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复方黄栌口服液治疗慢性乙型肝炎湿热蕴结证的随机对照研究
目的:探讨复方黄栌口服液治疗慢性乙型肝炎(CHB)湿热蕴结证的临床疗效及对血清干扰素-γ(IFN-γ),白细胞介素-10(IL-10),IL-21和IL-22水平的影响.方法:将146例CHB患者采用随机按数字表法分为对照组72例和观察组74例.对照组口服恩替卡韦片,0.5 mg/次,1次/d;观察组在对照组治疗的基础上,加服复方黄栌口服液,20 mg/次,3次/d.两组疗程均为48周.于治疗前、治疗后24周和48周检测乙型肝炎E抗原(HBeAg)和乙肝病毒基因(HBV-DNA);每3个月检测1次谷丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和血清总胆红素(TBIL);进行治疗前后湿热蕴结证评分;检测治疗前后血清IFN-γ,IL-10,IL-21和IL-22水平.结果:治疗48周后观察组的应答率为89.19％,对照组为73.61％,观察组高于对照组(x2=5.875,P＜0.05);治疗48周后观察组中医证候疗效总有效率为86.49％,对照组为58.33％,观察组高于对照组(x2=14.541,P＜0.01);观察组HBeAg阴转率为41.89％高于对照组复常率的26.39％ (x2=3.895,P＜0.05),HBV-DNA阴转率为82.43％,高于对照组的68.06％ (x2=4.06,P＜0.05);治疗后观察组AST,ALT和TBIL水平低于对照组(P＜0.01);治疗后观察组ALT复常率为86.49％,高于对照组的72.22％(x2=4.548,P＜0.05),AST复常率为89.19％,高于对照组的75％(x2=5.019,P＜0.05);治疗后观察组血清IFN-γ和IL-21水平均高于对照组,IL-10和IL-22水平均低于对照组(P＜0.01).结论:复方黄栌口服液联合恩替卡韦片治疗CHB,能提高生化学、病毒学和血清学应答,改善中医临床症状,并能调节患者免疫功能,提高机体清除病毒的能力,值得临床使用.
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添加细胞因子优化人外周血γδ T细胞的体外扩增培养体系
目的从添加细胞因子角度,优化用于肿瘤过继免疫治疗的γδ T细胞体外扩增培养方案. 方法在固相化抗TCR γδ抗体加IL-2扩增人外周血γδ T细胞的体系基础上,添加其他的γ链受体家族细胞因子,包括IL-7、IL-15或IL-21,单独或联合使用、长期使用或短时添加,通过流式细胞术检测γδ T细胞纯度、细胞增殖及细胞毒活性相关分子的表达,计算γδ T细胞扩增效率;乳酸脱氢酶法检测γδ T细胞对人Burkitt`s淋巴瘤细胞系Daudi的细胞毒活性.结果单独使用IL-7或IL-21不能有效扩增γδ T细胞,但单独使用IL-15可以使γδ T细胞纯度、扩增效率及细胞毒活性均达到与单独使用IL-2相当的水平;IL-2与 IL-15联合使用,可促进γδ T细胞表达CD69,从而显著提高其扩增效率(P<0.05);而IL-2与 IL-21联合使用,可通过促进γδ T细胞颗粒酶A的表达,增强其对Daudi细胞的细胞毒活性(P<0.001);IL-2、IL-15和IL-21联合使用可以显著提高γδ T细胞的细胞毒活性,但是会影响其扩增效率;而仅在效应前短时间添加IL-21,同样可以有效增强γδ T细胞对肿瘤细胞的细胞毒活性(P<0.05).结论在用固相化TCR γδ抗体加IL-2体外扩增培养γδ T细胞体系中,使用IL-15,而在回输效应前短时间添加IL-21,显著提高γδ T细胞扩增效率及对肿瘤细胞的细胞毒活性,此为目前优化的γδ T细胞体外扩增培养方案.
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乙型肝炎肝硬化患者病毒基因型与滤泡辅助性T淋巴细胞及白细胞介素-21的关系和意义
目的 探讨乙型肝炎肝硬化患者不同HBV基因型与外周血滤泡辅助性T淋巴细胞(Tfh)及白细胞介素-21 (IL-21)的关系和意义.方法 59例人白细胞抗原(HLA)-A2阳性的乙型肝炎肝硬化患者作HBV基因型检测,比较B、C基因型感染者之间Tfh、IL-21的差别,并探讨其意义.结果 59例乙型肝炎肝硬化患者中,C基因型36例(61.02％),B基因型22例(37.29％),B、C混合型1例(1.69％),C基因型外周血Tfh水平(2.89％±1.44％),低于B基因型(4.65％±1.37％),t=3.01,P＜0.01,IL-21水平(14.62±2.12 ng/L),低于B基因型(32.27±11.25 ng/L),=4.12,P＜0.01,HBV特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)水平(0.17％±0.02％),低于B基因型(0.37％±0.03％),t=3.12,P＜0.01,HBV DNA水平(6.95±0.75log10拷贝/ml),高于B基因型(5.02 ±0.36log10拷贝/ml),=3.03,P＜0.01.结论 与乙型肝炎肝硬化B基因型感染者相比,C基因型感染者的外周血Tfh水平较低,引起IL-21和HBV特异性CTL水平降低,导致HBV DNA水平较高.
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白细胞介素-21在狼疮肾炎患者肾脏组织中的表达及意义
目的研究狼疮肾炎（ LN）患者肾脏组织中白细胞介素-21（ IL-21）的表达特点，为探讨IL-21在LN中的作用提供重要的临床病理学证据。方法采用免疫组化技术对40例LN患者及5例健康对照组肾脏组织中IL-21的表达水平进行检测，结合临床资料及肾脏病理进行相关分析。结果 IL-21阳性细胞主要在肾小管间质中表达，在肾小球中无表达；LN肾组织中IL-21表达较正常对照组明显增多（ P＜0.05），且病变较严重的Ⅲ型、Ⅳ型LN尤为明显，Ⅲ型＋Ⅳ型与Ⅰ型＋Ⅱ型相比差异有统计学意义（ P＜0.05）；IL-21在肾小管间质的表达水平随LN小管肾间质病变程度的加重而增强（ r＝0.548，P＜0.01）；肾脏组织中IL-21表达与血肌酐、24 h尿蛋白定量、系统性红斑狼疮疾病活动指数、病理活动性指数、病理慢性指数呈正相关（ r＝0.418、0.326、0.450、0.518、0.415，P均＜0.05），与血清补体C3无明显相关性（ P＞0.05）。结论 LN肾组织中IL-21表达增加与肾脏病变程度和病理类型及肾损害密切相关，可作为判断LN活动及严重程度的指标，在LN发病机制中可能起重要作用。
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白细胞介素-21对 RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响
目的：了解白细胞介素-21（ IL-21）诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞向破骨细胞分化的作用，并探讨其可能的机制。方法1、以不同浓度IL-21（0，1，10，20，40 ng／ml）处理RAW264.7细胞，培养5天后进行抗酒石酸酸性磷酸酶（ TRAP）染色，Western Blot和免疫组化法检测降钙素受体（CTR）表达，采用Real time PCR 法检测CTR和组织蛋白酶（Cathepsin）-K的mRNA表达水平。2、以信号通路抑制剂AG490、LY294002和PD98059作用30min后再加入IL-21，培养5天后观察破骨细胞形成情况，以Western Blot检测IL-21作用不同时间点时信号通路分子总蛋白和磷酸化蛋白水平，探讨IL-21直接诱导破骨细胞分化的作用机制。结果1、在无RANKL作用的情况下，随着IL-21浓度增加TRAP阳性细胞数逐渐增多，20 ng／ml作用强，40ng／ml时减弱。 IL-21能够诱导破骨标志分子CTR和Cathepsin-K mRNA水平表达上调。 Western Blot和免疫细胞化学证实，与阴性组比较，IL-21能促进 CTR 蛋白水平表达增高。2、PI3K-AKT 通路抑制剂（ LY294002）可以显著抑制 IL-21诱导的RAW264.7细胞向破骨细胞分化，IL-21刺激5～15 min时p-AKT表达增强。结论 IL-21可不依赖RANKL直接诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞向破骨细胞分化，该作用可能由PI3K-AKT通路介导。
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不同临床类型结核病患者血清白细胞介素-21水平及其临床意义
目的 探讨不同临床类型结核病患者白细胞介素-21(IL-21)表达水平及其与结核抗体间的相关性.方法 选取2014年10月至2018年6月昆明医学院第六附属医院感染科初治结核病患者共180例,根据患者结核发病部位分为肺结核组(99例,其中包括结核性胸膜炎患者37例)和肺外结核组(81例),选取同期体检的健康志愿者作为对照组(140例),运用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结核病患者抗结核分枝杆菌治疗前后血清IL-21水平和抗结核分枝杆菌抗体,以及结核性胸膜炎患者抗结核分枝杆菌治疗前胸水IL-21水平,分析血清IL-21水平与结核分枝杆菌抗体的相关性.结果 在抗结核分枝杆菌治疗前,肺结核组[43.16(72.98)pg/ml]和肺外结核组[38.68(58.17)pg/ml]患者血清IL-21水平均低于健康对照组[59.49(42.41)pg/ml],差异均有统计学意义(Z=-2.788、P=0.005,Z=-2.788、P=0.005);但肺结核组和肺外结核组差异无统计学意义(Z=-0.052、P=0.961).经过强化期抗结核分枝杆菌治疗,肺结核组和肺外结核组患者血清IL-21水平均显著回升[60.21(57.58)pg/ml vs.43.16(72.98)pg/ml,Z=-2.681、P=0.007;66.16(42.21)pg/ml vs.38.68(58.17)pg/ml,Z=-2.422、P=0.015].肺结核组中结核性胸膜炎患者胸水IL-21水平显著高于其抗结核分枝杆菌治疗前血清IL-21水平[121.36(133.67)pg/ml vs.49.09(80.67)pg/ml,Z=-3.477、P=0.001].结论 结核病患者血清IL-21水平降低,并于抗结核分枝杆菌治疗后回升,提示IL-21水平可作为观察结核病患者疗效及临床转归的指标.
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乙型肝炎病毒感染患者外周血细胞因子表达分析
目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染患者外周血中特异性白细胞介素-21(IL-21) +CD4+T细胞及γ-干扰素(IFN-γ)+ CD8+T细胞表达差异,为阐明HBV感染后T细胞功能衰竭机制提供理论依据.方法 选取2013年4月-2015年4月医院收治的HBV感染患者127例,其中慢性乙型肝炎患者41例、非活动性HBsAg携带患者38例、急性乙型肝炎(AHB)患者31例、慢性HBV携带患者17例,再选择同期医院健康体检人员30名作为对照组,比较各组受试者外周血中特异性IL-21+CD4+T细胞及IFN-γ+ CD8+T细胞表达情况;采用SPSS22.0软件对数据进行统计分析.结果各组受试者特异性IL-21+ CD4+T细胞比例及非特异性IL-21+CD4+T细胞比例均显著高于阴性对照(P＜0.05),急性乙型肝炎患者特异性IL-21 +CD4+T细胞比例及非特异性IL-21+ CD4+T细胞比例较对照组、慢性乙型肝炎、非活动性HBsAg携带、慢性HBV携带显著升高(P＜0.05);各组受试者特异性IFN-γ+ CD8+T细胞比例及非特异性IFN-γ+ CD8+T细胞比例均显著高于阴性对照(P＜0.05),急性乙型肝炎特异性IFN-γ+ CD8+T细胞比例及非特异性IFN-γ+ CD8+T细胞比例显著高于对照组、慢性乙型肝炎、非活动性HBsAg携带以及慢性HBV携带患者(P＜0.05);特异性IL-21+ CD4+T细胞与IFN-γ+CD8+T细胞比例在对照组及各HBV感染组中均呈显著正相关关系(P＜0.05).结论 在急性乙型肝炎患者中,特异性及非特异性IL-21 +CD4+T细胞与IFN-γ+ CD8+T细胞水平较慢性HBV感染患者显著升高,且特异性IL-21+ CD4+T细胞与IFN-γ+ CD8+T细胞具有着明显的相关性,提示HBV慢性感染患者存在T细胞免疫功能的低下.
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白细胞介素-21的基础与临床
白细胞介素(IL)-21主要来源于CD4+细胞,与IL-2,IL-15有较高的同源性;其对应的受体由IL-21R和c两个亚单位构成,前者在氨基酸序列上与IL_2RB或IL一4Rot具有很高的一致性,后者则为IL-2,IL-4,IL-15等细胞因子受体的共用1(common^y,1c)链,是IL-21启动信号转导中不可缺少的亚单位.通常,cγ介导的IL-21信号转导通过JAKl,JAK3,以及sTATl和s1'AT3途径而得到执行,影响B细胞、NK细胞和T细胞等免疫功能的发挥,表现出复杂的生物学效应.鉴于IL-21所具有的多种免疫活性,推测其在肿瘤的防御机制中扮演着重要角色.本文就IL-21及其受体结构、生物学作用、抗肿瘤作用及临床应用作一简介.
关键词： 白细胞介素-21 杀伤细胞 天然 CD8《'+》T细胞 抗肿瘤免疫反应 -
监测 IL-17、IL-21、IL-22、IL-23表达水平在溃疡性结肠炎患者临床治疗中的应用价值
目的：探讨溃疡性结肠炎(UC)患者外周血清中白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-21(IL-21)、白细胞介素-22(IL-22)、白细胞介素-23(IL-23)的表达水平在临床治疗中的应用价值。方法30例UC 患者(观察组)及30例健康者(对照组)，应用夹心酶联免疫吸附法检测外周血清中 IL-17、IL-21、IL-22、IL-23的含量，比较健康人群和 UC 患者外周血清中 IL-17、IL-21、IL-22、IL-23的水平差异及不同严重程度 UC 患者结肠黏膜组织中的表达差异性。结果观察组患者外周血清中 IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平均明显高于对照组(P<0.05)；观察组轻中度 UC 患者外周血清 IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平明显低于重度 UC 患者(P<0.05)；初发型 UC 患者外周血清 IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平低于慢性复发型患者，差异具有统计学意义(P<0.05)；观察组治疗后外周血清 IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平明显低于治疗前(P<0.05)。结论UC 患者外周血清中 IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平明显升高，与疾病活动度密切相关，可预测 UC 发展或评估治疗效果。
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IL-21及其受体表达与溃疡性结肠炎分级的相关性
目的 探讨溃疡性结肠炎(UC)患者炎性反应严重程度分级与IL-21及其受体表达之间的关系.方法 收集34例UC患者(包括轻度组10例、中度组8例、重度组6例、缓解组10例)和30例健康成人外周血标本,分离血清和外周血单个核淋巴细胞(PBMC),双抗夹心法ELISA检测血清IL-21水平,流式细胞仪检测外周血CD4+、CD8+T细胞、B细胞和NK细胞IL-21R的表达.结果 UC患者血清IL-21水平及外周血CD4+、CD8+T细胞、B细胞和NK细胞IL-21R表达水平与健康对照比较显著升高(P<0.01),并且与病情严重程度有一定相关性.结论 IL-21及其受体IL-21 R在UC肠黏膜炎症病变过程中起着重要作用,可能参与了肠道黏膜组织免疫损伤过程.
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甲氨蝶呤联合环磷酰胺治疗类风湿关节炎对患者血清IL-21的影响
目的 探讨甲氨蝶呤联合环磷酰胺治疗类风湿关节炎(RA)对患者血清白细胞介素-21(IL-21)的影响.方法 选择本院70例RA患者,采用甲氨蝶呤联合环磷酰胺静脉滴注治疗,观察患者治疗后自身抗体阳性组与阴性组血清IL-21水平及第6、12、24周血清IL-21水平变化情况.结果 本组患者RF-IgM、RF-IgA和抗CCP抗体阳性组患者血清IL-21水平均明显高于阴性组患者,差异有统计学意义(P＜0.05);患者治疗后第6、12、24周血清IL-21检测指标呈下降趋势,治疗第12、24周时血清IL-21水平明显低于入院时,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 甲氨蝶呤联合环磷酰胺治疗RA临床疗效显著,可明显降低血清IL-21水平.
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IL-21免疫调节HIV/SIV感染者T淋巴细胞的研究进展
白细胞介素21(IL-21)是一种新近发现的、具有免疫调节作用的细胞因子,可通过多途径影响CD4+T细胞的应答,增强CD8+T细胞介导的抗HIV/SIV作用,具有潜在的抗HIV/SIV的临床应用前景.血清IL-21水平测定有望作为确定HIV感染者AIDS病程以及HIV感染者抗病毒治疗反应的重要免疫学参数.近年来关于IL-21免疫调节HIV/SIV感染者T淋巴细胞的研究日益增多,并取得了一些成果.
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白细胞介素-21的生物学研究进展
近年来,白细胞介素-2已经广泛应用到肿瘤的治疗中,但因其严重的药物毒副作用而使其未能在临床中广泛被应用.和IL-2有高度同源的白细胞介素-21有着和IL-2相似的生物功能,特别是IL-21药物的低毒性,使其在肿瘤治疗中的研究越来越受到人们的重视.本文就IL-21的生物学功能,以及对IL-21在肿瘤治疗中的应用前景作了综述.
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白细胞介素-21在类风湿关节炎发病中作用的研究
目的：研究血清中白细胞介素-21(IL-21)与类风湿关节炎(RA)病情活动的关系。方法40例病程<1年的RA患者作为观察1组,40例病程>1年的RA患者作为观察2组,40例健康成年人作为对照组,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测三组研究对象血清IL-21,对RA患者进行类风湿关节炎患者病情评价(DAS28评分),分析相关性。结果观察2组的IL-21水平(520.42±74.38)ng/L高于观察1组(435.42±64.38)ng/L和对照组(332.84±30.12)ng/L,差异均具有统计学意义(P<0.05)；观察1组IL-21水平高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察2组的DAS28评分(5.02±0.87)分高于观察1组的(3.75±1.01)分,差异具有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析显示, RA患者的血清IL-21水平与DAS28评分有显著相关性(r=0.300, P=0.028<0.05)。结论 IL-21水平和DAS28评分与风湿免疫性疾病的发生、发展相关,对RA的临床诊断和确定治疗方案有一定意义。
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沙利度胺与泼尼松片分别联合来氟米特治疗对系统性红斑狼疮BAFF和IL-21的影响
目的：探讨沙利度胺与泼尼松片分别联合来氟米特治疗对系统性红斑狼疮(SLE)血清B细胞活化因子(BAFF)和白细胞介素-21(IL-21)水平变化及治疗的临床疗效。方法180例符合1997年美国风湿病协会制定的诊断标准的SLE 患者,随机分为观察组和对照组,各90例。观察组口服沙利度胺,对照组采用口服泼尼松片。两组均同时按照来氟米特的用药标准注射来氟米特。治疗3个月后检测两组患者的血清BAFF和IL-21水平。结果观察组患者血清中BAFF和IL-21值分别为(10.2±3.1)μg/L和(817±324)ng/L,对照组患者血清中BAFF和IL-21值分别为(13.5±2.9)μg/L和(986±337)ng/L。观察组患者的血清中BAFF和IL-21值显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用沙利度胺联合来氟米特治疗系统性红斑狼疮的效果优于采用泼尼松片联合来氟米特治疗的效果,在临床上值得推广使用。
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急性白血病患者血清中白细胞介素-21的表达及其意义
目的 探讨白细胞介素-21在急性白血病患者血清中的表达情况及其意义.方法 选择符合标准的65例白血病患者,根据疾病发生情况分成急性淋巴细胞性白血病(ALL)组(31例)与急性髓性细胞白血病(AML)组(34例),测定常规化疗前后患者血清IL-21水平. 结果 ALL组与AML组血清IL-21水平均显著高于健康组(P<0.05),且ALL组显著高于AML组(P<0.05).ALL组女性患者血清IL-21值均显著性高于ALL组男性患者与AML女性患者(P<0.05).在ALL组与AML组中,IL-21R阳性患者于IL-21R阴性患者在WBC与外周血幼稚细胞水平上存在显著性差异(P<0.05).结论 通过检测患者血清中的IL-21水平能够用于辅助诊断急性白血病,同时区分ALL与AML,具有一定的临床价值,值得临床进行推广并进一步深入研究.
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慢性乙型肝炎核苷酸类似物耐药患者外周血IL-21、γ-IFN、IL-10及β-TGF变化的临床研究
目的：探析慢性乙型肝炎核苷酸类似物耐药患者外周血白介素-21(IL-21)、γ-干扰素(γ-IFN)、IL-10及β-转化生长因子(β-TGF)的变化情况。方法以2012年7月—2015年7月所收治慢性乙型肝炎患者48例进行回顾性分析,根据患者是否出现核苷酸类似物耐药分为A组(无耐药,22例)与B组(耐药,26例)。另从同期健康检查的体检者中随机抽取23例作为对照组。测定3组的外周血IL-21、γ-IFN、IL-10及β-TGF水平并比较。结果 A、B组外周血IL-21水平低于对照组(P<0．0167),A组低于B组(P<0．0167)；A、B组外周血IL-10、γ-IFN水平低于对照组(P<0．0167)；A和B组拉米夫定应用比例差异有统计学意义(P<0．01)。结论核苷酸类似物的耐药会影响慢性乙型肝炎患者机体的免疫功能。
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IL-15与IL-21细胞因子组合优化临床级人NK细胞培养体系
目的：探讨IL-15、IL-21细胞因子组合建立的临床级人NK细胞培养体系对NK细胞增殖、免疫细胞表型和细胞毒作用的影响。方法分离9例健康志愿者外周血单个核细胞(PBMCs),根据以下3组进行扩增培养：(1)对照组(我科临床级人NK细胞培养体系),(2)IL-15组(对照组+IL-15),(3)IL-15/IL-21组(对照组+IL-15+IL-21)。台盼蓝拒染法计数细胞总数和活力；流式细胞术分析免疫细胞表型和NK细胞活化受体表达；乳酸脱氢酶释放法检测细胞毒活性。结果培养至14 d,IL-15/L-21组细胞总数明显升高,NK细胞增殖倍数达到(761．68±449．30)倍,明显高于IL-15组,差异有统计学意义(P<0．05)；IL-15/IL-21组明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0．01)。3组培养物中CD3-/CD56+细胞百分率比较,IL-15/IL-21组和IL-15组明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0．05),但IL-15/IL-21组和IL-15组比较,差异无统计学意义(P>0．05)；3组中CD3+/CD4+细胞百分率均呈下降趋势,且IL-15/IL-21组和IL-15组明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0．05),但IL-15/IL-21组和IL-15组比较,差异无统计学意义(P>0．05)；3组中总CD3+细胞百分率比较,IL-15组明显低于对照组(P<0．05),但IL-15/IL-21组和IL-15组比较,差异无统计学意义(P>0．05)。 IL-15/IL-21组NKG2D活化受体表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0．05),但与IL-15组比较,差异无统计学意义(P>0．05)。3组中CD3+/CD56+细胞百分率、CD3+/CD8+细胞百分率以及NKp46活化受体的表达水平比较,差异均无统计学意义( P>0．05)。相同的效靶比,3组细胞的细胞毒作用比较,差异均无统计学意义( P>0．05)。结论采用IL-15/IL-21组合优化人NK细胞培养体系,可以选择性地扩增NK细胞,提高培养物中NK细胞数量和细胞总数,以及活化受体NKG2D的表达水平,这将为优化临床级人NK细胞制备体系提供科学依据。
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白细胞介素-21和Blimp1 mRNA在老年类风湿关节炎患者外周血单个核细胞的表达及作用机制
目的 探讨白细胞介素(IL)-21和Blimp1 mRNA在老年类风湿关节炎患者外周血单个核细胞(PBMCs)的表达及作用机制.方法 老年类风湿关节炎患者62例,同期体检的健康老年人45名作为对照.取外周静脉血分离PBMC和血浆,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血浆中IL-21水平,分析DAS28、抗CCP抗体与IL-21的相关性;实时荧光定量PCR检测患者PBMCs中Blimp1 mRNA表达量;使用IL-21、CD40L刺激PBMCs 72 h后检测Blimp1 mRNA表达量,流式细胞术检测各组CD138+细胞比例.结果 类风湿关节炎患者血浆IL-21含量明显高于对照组(P<0.01).血浆IL-21含量与类风湿关节炎患者DAS28、抗CCP抗体具有明显相关性(r=0.769、0.785,P<0.05).类风湿关节炎患者PBMCs中Blimp1 mRNA表达量明显高于对照组(P<0.05).IL-21、CD40L体外刺激后,对照组与CD40L组Blimp1 mRNA表达水平之间差异无统计学意义(P>0.05);IL-21组、IL-21+CD40L组Blimp1 mRNA表达水平均明显高于对照组(P<0.01);IL-21+CD40L组明显高于IL-21组(P<0.05).流式细胞术显示,IL-21+CD40L组CD138+细胞比例明显高于CD40L组和IL-21组(P<0.05).结论 IL-21可促进老年类风湿关节炎患者PBMCs中Blimp1 mRNA表达,IL-21与CD40L协同作用可通过调节Blimp1 mRNA表达促进B淋巴细胞分化并参与类风湿性关节炎的发病.
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白细胞介素-21与乙型肝炎病毒前S2S抗原融合蛋白在293T细胞中的表达
目的:构建白细胞介素-21 (interleukin-21,IL-21)和乙型肝炎病毒前S2S抗原(S2S)的融合表达质粒,并研究其在293T细胞中的表达.方法:采用PCR方法扩增IL-21和HBV前S2S基因片段,分别克隆入pcDNA3真核表达质粒,用分子克隆方法构建融合表达质粒,并以脂质体2000转染293T细胞,分别应用ELISA法和Western Blot法检测细胞上清及细胞中IL-21和HBsAg的表达水平.结果:经酶切鉴定及DNA序列证实重组质粒内插入片段序列正确,三种重组质粒分别命名为pcDNA-IL-21、pcDNA-S2S和pcDNA-IL-21-S2S,并且重组质粒能在293T细胞内表达并分泌相关蛋白.结论:成功构建IL-21和乙型肝炎病毒前S2S抗原的融合表达质粒,重组质粒能在真核细胞内表达.
