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  • 岩大戟内酯B对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响

    作者:林宇;岳丽玲;蒋丽艳

    目的:探讨岩大戟内酯B (jolkinolide B,JB)对人乳腺癌MDA-M B-231细胞增殖及生长周期的影响.方法:取对数生长期的MDA-MB-231细胞,加入JB,使终质量浓度分别为0,2.5,5,10,20,40,80 mg·L-1,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测岩大戟内酯B对MDA-MB-231细胞的生长抑制率.另设10,20,40,80 mg·L-1组的JB,采用流式检测技术分析岩大戟内酯B对MDA-MB-231细胞的细胞周期,RT-PCR及Western blot检测真核细胞翻译起始因子(eIF4E),细胞周期蛋白D1(CyclinD1)基因mRNA表达及蛋白水平.结果:随着岩大戟内酯B浓度增加可显著抑制MDA-MB-231细胞的增殖,G1期细胞阻滞.与空白组比较,20,40 μmol·L-的岩大戟内酯B可抑制CyclinD1和eIF4E的mRNA表达,转染eIF4E-siRNA组CyclinD1的mRNA表达及蛋白水平也被抑制,同时细胞周期阻滞在G1期(P <0.05,P<0.01).结论:岩大戟内酯B可通过下调eIF4E及CyclinD1的表达而阻滞细胞周期于G1期.

  • eIF4E、p-eIF4E和Mcl-1在病理性瘢痕组织中的表达和意义

    作者:吴文艺;张丽婷;郑志芳;朱世泽;王朝阳

    目的 研究真核细胞翻译起始因子( eIF4E)、磷酸化真核细胞翻译起始因子(p-eIF4E)和髓样细胞白血病-1(myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)在病理性瘢痕中的表达情况及其相互关系,探讨它们在瘢痕形成中的作用及机制.方法 利用实时荧光定量PCR法检测正常皮肤、成熟瘢痕、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中eIF4E和Mel-1的mRNA表达量.利用蛋白质免疫印迹( Western blotting)法检测正常皮肤、成熟瘢痕、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中eIF4E、p-eIF4E和Mcl-1的蛋白表达情况.结果 正常皮肤、成熟瘢痕、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中eIF4E的mRNA及蛋白质的相对表达水平分别为1.380±0.450、1.230±0.230、5.400±0.450、5.460±0.460和0.597±0.060、0.590±0.040、0.694±0.066、0.697±0.022.正常皮肤、成熟瘢痕、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中p-eIF4E的蛋白质表达量为0.202±0.037、0.216±0.019、0.426±0.026、0.433±0.027.Mcl-1的mRNA及蛋白质的相对表达水平分别为1.510±0.660、1.400±0.530、6.650±0.850、7.230±1.530和0.589±0.059、0.660±0.063、0.870±0.118、0.914±0.064.病理性瘢痕组织中eIF4E的mRNA及蛋白质表达显著高于正常皮肤、成熟瘢痕(P<0.05);病理性瘢痕组织中Mcl-1的mRNA及蛋白质表达增高,与正常皮肤、成熟癜痕对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);病理性瘢痕组织中eIF4E的磷酸化程度高于正常皮肤和成熟瘢痕(P<0.05).病理性瘢痕组织中eIF4E的mRNA及蛋白质表达与Mcl-1的mRNA及蛋白质表达呈正相关.结论 eIF4E在病理性瘢痕组织中表达增高,磷酸化程度增高,p-eIF4E可能通过调节Mcl-1等细胞周期调控因子而促进癜痕组织中细胞的增生,对病理性瘢痕的形成可能起着重要作用.

  • 009真核细胞翻译起始因子eIF4E与头颈部鳞状细胞癌

    作者:陶磊;周梁

    真核细胞翻译起始因子eIF4E对mRNAs的翻译起重要作用,其过度表达可影响细胞的生长和分化,并与肿瘤尤其是头颈部鳞状细胞癌的发生发展有关.

  • eIF4E基因下调对人乳腺癌Bcap37细胞凋亡的影响

    作者:林宇;许惠玉;邹宇;崔红霞;刘吉成

    目的 应用化学合成的siRNA干扰乳腺癌Bcap37细胞真核细胞翻译起始因子4E( eukaryotic translation initiation factor 4E,eIF4E)的表达,探讨其对乳腺癌细胞凋亡和生长周期的影响.方法 化学合成eIF4E基因的siRNA,转染人乳腺癌Bcap37细胞,采用Western blotting法及RT-PCR法检测转染前后Bcap37细胞中eIF4E蛋白和mRNA表达;应用流式细胞技术检测转染前后细胞周期的变化;AO/EB双染色法检测细胞凋亡;酶标仪检测caspase -3活性.结果 RT - PCR与Western blotting法检测结果显示,转染eIF4E -siRNA - 3#组细胞eIF4E基因的mRNA和蛋白表达均明显下降(P<0.01);eIF4E - siRNA转染组G1期细胞比例显著增加,S期细胞比例相对减少,差异显著(P<0.05);转染eIF4E - siRNA可诱导细胞凋亡,caspase-3活性亦增强.结论 eIF4E - siRNA可下调eIF4E基因在乳腺癌Bcap37细胞中的表达水平,诱导细胞凋亡.

  • RNA干扰HPV E6下调eIF4E转录表达抑制宫颈癌He1a细胞增殖并影响细胞周期进程研究

    作者:王森;高敏;赵毅;朱伟;姜恩平;康海仙;姚运红;胡新荣

    目的 探讨宫颈癌Hella细胞中干扰HPV E6对eIF4E表达的调控,探寻HPV E6促癌的新途径,为宫颈癌诊断和治疗提供新靶点.方法 构建高效的靶向HPV18 E6的shRNA质粒(shE6)并测序,而后转染人宫颈癌Hela细胞,荧光显微镜及流式细胞术检测转染效率.而后以Real-time PCR检测E6及eIF4E的mRNA水平,采用CCK-8法检测Hela细胞增殖能力的改变,流式细胞术检测细胞周期.结果 测序结果显示成功构建shE6质粒.shE6-3转染人宫颈癌Hela细胞后48 h,E6及eIF4E mRNA表达的抑制率分别约为80%,76%.shE6-3对Hela细胞的增殖活性在48 h的抑制效果明显,增殖抑制率约为21%;相对于NC组,shE6组Go/G1期细胞比例显著增高,而S期比例减少,G2/M期未见明显变化.结论 RNA干扰HPV E6能够下调eIF4E转录表达,抑制宫颈癌Hela细胞增殖,并阻滞细胞周期于G0/G1期.eIF4E有望成为宫颈癌防治的潜在靶点.

  • IL-24与蛋白激酶和 eIF-2α在胶质瘤中的表达

    作者:胡长伟;尹港峰;王希瑞;白庆龄;吕艳明;赵文清;李文玲

    目的:探讨IL-24与蛋白激酶( PKR)、真核细胞翻译起始因子( eIF-2α)在胶质瘤中的表达情况。方法收集30例不同级别的胶质瘤标本,利用荧光定量PCR及免疫组化技术检测胶质瘤中IL-24及PKR、eIF-2α的表达。结果胶质瘤中IL-24及PKR、eIF-2α的mRNA及蛋白表达随级别的增加表达降低。结论胶质瘤中IL-24下调可能通过PKR、eIF-2α的表达抑制,降低胶质瘤细胞凋亡。

  • siRNA下调EIF4E基因对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和周期的影响

    作者:孙阳阳;曹友德;叶维霞;磨娜

    目的:应用小干扰RNA (small interfering RNA,siRNA)乳腺癌MDA-MB-231细胞中真核细胞翻译起始因子4E' (eukaryotic translation initiation factor 4E,EIF4E)基因的表达,探讨其对乳腺癌细胞增殖和生长周期的影响.方法:构建针对EIF4E基因的siRNA表达质粒,采用脂质体法将表达质粒pGPU6/GFP/Neo-EIF4E转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞;分别采用RT-PCR,Western印迹法和免疫细胞化学法检测转染EIF4E siRNA后,对MDA-MB-231细胞中EIF4E及cyclinD1 mRNA和蛋白的表达水平的影响;MTT法、平板克隆形成实验和FCM检测MDA-MB-231细胞增殖活性、克隆形成率及细胞周期.结果:成功构建EIF4E siRNA表达质粒.RT-PCR,Western印迹法和免疫细胞化学法检测结果显示,MDA-MB-231细胞中EIF4E及cyclinD1 mRNA和蛋白表达均明显下降(P<0.05).转染EIF4EsiRNA组细胞生长缓慢,集落形成数明显减少,与空白对照组和转染空载体组比较,差异有统计学意义(P<0.05).FCM检测结果显示,EIF4E siRNA转染组G,期细胞所占百分比为(71.30±0.47)%,较空白对照组的(53.10±0.43)%明显增加,而S期细胞所占百分比为(12.53±0.13) %,较空白对照组的(26.47±0.38) %明显减少(P<0.05).结论:EIF4E siRNA可显著下调EIF4E基因在乳腺癌MDA-MB-231细胞中的表达水平,在一定程度上抑制乳腺癌细胞的增殖,有可能成为临床治疗乳腺癌的靶点之一.

  • 真核细胞翻译起始因子4E在NHL血管生成中的作用研究

    作者:赵艳霞;周晟;刘文励;周剑峰;孙汉英

    目的探讨真核细胞翻译起始因子4E(EIF4E)和非霍奇金淋巴瘤(NHL)血管生成的关系.方法检测52例初诊NHL患者淋巴瘤石蜡切片EIF4E和平均微血管密度(MVD)的表达.构建反义EIF4E表达载体,电转染至Burkirt淋巴瘤细胞系Raii细胞,应用western-blot方法检测Raji细胞转染前后和正常人外周血淋巴细胞(NPBMC)中血管内皮生长因子(VEGF)的表达.结果在NHL患者中,侵袭性淋巴瘤EIF4E和MVD的表达明显高于惰性淋巴瘤的表达(P<0.05),且EIF4E与MVD的表达呈正相关(r=0.695,P<0.01).成功构建EIF4E反义表达载体,将其转染入Raji细胞后,VEGF表达抑制.结论EIF4E在NHL的肿瘤血管生成中发挥作用,可能通过上调VEGF的表达而促进肿瘤血管生成.

  • eIF4E在肝癌组织中的表达及意义

    作者:周晓艳;曾庆堂;晁耐霞;肖飞;庞玉艳

    目的 探讨eIF4E在肝癌发生发展过程中的作用.方法 采用免疫组织化学S-P法检测62份肝癌组织及癌旁硬化肝组织、15份正常肝组织中eIF4E蛋白的表达情况,并分析eIF4E表达与肝癌临床病理特征的关系.结果 肝癌组织中eIF4E阳性表达率显著高于癌旁硬化肝组织及正常肝组织(x2=29.37,P<0.001),其表达与患者年龄、性别、肿瘤大小及包膜的完整程度无关,与肝癌分化程度、临床分期及有无门静脉癌栓有关.结论 eIF4E蛋白表达随肝癌分化程度降低而增高;eIF4E在肝癌的发生发展过程中可能起非常重要的作用.

  • 真核细胞翻译起始因子-4E在食管癌变过程中的表达变化及意义

    作者:于建;张景航;杨晓煜;李劲松;狄文玉;臧丹;苏蔚

    目的 研究真核细胞翻译起始因子-4E (eIF-4E)在正常食管上皮及不同食管病变组织中的表达及其与血管内皮生长因子(VEGF)的关系.方法 从新乡医学院第一附属医院病理科2014年3月至2016年3月胃镜活组织检查存档标本中选取正常食管断端30例、非典型增生32例、原位癌20例和浸润癌117例.采用免疫组织化学法检测eIF-4E、VEGF在各种食管组织中的表达,并分析二者之间的相关性.结果 正常食管上皮、非典型增生、原位癌和浸润癌组织中eIF-4E阳性表达率分别为0.0% (0/30)、9.4% (3/32)、45.0% (9/20)和80.3% (94/117).正常食管上皮与非典型增生组织中eIF-4E阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05);其余各组织之间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05).117例浸润癌组织中,发生转移和未发生转移癌组织中eIF-4E阳性表达率分别为93.2%(55/59)、67.2% (39/58),发生转移癌组织中的阳性表达率显著高于未发生转移癌组织(P<0.05);浸润至浅肌层、深肌层和外膜的癌组织中eIF-4E阳性表达率分别为70.0%(28/40)、73.8% (31/42)、100.0%(35/35),浸润至浅肌层与深肌层的癌组织中eIF-4E阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05),浸润至浅肌层和深肌层的食管癌组织中eIF-4E阳性表达率明显低于浸润至外膜的食管癌组织(P<0.05).食管浸润癌组织中eIF-4E表达与VEGF表达呈正相关(r=51.460,P<0.05).结论 eIF-4E在正常食管上皮癌变及癌变后的浸润与转移中发挥着重要作用;eIF-4E在食管癌组织中的表达与VEGF有相关性.

  • 真核细胞翻译起始因子4E及基质金属蛋白酶-9在声门上喉癌和下咽癌转移淋巴结中的表达

    作者:孙树军;刘清明;张爱玲;何恩海

    目的:探讨声门上喉癌、下咽癌瘤体、周围组织及转移淋巴结真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达情况,以及2种分子标志物表达的相关性.方法:采用免疫组织化学SP法及图像分析,检测38例肿瘤瘤体及不同距离手术切缘组织、转移淋巴结中eIF4E、MMP-9的表达情况.结果:①在喉及下咽部鳞状细胞癌组织中MMP-9阳性表达率为68.4%,表达强度与淋巴结转移、临床分期相关,而与肿瘤位置及病理分级无关.MMP-9在声门上喉癌、下咽癌瘤体及5 mm、10 mm切缘组织中的表达阳性率依次递减;②喉及下咽部鳞癌组织eIF4E表达阳性率为89%,表达强度与淋巴结转移、肿瘤病理分级、临床分期相关.eIF4E在声门上喉癌、下咽癌瘤体及5 mm、10 mm切缘组织表达阳性率依次递减;③MMP-9和eIF4E在正常淋巴结中均无表达,在转移淋巴结表达阳性率分别为28%和42%;④eIF4E与MMP-9表达无相关性.结论:eIF4E、MMP-9在喉癌及下咽癌瘤体中的表达高于癌周正常组织,eIF4E在瘤体及癌周正常组织表达阳性率高于MMP-9.eIF4E可作为预测喉癌及下咽癌浸润生长、转移的敏感标志物.

  • 榄香烯诱导喉癌细胞凋亡eIF家族表达的研究

    作者:陶磊;周梁

    目的:探讨榄香烯抑制人喉肿瘤细胞(HEp-2)过程中与凋亡相关的Caspase-3活性的改变,以及真核细胞翻译起始因子(eIF)家族成员(eIF4E、eIF4G等)和与肿瘤新生血管有关的碱性纤维母细胞生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达.方法:使用比色法,研究榄香烯诱导人喉鳞状细胞癌细胞株HEp-2细胞凋亡时Caspase-3活性的变化;并使用Westernblot和RT-PCR法检测榄香烯作用的HEp-2细胞中eIF4E、eIF4G、bFGF、VEGF在mRNA和蛋白水平的表达.结果:Caspase-3活性在药物作用12 h达到高,并随药物作用时间的延长而下降;随着榄香烯作用时间的延长,eIF4E、eIF4G、bFGF、VEGF蛋白表达下降,bFGF、VEGF的mRNA含量亦下降.结论:榄香烯抑制HEp-2细胞生长可引起Caspase-3活性的改变; eIF4E、eIF4G的表达下降与bFGF、VEGF的表达呈正相关;bFGF、VEGF表达的下降与eIF家族成员表达的下降所引起的翻译水平的抑制有关.

  • eIF-4E与口腔癌发生的研究进展

    作者:郑维银;张建设

    真核细胞翻译起始因子(eukaryotic initiation factor 4E,eIF-4E)是一个25 kDa的蛋白复合物,在蛋白质合成的起始阶段起重要的调控作用.近年来研究发现eIF-4E的表达与肿瘤的发生发展有关,被认为是一种原癌基因和有价值的肿瘤标志物.本文就eIF-4E与口腔癌的关系作一综述.

  • eIF-4E、p53在皮肤鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

    作者:李慎秋;卫琴静

    目的 检测皮肤鳞状细胞癌中 eIF-4E、p53 的表达,以探讨它们的临床意义.方法 用免疫组化 SABC 法分别检测 7 例正常成人皮肤以及 32 例皮肤鳞状细胞癌中 eIF-4E、p53 的表达水平.结果 在正常表皮中 eIF-4E、p53 表达均为阴性.在皮肤鳞状细胞癌中的表达率分别为 93.8%和56.3%,明显高于正常成人皮肤(P<0.05).结论 在皮肤鳞状细胞癌中,eIF-4E、p53 均可作为肿瘤标志物,且 eIF-4E 蛋白表达率高、特异性强,是一种更具潜质的肿瘤标志物.

  • p-elF4E在肿瘤中作用的研究进展

    作者:李姣;郑军

    真核细胞翻译起始因子4E(eukaryotic initiation factor 4E,eIF4E)是蛋白质翻译起始的关键因子,磷酸化eIF4E(p-eIF4E)与真核生物蛋白质合成及与肿瘤的发生、发展、侵袭、转移和预后密切相关.p-eIF4E的异常表达参与了前列腺癌、淋巴瘤以及肺癌等多种肿瘤的发生、发展.

  • 真核细胞翻译起始因子和雷帕霉素靶蛋白在食管鳞癌组织中表达的临床意义

    作者:鲁建军;潘游;雷艺炎;顾勇;钟佛添

    目的:探讨真核细胞翻译起始因子(eIF4E)与雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在食管鳞癌组织中表达的临床意义。方法回顾性收集2010年1月至2012年12月在中山大学附属第一医院胸外科行手术切除的148例食管鳞癌患者的临床资料及肿瘤组织石蜡标本,应用Western blot和免疫组织化学(免疫组化)染色检测食管鳞癌组织、癌旁不同距离组织中eIF4E与mTOR的表达情况,并分析其与本组患者临床病理特征的关系。结果 mTOR主要表达于细胞质,而elF4E阳性部位位于细胞膜,呈棕黄色颗粒;两种标记物在癌组织中强表达,在癌旁组织呈弱表达或不表达。食管鳞癌组织、癌旁1 cm组织及癌旁5 cm组织中,mTOR蛋白的表达分别为85.8%(127/148)、35.1%(52/148)及3.4%(5/148),eIF4E蛋白分别为93.9%(139/148)、35.1%(52/148)及12.8%(19/148),均呈明显下降趋势(均P<0.05)。 mTOR和eIF4E的表达均与肿瘤浸润深度和有无淋巴结转移有关(均P<0.05),其中mTOR表达还与肿瘤分化程度有关(P=0.003),而eIF4E表达与肿瘤分化程度无关(P=0.062)。两者的表达均与患者性别、年龄、肿瘤大小无关(P>0.05)。结论 eIF4E与mTOR在食管鳞癌组织中呈过度表达,可能与肿瘤恶性程度和淋巴结转移有关,两者联合检测可能有助于对食管鳞癌恶性程度及预后的判断。

  • 真核细胞翻译起始因子4E 对鼻咽癌侵袭转移的作用

    作者:李哲;翁玉玲;刘艳明

    目的:分析真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)对鼻咽癌侵袭转移的促进作用,为临床评估鼻咽癌侵袭转移提供新的筛查靶点。方法利用细胞试验研究eIF4E在鼻咽癌细胞中高表达的机制,和被人潜伏膜蛋白(LM P1)诱导转录活化的机制,以及转录活化对鼻咽癌细胞侵袭转移的影响。结果 eIF4E可以被LM P1诱导转录活化,vector组eIF4E的mRNA表达水平与MOCK组间差异无统计学意义(P>0.05)。LMP1组与vector组比较,eIF4E的mRNA表达水平显著上升,差异有统计学意义(P<0.05)。经灰度分析,MOCK组与vector组eIF4E的mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05),LMP1组为vector组的2.173倍,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 eIF4E经LM P1诱导转录活化后,可促进鼻咽癌的侵袭转移,提示LM P1是致癌效应信号传递的一个关键节点,可以作为临床评估鼻咽癌侵袭转移的一个新的筛查靶点。

  • 真核细胞翻译起始因子eIF4E与白血病

    作者:刘丽萍

    真核细胞翻译起始因子eIF4E在30%以上的人类恶性肿瘤中过表达.靶向eIF4E及其上游通路的药物可以部分抑制肿瘤细胞的生物学行为.本文就eIF4E在白血病中的作用及其靶向治疗的研究进展作一综述.

  • eIF4E的研究进展及在肺癌中研究现状

    作者:张波;朱成楚

    eIF4E(eukaryotic translation initiation factor 4E),真核细胞翻译起始因子,是真核细胞翻译起始和调控的核心成分,通过与mRNA5'端帽子结构结合,在蛋白质翻译起始过程中发挥重要作用.研究证实在动物和人体中包括肺癌在内的大多恶性肿瘤中存在过表达,它与多种恶性肿瘤的发生、浸润和转移密切相关.因此,本文就eIF4E的研究进展以及elF4E在肺癌中的研究现状作一综述.

  • 胆管癌组织中真核细胞翻译起始因子4E和基质金属蛋白酶-9的表达及临床意义的研究

    作者:刘子沛;朱瑾;周金莲;熊燕;王曙光

    目的探讨在胆管癌组织中真核细胞翻译起始因子4E(eukaryotic initiation factor 4E,eIF4E)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达情况及临床病理意义.方法应用免疫组织化学技术检测62例胆管癌组织及8例正常胆管组织中eIF4E和MMP-9的表达情况,同时结合病人的临床病理资料进行分析.结果在62例胆管癌组织中eIF4E和MMP-9的表达阳性率分别为100%和82.3%,二者的表达具有正相关,而正常胆管组织无eIF4E和MMP-9表达.eIF4E在胆管癌组织中的表达水平与患者性别、年龄和肿瘤部位无明显相关性,但与肿瘤组织分化程度、手术方式和有无浸润转移明显相关.MMP-9表达与患者性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤组织分化程度及手术方式无明显相关,但与有无浸润转移明显相关.结论过度表达的eIF4E和MMP-9是胆管癌恶性改变及判断其恶性程度的分子标志,并在胆管癌的侵袭和转移机制中发挥重要作用.

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