察组、对照组FOXO1 mRNA相对表达量分别为11.16±0.79、1.06±0.06,二者比较,P<0.05;观察组、对照组FOXO1蛋白相对表达量分别为1.19±0.17、0.35±0.11,二者比较,P<0.05.结论 乳腺癌组织中miR-182高表达.抑制miR-182表达可抑制MDA-MB-231细胞的侵袭、迁移,其机制可能为上调FOXO1的表达.
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肺癌细胞中miR-182的功能及作用机制
目的 检测miR-182在肺癌细胞中的表达和对肺癌细胞生物学特性的影响,并观察miR-182对靶基因profilin1 (PFN1)表达的影响.方法 qRT-PCR检测miR-182在肺癌细胞中的表达.MTT和流式细胞仪分别检测miR-182对95-D细胞活力、增殖和凋亡的影响.Transwell侵袭小室检测miR-182对95-D细胞侵袭的影响.荧光素酶报告基因系统验证PFN1基因.Western blot方法检测miR-182对细胞中PFN1蛋白表达的影响.结果 qRT-PCR结果显示:miR-182在肺癌细胞中的表达显著上升(P＜0.01).MTT和流式细胞仪分析结果显示:抑制miR-182表达后,细胞活力和增殖指数明显下降(P＜0.05);细胞的凋亡显著增加(P＜0.01).Transwell侵袭小室检测结果显示:抑制miR-182表达后,细胞侵袭能力显著降低(P＜0.05).Western blot结果显示:抑制miR-182表达后,靶蛋白PFN1的表达显著上升(P＜0.05).结论 miR-182在肺癌细胞中表达上调,并促进95-D细胞增殖和侵袭,并可负性调节PFN1蛋白的表达.
关键词： miR-182 肺癌 增殖 凋亡 Profilin1(PFN1) -
微小RNA-182在原发性肺癌中的研究进展
原发性肺癌,简称肺癌,是全球发病率及病死率均较高的恶性肿瘤之一.近年来微小RNAs(microRNAs,miRNAs)是恶性肿瘤研究领域的一大热点.多项研究表明miR-182与肺癌细胞的增殖、浸润及转移等生物学行为有关,亦有研究报道miR-182可能用于肺癌的早期诊断及肺部结节的鉴别诊断,且对患者预后具有一定预测价值.
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MiR-182研究进展
目的：微小RNA是一种长约22 nt的单链非编码RNA分子。自发现以来,一直是科学家们研究的热点。 miRNA对基因表达的调控具有重要作用,参与了细胞周期以及生物发育的调节,并且在肿瘤的形成和发展中,也演绎了不可或缺的角色。目前已发现约2000种人类miRNAs,本文现以miR-182的研究为重点,将对miR-182目前的结构、功能,以及目前的研究现状方面作一综述。
