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2012-2013年新中东呼吸综合征冠状病毒感染的流行现状及对公众、临床工作者和卫生行政当局的指导建议
1 一般发病情况2012年9月全球首次报告中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)能引起人类感染.2013年7月,世界卫生组织(WHO)国际卫生条例应急委员会确定,尽管MERS-CoV感染未达到“国际关注的突发公共卫生事件标准”,但形势仍然“严重和值得密切关注”.本报告总结了流行病学相关资料,并更新到2013年9月20日,为病例的评估、病例定义、旅行和感染控制提供更多的指导建议.
关键词： 中东呼吸综合征冠状病毒 流行现状 建议 -
中东呼吸综合征冠状病毒出现3年后的流行现况
自从2012年沙特阿拉伯首次发生中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)感染人类以来,该病毒可能已经建立了地方疫源地,有能力在中东引起社区和医院的暴发疫情.截至2015年5月11日,世界卫生组织(WHO)已经接到1112例实验室确诊的人类感染MERS-CoV病例报告,其中死亡422例.平均年龄49岁(9月龄至99岁),男性占65％.
关键词： 中东呼吸综合征冠状病毒 危险性评估 预防措施 -
2016—2017年青海口岸朝觐回国人员呼吸道病毒监测
目的 开展青海口岸朝觐回国人员呼吸道传染病监测, 重点对中东呼吸综合征冠状病毒及流感病毒等呼吸道病毒进行监测.方法 2016—2017年, 在青海口岸朝觐回国入境人群中采集咽拭子样本共118份, 其中17份采集于体温≥37.0℃的入境人员, 其余101份采集自有呼吸道症状者.采集的咽拭子样本, 采用荧光定量RT-PCR或PCR方法检测中东呼吸综合征冠状病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒、冠状病毒、腺病毒等20种呼吸道病毒.结果 在采集的咽拭子样本中, 检测出甲型流感病毒、乙型流感病毒、鼻病毒、冠状病毒、人偏肺病毒、腺病毒等共11份, 阳性率为9.32％.2017年3份样本中检出两种呼吸道病毒混合感染.结论 青海口岸近两年未在朝觐回国人群中检出中东呼吸综合症冠状病毒, 初步了解青海口岸朝觐人群呼吸道病原谱构成.
关键词： 朝觐 中东呼吸综合征冠状病毒 呼吸道病毒 -
中东呼吸综合征冠状病毒重组酶介导核酸检测方法的建立
目的 建立快速、敏感、特异的逆转录重组酶介导(Reverse-transcription recombinase-aid assay,RT-RAA)核酸检测方法,用于中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)的检测.方法 根据MERS-CoV基因的保守序列设计并合成特异性RAA引物及探针.通过条件优化,以10倍系列稀释经第3代慢病毒载体构建的假病毒颗粒阳性标准品为模板,进行RT-RAA扩增,并进行特异性、敏感性以及临床样本检测.结果 建立的RT-RAA方法检测MERS-CoV假病毒颗粒阳性标准品的灵敏度为10拷贝/ml,高于实时荧光RT-PCR方法(102拷贝/ml);用该方法检测MERS-CoV假病毒颗粒有明显扩增,而甲型H1N1流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、鼻病毒等4种呼吸道病毒的检测均为阴性;检测我国首例输入性MERS病例的临床样本及1例英国QCMD协会的室间质评阳性灭活样本均能检出,与实际结果相符.检测时间(20 min)大大低于实时荧光RT-PCR (90 min).结论 建立的MERS-CoV RT-RAA检测方法灵敏、特异、快速,可用于MERS-CoV感染的现场快速检测和流行病学调查.
关键词： 中东呼吸综合征冠状病毒 重组酶介导 假病毒颗粒 -
2015年韩国中东呼吸综合征疫情流行病学特征分析
目的 分析2015年韩国中东呼吸综合征(MERS)疫情的流行特征,利于中国医疗卫生业务人员了解相关信息.方法 收集韩国政府、WHO等官方网站及韩国权威媒体信息,进行疫情流行特征相关分析.结果 2015年5月20日至7月13日韩国共报告186例MERS确诊病例,其中死亡36例.除2例可能为家庭内感染外,其余病例均在医疗机构相关场所感染.首发病例1例,二代病例29例、三代病例125例、四代病例25例,6例代数不详.5个道(市)11个区域的16家医院报告了病例,病例中包括39名医院工作人员.病例年龄M=55岁,男性占60％.死亡病例年龄M=70岁,男性占67％;78％的死亡病例有慢性基础性疾病.除首发病例外,有12例发生了续发病例,其中1例传播了84例.中国5月29日确诊1例韩国输入病例,未发生二代病例.从韩国病例和中国输入性病例中获得的病毒与从中东地区获得的病毒相比无明显变化.结论 2015年韩国MERS疫情特点和传播模式与以往中东地区暴发疫情类似.
关键词： 中东呼吸综合征 中东呼吸综合征冠状病毒 流行病学特征 -
中东呼吸综合征流行病学
中东呼吸综合征（MERS）是近年来新发现的由中东呼吸综合征冠状病毒（MERS-CoV）引起的一种严重呼吸道传染性疾病，于2012年9月WHO首次通报［1］。目前确诊报告病例数超过1000例，波及25个国家和地区，其中中东国家为病例集中区，而在欧洲、非洲、亚洲及北美等地出现的首发病例也均与中东地区有关，或发病前有中东旅行史，或有与中东相关病例接触史。近期我国周边国家如韩国也出现输入病例后引发的医院感染病例聚集性疫情。目前对其传染源及传播途径等流行病学特征仍不清晰，但较多研究显示该病为一种人畜共患病，单峰骆驼在人感染的过程中扮演着非常重要角色，而家庭及医院聚集性疫情报道说明该病毒具有一定的人传人的能力［2］。为进一步了解其流行规律进而为制定预防控制措施提供参考，本文对MERS的流行特征、流行过程及其聚集性疫情进行总结分析。
关键词： 中东呼吸综合征 中东呼吸综合征冠状病毒 流行病学 -
韩国MERS,人类再次显露阿基里斯之踵
如果说有哪种传染病病原体之名能为中国老百姓耳熟能详,冠状病毒一定可以排在前列.2003年SARS冠状病毒给一代人留下了惨痛记忆;2015年5月,另一种冠状病毒——中东呼吸综合征(MERS)冠状病毒(MERS-CoV)又闯入了大众的视野,成为人们关注的热点.2015年5月24日,WHO通报韩国确诊了该国首例MERS病例.
关键词： 中东呼吸综合征 中东呼吸综合征冠状病毒 -
中东呼吸综合征
2012年9月埃及病毒学家Zaki报告从沙特阿拉伯(沙特)一名60岁急性肺炎并发急性肾功能衰竭的男性患者中分离出一株新型冠状病毒[1].随后英国向WHO报告,曾赴沙特和卡塔尔旅行的一名49岁男性患者出现新型冠状病毒感染临床表现,并将该分离病毒命名为London1_novel CoY[2].2012年11月荷兰鹿特丹市Erasmus Medical Center确认Zaki报告的病毒属于新型β冠状病毒HCoV-EMC[3].此后该病毒感染呈散发状态,全球确认的病例月均不足5例.2013年2月WHO曾认为该疾病"在人-人之间的持续传播风险很低"[4],但至4、5月,分别出现19名新病例,其分布仍主要集中在中东地区或曾到过该地区的旅行者,其中多数曾与感染者有过接触.鉴此,国际病毒命名委员会于2013年5月将此病毒定名为中东呼吸综合征冠状病毒(Middle Eastrespiratorysyndrome coronavirus,MERS-CoV)[5].同时WHO发出警告,MERS-CoV对全球构成威胁[6].
关键词： 中东呼吸综合征冠状病毒 流行病学 -
不同剂量DPP4转导后MERS-CoV感染小鼠模型的临床及生物学特征比较
本研究探讨不同剂量DPP4转导小鼠后对中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coro navirus,MERS-CoV)感染建模及其生物特性的影响.首先将表达MERS-CoV受体DPP4的重组腺病毒以高剂量(2.5×108 PFU/只)、低剂量(0.5×108 PFU/只)分别转导转导BALB/c小鼠,继而滴鼻接种MERS-CoV,建立MERS-CoV感染小鼠模型.对成功构建的小鼠感染模型分别进行体征、病毒复制、免疫病理及抗体应答的比较分析.结果表明:两种剂量DPP4转导后MERS-CoV感染小鼠,均可引起典型肺炎表征,在小鼠肺部能检测到病毒复制及免疫病理,但高剂量DPP4转导组小鼠肺炎体征与肺病理损伤更明显,病毒复制水平亦高于低剂量DPP4转导组.小鼠感染建模后2w后可检测到结构蛋白特异抗体与中和抗体,高剂量DPP4转导组抗体应答亦明显高于低剂量转导组.本研究以两种剂量DPP4转导小鼠,均成功建立了MERS-CoV感染的小鼠模型,受体DPP4转导水平可影响MERS-CoV感染小鼠体征、病毒复制及抗体应答.
关键词： 中东呼吸综合征 中东呼吸综合征冠状病毒 动物模型 小鼠 抗体应答 -
MERS-CoV棘突蛋白表位多肽疫苗设计及在小鼠体内免疫效果分析
筛选有效的免疫原,研制安全有效的疫苗,是预防中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)感染的有利武器.本研究应用生物信息学方法,预测了MERS-CoV棘突蛋白(Spike,S)上的多肽抗原表位.基于生物信息学分析结果人工合成9条多肽并偶联钥孔戚血蓝素后,分别免疫BALB/C小鼠,检测了多肽诱导的体液免疫和细胞免疫应答.结果表明,YVDVGPDSVKSACIEVDIQQTFFDKT-WPRPIDVSKADGI的多肽,三次免疫小鼠后,可在小鼠体内诱导较强的IgG抗体(滴度达1∶10 000)和较高水平的抗原特异性细胞免疫应答.本研究结果为基于生物信息学预测的多肽疫苗的设计及MERS-CoV疫苗的研制提供了科学参考.
关键词： 中东呼吸综合征冠状病毒 多肽 表位 疫苗 生物信息学 -
环介导逆转录等温扩增技术检测中东呼吸综合征冠状病毒基因
建立了基于浊度仪和羟基萘酚蓝(Hydroxy naphthol blue,HNB)颜色变化的简单、快速和灵敏的环介导逆转录等温扩增技术(RT-LAMP)检测方法,应用于中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)的检测.针对MERS CoV的核衣壳蛋白基因(Nucleocapsid,N)设计6条特异引物,在等温条件下(63℃)进行60 min扩增反应.通过实时浊度仪记录扩增曲线和扩增前在反应体系中加入HNB观察颜色变化两种方式进行检测结果判定.本文对不同人类冠状病毒及常见呼吸道病毒进行了特异性验证,对梯度稀释的体外转录MERS-CoV全N基因RNA进行了定量和检测限分析,同时与已发表的实时荧光定量PCR (rRT-PCR)进行比较.结果显示,本研究建立的RT-LAMP方法特异性高,对于每反应管103至106的拷贝数RNA,出峰时间与每反应管N基因RNA拷贝数对数值有稳定的线性关系.基于浊度仪和颜色判定的RT-LAMP检测方法检测限分别为500拷贝和1 000拷贝.因此,该方法有望应用于MERS-CoV感染的快速筛选,具有在基层医疗卫生机构和现场推广和应用的潜力.
关键词： 环介导逆转录等温扩增 中东呼吸综合征冠状病毒 -
MERS-CoV动物模型研究进展
中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)早发现于2012年,是继严重急性呼吸窘迫综合征冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-CoV)之后,引起人类严重感染的又一种重要冠状病毒.对于该种新发现、致病性强、病死率高的感染性疾病,开发有效的动物模型对于研究疾病的发病过程、致病机理、评估预防与治疗措施的效果等具有重要理论和现实意义.到目前为止,非人灵长类动物如恒河猴、狨猴,小型动物如小鼠、仓鼠、雪貂、新西兰白兔等均被尝试作为MERS-CoV感染的动物模型.其中一些已经用于评估疫苗或药物的干预效果.本文就MERS-CoV动物模型研究进展作—综述.
关键词： 中东呼吸综合征冠状病毒 动物模型 非人灵长类动物 小鼠 感染性疾病 -
中东呼吸综合征冠状病毒半巢式PCR检测方法的建立
目的 建立特异、灵敏的半巢式PCR方法以期用于检测中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV). 方法 根据MERS-CoV N蛋白基因设计并合成特异性内侧、外侧引物.通过条件优化,建立MERS-CoV半巢式PCR检测体系,扩增产物测序后与目的序列进行同源比对.以10倍系列稀释重组质粒为标准品,与普通PCR反应进行比较,检测半巢式PCR方法的灵敏度.以其他6种呼吸道病原体及冠状病毒基因为对照,检测半巢式PCR方法的特异性. 结果 使用建立的半巢式PCR方法扩增的特异片段与GenBank中发表的MERS-CoV基因序列同源性为100％;半巢式PCR检测方法的灵敏度为1.17×101拷贝,比普通一轮PCR扩增的灵敏度(1.17×10 5拷贝)提高了104倍;用该方法检测MERS-CoV基因为阳性,其他6种呼吸道病原体及冠状病毒基因检测均呈阴性. 结论 建立的MERS-CoV半巢式PCR方法具有良好的准确性、灵敏性和特异性,为MERS-CoV感染的诊断提供了一种新的、可靠的检测手段.
关键词： 中东呼吸综合征冠状病毒 半巢式PCR 检测方法 敏感 特异 -
中东呼吸综合征冠状病毒量子点免疫层析试纸的制备
目的 制备一种能快速检测中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)的量子点免疫层析试纸,以期用于MERS-CoV感染检测. 方法 采用EDC偶联法将羧基化CdTe /ZnSe量子点与抗MERS-CoV RBD的单克隆抗体(mAb/MERS-CoV)共价偶联,通过斑点免疫印迹检验偶联物的活性.以CdTe/ZnSe量子点标记的mAb/MERS-CoV作为荧光标记物,采用免疫层析技术制备量子点免疫层析试纸,用于MERS-CoV检测.并对该方法进行特异性、敏感性评价.结果 CdTe/ZnSe量子点可偶联mAb/MERS-CoV,且偶联物具有良好的生物活性.以其作为荧光标记物建立的量子点免疫层析试纸可特异性检测MERS-CoV假病毒,低检测限为2×53 TCID50/ml,其他对照病毒检测均阴性. 结论 制备的MERS-CoV量子点免疫层析试纸具有简便、快速、特异等优点,可用于MERS-CoV感染快速诊断和流行病学调查.
关键词： 中东呼吸综合征冠状病毒 量子点 免疫层析试纸 -
中东呼吸综合征冠状病毒的实验室检测以及疫苗和治疗研究进展
中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)是2012年首次发现的具有高病死率、可感染人的一种新型冠状病毒,给全球公共健康带来严重威胁.目前,针对MERS-CoV的病毒分离、免疫学及核酸检测方法已经建立,特异性的疫苗和治疗药物也正在研发之中,成为控制MERS-CoV感染蔓延的有力武器.本研究就MERS-CoV的实验室检测及疫苗和治疗研究进展作一综述,以期为MERS-CoV的防控提供参考.
关键词： 中东呼吸综合征冠状病毒 检测 疫苗 治疗 -
中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)中和单抗研制技术进展
中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)2012年在中东地区的大暴发及其快速传播能力,已成为了全球科研工作者关注的重点,寻找有效的治疗和预防措施对MERS-CoV感染防治起着至关重要的作用.临床研究证实,病毒感染者恢复期血清中含有大量的中和抗体,并具有有效的临床治疗作用,说明中和抗体能有效、安全的作为病毒感染治疗手段.纤突(spike,S)蛋白是介导MERS-CoV感染宿主细胞的关键结构蛋白,是目前此病毒中和性单抗研究的关键位点.本文综述了MERS-CoV S蛋白结构特点、中和性单抗制备免疫原类型及不同种类中和性单抗的制备方式,并结合当前研究现状展望了MERS-CoV中和单抗研发前景.
关键词： 中东呼吸综合征冠状病毒 单克隆抗体 中和 纤突蛋白 受体结合区 -
基于Avicel-结晶紫染色空斑的中东呼吸综合征冠状病毒感染滴定与中和抗体检测方法
目的 针对中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV),建立安全、操作简易的空斑试验检测方法.方法 将MERS-CoV(EMC/2012)感染Vero或Huh7.5细胞,通过研究MERS-CoV感染后镜下细胞病变与染色后蚀斑,比较染毒时间(2 d和3 d)以及细胞培养覆盖物[琼脂、微晶纤维素-羧甲基纤维素钠复合物(Avicel)]对空斑试验的影响,确定MERS-CoV空斑试验适用的细胞类型、染毒时间以及细胞培养覆盖物,并将该方法用于MERS-CoV中和抗体的检测.结果 MERS-CoV感染Vero细胞后能形成清晰的病毒空斑;染毒后3 d后能稳定清晰地形成MERS-CoV特异性空斑;微晶纤维素-羧甲基纤维素钠复合物覆盖细胞所产生的病毒空斑较琼脂覆盖物更为清晰,操作简易,更易于在BSL-3实验室进行操作;该方法可用于MERS-CoV中和抗体的检测.结论建立了基于Avicel-结晶紫染色技术的适用于BSL-3实验室操作的MERS-CoV空斑试验方法,为MERS-CoV的滴定、中和抗体检测等提供了实验资料.
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中东呼吸综合征冠状病毒N蛋白的原核表达、纯化和鉴定
目的：对中东呼吸综合征冠状病毒（ middle east respiratory syndrome coronavirus， MERS-CoV）的核衣壳蛋白（ nucleocapsid，N）进行原核表达、纯化和鉴定，了解其免疫原性。方法通过人工合成N基因，构建重组质粒pET30a-MERS-CoV-N，然后转化E．coli BL21（DE3），利用 IPTG进行诱导表达，并优化确定表达条件；采用镍柱亲和层析纯化，SDS-PAGE和Western blot验证。结果原核表达成功并纯化获得与预期大小（46×103）一致的高纯度可溶性N蛋白。 Western blot表明重组蛋白可与免疫阳性兔血清及His标签抗体发生特异性反应，但与北京地区2008年收集的30份成人血清无反应。结论 MERS-CoV的N蛋白成功在原核系统中实现表达并纯化、鉴定，为MERS-CoV的免疫学诊断和免疫原性研究奠定了基础。
关键词： 中东呼吸综合征冠状病毒 核衣壳蛋白 原核表达 纯化 鉴定 -
2013年感染性疾病热点回顾
本文对2013年全球传染病，包括禽流感、GⅡ4悉尼诺如病毒感染、中东呼吸综合征冠状病毒感染、手足口病、结核病、麻风病、登革热、病毒性肝炎、AIDS的流行特点和相关感染性疾病的疫情予以回顾。重点公布了中国大陆2013年法定传染病发病情况，介绍了全球发生的多起传染病疫情，归纳了几种新突发传染病的现状，关注了常见传染病的诊治、预防新动态。提示仍不可忽视对新突发、病原变异及尚未能控制的传染病的积极防治。
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2015年全球传染病相关热点回顾
2015年中东呼吸综合征、埃博拉病毒病和寨卡病毒感染疫情令人关注,结核病、AIDS、病毒性肝炎、疟疾、人乳头状瘤病毒感染以及被忽视的热带病也应引起重视.本文对2015年全球的传染病疫情和防控进行简要概述.
