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抗SARS-CoV病毒N蛋白的单链抗体(scFv)筛选
目的 筛选出抗SARS-CoV病毒N蛋白的单链抗体.方法 利用原核表达所获得的SARS病毒N蛋白,筛选人源单链抗体噬菌体展示库,经特异性的检测,以期得到抗SARS-CoV病毒N蛋白的特异单链抗体.结果 获得了8个抗SARS病毒N蛋白的候选克隆.经测序,获得了编码抗体可变区的基因序列,并进行了原核表达.结论 筛选得到的抗SARS-CoV病毒N蛋白单链抗体具有高度的特异性,可以用作临床实验或研究SARS病毒过程中快速检测SARS N蛋白或SARS病毒粒子的候选抗体.
关键词: SARS-CoV病毒 N蛋白 人源单链抗体噬菌体展示 -
SARS病毒BJ01株空斑测定方法的建立
目的建立SARS病毒空斑测定方法,为SARS病毒生物学研究提供手段.方法将不同稀释度SARS病毒BJ01株分别接种Vero细胞单层,然后加营养琼盖.按Dullbecco R的方法计算空斑滴度.结果 SARS病毒BJ01株加营养琼盖后,3天即可出现空斑,形态呈圆形,直径2.5~3mm,大小均匀.结论建立的SARS病毒的空斑方法稳定,出斑规律.
关键词: 严重急性呼吸综合征 SARS-CoV病毒 BJ01株 空斑测定 -
20条SARS病毒全基因组序列的突变分析:负选择作用于复制酶ORF1b和spike基因的证据
目的:近,有越来越多的SARS-CoV病毒基因组序列释放到GenBank数据库中.我们这项研究的目的是通过分析病毒基因组的变异揭示病毒的进化规律.方法:我们从GenBank数据库中获得20条SARS-CoV病毒基因组序列,计算病毒基因非同义突变频率(Ka)和同义突变频率(Ks)之比.结果:复制酶ORF1a,ORF1b和Spike蛋白基因的Ka/Ks之比分别是0.94(p=0.4606),0.38(p=0.0074),0.48(p=0.0685).结论:SARS-CoV复制酶ORF1b在宿主体内正在经历负选择;这种负选择的力量可能也作用于Spike基因.这一发现为治疗SARS药物和抗SARS疫苗研制提供了新的基础.
关键词: 重症急性呼吸综合征 SARS-CoV病毒 负选择 复制酶多蛋白 S蛋白