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miR-143在结直肠癌中表达及意义
目的 探讨miR-143在结直肠癌中的表达情况及其与临床病理指标间关系.方法 采用RT-PCR法检测miR-143在17例结肠癌患者的肿瘤标本(结肠癌组)及癌旁黏膜组织(结肠黏膜组)和81例直肠癌患者的肿瘤标本(直肠癌组)及癌旁黏膜组织(直肠黏膜组)标本中的表达情况,并分析其与结直肠癌患者临床病理指标间关系.结果 结肠癌组miR-143表达水平(Ct值为15.96土1.76)明显低于结肠黏膜组(Ct值为14.34±3.44),差异有统计学意义(P=0.023),直肠癌组miR-143表达水平(Ct值为14.66±3.18)与直肠黏膜组(Ct值为14.29±4.82)比较,差异无统计学意义(P—0.351)；直肠癌组miR-145表达下调在性别、年龄、TNM分期、脉管浸润上差异无统计学意义(P＞0.05).结论 miR-143仅在结肠癌中表达降低,在直肠癌中表达无变化,miR-143仅参与了结肠癌的发生,结肠癌和直肠癌可能有不同的癌变分子基础.
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子宫动脉介入化疗联合栓塞治疗前后宫颈癌组织miR-143和岩藻糖基转移酶Ⅳ表达及意义
目的 探讨宫颈癌患者行子宫动脉介入化疗联合栓塞治疗前、后宫颈癌组织miR-143和岩藻糖基转移酶4(fucosyltransferase 4,FUT4)表达变化及意义.方法 20例宫颈癌患者,采用多西他赛+顺铂方案子宫动脉介入化疗联合栓塞治疗3周后行手术治疗,采用实时荧光定量PCR法检测化疗前、后宫颈癌组织中miR-143表达,采用Western blot法检测FUT4蛋白表达,Pearson线性相关分析宫颈癌组织miR-143与FUT4表达的相关性.结果 化疗后宫颈癌组织miR-143相对表达量(2.11±0.17)较化疗前(1.04±0.10)增高,FUT4相对表达量(0.38±0.08)较化疗前(0.93±0.09)降低(P＜0.05);miR-143表达在化疗前、后与FUT4均呈负相关(r=-0.509,P=0.020;r=-0.563,P=0.010).结论 多西他赛+顺铂方案子宫动脉介入化疗联合栓塞治疗可上调miR-143及下调FUT4在宫颈癌组织中的表达.
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氟西汀对CUMS模型组大鼠血浆miR-34a miR-134 miR-143表达的影响
目的 探讨血浆miR-34a、miR-134、miR-143成为抑郁行为严重程度和药物疗效的客观评估指标的可能性.方法 将40只雄性SD大鼠分为4组,干预组、模型组、模型+干预组、对照组各10只,采用慢性不可预见性应激的方法建立抑郁模型,采用旷场实验评价大鼠行为. 结果 应激前4组大鼠各项实验指标比较差异无统计学意义 (P>0.05);而应激后,模型组和模型+干预组大鼠24 h饮用1%糖水消耗量及体质量、水平运动格子数与垂直运动格子数较应激前显著减少,排便次数较应激前显著增多(P<0.05或0.01),对照组和干预组则无显著变化(P>0.05).本研究未检测到miR-143的表达水平.与对照组相比,模型组大鼠血浆miR-34a表达增强(P<0.05),miR-134表达下降(P<0.05);与模型组相比,模型+干预组、干预组大鼠血浆miR-34a表达下降(P<0.05),miR-134表达增强(P<0.05).结论 应激抑郁模型小鼠糖水代谢消耗下降,动力及探索活动减少,而氟西汀可增加糖水消耗动力及探索活动.miR-143在血浆中基本不表达,血浆miR-134与miR-34a有可能成为抑郁症的生物学标记物,值得进一步研究.
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MiR-143通过靶控KRAS表达对白血病细胞增殖的影响
目的：探讨miR-143靶向KRAS对急性髓系白血病细胞系HL-60增殖的影响。方法选取HL-60为研究对象，采用荧光素酶报告基因实验验证miR-143对KRAS的靶向作用；采用RT-PCR检测细胞中miR-143及KRAS mRNA表达；采用Western印迹检测细胞中KRAS蛋白表达；采用MTT法检测HL-60增殖水平。结果与正常人外周血单个核细胞（ peripheral blood mononuclear cell， PBMNC）相比较， HL-60中miR-143表达显著降低， KRAS蛋白表达显著增加（ P＜0.01）。 miR-143可与KRAS基因3＇-非翻译区（ un-translated region， UTR）特异性结合。转染miR-143模拟物（ miR-143 mimic）可使HL-60中miR-143表达显著提高， KRAS蛋白表达显著降低，细胞增殖受到抑制；转染miR-143模拟物＋KRAS可使KRAS蛋白表达显著提高，同时部分逆转miR-143对HL-60细胞增殖的抑制作用。结论 miR-143可通过靶向KRAS抑制急性髓系白血病细胞系HL-60增殖。
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miR-143/145启动子区rs4705341多态性与膀胱癌的关联
目的 探讨 miR-143/145启动子区 rs4705341多态性与膀胱癌易感性的关系. 方法 收集106例临床确诊膀胱癌病例和162例年龄、性别相匹配的正常对照者的血液样本,采用聚合酶链反应-限制性长度片段多态性对 miR-143/145启动子区 rs4705341进行多态性分型. 结果病例组中 rs4705341的GG基因型和G等位基因频率显著低于对照组,差异具有统计学意义(GG与 AA相比:OR=0.34,95%C I:0.15~0.78,P=0.007;G与A对比:OR=0.60,95%C I:0.41~0.87,P=0.007).结论 miR-143/145启动子区 rs4705341多态性可能与膀胱癌易感性有关,GG基因型携带者膀胱癌发病风险明显降低.
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冠心病患者血浆 miR-126和 miR-143表达水平变化研究
目的：研究血浆 miR-126、miR-143在急性心肌梗死 AMI 和不稳定型心绞痛 UAP、稳定型心绞痛（SAP）及非冠心病患者（NCHD）中浓度的变化。方法：收集急性心肌梗死22例和不稳定型心绞痛31例，稳定型心绞痛患者（23例）及非冠心病患者（20例）共96例，采集入院后24小时内的清晨空腹静脉血标本，以 miR-39为参照基因，Trizol 法提取血浆总 microRNA，逆转录成 cDNA，并用 real-timeqPCR 检测血浆中 microRNA 的相对表达量，分析 microRNA 相对表达量各组中的变化。结果：1.miR-126：与 NCHD 组比较，SAP 组表达量增高，且有统计学差异，AMI、UAP 组有增高趋势，但无统计学意义；2.miR-143：与 NCHD 组比较，UAP、SAP 组无差异，AMI 组明显升高；AMI 组高于 UAP 和 SAP 组，且具有统计学差异；结论：1.miR-126在 SAP 组较 AMI、UAP、NCHD 均明显升高，且均有统计学差异，说明有可能在 AS 发病过程中具有保护作用。2.miR-143在 AMI 中高表达，且与 UAP、SAP、NCHD 相比均有统计学差异，表明 miR-143在某种程度上有可能作为 AMI 时的临床检测指标之一。
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miR-143、miR-145及血管紧张素Ⅱ在人冠状动脉粥样硬化斑块中的表达
目的 探究miR-143、miR-145及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)在人冠状动脉粥样硬化斑块中的表达情况.方法 采用12例冠状动脉粥样硬化解剖病例的硬化冠状动脉及斑块和13例非心源性死因病例的冠状动脉血管的石蜡包埋组织,提取组织RNA,逆转录后运用qPCR技术检测miR-143、miR-145在病变冠脉组织和正常冠脉组织中的表达情况,同时运用免疫组织化学染色技术半定量AngⅡ在病变冠脉组织和正常冠脉组织中的表达情况.结果 冠状动脉粥样硬化组中miR-143、miR-145的表达量分别为(1.16±0.36)、(3.22±1.30),较对照组的(5.21±2.86)、(13.09±6.06)下降,差异均有统计学意义(P＜0.01).AngⅡ主要表达于粥样硬化冠状动脉的巨噬细胞及成纤维细胞中,其表达量在冠状动脉粥样硬化组中为(7.09±0.71),较对照组的(42.75±29.59)下降,差异有统计学意义(P＜0.01).对照组不同死因病例间miR-143、miR-145和AngⅡ表达差异无统计学意义.结论 miR-143、miR-145及AngⅡ在人冠状动脉粥样硬化斑块中表达下调.
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miR-143和miR-145在胃癌中的表达及功能研究
目的：探讨miR-143和miR-145在胃癌组织中的表达情况，观察其生物学功能。方法通过高通量芯片检测比较11对胃癌原发灶及其配对肝转移灶的miRNA表达谱，采用Real-time PCR方法观察miR-145和miR-143在55例胃癌组织中的表达情况。同时使用Transwell方法观察其对细胞转移能力的影响。结果 miR-143和miR-145在胃癌组织中的表达明显低于癌旁正常组织（miR-143：0．028±0．005比0．052±0．014，P＝0．058；miR-145：0．922±0．135比1．772±0．285，P＝0．007），在转移灶中的表达明显低于原发灶（miR-143：0．059±0．025比0．182±0．045，P＝0．021；miR-145：0．164±0．076比0．594±0．283，P＝0．042），相关性分析显示，miR-143和miR-145表达具有显著相关性（r＝0．400， P＝0．000）。体外实验显示，两者可协同抑制胃癌细胞系转移。结论 miR-145和miR-143可能参与胃癌转移进程，并且两者可能发挥协同作用。
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MiR-143通过负调控GLI3基因来抑制鼻咽癌细胞的迁移
目的 探讨miR-143在鼻咽癌细胞迁移中的生物学功能及可能的分子机制.方法 应用生物信息软件预测miR-143靶基因,分别将预测靶基因GLI3的3'UTR及其突变体构建到荧光素酶载体psiCHECK-2骨架中.通过荧光素酶报告基因检测分析miR-143对靶基因GLI3的调控作用,并检测转染miR-143mimics、inhibitor和siGLI3后鼻咽癌5-8F细胞miR-143和GLI3的表达水平及迁移能力的变化.结果 生物信息学预测Hh信号通路转录基因GLI3可能是miR-143的靶基因；双荧光素酶报告基因分析表明miR-143能够作用于GLI3的3'UTR；Western Blot和qRT-PCR结果进一步证明5-8F细胞中miR-143与GLI3的表达呈负相关,并影响5-8F细胞的迁移能力.结论 MiR-143可通过负调控靶基因GLI3抑制鼻咽癌细胞的迁移,为进一步研究miR-143及Hh信号通路在鼻咽癌中的作用机制提供参考价值.
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miR-143在鼻咽癌细胞系中的表达及其对高转移细胞株5-8F的影响
目的 检测鼻咽癌细胞系中miR-143表达情况,建立稳定高表达miR-143的鼻咽癌细胞系,为研究其在鼻咽癌的发生和发展中的作用机制提供可靠的细胞模型.方法 采用QPCR方法检测鼻咽癌细胞系CEN1、CNE2、HONE1、5-8F、6-10B及人永生化鼻咽上皮细胞NP69中miR-143的表达水平.构建重组逆转录病毒质粒pMSCV-puro-miR-143,包装逆转录病毒pMSCV-miR-143和pMSCV-Vector并感染鼻咽癌细胞,建立稳定高表达miR-143的鼻咽癌细胞系,并应用细胞黏附实验检测过表达mir-143后,鼻咽癌细胞对胞外基质的黏附性.结果 鼻咽癌细胞系中miR-143的表达水平均低于对照组NP69细胞,其中高转移潜能细胞株5-8F的表达量低,仅为对照组的3.03％,成瘤但不转移细胞株6-10B表达量高,为对照组的63.59％.实时荧光定量PCR显示筛选后第7代细胞miR-143的表达水平比对照组高出达1080倍(P＜0.05).细胞黏附实验结果显示,过表达mir-143可降低5-8F细胞对胞外基质的黏附性.结论 miR-143在鼻咽癌细胞系中表达失常,其作用可能与鼻咽癌细胞的侵袭和转移相关；成功建立了稳定高表达miR-143的鼻咽癌细胞系,并初步确定miR-143能抑制5-8F细胞的黏附能力,为探索miR-143在鼻咽癌的发生和发展中的作用机制奠定了实验基础.
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miR-143和miR-520d-5p在胃癌组织中的异常表达
目的 应用MicroRNAs (miRNAs)芯片技术筛选胃癌组织中差异表达的miRNAs,研究与胃癌相关的miRNAs.方法 从3对手术切除的胃和相配对的正常胃组织中提取总RNA,miRNA芯片检测miRNA表达情况,然后在47例配对的胃癌和正常胃组织中,用Real-time RT-PCR(Taqman)对部分差异表达miRNA进行验证.结果 芯片结果显示:与配对的正常胃组织相比,有62个miRNAs在胃癌中异常表达,其中42个miRNA高表达,20个miRNA低表达.用Real-time RT-PCR(Taqman)验证显示:miR-143在胃癌组织中表达显著降低(JP=0.002 9);miR-520d-5p在胃癌组织中表达显著提高(P =0.032).结论 miR-143和miR-520d-5p可能参与了胃癌的发生过程.
关键词： miRNA miR-143 miR-520d-5p 胃 -
miR-143和miR-145在膀胱癌中的表达及意义
[目的]探讨膀胱癌中miR-143、miR-145的表达及其与膀胱癌临床病理特征的关系.[方法]采用miRNA表达谱芯片、Northen blot、Real-time PCR法检测miR-143、miR-145在膀胱癌中的表达,分析miR-143、miR-145的表达与膀胱癌临床分期、分级的关系.[结果]miRNA表达谱芯片、Northen blot、Real-time PCR法均提示miR-143、miR-145在膀胱癌中较癌旁正常膀胱组织中表达明显降低,差异具有统计学意义.miR-143、miR-145的低表达在不同临床分期与分级的膀胱癌中差异不明显.[结论]miR-143、miR-145在膀胱癌中明显低表达,可能与膀胱癌的发生密切相关.
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miR-143在乙型肝炎相关肝病患者血清中的表达及意义
目的 探讨乙型肝炎(乙肝)相关肝病患者血清中miR-143的表达水平与HBV DNA、甲胎蛋白(AFP)定量水平的关系,研究其在乙肝相关肝病患者中的价值.方法 随机选取乙肝患者共计169例,且入选患者均被告知并签署知情同意书.其中慢性乙肝78例(慢乙肝组),肝硬化53例(乙肝肝硬化组),肝细胞癌(乙肝肝癌组)38例,正常对照组20例.采用荧光定量PCR检测血清miR-143和HBV DNA,ELISA检测乙肝血清标志物(HBV-M),化学发光免疫分析技术定量检测血清AFP水平,罗氏C8000全自动生化分析仪检测肝功能指标丙氨酸氨基转移酸(ALT).结果 乙肝肝癌组miR-143相对表达量为4.23±1.08,较乙肝肝硬化组(2.37±0.97)、慢乙肝组(1.21±0.58)及正常对照组(1.53±0.36)显著升高(P＜0.05),且miR-143相对表达量随着病程进展而有升高趋势.血清miR-143表达水平在TNM分期Ⅲ期的乙肝肝癌患者较Ⅰ～Ⅱ期患者高(P＜0.05),而在患者不同年龄、性别、肿瘤大小、癌栓间差异无统计学意义(P＞0.05).血清miR143、HBV DNA、AFP在乙肝肝癌患者的表达量显著高于其他3组(P＜0.05).乙肝肝癌患者中血清miR-143与HBV DNA、ALT、AFP水平均呈正相关(r =0.63,P＜0.05;r =0.67,P＜0.05;r =0.88,P＜0.05).结论 miRNA-143与乙肝相关肝病患者病情进展有密切关系,可作为一种潜在的HBV相关肝癌诊断的生物学标记物.
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miRNA-143通过DNMT3a介导血管平滑肌细胞增殖作用的研究
目的 探讨miRNA-143(miR-143)和DNMT3a在血管平滑肌细胞增殖中的作用及机制.方法 分别用miR-143的前体和抑制物干预血管平滑肌细胞(VSMCs),MTT法检测VSMCs增殖情况,qRT-PCR法检测miR-143和DNMT3a的表达,Westem blot法检测DNMT3a的蛋白表达,巢式降落式特异性甲基化PCR法分析miR-143启动子区的甲基化状态,双荧光素酶报告基因检测系统分析荧光素酶活性.结果 miR-143的前体干预VSMCs后,细胞的增殖活性显著下降,DNMT3a mRNA和蛋白表达均降低,而miR-143的抑制物作用后细胞增殖活性明显增强,DNMT3a表达增加;转染miR-143前体后,荧光素酶活性减弱,而用miR-143抑制物作用细胞后,荧光素酶活性明显增强(P＜0.01);干扰DNMT3a后,miR-143的表达增加,但miR-143启动子区甲基化程度降低.结论 miR-143和DNMT3a相互调控可能是VSMCs增殖的重要机制.
关键词： miR-143 DNA甲基化转移酶3a 血管平滑肌细胞 增殖 -
miR-143在mTOR大肠癌发生发展中的作用及其机制
目的:研究mTOR通过下调miR-143对大肠癌的发生发展的调控作用及其机制.方法:Westernblot、qPCR检测mTOR抑制剂处理前后大肠癌细胞中mTOR信号通路蛋白相关蛋白及miR-143的表达;qPCR检测TSC2敲低后HT-29细胞中miR-143的变化;MTT及克隆形成实验检测TSC2敲低后HT-29细胞的增殖能力及克隆形成能力;MTT及克隆形成实验检测miR-143对HT-29细胞增殖能力及克隆形成能力的影响;MTT及克隆形成实验检测miR-143 mimic能否逆转mTOR对HT-29细胞增殖能力的影响;裸鼠成瘤实验验证mTOR通过下调miR-143促进大肠癌的发展;Westem blot、qPCR检测大肠癌组织及癌旁组织中mTOR信号通路蛋白相关蛋白及miR-143的表达.结果:雷帕霉素抑制大肠癌细胞mTOR信号通路后,miR-143表达上调;mTOR活化促进HT-29细胞的增殖能力及克隆形成能力;miR-143抑制HT-29细胞的增殖能力及克隆形成能力;miR-143可以逆转mTOR过度活化对HT-29细胞增殖能力的影响;在miR-143水平升高的情况下,mTOR不能有效地发挥其促癌效应;相对于癌旁组织,大肠癌组织mTOR过度活化且miR-143表达下调,与前期实验结果一致.结论:mTOR通过下调miR-143促进大肠癌的发生发展.
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血浆miR-143、miR-145与冠脉粥样硬化程度的关系
目的:探讨血浆miR-143和miR-145水平与冠脉粥样硬化严重程度的关系.方法:112例患者按冠脉造影结果分为冠脉病变组、非显著冠脉病变组和对照组,用Gensini评分评估病变严重程度.用实时定量RT-PCR检测血浆中miR-143和miR-145的浓度,并评估其与冠脉粥样硬化严重程度的关系.结果:与非显著冠脉病变组和对照组相比,冠脉病变组患者血浆miR-143和miR-145水平显著降低.miR-143和miR-145是冠脉粥样硬化严重程度的独立危险因素(miR-143,r=-0.440,P=0.001; miR-145,r=-0.459,P=0.015).miR-143和miR-145的ROC曲线下面积分别为0.884和0.909.结论:miR-143和miR-145可作为评估冠脉粥样硬化程度的生物标志物,并具有较高的特异性和敏感性.
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miR-21、miR-126、miR-143和miR-373在正常宫颈组织、宫颈癌组织及Hela细胞中的表达差异
目的 研究miR-21、miR-126、miR-143和miR-373在正常宫颈组织、宫颈癌组织及Hela细胞中的表达差异,探讨microRNAs(miRNAs)对宫颈癌发生的调控作用.方法 荧光实时定量检测20例良性肿瘤患者的正常宫颈组织,20例宫颈癌组织及Hela细胞中miR-21、miR-126、miR-143和miR-373的表达.结果 m iR-21在宫颈癌组织及Hela细胞系中高表达,在正常宫颈标本中低表达,在宫颈癌组织中相对定量为正常宫颈组织的11.3196倍(P＜0.05);miR-143、miR-373在宫颈癌组织及Hela细胞中均低表达,在正常宫颈标本中高表达,miR-143、miR-373在宫颈癌组织中相对定量分别为正常宫颈组织的0.1553倍和0.4907倍(P＜0.05);miR-126的表达无明显变化.结论 miRNAs与宫颈癌的发生和调控密切相关.在宫颈癌组织和Hela细胞中,miR-21表达上调,可能在宫颈癌的发生过程中发挥癌基因的作用;miR-143、miR-373表达下调可能发挥抑癌基因的作用;miR-126表达无差异,与宫颈癌无明显关系.
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MiR-143在ob/ob小鼠肝脏、骨骼肌中的表达及意义
目的 观察miR-143在遗传性ob/ob肥胖小鼠与正常对照组C57/BL6J小鼠肝脏、骨骼肌中的差异表达,初步探讨miR-143在肥胖及相关脂代谢紊乱发生中的作用.方法 选择16周龄的ob/ob小鼠与C57/BL6J小鼠各12只,采用实时荧光定量聚合酶链反应技术检测两组小鼠肝脏、骨骼肌中miR-143的表达水平.结果 miR - 143在ob/ob小鼠肝脏中的表达水平明显高于C57/BL6J小鼠(P＜0.05),但在骨骼肌中的表达水平两组无显著性差异(P＞0.05).结论 miR-143可能参与了ob/ob小鼠肝脏脂质代谢紊乱的发生.
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miR-143-3p在人腹膜间皮细胞转分化过程中的作用及机制
目的 探讨miR-143-3p在高糖刺激的人腹膜间皮细胞(HPMC)转分化中的作用及相关机制.方法 将永生化的HPMC给予50 mmol/L高糖刺激72 h后,反转录PCR及Western blot法检测miR-143-3p、血清反应因子(SRF)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏素(E-cadherin)及Snail的mRNA和蛋白表达变化;利用miR-143-3p的模拟物、模拟物阴性对照、抑制剂及抑制剂阴性对照;pcDNA3.1空载体与pcDNA3.1-SRF质粒;SRF-siRNA和阴性对照分别转染高糖刺激72 h后的HPMC,反转录PCR及Western blot法检测miR-143-3p、SRF、α-SMA、E-cadherin及Snail的mRNA和蛋白表达水平.结果 反转录PCR及Western blot法检测结果显示,高糖刺激HPMC 72 h后,miR-143-3p、SRF、α-SMA及Snail表达增加,而E-cadherin表达下降;上调miR-143-3p的表达后,SRF、α-SMA及Snail表达增加,而E-cadherin表达降低.下调miR-143-3p的表达后,SRF、α-SMA及Snail表达减少,而E-cadherin表达增加.利用pcDNA3.1-SRF质粒上调SRF表达,则miR-143-3p、α-SMA及Snail表达增加,而E-cadherin表达下调;SRF-siRNA沉默SRF后,miR-143-3p、α-SMA及Snail表达下调,而E-cadherin表达增加.结论 SRF/miR-143-3p信号通路轴参与了高糖刺激所引起的人腹膜间皮细胞的转分化过程,其机制可能是通过SRF上调miR-143-3p的表达,间接参与人腹膜间皮细胞的转分化.
关键词： 上皮间充质细胞转分化 miR-143 血清反应因子 -
miR-143下调肝癌细胞TLR2的表达并抑制肝癌细胞增殖和侵袭
目的 探讨肝癌组织中小RNA-143(miR-143)的表达,并通过瞬时转染肝癌细胞观察对癌细胞生物学行为的影响.方法 收集肝癌组织标本及其对应癌旁组织,实时定量PCR检测miR-143在肝癌组织与对应癌旁组织中的表达情况;人工合成寡义核苷酸miR-143mimics,体外瞬时转染HepG2肝癌细胞,MTY法检测细胞增殖变化,annexin V-F1TC/PI染色结合流式细胞仪检测细胞凋亡变化,TranswellTM侵袭实验检测细胞侵袭力变化,Western blot法检测Toll样受体2(TLR2)、核因子κB(NF-κB)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)及MMP-9蛋白表达情况.结果 miR-143在肝癌组织中低表达,通过转染miR-143mimics上调miR-143水平后,可以抑制肝癌细胞增殖、促进肝癌细胞凋亡、抑制肝癌细胞侵袭,并下调TLR2、NF-κB、MMP-2及MMP-9表达.结论 miR-143在肝癌中低表达,肝癌细胞过表达miR-143可下调TLR2、NF-κB、MMP-2及MMP-9表达.
